快速DNA提取检测试剂盒
FastDNASPINKitforSoil土壤DNA快速提取试剂盒提取步骤
FastDNASPINKitforSoil土壤DNA快速提取试剂盒提取步骤1.准备样品:选择合适的土壤样品,将其称重至1g。
如果样品中有根、树枝等杂物,需要将其去除。
2. 加入试剂:将1g土壤样品加入50ml试样管中,然后加入4ml试剂A。
用旋转混合器将土壤样品和试剂彻底混合。
3.离心:将混合物离心10分钟,以去除土壤颗粒和杂质。
离心后,样品将分为上清液和沉淀。
4. 转移上清液:使用移液器将上清液转移到新的1.5ml离心管中。
注意不要转移沉淀物。
5. 加入试剂:将2ml试剂B加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,使试剂B和上清液充分混合。
6. 震荡:将离心管放入震荡器中,以6000rpm的速度震荡10分钟,以充分裂解细胞。
7.离心:将离心管离心10分钟,以去除残余的土壤颗粒。
8. 转移上清液:使用移液器将上清液转移到新的1.5ml离心管中。
注意不要转移沉淀物。
9. 加入试剂:将0.5ml试剂C加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,以充分混合。
10.离心:将离心管离心10分钟,以去除残余的杂质。
注意不要转移沉淀物。
12. 加入试剂:将0.8ml试剂D加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,以充分混合。
13.离心:将离心管离心10分钟,以去除残余的杂质。
14. 转移上清液:使用移液器将上清液转移到新的1.5ml离心管中。
注意不要转移沉淀物。
15. 加入试剂:将0.5ml试剂E加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,以充分混合。
16.离心:将离心管离心10分钟,以去除残余的杂质。
17. 转移上清液:使用移液器将上清液转移到新的1.5ml离心管中。
注意不要转移沉淀物。
18. 加入试剂:将0.5ml试剂F加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,以充分混合。
19.离心:将离心管离心10分钟,以去除残余的杂质。
20. 转移上清液:使用移液器将上清液转移到新的1.5ml离心管中。
注意不要转移沉淀物。
21. 加入试剂:将0.5ml试剂G加入离心管中,用手轻轻颠倒离心管,以充分混合。
干血斑DNA快速提取试剂盒说明书
干血斑DNA快速提取试剂盒说明书运输条件:常温运输货号:51041-N:50次反应51042-N:100次反应储存条件:室温(15-25℃)产品特点试剂盒组成组分50次100次结合液50ml 100ml洗涤液25ml 50ml核酸释放剂 2.5ml 5ml产品介绍BIOG干血斑DNA快速提取试剂盒是我公司研发团队在综合比较了国外同类优质产品的基础上反复研制优化而成,专门用于干血斑DNA的提取。
本试剂盒可从干血斑中提取高质量的基因组DNA。
BIOG干血斑DNA快速提取试剂盒采用了结合液、洗涤液和核酸释放剂经过多次优化,提取得到的DNA产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
操作步骤1.请自行准备:1.5ml离心管。
2.取1.5ml离心管,加入1mL结合液,取干血斑样本(5-9片5mm*5mm/片)至离心管中,300-500rpm室温摇动10分钟。
取出纸片,将离心管置于离心机5,000 rpm 离心3分钟。
3.彻底弃上清,加入0.5ml洗涤液,悬浮沉淀,300-500rpm室温摇动5分钟。
将离心管置于离心机5,000 rpm 离心3分钟。
4. 彻底弃上清,加入30-50μL核酸释放剂,充分混匀,即得DNA溶液。
提取的DNA可直接用于下一步实验或-20℃保存备用。
储存、运输和有效期本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月。
质量控制本产品经严格的质量检验,无PCR和酶切反应抑制物。
◎操作简便快速,无抑制剂;◎产量高,提取量大;◎适用于从干血斑中提取基因组DNA。
酵母基因组DNA快速提取试剂盒
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,用于 提取酵母细胞中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新 型材料,高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合 物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、构 建、Southern 杂交等实验。
10. 向吸附柱中加入 500 µl 漂洗液 W2,12,000 rpm(~13,400×g )离心 30 秒, 倒掉废液。
11. 将吸附柱放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 分钟,倒掉废液。将 吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留 会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等)实验。
12. 将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加 50-200 µl 洗脱缓冲液 TE,室温放置 2-5 分钟,12,000 rpm(~13,400×g )离心 2 分钟, 将溶液收集到离心管中。 注意:为增加基因组 DNA 的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室 温放置 2 分钟,12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 分钟。 洗脱缓冲液体积不应少于 50 µl,体积过小影响回收效率。 洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内(可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围),pH 值低于 7.0 会降 低洗脱效率;且 DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液 W2 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。 1. 取酵母细胞(最多不超过 5×107cells),12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟,
dna提取试剂盒原理
dna提取试剂盒原理
DNA提取试剂盒的原理是利用化学方法和物理方法将细胞膜破坏、细胞蛋白质降解、DNA与其他细胞组分分离,从而获得纯净的DNA样品。
具体步骤如下:
1. 细胞破碎:将待提取DNA的样品加入溶解缓冲液中,通过机械破碎、超声处理或酶解等方法使细胞膜完全破裂,释放细胞内的DNA。
2. 蛋白质降解:加入蛋白酶K等蛋白酶,将细胞内的蛋白质降解为小分子物质,以便后续去除。
3. DNA与蛋白质的分离:加入乙酸酚-氯仿等有机试剂,通过离心将DNA和蛋白质、碎细胞残渣等分为两相,DNA富集于上层而蛋白质和细胞残渣富集于下层。
4. DNA析出:将上层液体转移至新离心管中,加入同等体积的冷乙醇或异丙醇,DNA会在其中沉淀出来。
5. DNA洗涤:用70%的乙醇洗涤DNA沉淀,以去除残留的盐类和杂质。
6. DNA溶解:用脱离蛋白质结构的缓冲液溶解DNA沉淀,得到所需的DNA提取物。
DNA提取试剂盒通过上述原理,能够高效、快速地提取出高
质量的DNA样品,适用于分子生物学、基因组学、遗传学、犯罪学等领域的研究和应用。
dna提取试剂盒原理
dna提取试剂盒原理DNA提取试剂盒是一种用于从生物样本中提取DNA的化学试剂盒,其原理是利用试剂盒中的各种试剂和材料,通过一系列化学反应和物理处理,将DNA从细胞中分离出来,从而实现DNA的提取和纯化。
首先,DNA提取试剂盒中通常包含有裂解液,用于破坏细胞膜和核膜,释放细胞内的DNA。
裂解液中的成分通常包括离子性洗涤剂和蛋白酶,能够有效地破坏细胞膜和核膜,使DNA得以释放。
接着,试剂盒中还包含有沉淀剂,用于沉淀DNA。
沉淀剂通常是乙醇或异丙醇,能够与DNA形成复合物,使DNA沉淀到溶液底部。
此外,试剂盒中还包含有洗涤缓冲液,用于去除沉淀物和其他杂质,最终得到纯净的DNA。
在实际操作中,使用DNA提取试剂盒进行DNA提取通常需要按照以下步骤进行,首先,将待提取的生物样本加入裂解液中,使细胞裂解并释放DNA。
接着,加入沉淀剂,使DNA沉淀到溶液底部。
然后,将上清液倒出,加入洗涤缓冲液进行洗涤,最终得到纯净的DNA。
DNA提取试剂盒的原理简单而有效,能够快速、高效地从各种生物样本中提取DNA。
它广泛应用于分子生物学、遗传学、法医学等领域,为科研和临床诊断提供了便利。
同时,随着技术的不断进步,现代的DNA提取试剂盒已经具有了更高的纯度和更快的操作速度,为科研工作者和临床医生提供了更好的工具和支持。
总的来说,DNA提取试剂盒的原理是基于化学和物理的方法,通过一系列的步骤将DNA从生物样本中提取出来。
它的应用范围广泛,操作简便,是现代生物学研究和临床诊断中不可或缺的工具之一。
随着科学技术的不断发展,相信DNA提取试剂盒会在未来发挥更加重要的作用,为人类健康和科学研究做出更大的贡献。
游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书
游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(磁珠法)英文名称:Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法,适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。
纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠,可用于下游常规实验。
该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
【预期用途】 样品裂解后,在高盐存在时,DNA 结合于硅基包被的磁珠表面,漂洗后,高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。
DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。
【检验原理】50次/盒;400次/盒【包装规格】版本号:11/2020【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。
2.标本处理与保存:血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。
3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。
【检验方法】实验前准备:向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解,终浓度为20 mg/ml ,-20℃保存。
1.向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。
2.向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。
注意:冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。
溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。
3.向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。
注意:1)如无Thermomixer ,需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟,期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。
细菌基因组DNA提取试剂盒(溶液型)操作方法及步骤说明书
细菌基因组DNA提取试剂盒目录号:DN12目录编号包装单位DN1201 50次DN1202 100次DN1203 200次❖适用范围:适用于快速提取各种细菌基因组DNA❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次细胞核裂解液室温30 ml 60 ml 120 ml蛋白沉淀液室温10 ml 20 ml 40 mlDNA溶解液室温10 ml 15ml 30 mlRNase A(10mg/ml) -20℃150μl250μl400μl本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,轻轻旋摇,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,如果不能完全溶解,也不影响使用效果,直接取用上层溶液即可。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍:本试剂盒用于快速的从各种细菌中提取基因组DNA。
细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后),首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
❖产品特点:1.不需要使用有毒的苯酚等试剂。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定,产量高,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50 kb -150kb,可直接用于构建文库,PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
❖注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.用户需自备异丙醇、70%乙醇、0.5M EDTA和Lysozyme(溶菌酶)(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
天隆NP968核酸提取试剂盒使用说明书
核酸提取或纯化试剂使用说明书【产品名称】核酸提取或纯化试剂【通用名称】病毒DNA/RNA提取试剂盒【规格】96T/盒(预封装)16T/板×6板【预期用途】可从拭子洗液等多种液体样品中快速提取病毒DNA和病毒RNA,提取的病毒DNA和病毒RNA纯度高、质量稳定,可广泛应用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗等用途。
【检测原理】核酸提取过程中,配合天隆NP968系列仪器,利用磁珠吸附原理,通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,实现磁珠/核酸的转移,自动完成核酸的提取。
【试剂盒组成】组件名称96T/盒(预封装)组件规格组件数量预封装试剂16T/板6蛋白酶K 1.1ml/支2【储存条件及有效期】室温保存;有效期一年。
【适用仪器】天隆NP968系列核酸提取仪及同类型仪器。
【样本要求】1.适用样本类型:拭子洗液等。
2.样本保存:可立即进行提取,也可于4℃保存待测,保存期不超过24小时,长期保存需置于-20℃。
【使用方法】1.预封装试剂准备从试剂盒中取出预封装试剂,慢慢颠倒混匀数次使磁珠重悬,去掉真空包装,轻甩孔板,使试剂及磁珠均集中到孔板底部(也可使用孔板离心机,500rpm×1min行离心),使用前小心撕去铝箔封口膜,避免孔板振动,防止液体溅出。
2.自动化仪器提取步骤2.1在预封装试剂的第1或7列(注意有效孔位)中加入200µl样品、20μl蛋白酶K。
2.2按以下程序进行自动化提取;2.2.1快速版(适合口腔拭子、鼻腔拭子、新型冠状病毒)步骤槽位名称等待时间(min)混合时间(min)磁吸时间(sec)混合速率体积(µl)温度状态温度(℃)12转移磁珠0030快300裂解加热90 21结合0590中720裂解加热90 34洗涤0160快600洗脱加热90 46洗脱1290中80洗脱加热90 54弃磁010快600关闭02.2标准程序(适合血清血浆中病毒HBV\HCV等)步骤槽位名称等待时间(min)混合时间(min)磁吸时间(sec)混合速率体积(µl)温度状态温度(℃)12转移磁珠0030块600裂解加热90 21裂解结合01090中720裂解加热90 32洗涤10260快600洗脱加热75 43洗涤20160快600洗脱加热75 54洗涤30160快600洗脱加热90 66洗脱1590中80洗脱加热90 74弃磁010快600关闭02.3自动化程序结束后,将第6、12列的洗脱液转移至干净的无核酸酶离心管中。
四种DNA提取试剂盒提取效果的比较
志2 0 l 曼 午4 月第 2 0 卷第 4 期
J o u r n a l o f P r a c t i c a 1 M e d i c lT a e c h n i Ⅱ u e s , A n i f l 2 0 1 3 , V o 1 . 2 0 , N o . 4
・
医学检验 ・
1 . 2 试剂 : O me g a 石蜡包埋 D N A提取试 剂盒 ( O m e g a )购 自 O me g a 公 司; 天根 口腔拭子基 因组 D N A提取试剂盒 ( 口腔 ) 、 天根石蜡包埋组织 D N A提取试剂盒( 普通 ) 、 天根石蜡包埋组 织D N A快速提取试剂盒( 快速 ) 均购 自天根公司。 1 . 3 荧光定量 P C R扩增用 引物与探针 : He r 2 . F : 5 , - T C C G G A .
值等因素 , 为短片段扩 增及 长片段扩增所选用 的试剂盒 提供
实验依据 。 1 材料与方法
1 . 1 材料 : 实验样本为山西医科大学第一医院病理科 提供 的 未染色石蜡切 片和 H E染 色石蜡 切片 , 2种类型共 3 O例 , 其 中未染色石蜡切片 2 4例 , HE染色石蜡切片 6 例。
异无统计学意义 ( P > O . 0 5 ) ; 与天根石蜡包埋组织 D N A快 速提
取试剂盒进行 比较差异有 统计学意义( P < 0 . 0 1 o
3 讨 论
D N A提取方法很多 , 主要包括浓盐法 、 阴离子去污剂法、
苯酚抽 提法 、 水抽提法等 。 浓盐法是利用 R N P和 D N P在电解
( A1 A 2 4 ) 和苏木素一 伊红( HE ) 染色石蜡切片 ( B 1 . B 6 )2种类
λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒
λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒(离心柱型)目录号:ZP317试剂盒内容:试剂盒组成 ZP317-01(50次)ZP317-02(100次)RNase A 20 mg 20 mg X 2DNase I 50 mg 50 mg X 2噬菌体沉淀液 100 ml 200 ml裂解缓冲液 30 ml 60 ml杂质沉淀液 5 ml 10 ml结合液LB 20 ml 40 ml漂洗液WB 15 ml 2×15ml洗脱缓冲液EB 15 ml 30 ml吸附柱AC 50个 100个收集管(2ml) 50个 100个说明书 1份 1份本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后, 按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
产品介绍:λ噬菌体载体广泛用于文库筛选,目的克隆培养获得大量的噬菌体颗粒需要提取λ噬菌体DNA来开展测序等后续工作。
λ噬菌体裂解培养物离心后的上清,首先用RNase A /DNase I混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌体,噬菌体被SDS裂解,残留碎片通过沉淀离心去除掉。
裂解物上清中的λ噬菌体DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将λ噬菌体DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,可用于液体培养裂解物和固体培养板的提取,单个样品操作一般可在1.5小时内完成。
3.产量高,典型的产量10ml λ噬菌体裂解培养物上清可以提取约10µg λ噬菌体DNA。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9。
可以直接用来酶切和测序。
注意事项:1.使用转速可以达到13,000rpm的冷冻离心机。
细菌基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
细菌基因组DNA快速提取试剂盒DN1101 50次DN1102 100次DN1103 200次DN1111 50次(带蛋白酶K) DN1112 100次(带蛋白酶K) DN1113 200次(带蛋白酶K)❖适用范围:适用于快速提取各种细菌基因组DNA❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次平衡液室温 5 ml 10 ml 20 ml 缓冲液RB 室温30 ml 60ml 120 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 2x25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml 蛋白酶K粉(可选)20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1毫升灭菌水溶解,因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
❖产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
济凡核酸提取试剂盒-FineMag Quick Viral DNA RNA 提取试剂盒说明书
核酸提取试剂使用说明书[产品名称]FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒1.通用名称:核酸提取试剂2.英文名称:FineMag Quick Viral DNA/RNA提取试剂盒[包装规格]96次/盒[预期用途]用于全血、唾液、拭子、血清、血浆、淋巴液、无细胞体液、细胞培养上清液、组织匀浆液或各种病毒保存液中纯化高质量病毒核酸。
[检验原理]本试剂盒以超顺磁性的纳米磁性粒子为基质,这种磁性粒子在高浓度离液剂的条件下可通过氢键和静电特异的吸附核酸,而蛋白质或其它非特异吸附的少量杂质经洗涤被去除,最后用低盐缓冲液或RNase Free ddH2O洗脱核酸。
纯化的核酸可适用于各种常规操作,包括RT-PCR、qRT-PCR、荧光定量PCR等各种下游实验。
[主要组成成分]本试剂盒包含以下组分:[储存条件及有效期]本试剂盒置于室温(15℃~25℃)干燥条件下可保存12个月。
[适用仪器]济凡Purifier HT[样本要求]1.适用样本类型:肺泡灌洗液、咽拭子、全血、血清、血浆、淋巴液等。
2.样本采集:用无菌容器采集样本,样本量应不少于1mL。
3.样本保存和运送:待测样本可在2℃~8℃放置24小时,长期保存应置于≤-20℃条件下或专业的病毒保存液内,避免反复冻融。
标本运送采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
[检验方法]1.从试剂盒中取出预封装96孔板。
2.用涡旋振荡器震荡板位3的96孔板4角,使磁珠悬浮。
3.小心撕去96孔板铝箔封口膜,避免孔板振动,防止液体溅出。
4.在板位1(Buffer MVN)的96孔位中加入20μl ProteinaseK和200μl样品(样品需平衡至室温)。
注:请在加样后1h内上机运行程序。
5.将磁力套放入板位2(Buffer DW1P)中。
6.按照提示将4块预封装板放入机器正确位置。
7.选择程序“GF_FM502T5_P96”/“GF_FM502T5K S”(快速版)并运行。
磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则
磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种常用的分子生物学实验试剂盒,用于从生物样本中提取和纯化DNA。
下面是该试剂盒的检测通则:
一、试剂盒概述
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种高效、快速、简便的DNA提取和纯化试剂盒,适用于多种生物样本的DNA提取和纯化。
二、实验步骤
1. 样本裂解:将生物样本加入裂解缓冲液中,经过高温或化学处理使细胞壁破裂,释放DNA。
2. DNA结合:将磁珠加入裂解液中,磁珠表面的DNA结合试剂与DNA结合形成复合物。
3. 磁珠分离:将磁珠复合物通过磁场分离,将未结合的杂质分离出去。
4. 洗涤:用洗涤缓冲液洗涤磁珠复合物,去除杂质。
5. DNA洗脱:用低盐缓冲液或水洗脱DNA。
三、注意事项
1. 样本应该新鲜,保存在-80℃以下。
2. 样本裂解应该充分,避免DNA断裂。
3. 磁珠复合物分离时应该注意磁珠的数量和磁力的强度,避免DNA的损失。
4. 洗涤缓冲液的pH值应该控制在7.5-8.5之间,避免DNA的损失。
5. 洗脱液的温度应该控制在60℃以下,避免DNA的降解。
以上是磁珠法DNA提取纯化试剂盒的检测通则,实验者在使用该试剂盒时应该严格按照实验步骤和注意事项进行操作,以保证实验结果的准确性。
离心柱型dna提取试剂盒的基本流程
离心柱型dna提取试剂盒的基本流程
1. 样品的准备
在进行DNA提取之前,首先需要准备样品。
样品可以是血液、唾液、组织、细胞等,但
是需要根据样品的性质选择合适的提取方法。
一般来说,采用离心柱型DNA提取方法的
样品需要先经过离心、洗涤等处理,去除其中的细胞碎片、蛋白质和其他杂质。
2. DNA的溶解
将样品中的细胞溶解在含有离子表面活性剂的缓冲液中,使DNA从细胞核中溶解出来。
通常情况下,使用蛋白酶K进行细胞溶解,加速DNA的释放。
3. DNA的结合
将DNA溶解液加入离心柱中,离心柱上的硅胶膜能够特异性地结合DNA,将其分离出来。
此步骤是离心柱提取法的关键步骤,也是DNA提取的核心步骤。
4. 杂质的去除
经过上一步骤,DNA和其他细胞组分已经成功地分离出来,接下来需要对离心柱中的杂
质进行去除。
通常会使用洗涤缓冲液进行洗涤,从而将杂质彻底去除。
5. DNA的洗脱
经过洗涤之后,将离心柱插入含有洗脱缓冲液的离心管中,通过离心将DNA洗脱出离心柱。
此时,得到的洗脱液中含有纯度较高的DNA,可以用于后续的分子生物学实验。
6. DNA的保存
将洗脱后的DNA溶液保存在-20℃或更低的温度下,以防止DNA的降解。
此外,也可以
将DNA进行分装,并标记好相关信息以便后续实验使用。
总结来说,离心柱型DNA提取试剂盒的基本流程包括样品的准备、DNA的溶解、DNA的
结合、杂质的去除、DNA的洗脱和DNA的保存。
通过这些步骤,可以快速、高效地从样
品中提取出高质量的DNA,为后续的实验研究提供充分的保障。
细菌基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
细菌基因组DNA快速提取试剂盒目录号:DN11目录编号包装单位DN1101 50次DN1102 100次DN1103 200次DN1111 50次(带蛋白酶K) DN1112 100次(带蛋白酶K) DN1113 200次(带蛋白酶K)适用范围:适用于快速提取各种细菌基因组DNA试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次平衡液室温 5 ml 10 ml 20 ml 缓冲液RB 室温30 ml 60ml 120 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 2x25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml 蛋白酶K粉(可选)20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1毫升灭菌水溶解,因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
FastDNA试剂盒使用说明
本实验沉积物基因组DNA的提取采用土壤DNA快速提取试剂盒Fast DNA Spin Kit for Soil(MP bio,USA)进行提取,具体实验操作如下:(1)称取0.3 g~0.4 g沉积物样品加入Lysing Matrix E Tube 中。
(注意:需保证加完样品及所需溶液后,管中应留出不少于200 μL 空间)(2)加入978 μL SPB,加入122 μL MT Buffer。
(3)盖紧Lysing Matrix E Tube的盖子,将离心管置于涡旋混合仪上,对管内物质进行震荡破碎均质化,时间设定为40 s~50 s。
(注意:时间不可过长,有可能打断基因组DNA片段降低提取质量)(4)在8000 r/min转速下离心15 min,有利于去除体积较大或具有复杂细胞壁结构的样品碎屑。
(5)将上清液用大口枪头吸出转入2.0 mL的微离心管中,加入250 μL PPS,手持离心管晃动10次以混匀。
(6)在8000 r/min下离心5 min,用大口枪头将上清液转移至5 mL离心管中。
(7)摇匀Binding Matrix后,吸取1.0 mL加入上一步离心管中。
(8)将离心管上下颠倒2 min后,静置3 min,使DNA附着于Bingding Matrix 上,并等待二氧化硅基质沉淀。
(9)小心移除600 μL上清液,避免吸出沉淀物。
(10)将剩余的上清液与沉淀物重新混匀,吸取约600 μL混合液移入SPIN Filter中,8000 r/min下离心1 min。
(11)倒掉收集管中的液体,重复上一步操作直至5 mL离心管中的液体吸尽。
(12)加入已制备好的SEWS-M溶液500 μL,用小枪头小心混匀后,8000 r/min 下离心1 min后,弃去收集管中的液体。
(13)为更好的去除杂离子,可重复第12步,更换为1.5 mL离心管。
(14)在8000 r/min下离心2 min,去除残留的SEWS-M溶液,然后更换为干净的catch tube。
艾德莱基因组DNA提取试剂盒
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试剂盒组成、储存、稳定性: 保存
室温 室温 室温 -20℃
试剂盒组成
细胞核裂解液 蛋白沉淀液 DNA 溶解液 RNase A(10mg/ml)
50 次
30 ml 10 ml 10 ml 100 μl
100 次
60 ml 20 ml ml 15 15ml 200 μl
200 次
120 ml 40 ml 30 ml 400 μl
11.
加入 1ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗 DNA 沉淀,12,000rpm 离心 1 分钟, 倒去上 清 (注意不要把 DNA 沉淀倒掉了) , 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇, 还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟。 注意不要干燥过头,否则 DNA 极其难溶;也不能残留太多乙醇,否则乙醇可能 抑制下游如酶切反应。
9.
垂直放置离心管,让白色 DNA 沉淀自然沉到管底,然后尽可能多的吸弃大部分 的上清,注意不要吸到沉淀。 如果棉絮状(丝状)DNA 沉淀附着有气泡,则会漂浮在液体表面,而不会沉淀 下来,要小心避开沉淀吸取上清,不要把沉淀给吸掉了。
10.
加入 1ml70%乙醇后,颠倒漂洗 DNA 沉淀,12,000rpm 离心 1 分钟,在管底可以 见到白色的 DNA 沉淀块,倒弃上清。
d. 55℃水浴放置过夜,期间轻柔的振荡几次帮助裂解。或者在一个摇床上 55℃ 水浴 3 小时,每一个小时高速涡旋振荡混匀一次。确保鼠尾裂解完全(没剪碎的 鼠尾,可能不能完全裂解,产量会低一些) 。 4. 加入 1.8μl RNase A(10mg/ml)至裂解物中,即 RNase A 终浓度 30μg/ml,颠倒混 匀后 37℃温育 15-30 分钟去除残留 RNA。然后室温冷却至少 5 分钟或者冰浴使 回复到室温。 5. 在回复到室温的裂解物内加入 200μl 蛋白沉淀液后,在涡旋振荡器上高速连续振 荡混匀 25 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴 5 分钟。 由于样品体积重量小,用涡旋振荡器振荡混匀产生的剪切力并不会剪切打断基因 组 DNA。如果用手振荡混匀,则不可以用手上下剧烈振荡混匀,只能适当力度 振荡混匀,否则会剪断基因组 DNA; 但是力度也不能太小,要保证充分混匀, 将粘稠的裂解物打散开,否则 DNA 无法和蛋白质沉淀分离开, 离心的时候会和 蛋质一起沉淀下来,造成 DNA 丢失或者降低产量。此外混匀不充分也可能造 成蛋白沉淀不充分, 最后的产物污染有较大量的蛋白质。因此建议用涡旋振荡 器。
细菌基因组 DNA 快速提取试剂盒 说明书
细菌基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)GK1061 50 次GK1062 100次一、试剂盒组成Components GK1061 GK1062Digestion Solution(a)Proteinase K(b)NaCl Solution CTAB/NaCl Solution(c) Boiled RNase A (10mg/ml)TE (pH8.0)Lysozyme(d)SP Buffer 18ml3mg6ml6ml240µl18ml30mg0.5ml36ml6mg12ml12ml480µl36ml60mg1.0ml二、实验前的准备(a) Digestion Solution低温时可能出现沉淀,请于55℃适当加温溶解后使用,不会影响实验结果。
首次使用时,将Boiled RNase A全部加入到Digestion Solution中,充分混匀备用,加完Boiled RNase A的Digestion Solution,请于4℃保存。
(b) Proteinase K使用前加入300µl (GK1061) 、600µl (GK1062)灭菌双蒸水,分装-20℃冻存。
不得将ProteinaseK直接加入到Digestion Solution中,以免酶失活。
(c) CTAB/NaCl Solution使用前需要65℃预热,便于溶解和取液。
(d) Lysozyme使用前加入500µl (GK1061) 或1ml (GK1062) SP Buffer,使Lysozyme全部溶解。
分装后-20℃冻存。
三、试剂盒说明本试剂盒用于快速的从各种细菌中提取基因组DNA。
细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后),首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重新溶解于DNA溶解液中。
试剂盒DNA提取详细操作步骤
试剂盒DNA提取详细操作步骤一、试剂盒打开后需要准备的工作1、Proteinase K(蛋白酶K)的溶解①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管,每管100ul~200ul③将分装好的Proteinase K放入-20℃冰箱中保存,使用期限为12个月 2、组织抑制剂(Inhibitor Removal buffer)的调配加入20ml无水乙醇(absolute ethanol)颠倒混匀并在空白方框处打钩 3、洗液(wash buffer)的调配加入80ml无水乙醇(absolute ethanol)颠倒混匀并在空白方框处打钩二、组织DNA提取(试剂盒)1、组织样品处理与消化①将采集来的样品剪碎(≤0.1cm)洗净保存液。
②加入组织破解液Tissue-lysis 200ul 蛋白酶K 40ul然后放入55℃水浴锅内3个小时使其充分消化。
2、DNA提取①在消化好的组织样品中加入结合液binding buffer 200ul 然后放入70°水浴锅中10分钟。
②再加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中,然后离心8000g一分钟。
③倒掉底液,加500ul组织抑制剂Inhibitor Removal 然后离心倒掉底液④加洗液washing buffer500ul离心(洗液加两次)⑤在70℃预热Elution Buffer,然后将洗好的柱体下部分丢掉,换新的离心管加入Elution Buffer200ul溶解10分钟离心保留底液放-20℃保存。
三、细胞DNA的提取(试剂盒)1、组织样品处理与消化① 将带有培养基的样品用PBS清洗干净8000rpm/1min离心,倒掉上清② 加PBS200ul振荡摇匀使之样品成为单个细胞的悬浊液③ 加200ul Binding Buffer,40ul蛋白酶K 混合均匀放入70℃水浴锅内消化10分钟。
2、 DNA提取① 加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中,然后离心8000g一分钟。
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- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
简单快速:无需液氮,5 min即可快速提取各种组织DNA。 材料广泛:适用于植物叶片、种子、动物组织、血液样品(新鲜血、抗凝血、血凝块、干血
斑等)、酵母和细菌等材料。 兼容性强:PCR试剂适用于提取的各种来源样本的DNA扩增。 基因检测:特别适合大规模的基因检测。
注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
产品简介
本试剂盒采用独特的包装体系,包含了快速制备基因组DNA和PCR扩增的所有试剂,适 用于从植物组织、种子、动物组织、血液样品、酵母和细菌中一步法提取基因组DNA并用于 后续的PCR扩增和检测。整个提取过程不包含去蛋白、去RNA及其它次生代谢物的过程,无 需有机溶剂抽提,无需无水乙醇沉淀,简便、快捷,而且质量稳定可靠。
35 cycles
结果检测 反应结束后取5-10 µl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。 注意:举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情
况设定最佳反应条件。 注意:在操作中如发现管壁或管盖上有液体可以瞬时离心将其甩至管底。
附表1
样品名称 植物叶片 植物种子 动物组织 细菌样品 酵母样品 血液样品
6 ml 6 ml 500 µl
10个
KG203-03 (200 preps)
24 ml 24 ml 2×1000 µl
20个
选配仪器
TGrinder电动组织研磨器 (目录号:OSE-Y10)
储存条件
缓冲液B1和缓冲液B2在室温 (15-25℃) 干燥条件下可保存12个月;2×Det PCR MasterMix在-20℃条件下可长期保存,多次冻融不会影响活性,如需经常使用,可存放于 4℃。
2×Det PCR MasterMix
10.0 µl
正向引物 (10 µM)
0.5 µl
反向引物 (10 µM)
0.5 µl
模板DNA
1.0 µl
ddH2O
补至20 μl
试剂全部加好后,混匀后瞬时离心,将所有试剂收集到管底。
参考反应条件 94℃ 3 min 94℃ 30 sec 55℃ 30 sec 72℃ 1 min 72℃ 5 min
3. 用研磨杵(天根目录号:WL046)将样品捣碎。 注意:若样品为血液、菌液等液体样,可用研磨杵反复研磨30 sec至样品与缓冲液B1混 匀即可;若样品为不易捣碎的植物种子、皮肤组织、结缔组织等,可用研磨杵(推荐配 合电动组织研磨器进行捣碎更方便)尽量研磨至溶液浑浊变色即可(如新鲜叶片研磨后 溶液由澄清变为绿色,即使溶液中有可见固状物存在也不影响结果)。如果需要更多研 磨杵,可以向TIANGEN咨询购买。
本试剂盒提供的2x Det PCR MasterMix是一种扩增兼容性很强的PCR试剂,无需彻底去 除蛋白等杂质,便能进行高效特异扩增,该试剂包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反 应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂及稳定剂。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳 定性好等特点,特别适合于高通量的筛选。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
处理量 1-5 mg 去除种皮后的样品1-5 mg 1-5 mg 0.2-0.5 ml菌液收集物 0.2-0.5 ml菌液收集物 20 μl
版本号: DP130828
Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD
足体积,使其浓度为1×即可进行反应。
操作步骤
1.第一次使用本试剂盒时,请仔细查看两种缓冲液中是否有结晶析出,如有结晶请将两种 缓冲液于室温充分平衡至结晶完全溶解,或在37℃水浴中重新溶解沉淀后使用。两种缓 冲液溶解后在室温保存。
2.取少量样品(具体加入量参考附表1)于1.5 ml的离心管中,加入100 μl 缓冲液B1,确保 缓冲液可以完全覆盖样品。
TIANcombi DNA Lyse&Det PCR Kit 快速DNA提取检测试剂盒
目录号:KG203
产品内容
产品组成
缓冲液B1 (Buffer B1) 缓冲液B2 (Buffer B2) 2×Det PCR MasterMix
研磨杵 (Grinding Pestles)
KG203-02 (50 preps)
4.样品捣碎后,加入100 μl 缓冲液B2,震荡混匀,12,000 rpm (~13,400×g )离心2 min。 5.离心结束后,小心吸取100 μl上清液于另一干净的1.5 ml离心管中作为模板备用。 6. PCR扩增反应。
反应体系
PCR反应体系的建立,20 µl体系如下:
组组成成成成分分
体 积积
1. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。 2.对于类似于棉花叶片这种含有酚类较多的样品,应严格控制样品处理量不超过0.4 mg,
否则会影响PCR反应。 3.缓冲液B1和缓冲液B2应放置于室温保存,如放在低温(-20℃或4℃)保存时有沉淀析
出,可在37℃水浴中重新溶解沉淀,并摇匀溶液后使用。 4.本产品提供的2×PCR Reagent 为2×母液,使用时需加入模板和引物,并加入灭菌水补