第七章微生物的遗传变异和育种

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细胞的裂解
蛋白质去除
RNA的去除
质粒DNA与染色体DNA相分离 (2)质粒鉴定。
电镜、琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳
4.质粒的种类
5.典型质粒简介
(1)F质粒
又称F因子、致 育因子或性因 子,是E.coli等 细菌决定性别 并有转移能力 的质粒。
(2) R质粒
又称R因子 由RTF和r决定子结合而形成R质粒
(3) Col质粒
Col质粒:又称大肠杆菌素质粒或产大肠杆 菌素因子。 细菌素:许多细菌都能产生抑制或杀死其 他近缘细菌或同种不同菌株的代谢产物是由 质粒编码的蛋白质。
(4)Ti质粒即诱瘤质粒或冠瘿质粒。
Ti质粒即诱瘤质粒或冠瘿质粒 Ti质粒是一种200 kb的环状质粒, 包括毒性区(vir)、接合转移区(con)、 复制起始区(on)和T-DNA区4部分。 植物基因工程中使用最广、效果最佳的克隆 载体。
(二)突变率
定义:
某一细胞(或病毒粒)在每一世代中发生 某一性状突变的几率,称突变率。
(三)基因突变的特点
共同特点: ①自发性 ③稀有性 ⑤可诱变性
②不对应性 ④独立性 ⑥稳定性
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⑦可逆性
(五)基因突变及其机制
1.诱发突变
诱发突变:简称诱变,是指通过人为的方法, 利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发 突变频率的手段。凡具有诱变效应的任何因素, 都称诱变剂。
2.细胞核水平 不论真核生物的细胞核或原核生物细胞的核
区都是该微生物遗传信息的最主要负荷者,被 称为核基因组、核染色体组或简称基因组。
3.染色体水平
(1)染色体数不同 (2)染色体倍数
4.核酸水平 (1)核酸种类 (2)核酸结构 (3) DNA长度(即基因组的大小 )
5.基因水平
(1)基因:
是生物体内一切具有自主复制能力的最小 遗传功能单位,其物质基础是一条以直线排 列、具有特定核苷酸序列的核酸片段。
遗传型+环境条件 表型 (可能性)(现实性)
(2)表型 指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和,
是其遗传型在合适环境条件下通过代谢和发育而得到的具体 体现。所以,它与遗传型不同,是一种现实性(具体性状)。
(3)变异 指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结
构或数量的改变,亦即遗传型的改变。其特点是在群体中只 以极低的几率(一般为10-5~10-10)出现,性状变化幅度大, 且变化后的新性状是稳定的、可遗传的。
(2)细菌培养试验 (3)S型菌的无细胞抽提液试验 离体转化实验
(二)噬菌体感染实验
(三)植物病毒的重建实验
二、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式
(一)7个水平 1.细胞水平 在细胞水平上,真核微生物和原核生物的大部
聚DNA都集中在细胞核或核区(核质体)中。在 不伺种微生物或同种微生物的不同细胞中,细 胞核的数目常有所不同。
(5) Ri质粒
发根土壤杆菌或发根农杆菌可侵染双子叶 植物的根部,并诱生大量称为毛状根的不定 根。
Ri质粒已成为外源基因的良好载体,也可用 作进行次生代谢产物的生产。
(6) mega质粒 即巨大质粒,存在于根瘤菌属中,。分子质 量比一般质粒大几十倍至几百倍。
(7)降解性质粒
假单胞菌属中发现。质粒编码降解一系列复杂有机物 的酶,
2.质粒在基因工程中的应用
质粒具有的优点: ①体积小,便于DNA的分离和操作; ②呈环状,使其在化学分离过程中能保持性 能稳定; ③有不受核基因组控制的独立复制起始点; ④拷贝数多,使外源DNA可很快扩增; ⑤存在抗药性基因等选择性标记。
E. coli的pBR322质粒克隆载体
3.质粒的分离与鉴定 (1)质粒的分离步骤
第七章 微生物的遗传变异 和 育种
概述
1遗传:讲的是发生在亲子间即上下代间的关 系,即指上一代生物如何将自身的一整套遗传 基因稳定地传递给下一代的行为或功能,它具 有极其稳定(保守)的特性。
4个基本概念
(1)遗传型又称基因型
遗传型又称基因型
指某一生物个体所含有的全部遗传因子即 基因组所携带的遗传信息。遗传型是一种内 在的可能性或潜力,其实质是遗传物质上所 负载的特定遗传信息。具有某遗传型的生物, 只有在适当的环境条件下,通过其自身的代 谢和发育,才能将它付诸实现,即产生自己 的表型。
第二节基因突变和诱变育种
一、基因突变 基因突变:
简称突变泛指细胞内遗传物质的分子结构或 数量突然发生的可遗传的变化,可自发或诱导产 生。 狭义专指基因突变, 广义则包括基因突变和染色体畸变。
(一)突变类型
凡能用选择性培养基(或其他选择性培养条件)快速选择出 来的突变株称选择性突变株,反之则称为非选择性突变株.
(2)基因调控系统
A结构基因:是决定某一多肽链结构的DNA模板,它是通 过转录和转译过程来执行多肽链合成任务的。 B 操纵基因:是位于启动基因和结构基因之间的一段核苷酸 序列,控制结构基因是否转录。 C启动基因:是一种依赖于DNA的RNA多聚酶所识别的核苷 酸序列。
6.密码子水平
遗传密码: 是指DNA链上决定各具体氨基酸的特定
(4)饰变 顾名思义,饰变是指外表的修饰性改变,意即一种不涉及
遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 其特点是整个群体中的几乎每一个体都发生同样变化;性状 变化的幅度小;因其遗传物质未变,故饰变是不遗传的。
第一节遗传变异的物质基础
一、3个经典实验 (一)经典转化实验 (1)动物试验
核苷酸排列顺序。 UAA ; UAG和UGA仅表示转译中的终止信号
7.核苷酸水平
(二)原核生物的质粒
1.定义和特点 定义:凡游离于原核生物核基因组以外,具有独
立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子.
特点:
(1)可自我复制,稳定遗传。对生存不是必要的。 复制与染色体分开。 (2)不同质粒携带不同遗传信息。 (3)无质粒细菌可通过接合、转化、转导等方式获 得,不能自发产生。
(1)碱基的置换
诱变剂:
①直接引起置换的诱变剂: 直接与核酸的碱基发生化学反应的化学诱
变剂 ②间接引起置换的诱变剂 一些碱基类似物
(2)移码突变
指诱变剂会使DNA序列中的一个或几个核 甘酸发生增添(插入)或缺失,从而使该处后 面的全部遗传密码的阅读框架发生改变,并进 一步引起转录错误的一类突变.
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