细胞生物学实验

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1-细胞生物学实验

如镜台测微尺1mm处(全长)与目镜测微尺75 刻度(150小格)重合，则:
目镜测微尺每小格的实际长度=
1 150
mm
=0.0067mm=6.7μm
④同样的方法标定高倍镜下目镜测微尺每小格的实际长度
计算公式如下:
目镜测微尺每小格的实际长度
镜台测微尺长度＝
目镜测微尺格数
＝ 30×10μm 200
(4)测量细胞并计算核质比
五、实验操作
1. 取猪肝1g，放入小烧杯中，加4ml 0.25M蔗糖缓冲液，将组织剪成约1mm立方的小块。
2. 将剪碎的组织移入匀浆器的外管中，再将内管（带柄的活塞）插入外管中，缓慢而均匀地施力，上下旋转拉动，匀浆7-10分钟，然后用六层纱布过滤回洗净的原烧杯中。（这两步操作略）
3. 每组取1个5ml离心管，加入匀浆液2ml，2000rpm离心10分钟。（每组1管）
许多酸性染料不易穿过活细胞的质膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。
2.方法取酵母悬液一滴于洁净玻片上，滴一滴0.2％亚甲基
蓝染液，加盖片，2分钟后于显微镜下观察细胞。
3.结果死细胞被染成蓝色，活细胞不着色。
实验作业
画图记录细胞吞噬实验所见结果
实验三
细胞核与线粒体的分级分离
实验内容
实验一、细胞的形态结构与显微测量实验二、细胞生理活动的实验观察实验三、细胞核与线粒体的分级分离实验四、细胞分裂的形态观察实验五、细胞原代培养实验六、细胞计数及死活细胞的鉴定实验七、综合设计性实验
实验一
细胞的形态结构与显微测量
实验目的
(一) 观察并了解细胞的基本形态。 (二)掌握临时制片和显微绘图的方法。 (三)了解显微测微尺的原理及使用方法

细胞生物学实验

1. 什么是细胞培养？细胞生物学实验指从动物活体体内取出组织，并将其分散为单个细胞（机械或酶消化），在体外模拟体内的生理环境，使其在人工培养条件下保持生长、分裂繁殖、细胞的接触性抑制以及细胞衰老过程等生命现象。

最常见的细胞一般有两种，一种是原代细胞，另一种是传代细胞。

原代细胞是指动物组织经过胰酶或胶原酶等酶类的消化，使其分散，从而获得单个细胞，再使这些单个细胞生长于培养容器中的过程。

大多数组织可以制备原代细胞，但制备的方法略有不同，制备的细胞生长快慢及难易程度也不相同。

不同的原代细胞，其形态也不尽相同。

一般将10代以内的细胞称之为原代细胞。

传代细胞一般指无限繁殖的细胞系，理论上这类细胞可以无限次的传代。

做实验的时候也会经常使用这类细胞，如Hela、293、Vero 等细胞。

2. 细胞的生长周期游离期：细胞刚接种到新的培养容器中到贴壁前的一段时期，这个时期的长短由细胞类型决定，从几分钟到几个小时不等。

贴壁期：细胞从游离状态变为贴附到培养器皿表面并展现出一定细胞形态的时期。

潜伏期：细胞在完成贴壁后，并不会马上进行增殖，会进行增殖所必须的物质和能量的储备，这个时候称之为潜伏期。

对数生长期：细胞在完成物质和能量储备后，开始大量的增殖的时期。

这个时期的细胞活力旺盛，且状态稳定，我们所做的绝大多数实验都是在这个时期开展的。

停止期：随着细胞的生长，细胞密度越来越大，由于营养物质的消耗、细胞间的接触抑制等因素，细胞生长缓慢，甚至停止生长。

这个时候，我们就要给细胞进行传代了，使细胞可以继续进行增殖，保持旺盛的活力。

3. 细胞生长所需要营养条件细胞的培养所需要的营养成份一般来自于基础培养基（比如DMEM培养基）和血清。

基础培养基：主要是提供细胞生长所需要的氨基酸（组成蛋白质的基本单位）、维生素（细胞代谢中辅酶的组成成分）、无机离子（K+，Na+等）、碳水化合物（碳源和能量来源）和一些激素等营养物质。

血清：主要是提供一些基础培养基不能提供的生长因子和低分子的营养物质，此外它还有促进细胞的贴壁、中和有害重金属离子等作用。

细胞生物学实验

二、实验原理
植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分，除去细胞壁而使原生质体释放出来。
原生质体分离纯化或融合后，在适当的培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团，长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体培养中最基础也是最关键的环节。
选取新鲜的嫩菠菜叶，洗净擦干后去除叶梗脉，称30g于150ml 0.35mol/L NaCl溶液中，装入组织捣碎机。
将匀浆用6层纱布过滤于500ml烧杯中。
利用组织捣碎机低速(5000r/min)匀桨3-5min。
将上清液在3000r/min下离心5min。弃去上清液，沉淀即是叶绿体(混有部分细胞核)。
二、实验原理
凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。
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凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与细胞膜上受体的分布有关。
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三、实验仪器
显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机等.
用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
洋葱、小麦种子或黄豆幼根根尖
人口腔上皮细胞
五、实验内容与实施过程
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓ 滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液 ↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞 ↓ 刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中 ↓ 染色10-l5min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液) ↓ 盖上盖玻片,显微镜下观察

细胞生物学实验教程

细胞生物学实验教程1. 细胞培养细胞培养是研究细胞生物学的重要工具。

其基本原理是将动植物等生物材料分离、挑选出优良细胞群体，通过合适的细胞培养基、培养条件、方法和设备，使细胞在体外生长和繁殖。

其常用培养细胞的类型有：肺、肝、胃肠、心肌、肌肉、神经、结缔组织、卵巢等。

2. 细胞分离将细胞组织挑选出来进行细胞分离，我们需要用到一般的分离试剂，如细胞酶、生物表面活性剂、离子液体、尼龙布、毛细管、细胞分选仪和细胞联合培养等，同时需要注意一些技术细节。

例如合适的分离环境和分离条件、合适的分离时间、细胞貌形的观察以及细胞去污的操作等。

3. 细胞染色细胞染色是存在于细胞的染色体、蛋白质和核酸等物质，借助不同染色剂使之显色的过程。

其优点是操作简便，速度快，结果直观且研究范围广。

根据它的使用范围和目的不同，一般分为核型分析、基因型分析、生化分析、免疫分析和化学分析等。

4. 免疫组化染色免疫组化染色是指利用抗体与细胞中的特定抗原之间的结合反应，使细胞中的抗原在细胞、组织切片或细胞培养物中可视化并得到定位的技术。

这种技术是现代生物技术与分子生物学的重要组成部分，也是研究细胞分子和生物学的密切联系。

5. 荧光标记技术荧光标记技术是指在一定条件下，荧光分子效应的物理特性。

将该技术运用于细胞生物学中，可以标记生物分子，如细胞内结构组分和生物分子中的蛋白质、核酸、糖等，以实现对其特性、运动和转化的动态和定量分析。

同时，它对于研究牛眼改良和细胞砂浆的研究、比较病理学和細胞生理学中细胞示踪标记的定位等过程中也有着积极的作用。

6. 电镜观察电子显微镜（EM）是一种利用电子束代替光束观察样品表面的高分辨率显微镜。

其操作方法较为复杂，需要像样的准备样本和设备，但提供的高分辨率和高对比度，使得研究者可以观察小于光学分辨率的细胞结构，并能发现小分子、细菌和病毒等细胞成分。

7. 分子生物学实验技术目前，分子生物学技术已经成为细胞生物学研究的重要手段之一。

医学细胞生物学实验

采用荧光染色、流式细胞术、免疫组化等方法检测细胞凋亡的数量、形态和相关蛋白的表达。
细胞凋亡诱导与检测
细胞凋亡检测
细胞凋亡诱导
自噬诱导
通过饥饿、药物刺激等手段诱导细胞自噬，以研究自噬的生物学意义和作用机制。
自噬检测
采用荧光染色、电镜观察、蛋白质印迹等方法检测自噬体的形成、数量和相关蛋白的表达。
自噬诱导与检测
03
02
01
实验原理
实验设计
根据实验目的和原理，设计具体的实验方案和操作流程。
实验操作
按照实验方案进行实验操作，包括细胞培养、显微观察、分子生物学检测等步骤。
数据收集与分析
收集实验数据，进行统计分析，得出实验结果。
结果汇报与讨论
将实验结果以书面形式汇报，并进行讨论和总结。
实验步骤
02
细胞培养
CHAPTER
利用免疫荧光染色、荧光共振能量转移等技术，可以检测和定位细胞内特定信号分子的分布和动态变化，进而揭示其在信号转导中的作用机制。
详细描述
总结词
信号转导抑制剂的应用
总结词：信号转导抑制剂是一类能够干扰细胞信号转导过程的化合物，具有潜在的治疗作用。
07
细胞凋亡与自噬研究
CHAPTER
通过使用化学物质、射线、病毒等手段诱导细胞凋亡，以研究其发生机制和生物学意义。
电子显微镜
利用电子束代替可见光，观察细胞超微结构。
显微镜观察
通过显微镜或细胞计数板，统计细胞数量。
细胞计数
利用染色剂或荧光染料，检测细胞活性，如MTT法、染色排除法等。
细胞活力检测
细胞计数与活力检测
利用染色剂对细胞进行染色，以便观察细胞形态和结构。
染色技术

细胞生物学实验课

选择题：
在进行细胞培养实验时，以下哪项操作是必需的？
A. 每日更换培养基
B. 保持培养箱的无菌环境（正确答案）
C. 使用金属器皿进行细胞操作
D. 在普通环境下进行细胞传代
观察细胞形态时，常使用哪种显微镜？
A. 电子显微镜
B. 光学显微镜（正确答案）
C. 望远镜
D. 放大镜
在进行细胞计数时，通常使用哪种染色剂来增强细胞的可见性？
A. 碘酒
B. 台盼蓝（正确答案）
C. 盐酸
D. 氢氧化钠
细胞冻存的主要目的是什么？
A. 增加细胞数量
B. 保存细胞株以备后续使用（正确答案）
C. 改变细胞形态
D. 加速细胞生长
下列哪项不是细胞转染的常用方法？
A. 电穿孔法
B. 磷酸钙共沉淀法
C. 煮沸法（正确答案）
D. 脂质体介导法
在进行细胞迁移实验时，通常使用哪种方法来观察细胞的迁移能力？
A. 显微镜直接观察（正确答案）
B. 离心法
C. 染色后计数
D. 电泳法
细胞凋亡与细胞坏死的主要区别是什么？
A. 细胞大小的变化
B. 是否伴有炎症反应（正确答案）
C. 细胞核的形态变化
D. 细胞膜的完整性
在进行细胞周期分析时，常使用哪种技术来检测细胞周期各阶段的分布？
A. PCR技术
B. 流式细胞术（正确答案）
C. 免疫荧光技术
D. 蛋白质印迹技术
细胞培养中，为了防止细菌污染，常使用哪种抗生素？
A. 青霉素（正确答案）
B. 阿司匹林
C. 维生素C
D. 胰岛素。

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师：xxx所在学校：xxx中学目的要求：1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具：新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。

方法步骤方法与步骤要点注意事项（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。

2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。

3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。

要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。

4用毛笔蘸出较薄的一片，制成临时切片。

叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。

刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。

为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得较薄的一片用来观察。

（二）观察叶片的结构1．用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。

2．观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。

仔细观察上、下表皮细胞的`区别（三）观察叶片的下表皮1．用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。

2．用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。

注意观察气孔的结构。

（四）画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。

画图时，要真实、实事求是。

讨论与交流1．保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？2．从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。

2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。

二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。

细胞生物学实验

细胞生物学实验细胞生物学是一门复杂而有趣的科学，旨在探索细胞基础结构及其功能。

细胞生物学实验是为了更深入地了解细胞，以便更好地应用。

细胞生物学实验涵盖了在实验室中模拟和测试不同类型的细胞，以发现细胞的结构和功能。

细胞生物学实验可以根据不同的实验目的而有不同的设计。

有些实验的目的是了解细胞的基础结构，例如用来实现细胞分裂的机制和细胞内组织构建的过程；有些实验的目的是了解细胞受环境刺激后该如何反应，例如研究细胞对毒性物质或药物的反应；也有些实验的目的是了解细胞之间的相互作用，例如研究细胞传播信息的机制。

不管实验的目的是什么，它们都需要有效的实验设计、精确的操作技巧和准确的数据分析。

在实验室中，细胞生物学实验的步骤要求详细。

实验的第一步是准备实验材料，根据实验的目的而确定所需的技术和实验材料，细胞培养和试剂的准备非常重要。

实验的第二步是实施实验，要求操作者熟悉实验操作流程和技术，以确保细胞培养和观察的精确性。

实验的第三步是数据分析，分析测得的实验数据，对结果进行概括和解释，并画图显示数据。

细胞生物学实验通常分为室内实验和实地实验。

室内实验用于实验室中实现细胞培养、操作和观测，实现实验过程的模拟，这样能迅速得到实验结果，更方便地探索实验结果的可靠性和可重复性。

实地实验涉及到从实地样本中收集细胞，进行实验室外观测，探究细胞在大自然环境中的表现，进而发现细胞的新特性，从而更好地应用。

细胞生物学实验的重要性不言而喻，其探索的结果可以丰富细胞生物学的理论，为临床药物发现、新药开发和疾病治疗应用提供重要的科学依据。

近年来，细胞生物学实验技术发展迅猛，实验过程日益简化，实验结果也越来越准确可靠，为研究人员在实验室中快速发现细胞的新特性提供了良好的条件。

细胞生物学实验是一种长期探索性的实验工作，一般来说，实验结果最后能揭示的不仅仅是细胞的结构及其复杂的功能，更能揭示人类自身的始祖，以及窥探自然现象的深奥内涵。

综上所述，细胞生物学实验是一项复杂而又有趣的工作，旨在深入了解细胞结构和功能，针对不同实验目的，它要求严格的实验设计、准确的操作技巧和精确的数据分析，研究结果为药物发现、新药开发和疾病治疗提供宝贵的科学依据，进而改善人类的健康水平。

细胞生物学实验(本科生)实验内容

细胞生物学实验（本科生）实验内容实验一细胞的结构目的：1、熟悉实验室规范2、掌握光镜下细胞器的形态、分布特点；3、掌握临时制片法；4、学会生物绘图内容：（一）录像：临时标本片的制作（二）光镜下细胞器形态学观察：1、高尔基体（兔神经节切片）2、细胞核及核仁（蝾螈表皮装片）3、线粒体（肾小管切片）4、细胞骨架（培养肝癌细胞飞片）5、中心体*（马蛔虫受精卵切片）（二）操作：制作人口腔上皮细胞临时制片（显示活体线粒体）（三）实验报告：绘制人口腔粘膜上皮细胞实验二细胞化学细胞工程目的：1、掌握甲基绿-派洛咛染色法原理及操作技巧2、了解几种化学成分的显示方法及原理；3、观察各种化学成分在细胞中的分布；4、了解PCC原理；5、了解细胞融合及其应用；内容：（一）录象：克隆羊（二）观察：1、糖原（动物肝切片，PAS反应）2、酸性蛋白（蟾蜍血涂片，酸性固绿染色）3、酸性磷酸酶*（鼠腹腔液涂片，金属沉淀法显色）4、DNA* （小鼠睾丸切片，Feulgen反应）5、DNA、RNA*（人口腔粘膜上皮细胞涂片，吖啶橙染色，荧光显微镜观察）6、细胞融合（鸡血细胞、培养细胞）7、PCC*（Hela细胞）（三）操作：制作蟾蜍血涂片，显示DNA、RNA（四）实验报告：甲基绿-派洛咛染色原理、步骤及结果实验三显微测量细胞的生理活动目的：1、掌握显微测量技术；2、观察细胞的生理活动；3、掌握死活细胞的鉴别方法及原理；内容：(一)录象：细胞的活动显微测量（二）观察：1、胞质环流（黑藻叶片）2、吞噬作用*（小鼠白细胞）3、吞噬作用（蟾蜍白细胞）（三）操作：1、显微测量（蟾蜍红细胞）2、死活细胞鉴别（酵母细胞）（四）实验报告：1、测量5-10个细胞的大小，计算平均值；2、计算细胞存活率。

实验四细胞增殖染色体（质）目的：1、熟悉细胞增殖的主要方式；2、掌握细胞增殖周期各期的形态学特点；3、熟悉人染色体的基本形态特征；4、掌握X染色质标本的制备方法及原理；内容：（一）观察：1、动物细胞有丝分裂（马蛔虫受精卵切片）2、植物细胞有丝分裂（洋葱根尖纵切片）3、收缩环*（肝癌细胞飞片）4、无丝分裂*（草履虫装片）5、人染色体的基本形态（人血涂片）（二）操作：1、制作有丝分裂压片（洋葱根尖）2、制作X染色质标本片（人口腔粘膜上皮细胞）（三）实验报告：绘有丝分裂图、X染色质图。

细胞生物学实验

细胞生物学实验细胞生物学实验是细胞生物学研究的重要组成部分，在细胞生物学中，细胞生物学实验具有重要作用。

细胞生物学实验可以通过对细胞进行观察，检测，分离和操作等方法，对细胞内外信息进行研究，从而研究细胞的结构、功能、化学反应和物质交换等。

一般来说，细胞生物学实验可以分为直接观察实验，化学分析实验，生物分析实验，生物组装实验，以及细胞移植和培养实验等几种。

这些实验分别有不同的用途，能够更好地帮助科学家研究细胞。

直接观察实验是最基本也是最重要的实验。

它需要将细胞用显微镜放大，形成细胞图谱。

通过观看细胞图谱，能够清楚地了解细胞的结构，细胞内部的构造以及细胞间的关系。

化学分析实验主要是为了研究细胞中的物质及其交互作用，可以采用的实验方法有酶活性测定、亲和纯化及表观遗传学分析等。

这些实验可以帮助科学家了解细胞中各种物质的含量，并对细胞的功能及物质之间的相互作用做出更深入的研究。

生物分析实验主要用于研究细胞内部结构和功能，包括细胞膜和核膜蛋白的定量分析，细胞结构及功能组成分析，细胞膜蛋白及核膜蛋白结构和功能研究等。

这些实验可以帮助科学家更深入地研究细胞的结构和功能。

生物组装实验是在细胞结构的基础上构建更复杂的九聚体，通过把这些九聚体组装到细胞神经元上，可以研究神经系统的功能、结构及行为。

细胞移植和培养实验是将细胞从一种宿主机体迁移到另一种宿主机体，或从一种宿主体中分离出来，然后在体外培养以研究其特性的实验。

这种实验能够为科学家更好地研究细胞的功能和行为提供帮助。

总之，细胞生物学实验是细胞生物学研究的重要组成部分，它能够帮助科学家们更好的研究细胞的结构、功能、化学反应和物质交换等方面，从而对细胞的研究有更深入的了解。

细胞生物学实验报告(3篇)

细胞生物学实验报告（3篇）细胞生物学实验报告（精选3篇）细胞生物学实验报告篇1一、实验目的：1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。

2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理：1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。

中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。

2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。

它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。

3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。

三、实验步骤：细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。

5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）6、清水冲洗，番红复染2min。

7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100_）细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。

吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。

细胞生物学实验

细胞生物学实验
一、细胞培养
1、细胞复苏
将冻存有细胞的冻存管从－70ºC 冰箱中取出，迅速置于已预热37ºC的水浴箱中不断摇动使冻存液在1 min 内解冻。

在超净工作台内吸出细胞悬液并滴加在含6 ml DMEM 培养基的离心管中，放入离心机1 000 rpm 离心6 min, 弃上清液，向离心管中加入DMEM 培养基6 ml 吹打混匀制成细胞悬液种于培养瓶中, 放入37ºC 5%CO2培养箱中继续培养，24 h 内换液，以除去残存冻存液和未贴壁细胞。

2、细胞培养与传代
当细胞长满培养瓶底约85%～90%时弃去原培养液，用PBS 轻洗2～3 次，弃去PBS，加入适量胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察，若胞质回缩，细胞间不再连接成片时，吸弃胰蛋白酶液，加入DMEM 培养基终止消化，轻轻吹打直至细胞全部脱落悬浮，将细胞悬液吸出分装至2~3 个培养瓶中，再加入适量DMEM 培养基和胎牛血清，血清浓度为10%，放入培养箱中静置培养。

传代第2 天吸出原培养
液，加入新培养液。

细胞约2~3 天传代1 次。

3、细胞冻存
细胞冻存前一天更换培养基，观察细胞生长情况，使细胞处于指数生长期。

按照细胞传代的方法收集，去少量细胞悬液在倒置显微镜下进行细胞计数。

然后将细胞悬液吸入离心管，1000 rpm 离心6min，弃上清，吸取细胞冻存液，吹打混匀细胞，使细胞密度为1×107个/ml，将细胞悬液吸入冻存管中严密封口，冻存管做标记。

先将冻存管放入4ºC 冰箱30 min，接着置于-20ºC 冰箱1 h，再移入超低温冰箱中保存。

细胞生物学实验汇总

细胞生物学实验汇总1.细胞培养实验：细胞培养是一种将细胞在人造环境下生长和繁殖的方法。

这种实验可以用来研究细胞的生长和增殖，观察细胞的形态变化，评估细胞的功能和活性等。

培养的细胞可以来自动物组织、植物组织或微生物等。

2.免疫荧光染色实验：这种实验可以用来观察细胞内特定的蛋白质、细胞器或DNA分布。

研究人员可以利用荧光染料或标记的抗体与目标分子结合，在显微镜下观察细胞瞬态或持久性标记。

这种实验可以帮助我们研究细胞的结构和功能，探索细胞中不同分子的相互作用。

3.转染实验：转染是将外源DNA或RNA引入细胞内的过程。

这种实验可以用来研究基因在细胞中的功能，或将外源基因导入到细胞中来改变其表达。

常见的转染方法包括酵母转染、细菌转染、质粒转染和病毒转染等。

转染实验可以帮助我们了解基因调控机制和研究细胞行为的变化。

4. 测定细胞增殖实验：这种实验可以用来测定细胞增殖速度和细胞生长的影响因素。

常见的细胞增殖实验包括MTT（3-（4,5-二甲基-2-苯唑基）-2,5-二苯基四氮唑）实验、BrdU（5-溴脱氧尿苷）实验等。

这些实验可以帮助我们了解细胞增殖的分子机制和影响细胞增殖的因素。

5.测定细胞凋亡实验：细胞凋亡是一种编程性死亡的过程，是维持细胞内稳态的重要机制。

测定细胞凋亡的实验可以帮助我们研究细胞死亡的调控机制，并评估不同因素对细胞凋亡的影响。

常见的细胞凋亡检测方法包括DNA损伤、细胞膜破裂和细胞色素释放等。

6.蛋白质分离和电泳实验：这种实验可以用来分离和鉴定细胞中的蛋白质。

常见的蛋白质分离方法包括凝胶电泳、二维凝胶电泳和西方印迹等。

这些实验可以帮助我们研究细胞中不同蛋白质的表达和功能，了解蛋白质调控的机制。

7. 实时荧光定量PCR（polymerase chain reaction）实验：PCR是一种在体外合成DNA的技术。

实时荧光定量PCR可以用来定量检测靶基因在细胞中的表达水平。

这种实验可以帮助我们研究细胞基因表达的调控机制和研究基因在不同生物学过程中的功能。

细胞生物学实验报告完整

一、实验目的1. 了解细胞膜的功能和特性；2. 掌握细胞膜的制备和观察方法；3. 学习细胞膜的流动性和渗透性实验技术；4. 通过实验验证细胞膜在细胞生理活动中的作用。

二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境之间的分隔层，具有保护、物质交换、信号转导等功能。

细胞膜主要由磷脂双分子层和蛋白质组成，具有一定的流动性和选择性渗透性。

本实验通过制备细胞膜、观察细胞膜形态、测量细胞膜流动性、研究细胞膜渗透性等方法，探讨细胞膜在细胞生理活动中的作用。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜猪肝、生理盐水、磷酸缓冲液（pH 7.4）、0.25%胰蛋白酶、0.1%EDTA、0.2%Triton X-100、红四唑（MTT）、无水乙醇、氯化钠、蒸馏水等。

2. 实验仪器：显微镜、离心机、超速离心机、恒温水浴锅、移液器、培养皿、烧杯、试管等。

四、实验步骤1. 制备细胞膜（1）取新鲜猪肝，用生理盐水冲洗干净，切成小块；（2）将肝组织放入烧杯中，加入适量生理盐水，用组织捣碎器捣碎；（3）将捣碎的肝组织过滤，收集滤液；（4）将滤液加入适量0.25%胰蛋白酶，在37℃恒温水浴锅中消化30分钟；（5）将消化后的滤液加入适量0.1%EDTA，终止消化；（6）将终止消化的滤液离心（3000r/min，10分钟），收集上清液；（7）将上清液加入适量0.2%Triton X-100，充分混匀，室温下放置10分钟；（8）将混合液离心（12000r/min，30分钟），收集沉淀即为细胞膜。

2. 观察细胞膜形态（1）取细胞膜沉淀，用生理盐水洗涤2次，每次5000r/min，10分钟；（2）将洗涤后的细胞膜沉淀加入适量生理盐水，制成细胞膜悬液；（3）取少量细胞膜悬液，滴于载玻片上，用盖玻片封片；（4）在显微镜下观察细胞膜形态。

3. 测量细胞膜流动性（1）取细胞膜悬液，加入适量红四唑（MTT），混匀；（2）将混合液离心（3000r/min，10分钟），收集上清液；（3）用分光光度计测定上清液在570nm处的吸光度值；（4）根据吸光度值计算细胞膜流动性。

《细胞生物学实验》课件

05
结论与讨论
实验结论
01 02
实验结论总结
通过本次实验，我们成功地观察到了细胞分裂的各个阶段，验证了细胞周期的存在和细胞分裂的机制。实验结果与预期一致，进一步证实了细胞生物学理论的正确性。
实验结果的意义
本实验结果对于深入理解细胞分裂和增殖的机制具有重要意义，为后续的细胞生物学研究和应用提供了有力支持。
《细胞生物学实验》 ppt课件
目录
CONTENTS
• 实验概述 • 实验材料 • 实验操作 • 实验结果 • 结论与讨论
01
实验概述
实验目的
掌握细胞培养技术
通过本实验，学生将熟悉并掌握细胞培养的基本技术和方法，了解细胞在体外生长和繁殖的条件和要求。
理解细胞形态与功能的关系
通过观察不同类型细胞的形态和生长特点，学生将进一步理解细胞形态与其功能之间的关系。
培养实践操作能力
本实验将提供实际操作的机会，培养学生的实验技能和动手能力，提高其解决实际问题的能力。
实验原理
细胞培养的生物学基础
细胞生长与增殖的过程
介绍细胞培养的基本概念、发展历程和应用领域，为学生提供相关的生物学基础知识。
解释细胞在体外生长和增殖的过程，包括细胞周期、分裂方式、接触抑制等基本概念。
03
实验结论的应用
实验结论可应用于教学、科研和实际生产中，有助于提高人们对细胞生
物学领域的认识和理解。
结果分析
数据分析方法
在实验过程中，我们采用了显微观察、图像处理和统计分析等多种方法，确保实验结果的准确性
和可靠性。
实验误差分析
在实验过程中，可能存在一些误差，如观察角度、显微镜倍数等因素可能影响实验结果。我们通过多次重复实验和交叉验证等方

细胞生物学实验

细胞生物学实验
1、高尔基复合体、镀银染色在核周的细胞质中被染成棕褐色，呈斑块状或扭曲的条索状。

2、线粒体、詹姆斯绿染色，细胞色素氧化酶，在细胞质中散在一些被然曾亮绿色的粒状或短棒状
3、中心体、铁苏木素染色受精卵两级各有一颗染色很深的小黑点
4、细胞骨架考马斯亮蓝沿细胞长轴方向分布着一些被染成蓝色的丝状纤维
5、胞质环流黑藻叶绿体
6、细胞活性鉴定染色排除法台盼蓝死细胞蓝色活细胞不着色
许多酸性染料不容易穿过活细胞的质膜进入细胞内，却能渗入死细胞使其着色以此来鉴别死活细胞
7、细胞融合聚乙二醇PEG
8、PAS法显示糖原过碘酸Schiff试剂
肝糖原位于细胞质中呈紫红色颗粒状
9、脂类苏丹染料橘红色脂滴
10、酸性蛋白——胞质、核仁碱性蛋白——细胞质
不用PH的固绿染液绿色
11、甲基绿---派洛咛甲基绿与DNA结合（胞核），派洛咛与RNA结合（胞质与核仁）
12、酸性磷酸酶溶酶体。

细胞生物学实验

究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。
▪
体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染
料的胶粒固定、堆积在细胞内某些持殊结构里，达到易于识
别的目的。体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分
离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固
定在活细胞的某种结构上而显色。
Janus green B
电镜下的红细胞
实验原理
▪ 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。
▪ 将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。
4、显微镜观察方法
▪ 标本置于载物台上-----先于低倍镜（10×）观察------高倍镜（40×）------上抬1cm --------加香柏油到标本上------调节镜头（100×），并使之埋入油中 --------适量调节粗、微调焦螺旋至看清材料--------镜下观察，并绘图；
▪ 实验结束，上升镜筒-------滴加二甲苯----用擦镜纸擦拭镜头--------将显微镜恢复原位，放入镜箱
【实验材料】
▪ 1、主要设备：普通离心机、组织捣碎机、扭力天平、光学显微镜。
▪ 2、小型器材：500m1烧杯2个，250m1量筒1 个，滴管10支，10m1刻度离心管20支，纱布若干，载玻片和盖片各4片。
▪ 3、 0.35mol/L NaCl溶液。 ▪ 4、新鲜菠菜。
【操作方法】
▪ A、游离叶绿体的制备与观察

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告目录：1.实验目的2.实验原理3.实验步骤4.实验结果与分析5.实验结论6.实验心得1.实验目的本实验旨在通过观察细胞的结构和功能，了解细胞的基本特征和生物学意义。

2.实验原理细胞是生物体的基本单位，由细胞膜、细胞质和细胞核组成。

细胞膜起着维持细胞内外环境平衡和物质交换的作用；细胞质内含有各种细胞器，如线粒体、高尔基体等，对细胞的代谢和功能发挥重要作用；细胞核则是细胞的遗传物质DNA的储存和转录的场所。

3.实验步骤步骤1：制备观察细胞的标本将动植物组织样本切片并固定在载玻片上，用甲醛或酒精进行固定。

步骤2：观察细胞结构将载玻片放在显微镜下，视野适当调整，首先用低倍镜观察整个组织结构，再用高倍镜观察细胞的细节。

步骤3：细胞核染色在载玻片上滴加少许乙醇溶液，保持片面湿润，然后在玻片上滴加适量的苏丹红G溶液，使其覆盖整个标本，再用玻片一端旋转均匀。

然后，用甲苯将玻片内溶液洗净，再用约10%苏丹红醇溶液染色5-10分钟，最后用水洗净，挤去水分。

步骤4：观察细胞核结构将载玻片放在显微镜下，用高倍镜观察染色的细胞核。

注意观察核膜、染色质和核仁的形态和位置。

4.实验结果与分析通过实验观察，得出以下结果和分析：-细胞膜：细胞膜是细胞的外层包裹结构，具有选择性通透性，能够控制物质的进出。

观察结果显示细胞膜是一个薄膜状结构，包裹着细胞质和细胞核。

-细胞质：细胞质是细胞核和细胞膜之间的区域，包含各种细胞器。

观察结果显示细胞质呈胶状或颗粒状，其中可以看到线粒体、高尔基体等细胞器。

-细胞核：细胞核是细胞的遗传中心，储存了细胞的遗传物质DNA。

观察结果显示细胞核通常为圆形或椭圆形，含有染色质和核仁。

5.实验结论本实验通过观察细胞的结构和功能，深入了解了细胞的基本特征和生物学意义。

细胞膜起着筛选物质进出细胞的作用，细胞质中的细胞器对细胞的代谢和功能起着重要作用，而细胞核则是细胞的遗传中心。

6.实验心得通过此次实验，我进一步了解了细胞的结构和功能。