江西野生枫香活性成分提取及鞣质含量研究

江西野生枫香活性成分提取及鞣质含量研究

郑　毅　张　青

(江西科技师范学院应用化学系　330013)

摘　要:目的　研究我省野生枫香(Liquidambar F orm osana Hance)树皮、树叶有效成分提取方法对鞣质含量的影响。方法　采用络合滴定法测定提取液中鞣质含量,以分析不

同提取方法的效果。实验结果:枫香树皮、树叶中鞣质含量因提取方法的不同而有明显的

差别,无水乙醇、乙酸乙酯提取液中鞣质含量分别为12.35%、11.35%。有机溶剂提取比水

溶液提取效果更好,枫香树叶中鞣质含量比树皮高。

关键词:野生枫香　鞣质　络合滴定

野生枫香又名枫树,大叶枫,三角枫,系金缕梅科枫香属植物(Liquidambarform osana Hance)。主要分布于我国黄河流域及其以南地带,西至四川、贵州,南至广东,东至台湾等地。据文献资料表明[1]:该属植物共有五种,我国有2种及1变种。枫香树属植物的研究主要集中于枫香树,苏合香和胶皮枫香树三种植物上,分离得到的化学成分大致有萜类、黄酮类、酚酸类、苯丙素类、挥发油和其它。枫香树全株均可入药。树皮、树根、树叶、味辛、微苦、性温、气香,有祛风湿、行气、解毒的功效[2]。对枫香的研究还远远不够,因此有必要对该属植物进行进一步的研究。

本文主要针对省金缕梅科枫香属植物野生枫香树进行化学成分提取,并根据鞣质的性质对提取液中的鞣质含量进行定量测定,以不同的提取方法对鞣质提取的有效性进行对比,在此基础上为下步再选取一种工艺提取液进行药用效果试验,为枫树开发应用提供实验数据。

1　实验原理及方法简介

1.1提取工艺方法一般常用的植物药用成分提取方法有蒸馏法、溶剂萃取法和水煮法三种,在工业生产上常用水蒸气蒸馏法提取。但若用溶剂萃取法(如乙酸乙酯为溶剂)的得油率往往高于水蒸气蒸馏,单萜化合物的得油率提高更为明显,由于溶剂萃取法不使精油组分发生较大变化更符合枝叶中精油组分提取。

1.2鞣质含量测定方法中草药中鞣质的含量测定方法较多,根据鞣质的性质而有皮粉吸附法、重量法、高锰酸钾法、络合滴定法与比色法等,这些方法各有优缺点。本文主要采用锌离子络合滴定法,此法测定鞣质的含量具有较好的选择性。

2　实验材料、仪器及药品

2.1实验材料　枫香树皮、树叶,采于江西南昌市下罗郊区,经鉴定为三角枫,采后水洗于太阳下晒干,置于阴处粉碎成粉末备用。

2.2实验仪器　H L一26型多功能食品粉碎机(上海海菱电器责任有限公司);TG—328B型电光分析天平(上海天平仪器厂):

HH—SH—2电热恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂):2XZ—0.5型旋片式真空泵(浙江黄岩医疗器械厂):RO—M B—20D高纯水机(杭州永洁达膜分离设备厂)

2.3标准溶液试剂　醋酸锌、氨水、铬黑T、乙二胺四乙酸乙钠、氯化铵、乙酸乙酯、无水乙醇(以上试剂均为分析纯)

3　枫香树叶、树皮样品提取液的制备

3.1水煮法　精密称取5.0000g粉末,放入250ml烧杯中,加入60ml去离子水,置于80±2℃的水浴中,加热1小时,并不断搅拌,然后冷却至室温,将水煮液进行抽滤,滤液再次过滤得提取液。

3.2水蒸气蒸馏　精密称取5.0000g粉末放入150ml烧瓶中加入60ml去离子水,置于水蒸气蒸馏提取装置中蒸馏1小时,并定期搅拌, (溶液易生成泡沫,妨碍蒸馏正常进行)。然后冷却至室温。将烧瓶中的溶液进行抽滤,滤液再次过滤得提取液。

3.3乙醇回流法　精密称取5.0000g粉末,放入150ml三颈烧瓶中,加入60ml无水乙醇置于80±2℃的水浴中,回流1小时,并不断搅拌,然后冷却至室温,将回流液进行抽滤,滤液再次过滤得提取液。

3.4乙酸乙酯萃取法　精密称取5.0000g 粉末,放入150ml三颈烧瓶中,加入60ml乙酸乙酯置于80±2℃的水浴中,回流1小时,并不断搅拌,然后冷却至室温,将回流液进行抽滤。然后加入60ml去离子水进行减压蒸馏回收乙酸乙酯,温度控制在50±2℃间,至无蒸馏液流出,然后冷却至室温,抽滤得提取液。

4　样品液的制备及鞣质含量测定

4.1样品液的制备[3]　分别精密吸取10. 00ml.1M的醋酸锌溶液于四个250ml容量瓶中,加入7mi氨水,摇匀至白色沉淀完全溶解。往上述四种提取液中各加去离子水到200ml,在35±2℃的水浴温热5min,定量移入容量瓶中与醋酸锌溶液反应,并置于35±2℃的水浴中反应30min,边反应边振荡,使反应充分进行。然后取出容量瓶冷却至室温,滴加去离子水至250ml,过滤得四份样品液。

4.2鞣质含量的测定[4]　分别取20.00ml 样品液于锥型瓶中,加去离子水至150ml,在滴入12.5ml氨一氯化铵缓冲液(PH=10),振荡,得白色浑浊液变澄清,加入铬黑T指示剂少许,用0.05M的乙二胺四乙酸二钠(ET DA)标准液滴定,溶液由紫红色变成蓝色,既为滴定终点。以下二式计算结果:

鞣质含量=0.1556V

W

×100%

V=10M zn-12.5M E×Q

式中:0.1556:由实验求得的比例常数

M zn:醋酸锌标准液的摩尔分子浓度

Q:乙二胺四乙酸钠标准溶液滴定消耗量(m1)

M E:乙二胺四乙酸钠标准溶液的摩尔分子浓度

V:I M醋酸锌标准溶液络合滴定消耗量

(ml)

W:样品重量(g)

5　实验数据记录

5.1枫香树叶提取物络合滴定数据:见表1

5.2枫香树皮提取物络合滴定数据:见表2

5.3枫香树叶提取液颜色;见表3

6　结果与讨论

6.1由表1枫香树叶提取液中鞣质定量测定可知,枫香叶中含有丰富的鞣质。有机溶剂提取的效果比水溶液提取法的效果更好。其中乙醇提取鞣质含量达到12.35%。

6.2由表2枫香树皮提取液鞣质定量测定可知,枫香树皮中虽含有鞣质,但比树叶中的鞣质含量要低。

6.3由表3可知,提取方法不同,其提取液颜色也不同。有机溶剂提取液颜色更深。这主要是有机溶剂提取效果好,而水溶液提取物因鞣质部分水解使产物颜色变浅,含量减少。

6.4鞣质具有多酚羟基结构,表现出较强的化学和生理活性,如抗氧化、止血、抗病毒、抗衰老等。

6.5由于鞣质不是易挥发性化合物,采用水蒸气蒸馏方法在接受瓶中不能得到鞣质,故本实验只能采用蒸馏瓶中的提取物进行鞣质含量络合滴定。

6.6本实验所测结果对枫香叶提取物化学成分、最佳提取工艺及药用性能提供了科学依据。

表1　枫香树叶提取液络合滴定数据表

提取方法批次Q(ml)V(ml)鞣质含量(%)平均值(%)

水煮法112.10 2.447.59%

212.15 2.417.50%7.56% 312.10 2.447.59%

水蒸气蒸馏112.10 2.447.59%

212.13 2.427.53%7.56% 312.12 2.437.55%

乙醇回流法19.65 3.9712.35%

29.80 3.8812.06%12.35% 39.50 4.0612.64%

乙酸乙酯萃取110.14 3.6311.30%

210.26 3.5911.17%11.35% 310.05 3.7211.58%