脂溶性维生素的定量检测

保健食品中9种脂溶性维生素的测定BJS201717

附件5保健食品中9种脂溶性维生素的测定BJS 2017171范围本方法规定了营养素补充剂类保健食品中维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素含量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本方法适用于营养素补充剂类保健食品中维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素含量的测定。

2原理试样经混合溶液（异丙醇：二氯甲烷：甲醇=10:10:80，v:v:v）提取后，采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

3试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂3.1.1甲醇：质谱级。

3.1.2乙腈：质谱级。

3.1.3异丙醇：色谱纯。

3.1.4丙酮。

3.1.5二氯甲烷。

3.1.6提取溶液（异丙醇：二氯甲烷：甲醇=10:10:80，v:v:v）：取异丙醇50mL、二氯甲烷50mL，用甲醇稀释至500 mL，混匀。

3.1.7 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1 mL用水稀释至1 000 mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。

3.1.8 0.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1 mL用甲醇稀释至1000mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。

3.2标准品维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。

3.3标准溶液配制3.3.1标准储备液（100μg/mL）—41 —3.3.1.1维生素K1标准储备液：称取0.01 g（精确至0.000 1 g）的维生素K1标准品（3.2），加入5mL丙酮（3.1.4）溶解，用甲醇转移并定容于100 mL棕色容量瓶中。

3.3.1.2 β-胡萝卜素标准储备液：称取β-胡萝卜素标准品（3.2）0.01 g（精确至0.000 1 g），用二氯甲烷（3.1.5）溶解，转移并定容至100 mL棕色容量瓶中。

血液中水、脂溶性的检测

血液中脂溶性维生素的检测1、仪器与试剂HP1220高效液相色谱仪、氮吹仪、漩涡振荡器、离心机维生素A、维生素D、维生素E标品；无水乙醇；正己烷；甲醇（色谱级别）2、标准溶液配制1mg/ml维生素标准储备液：3种维生素标品各0.01g于10ml 容量瓶中，甲醇定容。

工作液浓度（ug/ml) 量取的母液体积（ml）定容体积（ml）维生素A 40 2 50维生素D 10 1 100 维生素E 400 4 103、实验方法3.1 色谱条件设置色谱柱C18柱进样体积(ml）20ul泵流动相甲醇97%纯化水3%流速1ml/min 柱温25℃检测波长0-8min 315nm8-12min 265nm12-16min 290nm3.2 测定方法取血清0.2ml置5ml具塞离心管中，加入0.2ml无水乙醇沉淀蛋白质，后加入正己烷 1.0ml，旋涡振荡器振荡2min，8000r/min离心5min，吸取上层正己烷液0.5ml，氮气吹干，0.2ml流动相溶解残渣，旋涡振荡器振荡30s，15000r/min离心2min，取上清液到进样瓶。

4、上机进样测量物质波长设置V A标品315nmVD标品265nmVE标品290nm血清样品可变波长其他色谱条件与上述一致血液中水溶性维生素的检测1、仪器与试剂HP1220高效液相色谱仪、氮吹仪、涡旋振荡器、离心机、ODS C18固相萃取柱（100mg/1ml）维生素标准品：VB1、VB3、VC、叶酸；0.01mol/l HCL溶液；1mol/l KOH溶液; 甲醇；50mmol/l NH4H2PO4溶液（PH6.0）；VC提取溶剂：乙二酸四乙酸二钠0.005g，二硫苏糖醇0.05g，加适量水溶解，加入高氯酸1.42ml，加水定容至50ml。

2、标准溶液配制VB1、VB3、标准储备液（1mg/ml），用0.01mol/l HCL配制；叶酸标准储备液（1mg/ml）,以1滴1mol/lKOH溶解后，在用0.01mol/l HCL定容。

HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素D2及维生素E的含量

HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素D2及维生素E的含量目的建立测定脂溶性维生素注射液中维生素D2、维生素E的高效液相色谱（HPIC）分析方法。

方法应用高效液相色谱法。

维生素D2采用Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）色谱柱：以正已烷：异丙醇（97.5：2.5）为流动相：流速为1ml/min）：检测波长为265nm：柱温室温：紫外测器。

维生素E采用Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）色谱柱：以正已烷-异丙醇（99.5∶0.5）为流动相：流速为1mL/min：检测波长为298nm：柱温室温：紫外检测器。

结果维生素D2和维生素E分别在0.26～2.08?g/mL和0.64～3.20mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

维生素D2和维生素E的平均回收率分别为98.90%、100.2%、RSD分别为1.2%、1.1%。

结论本方法准确、快速、重现性好。

标签：维生素D2；维生素E；高效液相色谱法；含量测定[Abstract ] Objective To develop the HPLC method for determination of vitamin D2，vitamin E content in the Fat-soluble vitamin injection. Methods High performance liquid chromatography（HPLC）was used.Kromasil 100-5sil （250mm×4.6mm）chromatographic column was used to determine vitamin D2，n-hexane：isopropanol（97.5：2.5）was as mobile phase，the flow rate was 1ml/min，wavelength was 265nm，under the condition of room temperature，and UV-detector were used.Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）chromatographic column was used to determine vitamin E：n-hexane：isopropanol（99.5∶0.5）was as mobile phase，the flow rate was 1ml/min，the wavelength was 298nm，under the condition of room temperature，and UV-detector were used. Results There was a good linear relationship between the 0.26-2.08?g/mL range and peak area for vitamin D2，while the 0.64-320?g/mL range for vitamin E.The average recovery rate of vitamin D2 and vitamin E were 98.90% and 100.2%.RSD of vitamin D2 and vitamin E were 1.2% and 1.1%. Conclusion The method is accurate，rapid and reproducible.[Key words] Vitamin D2；Vitamin E；Chromatography（HPLC）；Determination脂溶性維生素注射液为含有维生素A、维生素D2、维生素E、维生素K1和注射用大豆油，卵磷脂等的灭菌乳剂，属维生素类药。

维生素e的含量测定方法

维生素e的含量测定方法维生素E的含量测定方法维生素E是一种重要的脂溶性维生素，对人体的正常生理功能发挥着重要作用。

因此，了解维生素E的含量十分重要。

以下将介绍维生素E含量测定的一般步骤和方法。

1. 原理测定维生素E的含量一般采用紫外-可见分光光度法或高效液相色谱法。

紫外-可见分光光度法利用维生素E在特定波长下的吸光度来测定其含量。

高效液相色谱法则是通过将样品在色谱柱上分离，再利用检测器检测峰面积或峰高来确定维生素E的含量。

2. 实验步骤以下是测定维生素E含量的一般步骤：步骤一：样品的制备首先，将待测样品如食品、保健品等进行充分打碎或细磨，以确保样品中的维生素E能充分释放。

然后，取一定量的样品并溶解或提取维生素E。

步骤二：预处理如果样品中存在其他干扰物质，需要进行预处理。

预处理的方法包括提取、分离、净化等。

例如，可以采用萃取方法将样品中的维生素E提取至有机溶剂中，以去除其他干扰物质。

步骤三：测定方法选择根据实验条件和要求，选择合适的测定方法。

常用的方法有紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法。

这两种方法各有优缺点，需要根据实际情况进行选择。

步骤四：仪器准备和参数设置根据选择的测定方法，准备好相应的仪器设备，如紫外-可见分光光度计或高效液相色谱仪，并进行相关参数的设置。

步骤五：标准曲线的绘制为了准确测定维生素E的含量，需要首先绘制标准曲线。

标准曲线可以通过制备一系列维生素E浓度逐渐升高的标准溶液，并测定其吸光度或峰面积/峰高，然后绘制曲线。

步骤六：测定样品取一定量的样品溶液，按照所选择的测定方法进行测定。

根据标准曲线，通过测定吸光度或峰面积/峰高，计算出样品中维生素E的含量。

步骤七：数据分析根据测定结果，可以计算出样品中维生素E的含量。

同时，还可以进行结果的统计分析，如平均值、标准差等。

步骤八：结果的解释及验证对于测定结果，需要进行合理解释，并与其他数据进行对比，以验证结果的准确性和可靠性。

3. 结论通过上述步骤，可以测定出样品中维生素E的含量。

食品中维生素ade的测定

食品中维生素ade的测定食品中维生素ADE的测定是食品质量检验中的重要一环。

维生素ADE是人体所必需的脂溶性维生素，对于身体的生长和发育、免疫系统的健康、视力的保护等起着重要的作用。

因此，准确测定食品中的维生素ADE含量，对于保障人体健康具有重要意义。

在食品中测定维生素ADE的方法有很多，其中常用的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、荧光光谱法和分光光度法等。

下面将就这几种方法分别进行介绍。

高效液相色谱法是一种常用的测定食品中维生素ADE的方法。

该方法通过色谱柱对维生素ADE进行分离，再利用紫外检测器对各个分离的维生素ADE进行检测。

这种方法具有操作简便、准确度高、重复性好等优点，因此在食品中的应用较为广泛。

气相色谱法也是一种常用的测定食品中维生素ADE的方法。

该方法利用气相色谱仪对食品中的维生素ADE进行分离和检测。

相比于高效液相色谱法，气相色谱法更适用于测定食品中微量的维生素ADE含量，但操作相对复杂一些。

荧光光谱法是利用维生素ADE在特定条件下的荧光特性进行测定的方法。

该方法通常将维生素ADE与荧光物质反应，生成具有特定荧光的产物，然后利用荧光光谱仪对产物进行检测。

荧光光谱法的优点是敏感度高、选择性好，能够快速准确地测定食品中的维生素ADE含量。

分光光度法是一种经典的测定维生素ADE的方法。

该方法通过测量维生素ADE在特定波长下的吸光度来确定其含量。

利用分光光度计进行测量，该方法具有操作简单、成本低廉等特点。

但是相比于其他方法，分光光度法的准确度和重复性稍差一些。

总结来说，测定食品中维生素ADE的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、荧光光谱法和分光光度法等。

这些方法各有优缺点，选择合适的方法取决于特定的实验要求和食品样品的特性。

无论采用哪种方法，准确测定食品中的维生素ADE含量是保障食品安全和健康的重要一环，对于提高食品检验的准确性和科学性具有重要意义。

维生素制剂中的维生素D化学分析方法

维生素制剂中的维生素D化学分析方法维生素D是一种重要的脂溶性维生素，它包括两种形式，即维生素D2和维生素D3、它们在人体中的主要功能是促进钙和磷的吸收和利用，有助于维持骨骼健康。

维生素D通常通过阳光照射皮肤或食物摄入来获得，但在一些情况下，人们可能需要通过维生素D补充剂来满足身体的需求。

因此，对维生素D制剂进行化学分析是至关重要的。

维生素D的化学分析主要包括两个方面：定性分析和定量分析。

定性分析用于鉴定样品中是否存在维生素D，而定量分析则用于确定维生素D的含量。

以下将介绍几种常用的维生素D化学分析方法。

1.高效液相色谱法(HPLC)HPLC是一种广泛应用于维生素D分析的方法。

该方法根据维生素D2和维生素D3的不同保留时间，通过比较待测样品与已知维生素D标准品的保留时间来定量测定维生素D的含量。

2.液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)LC-MS/MS是一种灵敏度极高的维生素D分析方法。

它结合了高效液相色谱和质谱技术，可以同时测定维生素D2和维生素D3的含量，并且不受样品基质的干扰。

3.放射免疫分析法(RIA)RIA是一种利用放射性同位素标记的抗体来测定维生素D的含量的方法。

该方法具有高度的选择性和灵敏度，可以测定较低浓度的维生素D，但需要使用放射性同位素，因此操作相对复杂。

4.高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)HPLC-UV是一种利用紫外光谱检测器来测定维生素D含量的方法。

该方法根据维生素D与紫外光的吸收特性，通过比较待测样品的吸光度与已知维生素D标准品的吸光度来定量测定维生素D的含量。

5.毛细管电泳法(CE)毛细管电泳是一种利用毛细管内部作为分离通道进行分析的方法。

该方法可以用于维生素D的定性和定量分析，具有分离效率高、操作简便等优点。

在进行维生素D制剂的化学分析时，需注意以下几点：1.样品处理：针对不同的分析方法，样品处理方式会有所不同。

例如，HPLC方法可能需要进行前处理步骤，如提取或萃取，而LC-MS/MS方法则可能需要对样品进行液-液萃取或固相萃取。

试验七食物中脂溶性维生素含量分析(高效液相色谱法——

实验七食物中脂溶性维生素含量分析（高效液相色谱法——HPLC）一、实验目的与要求1目的了解高效液相色谱仪的工作原理。

2要求掌握HPLC测定食物中脂溶性维生素含量的方法。

二、实验原理样品中的维生素A及维生素E经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。

用高效液相色谱法 C18反相柱将维生素A和维生素E分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。

最小检出量分别为维生素A： 0.8ng，αE： 91.8ng，γE： 36.6ng，δE： 20.6ng。

三、实验仪器与试剂1仪器（1）实验室常用设备；（2）小离心管： 1.5~3.0ml带盖塑料离心管（与高速离心机配套）；（3）高速离心机；（4）旋转蒸发器；（5）恒温水浴锅；（6）紫外分光光度计；（7）高压液相色谱仪带紫外分光检测器。

2试剂（1）高纯氮气；（2）无水乙醚：不含有过氧化物。

①过氧化物检查方法：用5ml乙醚加1ml 10%碘化钾溶液，振摇 1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。

该醚需处理后使用。

②去除过氧化物的方法：熏蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许，弃去10%蒸馏水和10%残留液。

(3) 无水乙醇：不得含有醛类物质。

①检查方法：取2ml银氨溶液于试管中，加入少量乙醛，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。

②脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中，取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。

将两者倾入1L 乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50ml。

当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。

（4）无水硫酸钠。

（5）甲醇：重蒸后使用。

（6）重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。

（7） 10%抗坏血酸溶液（100g/L）：临用前配制。

（8） 1∶1氢氧化钾溶液。

（9） 10%氢氧化钠溶液（100g/L）。

（10） 5%硝酸银溶液（50g/L）。

HPLC测定注射用脂溶性维生素中4种成分的含量

·药物分析与检验·HPLC测定注射用脂溶性维生素中4种成分的含量张慧，裴志东*，初正云，翟延君(辽宁中医药大学药学院，辽宁大连 116600)摘要：目的建立高效液相色谱法同时测定注射用脂溶性维生素中维生素A棕榈酸酯、维生素D2、E、K1含量的方法。

方法采用Intersil (ODS-2) C18 (150 mm×4.6 mm，5 µm)色谱柱，以甲醇-乙腈-乙醇-水(20∶55∶25∶6)为流动相，流速1.5 mL·min-1，检测波长265 nm。

结果维生素A棕榈酸酯、维生素D2、E、K1进样量分别在1.19～2.78 μg、6.14～14.33 ng、10.92～25.48 μg、0.19～0.44 μg内呈良好的线性关系；平均回收率分别为99.70%(RSD=0.48%)、100.13%(RSD=0.88%)、99.74%(RSD=0.69%)、99.97%( RSD=0.59%)。

结论方法操作简便、精确、结果可靠，可控制注射用脂溶性维生素的质量。

关键词：高效液相色谱法；维生素A棕榈酸酯；维生素D2；维生素E；维生素K1中图分类号：R917.793 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2009)06-0480-03Determination of Four Compounds in Fat-soluble Vitamin for Injection by HPLCZHANG Hui，PEI Zhidong*，CHU Zhengyun，ZHAI Yanjun(Department of drug，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600, China)ABSTRACT：OBJECTIVE To establish an HPLC method for simultaneous determination of retinol palmitate，vitamin D2，vitamin E and vitamin K1 in fat-soluble vitamin for injection. METHODS An Intersil (ODS-2) C18 (150 mm×4.6 mm，5 µm) was used as separation column. Methanol- acetonitrile- ethanol-water (1758255) was used as the mobile phase. Flo∶∶∶w rate was 1.5 mL·min -1. The detection wavelength was set at 265 nm. RESULTS The linear ranges for retinol palmitate，vitamin D2, vitamin E and vitamin K1 were 1.19-2.78 μg，6.14-14.33 ng，10.92-25.48 μg，0.19-0.44 μg, and the average recoveries were 99.70% (RSD=0.48%), 100.13% (RSD=0.88%)，99.74% (RSD=0.69%), 99.97% (RSD=0.59%), respectively. CONCLUSION The method is simple，accurate，reliable. It can be used for the quality control of fat-soluble vitamin for injection.KEY WORDS：HPLC；retinol palmitate；vitamin D2；vitamin E；vitamin K1注射用脂溶性维生素是由维生素A棕榈酸酯、维生素D2、E、K1等多种维生素成分制成的无菌冻干粉针，临床上用于各种内、外科手术、严重传染性疾病、昏迷等症的肠外维生素补充剂，是各种外科手术后必用的药物。

脂溶性维生素检测

迪信泰检测平台
脂溶性维生素检测
脂溶性维生素（Fat-soluble vitamins）是不溶于水而溶于脂肪及非极性有机溶剂（如苯、乙醚及氯仿等）的一类维生素，包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等。

这类维生素一般只含有碳、氢、氧三种元素，在食物中多与脂质共存，其在机体内的吸收通常与肠道中的脂质密切相关，可随脂质吸收进入人体并在体内储存（主要在肝脏）。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)、生化法，可高效、精准的检测脂溶性维生素的含量变化。

此外，我们还提供其他维生素检测服务以及维生素检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。

检测项目。

检测指标。

检测方法。

维生素A（Vitamin A）。

HPLC/LC-MS。

维生素D（Vitamin D）。

HPLC/LC-MS。

维生素E（Vitamin E）。

HPLC/LC-MS。

维生素K（Vitamin K）。

HPLC/LC-MS。

其他维生素。

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维生素e的含量测定方法 -回复

维生素e的含量测定方法-回复维生素E（Vitamin E）是一种重要的脂溶性维生素，对人体健康有许多益处。

它具有较强的抗氧化性能，能够保护细胞免受自由基的损害，从而减缓衰老的过程，维护血管、肌肤以及眼睛的健康。

要正确测定维生素E的含量，有许多可行的方法。

在此，我们将介绍一种常用的方法高效液相色谱法（HPLC），以及步骤和要点。

步骤一: 样品准备首先，我们需要准备样品。

这可以是食物中提取的维生素E，或者是维生素E补充剂。

将样品粉碎，以获得更好的分散性。

根据样品资料，选择合适的样品量，常规情况下为0.2~0.5克。

然后，将样品置于适当的容器中，并密封以防止维生素E的挥发或氧化。

步骤二: 提取过程接下来，我们需要进行维生素E的提取。

这是一种溶剂萃取的方法。

加入适量的萃取溶剂，常见的有乙醇、醚类、氯仿等。

注意，选择合适的萃取溶剂不仅要考虑溶解度，还要考虑其在分析过程中对仪器设备的影响。

样品和溶剂的比例一般为1:10。

然后，利用涡旋振荡器或超声波清洗机将样品与溶剂充分混合，进行提取过程。

提取时间一般为15~30分钟，提取温度可以控制在10~30摄氏度之间。

步骤三: 净化过程提取得到的提取液中可能还包含一些杂质，需要进行净化处理。

通常，我们会利用固相萃取柱（SPE）来进行净化。

选择合适的SPE柱根据维生素E的物理性质和样品特点。

将样品溶液转移至SPE柱中，注意控制流速以保证良好的净化效果。

一般来说，首先使用无极性固相材料进行预洗，然后再使用高极性固相材料进行后处理。

此过程可有效去除大部分杂质。

步骤四: 色谱分析在样品处理完成后，我们就可以进行色谱分析了。

将经过净化的样品溶液注入色谱柱中。

常见的色谱柱是正相色谱柱，填充物可以是矽胶或其他材料。

在色谱分析中，通常会选择适当的流动相，如正己烷/乙酸乙酯/异丙醇。

根据维生素E的特征峰，设置合适的检测波长，通常为280纳米。

然后，利用高效液相色谱仪（HPLC）进行分离和定性分析。

维生素D的测定——脂溶性维生素的测定

维生素D的测定——脂溶性维生素的测定为一组存在于动植物组织中的类固醇的衍生物，因其有抗佝偻病作用，也称之为抗佝偻病维生素。

目前己知的维生素D起码有10种，但最重要的是维生素D2和维生素D3。

维生素D2又名麦角钙化醇，分子式为C28H44O，相对分子质量为396.66；维生素D3又名胆钙化醇，分子式为C27H44O，相对分子质量为384.65。

食品中维生素D的含量很少，且主要存在于动物性食品中。

维生素D的含量普通用国际单位（IU）表示，1国际单位的维生素D相当于0.025μg的维生素D。

几种富含维生素D的食品中维生素D的含量（IU/100g）如下：奶油50，蛋黄150一400，鱼40一150，肝10一70，鱼肝油800一30000。

维生素D的测定办法有、紫外分光光度法、气相色谱法、液相色谱法及薄层层析法等。

其中比色法敏捷度较高，但操作非常复杂、费时。

虽然操作容易，精密度也高，但敏捷度低，不能用于含微量维生素D的样品。

液相色谱法的敏捷度比比色法高20倍以上，且操作简便，精度高，分析速度快，是目前分析维生素D的最好办法。

这里主要介绍三氯化锑比色法。

在三氯甲烷溶液中，维生素D与三氯化锑结合生成一种橙黄色化合物，呈色强度与维生素D的含量成正比。

皂化与提取同维生素A的测定。

假如样品中有维生素A共存，可用以下办法举行分别纯化。

(1)分别柱的制备：取一支具有活塞和砂蕊板的玻璃层析柱。

第一层：加入无水硫酸钠，铺平整。

其次层：将celite540置于碘值瓶中，加入石油醚，振摇，再加入聚乙二醇600，强烈振摇，使其黏合匀称，然后倒入层析柱内。

第三层：加中性氧化铝。

第四层：加入无水硫酸钠。

轻轻地转动层析柱，使其次层的高度保持在12cm左右。

(2）纯化：先用石油醚淋洗分别柱，然后将样品提取液倒入柱内，再用石油醚继续淋洗。

弃去最初收集的滤液，再用容量瓶收集淋洗液至刻度。

将淋洗液移入分液漏斗中，加水洗涤3次（去除残留的聚乙二醇，以免与三氯化锑作用形成混浊物，影响比色）。

食品中维生素ade的测定

食品中维生素ade的测定食品中维生素ADE的测定是食品检测和营养分析中的重要一环。

维生素ADE是脂溶性维生素，对人体的健康具有重要意义。

本文将介绍维生素ADE的测定方法及其在食品安全检测中的应用。

维生素ADE是人体必需的脂溶性维生素，具有重要的生物学功能。

维生素A对眼睛、皮肤和黏膜的健康有重要作用；维生素D参与骨骼生长和钙磷代谢；维生素E是一种强效的抗氧化剂；维生素K参与血液凝结。

由于人体无法自行合成这些维生素，必须通过食物摄入。

维生素ADE的测定一般使用高效液相色谱法（HPLC）或气相色谱法（GC）进行。

以维生素A为例，HPLC测定方法是目前较为常用的方法之一。

该方法的步骤如下：1.样品准备：将待测食品样品经适当方法提取纯化，使之含有足够浓度的维生素A。

2.色谱条件设置：选择适当的色谱柱和流动相，以实现维生素A的有效分离和定量。

典型的色谱条件包括C18反相色谱柱和甲醇-乙腈为流动相。

3.色谱分离：样品注入到色谱柱中，利用流动相的梯度洗脱效应，将维生素A与其他组分分离。

4.检测方法选择：常用的检测方法有紫外检测法和荧光检测法。

紫外检测法通过测量维生素A在特定波长下的吸光度来定量，而荧光检测法则是通过维生素A在特定波长下的荧光来定量。

5.定量分析：根据标准品的峰面积和样品峰面积的对比，利用定量公式计算出样品中维生素A的含量。

对于维生素D和维生素E的测定，方法类似，只是在色谱分隔条件和检测方法的选择上有所差异。

维生素ADE的测定在食品安全检测中具有重要应用。

首先，维生素ADE的含量可以反映食品的营养价值。

食品中维生素ADE的含量高低与其食用价值和保健功效有直接关系。

通过测定食品中维生素ADE的含量，可以对其营养品质进行评估，为食品提供有关营养价值的指导。

其次，维生素ADE的测定可以用于食品安全检测。

食品中的维生素ADE含量不仅直接影响其营养价值，也与食品中的添加剂、防腐剂以及其他污染物有关。

对食品中维生素ADE的含量进行测定可以检测食品中的添加剂是否合规，是否超过允许的限量。

食品中脂溶性维生素分析的新方法

食品中脂溶性维生素分析的新方法脂溶性维生素对于人体的健康至关重要，它们包括维生素A、维生素D、维生素E和维生素K。

这些维生素在食物中的含量不仅与人类的饮食结构有关，还与很多其他因素有关。

因此，精确测量食品中脂溶性维生素的含量对于科学合理的饮食规划和营养评估具有重要意义。

但是，传统的脂溶性维生素分析方法存在一些局限，因此科学家们一直在寻求新的分析方法来提高准确性和效率。

最近，一种新的食品中脂溶性维生素分析方法引起了科学界的关注。

这种方法基于高效液相色谱（HPLC）技术，通过测量不同脂溶性维生素的紫外吸收特性。

与传统的色谱分析方法相比，这种方法具有很多优势。

首先，它在分析过程中不需要对样品进行前处理，这大大减少了实验的复杂性和时间成本。

其次，这种方法能够同时测量多种脂溶性维生素，提高了分析效率。

最重要的是，这种方法具有较高的准确性和灵敏度，可以测量出微量的脂溶性维生素，满足了科学家对分析方法的要求。

此外，这种新方法还可以与质谱联用，提高了分析结果的准确性。

通过连接质谱仪，科学家们可以在食品中准确测量每种脂溶性维生素的含量，并在质谱图样上获得更加详细的信息，如其结构和分子量。

这种联用方法不仅可应用于食品质量监测和营养评估，还在食品加工和质量控制中起到了关键作用。

例如，在乳制品加工中，可以用该方法精确测量维生素A和维生素D的含量，确保产品符合标准。

然而，这种新方法也存在一些挑战和限制。

首先，由于分析过程中涉及到复杂的设备和技术，设备的维护和维修成本较高。

其次，这种方法对仪器操作者的技术要求较高，需要经过专门的培训和实践才能掌握。

另外，样品的预处理和前处理仍然是该方法中一个关键的环节，需要进一步改进和优化。

为了解决这些问题，科学家们正在积极开展研究，希望能够开发出更简便、高效和准确的食品中脂溶性维生素分析方法。

目前，已经有一些新的技术和方法被提出。

例如，近红外光谱法和拉曼光谱法可以非破坏性地测量食品中维生素的含量，但它们的准确性和灵敏度仍然需要进一步验证。

维生素d的检测方法

维生素d的检测方法维生素D是一种重要的脂溶性维生素，对人体生长发育、钙磷代谢和免疫功能具有重要作用。

维生素D的检测方法一直是人们关注的热点问题。

目前常用的维生素D检测方法主要包括化学方法、免疫学方法以及分子生物学方法等。

化学方法是最传统的维生素D检测方法之一。

它基于维生素D的化学性质进行测定，常见的化学方法有高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。

这些方法需要对样品进行提取和纯化处理，然后通过色谱技术进行分离和定量分析。

化学方法具有准确度高、可靠性好的优点，但它们需要较为复杂的仪器设备和繁琐的样品处理步骤，且需要专业的技术人员进行操作。

免疫学方法是近年来发展起来的一种维生素D检测方法。

这种方法基于抗体与抗原结合的特异性反应来检测维生素D水平，常用的方法有放射免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）和化学发光法。

免疫学方法操作简便，结果快速，准确性和灵敏度较高，适用于大规模样品检测。

但免疫学方法也存在一定的局限性，例如可能受到交叉反应干扰，需要使用抗体等试剂，成本较高。

分子生物学方法在维生素D检测中发挥着越来越重要的作用。

PCR和实时荧光定量PCR是最常用的分子生物学方法。

这些方法通过检测与维生素D受体基因的关联突变位点，或者检测维生素D代谢相关基因的表达水平来间接评估体内维生素D的水平。

分子生物学方法具有快速、灵敏度高、样品体积要求低等优点，但需要复杂的实验操作和专业的技术支持。

除了以上主要的方法外，还有一些其他的维生素D检测方法，如质谱法、电化学法等。

这些方法在特定的实验条件下可以进行维生素D的测定，但一般更多用于科学研究领域。

需要注意的是，不论使用哪种检测方法，都需要注意样本的选择和处理。

维生素D血清水平的变化受到多种因素的影响，如日照时间、饮食摄入、年龄、季节、肥胖程度等。

因此，在进行维生素D的检测时，需要选择适当的样本类型（如血液、尿液或唾液）和采样时间，并尽量控制可能的干扰因素。

脂溶性维生素的测定

脂溶性维生素的测定一、维生素A目前维生素A都是合成的，来源：从动物肝脏中得到；从维生素前体而得到维生素A的测定常用的方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光分析法、液相色谱法。

对于三氯化锑比色法适用于样品中含V A高的样品，方法简便、快速、结果准确，但是对维生素A含量低的样品，如每克样品中含5～10μg维生素A时，这时样品由于受其脂溶性物质的干扰，不应用比色法测定。

对于紫外分光光度法不必加显色剂显色，可直接测定维生素A的含量，对样品中含V A低的也可以测出可信结果，操作简便、快速。

1、维生素A的性质⑴因有许多不饱和链，故见光易分解；⑵在缺氧情况下，对热较稳定，对光特别敏感。

如测强化奶粉时，速度要快，一般要求测定时间长短，因为时间长，见光时间长，见光分解，故测出的比出厂的含量要少；⑶对碱稳定；2、测定步骤⑴样品用有机溶剂萃取脂类样品可以根据脂肪的测定处理脂肪，即索氏抽提法，采用乙醚作提取剂，也可用热苯回流方法提取脂类。

如果样品中含蛋白质和淀粉多的情况下可采用乙醚提取法。

⑵脂类的皂化脂类有维生素和脂肪这两部分通过皂化把它们分开，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。

皂化条件：C2H3OH︰脂类=8︰1；KOH量=脂量×皂化价×；皂化温度与时间：70℃、30分钟在皂化时可以加入抗氧剂连苯二酚和对苯二酚，防止氧化。

⑶提取：不皂化物和皂化物经水、苯、乙醚萃取可得到不皂化物。

⑷柱层析分离干扰物质采用柱层析分离干扰物质，如果柱层析把β-胡萝卜素也洗脱下来，那么这时维生素A与β-胡萝卜素就是一个混合物，还要将它们分离开。

如果样品中只有维生素A而不含β-胡萝卜素时，这时可直接定容。

维生素A与β-胡萝卜素分离：吸附剂：8分中性Al2O3和2分碱性Al2O3混合，装柱分离方法：a.用2%丙酮石油醚洗β-胡萝卜素；b.用乙醚洗V A。

3、测定方法⑴SbCl3比色法维生素A／CHCl3＋SbCl3／CHCl3→形成兰色物质→在620nm有最大吸光峰这种兰色物质不稳定，很快褪色或变成其它物质，所以在分析时最好在暗室中进行，并且做标准曲线。

脂溶性维生素的测定

脂溶性维生素的测定一、维生素A目前维生素A都是合成的，来源：从动物肝脏中得到；从维生素前体而得到维生素A的测定常用的方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光分析法、液相色谱法。

对于三氯化锑比色法适用于样品中含V A高的样品，方法简便、快速、结果准确，但是对维生素A含量低的样品，如每克样品中含5～10μg维生素A时，这时样品由于受其脂溶性物质的干扰，不应用比色法测定。

对于紫外分光光度法不必加显色剂显色，可直接测定维生素A的含量，对样品中含V A低的也可以测出可信结果，操作简便、快速。

1、维生素A的性质⑴因有许多不饱和链，故见光易分解；⑵在缺氧情况下，对热较稳定，对光特别敏感。

如测强化奶粉时，速度要快，一般要求测定时间长短，因为时间长，见光时间长，见光分解，故测出的比出厂的含量要少；⑶对碱稳定；2、测定步骤⑴样品用有机溶剂萃取脂类样品可以根据脂肪的测定处理脂肪，即索氏抽提法，采用乙醚作提取剂，也可用热苯回流方法提取脂类。

如果样品中含蛋白质和淀粉多的情况下可采用乙醚提取法。

⑵脂类的皂化脂类有维生素和脂肪这两部分通过皂化把它们分开，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。

皂化条件：C2H3OH︰脂类=8︰1；KOH量=脂量×皂化价×；皂化温度与时间：70℃、30分钟在皂化时可以加入抗氧剂连苯二酚和对苯二酚，防止氧化。

⑶提取：不皂化物和皂化物经水、苯、乙醚萃取可得到不皂化物。

⑷柱层析分离干扰物质采用柱层析分离干扰物质，如果柱层析把β-胡萝卜素也洗脱下来，那么这时维生素A与β-胡萝卜素就是一个混合物，还要将它们分离开。

如果样品中只有维生素A而不含β-胡萝卜素时，这时可直接定容。

维生素A与β-胡萝卜素分离：吸附剂：8分中性Al2O3和2分碱性Al2O3混合，装柱分离方法：a.用2%丙酮石油醚洗β-胡萝卜素；b.用乙醚洗V A。

3、测定方法⑴SbCl3比色法维生素A／CHCl3＋SbCl3／CHCl3→形成兰色物质→在620nm有最大吸光峰这种兰色物质不稳定，很快褪色或变成其它物质，所以在分析时最好在暗室中进行，并且做标准曲线。

标准应用方法-脂溶性维生素的检测方法（20130321）

标准应用方法-脂溶性维生素的检测方法（20130321）饲料添加剂中四种脂溶性维生素的检测1.摘要应用HALO柱，建立一种用反相高效液相色谱测定饲料添加剂中4种脂溶性维生素的分析方法。

方法采用HALO C18色谱柱（4.6×50mm，2.7 μm），以乙腈－水为流动相进行梯度洗脱，流速2 mL/min，检测波长采用波长时间程序，分别在251nm和280nm 下检测，4种水溶性维生素7 min内完成分离检测。

维生素A乙酸酯、维生素K3线性范围0.8-80.0μ/mL，维生素D3、维生素E线性范围2.0-200.0μ/mL，测得维生素的检测限介于4×10-9g/mL~4×10-8g/mL之间(S/N>2)。

样品回收率为89%-100%这一方法操作简便快速、准确可靠，适用于饲料中脂溶性维生素的测定。

2.关键词反相高效液相色谱；脂溶性维生素；HALO柱。

3.范围本方法适用于饲料中脂溶性维生素的检测。

本方法适用于高效液相色谱法分析脂溶性维生素。

本方法可测定4种维生素，包括：维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E、维生素K3。

本方法测定各维生素最低检测限不高于4×10-8g /mL。

4.规范性引用文件GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。

5.定义5.1维生素维生素又名维他命，通俗来讲，即维持生命的物质，是维持生物体生命活动必须的一类有机物质，也是保持生物体健康的重要活性物质。

维生素在体内的含量很少，但不可或缺。

各种维生素的化学结构以及性质不同。

维生素是个庞大的家族，目前所知的维生素就有几十种，大致可分为脂溶性和水溶性两大类。

6.原理样品经提取后，用反相高效液相色谱进行色谱分析，采用外标法定量。

7.试剂与材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

7.1 乙腈：色谱纯7.2 超纯水：蒸馏水以0.22 um水系滤膜过滤即得。

7.3 标准品：维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E、维生素K3，纯度均大于等于97%。