小吞噬实验
小吞噬实验
将玻璃片放湿盒内，置37℃孵 箱30~40min。
作用完毕，取1滴制成薄片，自然干燥。
【结果观察】
结果：胞浆呈蓝色或淡红色，细菌呈深蓝色或紫 色，细 胞呈褐色，细胞核呈紫红色。
【注意事项 】
1.个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能 力亦不同。 2.涂血片时不宜太厚，否则不宜观察。
小吞噬实验
（体外法）
主讲： Q Q：
【实验目的 】 吞噬细胞吞噬功能的测定 【实验原理 】血液中的中性粒细胞即小吞噬
细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤，能 吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物 是机体固有免疫的重要组成部分。
【临床意义】 在某些情况下，小吞噬细胞也
能参与某些超敏反应和自身免疫疾病的组织损伤 和炎症过程。因此，测定小吞噬细胞功能可在一 定程度上反映机体的免疫状态，也可作为判断疗 效的一种指标。 枸橼酸钠或肝素（25U/ml）、毛细吸管、凹玻片、 载玻片、牙签、甲醇 瑞氏-吉姆萨染料、pH6.4PB、 酒精棉球、采血针等。
【材料 】表皮葡萄糖球菌液（9亿/ml）、3.8%
【实验流程】
取凹玻片一张，在凹孔中加一滴枸橼酸钠或肝素
酒精棉球消毒手指后，用采 血针从消毒部位取2大滴血 （约）， 然后用牙签轻轻搅匀 置瑞氏液1min， 置pH6.4PB中3min， 置吉姆萨染液5~10min， 蒸馏水洗， 待干， 镜检
最新2小吞噬实验
2. 录相《免疫反击战》
实验材料
(1)显微镜、香柏油、小试管、EP管、载玻片、酒精 棉球、吸管、水浴箱等。
(2)肝素抗凝试管、瑞氏染液、双蒸水。
(3)菌液制备：白色葡萄球菌18～24小时内汤培养物 ，经Mc Farland比浊法调整浓度至6～9×109/mL， 加热100℃ 15分钟杀死细菌，置4℃保存备用。
实验方法
(1)仔细消毒后，每个班取5ml静脉血于肝素抗凝管内（轻轻摇匀）。
(2)每个组(2~3人)取4滴抗凝血于EP管内，再加入2滴备好的白色 葡萄球菌菌液，充分混匀后，置37℃水浴20min，中途混匀1次。 (3)取出EP管，用吸管吹打混匀后，取1滴“全血-白色葡萄球菌混 合液”置于洁净载玻片上，用另一载玻片推片，制成血涂片。
• 油镜使用的原理
1. 香柏油的折射率与玻璃接 近，提高了视野的照明度。
2 . 提高了显微镜的分辨率
显微镜油镜的使用方法
1.用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 2.调节光亮度 3.低倍镜观察：粗调、细调 4.依次再进行中倍、高倍观察 5.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标
本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看 清物象为止。 6.换片：另换新片，必须从第三条开始操作。 7.用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的 油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用 擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。
(3)掌握好细菌与中性粒细胞的作用时间。
中性粒细胞对细菌的吞噬是一个非常迅速的过程，吞噬5min 时吞噬率达45%，10min时接近80%，20min 即达平台。
(4)取“细菌－全血”涂片时，要混匀后再取；制作血涂片要 求推出尾部，过厚或过薄，均不利观察。
小吞噬实验报告
小吞噬实验报告篇一：中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）实验目的1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。
实验材料实验方法片。
瑞氏染色法：取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。
然后加等量蒸馏水，轻轻晃动混匀，继续染5分钟，水洗，用吸水纸吸干后镜检。
结果观察油镜检查：寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而粒细胞的细胞浆则为淡红色。
中性粒细胞吞噬试验计数：1.吞噬百分率：观察100个中性粒细胞，计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数，计算出吞噬细胞百分率。
2.吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计算其中被吞噬的细菌总篇二：吞噬细胞吞噬功能检测实验-----吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测（Assay of the Phagocytic Function of Phagocyte）实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。
实验原理吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。
四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。
通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
主要试剂1. PBS 缓冲液2. 3％硫代乙醇酸钠3. 1％羊红细胞悬液4. 瑞氏染液5. 甲醇主要设备1. 解剖器材2. 注射器3. 尖吸管4. 橡皮吸头5. 小试管6. 载玻片实验材料ICR 小鼠实验步骤1. 实验准备：用无菌注射器吸取3％硫代乙醇酸钠3ml，注射于小鼠腹腔内。
2. 四日后，注射1％羊红细胞悬液1ml 于小鼠腹腔内。
中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)
中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）
实验目的
1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。
实验原理
血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。
实验材料
1.金黄色葡萄球菌悬液。
2.瑞氏染液、双蒸水
3.试管、玻片、采血针、酒精棉球、吸管、滴管、显微镜、香柏油
实验方法
1.取小鼠一只，给腹腔注射金黄色葡萄球菌悬液0.6ml,10~15min
2.取小鼠腹腔液。
3. 置37℃水浴箱水浴15分钟，中途混匀一次。
4 取出小试管，用吸管将试管中血液打匀后取血半滴于载玻片上，用另一载玻片推成薄血片。
5.待血片自干后，用瑞氏染液染色。
瑞氏染色法：取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。
然后加等量蒸馏水，
轻轻晃动混匀，继续染5分钟，水洗，用吸水纸吸干后镜检。
结果观察
油镜检查：寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而粒细胞的细胞浆则为淡红色。
中性粒细胞吞噬试验
计数：1.吞噬百分率：观察100个中性粒细胞，计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数，计算出吞噬细胞百分率。
2.吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计算其中被吞噬的细菌总数，
平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。
医学免疫学实验“小吞噬”.pptx
培养葡萄球菌
医学免疫学实验
烧灼接种环
取菌种
37℃，培养18～24h
接种
接种前 接种后
8
制备6%熟淀粉溶液
医学免疫学实验
称取6g淀粉
将淀粉倒入烧杯
量取10ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱml蒸馏水
将蒸馏水倒入淀粉中
搅拌均匀
9
加热煮熟，晾至室温
医学免疫学实验
实验前4小时
医学免疫学实验
建立无菌炎症小鼠模型
将放凉的熟淀粉 吸入注射器
腹水
血性腹水
15
小鼠腹腔液印片制备
医学免疫学实验
做标记
印片
逐一印片
自然晾干
甲醇固定1min
美兰染色0.5min
细水冲片
吸去附水16
镜下观察吞噬现象
医学免疫学实验
正常小鼠印片（10*10）
中性粒细胞 渗出RBC
无有菌炎症小鼠印片（10*100）
细菌
无菌炎症小鼠印片（10*10）
无有菌炎症小鼠印片（10*100）
思考题
医学免疫学实验
小吞噬细胞为什么能游出血管发挥吞噬作用？ 实验中哪些因素会影响吞噬现象的观察？ 炎症发生前后小鼠腹腔大体形态有何变化？
医学免疫学实验
谢谢！
主要试剂 甲醇
美蓝染液 葡萄球菌菌液 6%熟淀粉等
器材 显微镜、培养箱、 电炉、注射器、 手术剪、镊子、
载玻片等
5
实验内容
医学免疫学实验
实验前一天
培养葡萄球菌 制备6%熟淀粉溶液
实验前4小时
建立无菌炎症小鼠模型
实验当天
建立有菌炎症小鼠模型 解剖小鼠 制备印片
观察腹腔脏器 观察吞噬现象
中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)
中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）
实验目的
1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。
实验原理
血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。
实验材料
1.金黄色葡萄球菌悬液。
2.瑞氏染液、双蒸水
3.试管、玻片、采血针、酒精棉球、吸管、滴管、显微镜、香柏油
实验方法
1.取小鼠一只，给腹腔注射金黄色葡萄球菌悬液0.6ml,10~15min
2.取小鼠腹腔液。
3. 置37℃水浴箱水浴15分钟，中途混匀一次。
4 取出小试管，用吸管将试管中血液打匀后取血半滴于载玻片上，用另一载玻片推成薄血片。
5.待血片自干后，用瑞氏染液染色。
瑞氏染色法：取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。
然后加等量蒸馏水，
轻轻晃动混匀，继续染5分钟，水洗，用吸水纸吸干后镜检。
结果观察
油镜检查：寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而粒细胞的细胞浆则为淡红色。
中性粒细胞吞噬试验
计数：1.吞噬百分率：观察100个中性粒细胞，计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数，计算出吞噬细胞百分率。
2.吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计算其中被吞噬的细菌总数，
平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。
小吞噬实验_实验报告
1. 熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
2. 观察中性粒细胞在小吞噬实验中的吞噬现象。
3. 分析实验结果，了解中性粒细胞吞噬功能的变化。
二、实验原理中性粒细胞（又称小吞噬细胞）是血液中的主要吞噬细胞，具有吞噬和消化细菌、病毒、细胞碎片等异物的作用。
小吞噬实验通过观察中性粒细胞吞噬异物的过程，了解其吞噬功能的强弱。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜血液、生理盐水、2%中性红溶液、2%亚甲蓝溶液、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2. 实验仪器：离心机、移液器、恒温箱、显微镜等。
四、实验步骤1. 取新鲜血液1ml，加入等量生理盐水，混匀后离心，取上清液作为实验用血液。
2. 将2%中性红溶液和2%亚甲蓝溶液按1:1的比例混合，作为吞噬剂。
3. 取2ml混合液加入实验用血液中，混匀后置于37℃恒温箱中培养30分钟。
4. 取1滴混合液滴于载玻片上，盖上盖玻片。
5. 在显微镜下观察中性粒细胞的吞噬现象，记录吞噬百分率和吞噬指数。
五、实验结果与分析1. 实验结果实验结果显示，中性粒细胞在小吞噬实验中能够有效吞噬中性红和亚甲蓝颗粒，吞噬百分率和吞噬指数分别为80%和1.5。
2. 结果分析实验结果表明，中性粒细胞具有较强的吞噬功能。
吞噬百分率和吞噬指数的升高，说明中性粒细胞在小吞噬实验中能够有效地吞噬吞噬剂，具有一定的免疫防御能力。
通过小吞噬实验，我们了解到中性粒细胞在小吞噬实验中具有较强的吞噬功能，能够有效吞噬中性红和亚甲蓝颗粒。
这一实验结果有助于我们更好地了解中性粒细胞在人体免疫系统中的作用，为临床诊断和治疗提供理论依据。
七、实验反思与体会1. 实验过程中，需要注意无菌操作，防止污染。
2. 实验结果受多种因素影响，如实验材料、实验条件等，需要严格控制实验条件，提高实验结果的可靠性。
3. 通过本次实验，加深了对中性粒细胞吞噬功能原理的理解，提高了实验操作技能。
八、实验总结小吞噬实验是一种常用的细胞生物学实验，通过观察中性粒细胞在小吞噬实验中的吞噬现象，了解其吞噬功能的强弱。
小吞噬实验报告讨论
一、实验背景中性粒细胞是人体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬、杀菌和清除病原体的功能。
中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）是评估中性粒细胞功能的重要方法之一。
本次实验旨在通过小吞噬试验，观察中性粒细胞对细菌的吞噬和杀伤能力，并探讨影响中性粒细胞吞噬功能的相关因素。
二、实验目的1. 了解中性粒细胞吞噬功能试验的原理和操作方法。
2. 评估中性粒细胞对细菌的吞噬和杀伤能力。
3. 探讨影响中性粒细胞吞噬功能的相关因素。
三、实验结果1. 中性粒细胞对细菌的吞噬和杀伤能力较强，在一定时间内，中性粒细胞吞噬细菌的数量和杀伤率均较高。
2. 随着细菌浓度的增加，中性粒细胞吞噬细菌的数量逐渐增加，但杀伤率逐渐降低。
3. 不同浓度的中性粒细胞吞噬细菌的能力存在差异，高浓度中性粒细胞吞噬细菌的能力较强。
4. 中性粒细胞吞噬功能受到温度、pH值、补体等因素的影响。
四、讨论1. 中性粒细胞吞噬功能的重要性中性粒细胞是人体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬、杀菌和清除病原体的功能。
中性粒细胞吞噬功能试验是评估中性粒细胞功能的重要方法之一。
本次实验结果表明，中性粒细胞对细菌的吞噬和杀伤能力较强，说明中性粒细胞在抵御细菌感染方面具有重要作用。
2. 影响中性粒细胞吞噬功能的相关因素（1）细菌浓度：随着细菌浓度的增加，中性粒细胞吞噬细菌的数量逐渐增加，但杀伤率逐渐降低。
这可能是由于细菌浓度过高，导致中性粒细胞吞噬功能饱和，无法有效杀伤细菌。
（2）中性粒细胞浓度：不同浓度的中性粒细胞吞噬细菌的能力存在差异，高浓度中性粒细胞吞噬细菌的能力较强。
这可能是因为高浓度中性粒细胞具有更高的吞噬和杀伤能力。
（3）温度：中性粒细胞吞噬功能受到温度的影响。
过高或过低的温度都会影响中性粒细胞的吞噬和杀伤能力。
实验结果表明，在适宜的温度下，中性粒细胞的吞噬和杀伤能力最强。
（4）pH值：中性粒细胞吞噬功能受到pH值的影响。
pH值过高或过低都会影响中性粒细胞的吞噬和杀伤能力。
小吞噬实验报告
小吞噬实验报告实验二一巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法：实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。
高倍镜下进行观察，计数。
【结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。
【方法】制板：将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml打孔：待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔加样：在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl结果观察：将琼脂板置于湿盒，37℃一天后观察结果。
【结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。
中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。
【分析】抗体与抗原发生扩散时，随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
当有沉淀线出现时，说明有抗原抗体反应。
小吞噬实验报告
小吞噬实验报告
本次实验旨在研究小吞噬在不同环境条件下的生长和代谢特性。
通过对小吞噬
的培养和观察，我们希望能够深入了解其生物学特性，并为其在生物工程和医学领域的应用提供理论支持。
首先，我们选取了不同的培养基和培养条件，分别对小吞噬进行培养。
在常规
培养条件下，我们观察到小吞噬的生长速度较快，菌落呈现出规则的圆形和光滑的表面。
而在低温和高温条件下，小吞噬的生长速度明显减缓，甚至出现了生长受阻的情况。
这表明小吞噬对温度的敏感性较高，适宜的温度范围有利于其生长和繁殖。
其次，我们对小吞噬的代谢特性进行了研究。
通过对其在不同培养基中的代谢
产物进行分析，我们发现小吞噬在葡萄糖和乳糖培养基中的代谢产物有所差异。
在葡萄糖培养基中，小吞噬产生了大量的乳酸和乙醇，而在乳糖培养基中，产生了较少的代谢产物。
这表明小吞噬对不同碳源的利用能力存在差异，这对于其在工业生产中的应用具有重要意义。
最后，我们对小吞噬的耐受性进行了测试。
在高盐、酸碱度和抗生素等条件下，我们观察到小吞噬表现出不同程度的耐受性。
在高盐条件下，小吞噬的生长速度减缓，但并未受到致命影响。
而在酸碱度和抗生素条件下，小吞噬表现出了较强的耐受性，这为其在特殊环境中的生存和应用提供了可能性。
综上所述，通过本次实验，我们深入了解了小吞噬在不同环境条件下的生长和
代谢特性，为其在生物工程和医学领域的应用提供了理论支持。
我们相信，随着对小吞噬的进一步研究，其潜在的应用价值将会得到更多的挖掘和发展。
小吞噬试验_实验报告
1. 了解中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）的原理和方法。
2. 掌握中性粒细胞吞噬功能试验的操作步骤。
3. 观察中性粒细胞吞噬功能的变化，分析实验结果。
二、实验原理中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）是一种检测中性粒细胞吞噬功能的方法。
中性粒细胞在人体免疫系统中起着重要作用，具有吞噬、消化病原体的功能。
通过观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，可以了解中性粒细胞的吞噬功能。
三、实验材料1. 实验动物：健康小鼠2. 实验试剂：中性粒细胞吞噬功能试剂、生理盐水、染色液、显微镜等3. 实验仪器：离心机、显微镜、培养箱等四、实验步骤1. 选取健康小鼠，随机分为实验组和对照组。
2. 实验组：腹腔注射中性粒细胞吞噬功能试剂，对照组：腹腔注射等体积的生理盐水。
3. 注射后24小时，取小鼠血液，分离中性粒细胞。
4. 将中性粒细胞与特定物质（如细菌、酵母等）混合，置于培养箱中培养。
5. 观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，记录吞噬百分率和吞噬指数。
6. 对实验结果进行统计分析。
五、实验结果1. 实验组中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组，说明中性粒细胞吞噬功能试验结果显著。
2. 随着培养时间的延长，中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数逐渐增加，说明中性粒细胞吞噬功能随时间延长而增强。
1. 实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能。
2. 中性粒细胞吞噬功能试验具有操作简便、结果直观等优点，适用于临床和科研工作。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了中性粒细胞吞噬功能试验的原理和方法，了解了中性粒细胞吞噬功能的变化规律。
实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能，为临床和科研工作提供了有力支持。
八、实验反思体会1. 实验过程中，应严格按照操作步骤进行，避免人为误差。
2. 实验结果的分析应客观、准确，避免主观臆断。
3. 中性粒细胞吞噬功能试验具有实际应用价值，为临床和科研工作提供了有力支持。
小吞噬实验
小吞噬实验
（体外法）
主讲： Q Q：
【实验目的 】 吞噬细胞吞噬功能的测定 【实验原理 】血液中的中性粒细胞即小吞噬
将玻璃片放湿盒内，置37℃孵 箱30~40min。
作用完毕，取1滴制成薄片，自然干燥。
【结果观察】
结果：胞浆呈蓝色或淡红色，细菌呈深蓝色或紫 色，细 胞呈褐色，细胞核呈紫红色。
【注意事项 】
1.个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能 力亦不同。 2.涂血片时不宜太厚，否则不宜观察。
细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤，能 吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物 是机体固有免疫的重要组成部分。
【临床意义】 在某些情况下，小吞噬细胞也
能参与某些超敏反应和自身免疫疾病的组织损伤 和炎症过程。因此，测定小吞噬细胞功能可在一 定程度上反映机体的免疫状态，也可作为判断疗 效的一种指标。 枸橼酸钠或肝素（25U/ml）、毛细吸管、凹玻片、 载玻片、牙签、甲醇 瑞氏-吉姆萨染料、pH6.4PB、 酒精棉球、采血针等。
【材料 】表皮葡萄糖球菌液（9亿/ml）、3.8枸橼酸钠或肝素
酒精棉球消毒手指后，用采 血针从消毒部位取2大滴血 （约0.2ml）加入凹孔中混匀
加表皮葡萄糖液1滴 （0.02~0.04ml）， 然后用牙签轻轻搅匀 置瑞氏液1min， 置pH6.4PB中3min， 置吉姆萨染液5~10min， 蒸馏水洗， 待干， 镜检
小吞噬实验报告
小吞噬实验报告小吞噬实验报告近年来，科学界对于吞噬现象的研究逐渐引起人们的关注。
吞噬是一种细胞摄取外部物质的过程，它在维持生命活动中起着重要作用。
为了深入了解吞噬现象，我们进行了一项小吞噬实验。
实验过程中，我们选取了细胞培养作为研究对象。
首先，我们从实验室的细胞库中选取了一种常见的哺乳动物细胞株。
接着，我们将细胞培养在含有营养物质的培养基中，使其细胞数量逐渐增加。
为了观察细胞的吞噬现象，我们使用了荧光染料标记外部物质。
我们将荧光染料与细胞培养基中的微粒混合，然后将其加入到细胞培养基中。
通过荧光显微镜观察，我们可以清晰地看到细胞吞噬了荧光染料标记的微粒。
在实验过程中，我们发现细胞对于吞噬物质的选择性。
当细胞周围存在多种不同颜色的微粒时，细胞更倾向于吞噬一种特定颜色的微粒。
这表明细胞在吞噬过程中具有一定的选择性，可能与其自身需要相关。
进一步观察发现，细胞吞噬过程中还伴随着细胞器的重组和移动。
在吞噬过程中，细胞膜会形成一个囊泡，将外部物质包裹进去。
随后，这个囊泡会与细胞内的溶酶体融合，将吞噬物质降解并释放出营养物质。
这一过程中，细胞器的移动和重组起到了重要的作用。
在实验的后续观察中，我们发现细胞对于吞噬物质的处理速度也存在差异。
有些细胞在吞噬后很快将物质降解，而有些细胞则需要更长的时间。
这可能与细胞的代谢活性和吞噬物质的性质有关。
此外，我们还观察到细胞对于吞噬物质的大小也存在一定的限制。
当物质过大时，细胞无法完全吞噬，只能吞噬部分或者不吞噬。
这说明细胞在吞噬过程中有一定的选择性，只吞噬对其生存和功能有益的物质。
通过这次小吞噬实验，我们对于细胞吞噬现象有了更深入的了解。
吞噬作为细胞的一种基本生命活动，不仅有助于维持细胞的正常功能，还对于细胞的代谢和生存起着重要作用。
这项实验为我们进一步研究细胞吞噬现象提供了基础，并有望在医学和生物技术领域有所应用。
总之，通过这次小吞噬实验，我们对细胞吞噬现象有了更深入的了解。
小鼠小吞噬实验报告
一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬过程，加深对细胞吞噬作用机制的理解。
2. 测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，评估其非特异性免疫功能。
二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。
在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。
巨噬细胞能够识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物，通过胞吞作用将其吞噬并消化。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康小鼠若干。
2. 仪器：显微镜、离心机、无菌操作台等。
3. 试剂：大肠杆菌悬液、生理盐水、甲醛固定液、姬姆萨染液等。
四、实验步骤1. 制备腹腔巨噬细胞悬液：- 将小鼠麻醉后，无菌操作下取其腹腔液。
- 将腹腔液离心，弃去上清液，沉淀即为腹腔巨噬细胞。
- 用生理盐水洗涤腹腔巨噬细胞，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为纯化的腹腔巨噬细胞悬液。
2. 制备大肠杆菌悬液：- 将大肠杆菌接种于生理盐水中，37℃培养过夜。
- 将过夜培养的大肠杆菌用生理盐水洗涤，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为大肠杆菌悬液。
3. 实验分组：- 将纯化的腹腔巨噬细胞悬液分为实验组和对照组。
- 实验组：将腹腔巨噬细胞悬液与大肠杆菌悬液混合，37℃孵育30分钟。
- 对照组：将腹腔巨噬细胞悬液与生理盐水混合，37℃孵育30分钟。
4. 制片与染色：- 将实验组和对照组的细胞悬液分别制片。
- 用姬姆萨染液染色，显微镜下观察细胞形态和吞噬现象。
5. 结果分析：- 计算吞噬百分率和吞噬指数。
- 吞噬百分率 = 吞噬有细菌的巨噬细胞数 / 巨噬细胞总数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的细菌总数 / 吞噬有细菌的巨噬细胞数五、实验结果实验结果显示，实验组巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组，表明小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能。
六、讨论1. 本实验成功制备了小鼠腹腔巨噬细胞悬液，并观察了其吞噬大肠杆菌的过程，验证了巨噬细胞的吞噬功能。
小吞噬实验报告问题(3篇)
第1篇一、实验背景中性粒细胞是人体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬和杀灭病原体的功能。
小吞噬实验是研究中性粒细胞吞噬功能的重要方法之一。
通过观察中性粒细胞对特定颗粒的吞噬情况，可以评估中性粒细胞的吞噬活性及其在免疫反应中的作用。
本实验旨在探讨中性粒细胞对小吞噬体的吞噬能力，并分析影响吞噬效果的因素。
二、实验目的1. 熟悉中性粒细胞吞噬实验的基本原理和操作步骤。
2. 观察中性粒细胞对荧光标记小吞噬体的吞噬情况。
3. 分析影响中性粒细胞吞噬效果的因素，如温度、pH值、细胞浓度等。
4. 评估中性粒细胞吞噬功能在免疫反应中的作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：- 中性粒细胞来源：人外周血- 荧光标记小吞噬体：直径约为1μm的聚苯乙烯颗粒- 细胞培养液：RPMI-1640培养基- 其他：细胞计数板、离心机、显微镜、荧光显微镜等2. 实验试剂：- 胰蛋白酶：用于消化外周血中的红细胞- 胰蛋白抑制剂：用于抑制胰蛋白酶活性- 荧光标记剂：用于标记小吞噬体- pH缓冲液：用于调节细胞培养液的pH值- 温度调节装置：用于维持实验过程中的温度四、实验方法1. 细胞制备：- 收集人外周血，用生理盐水洗涤3次，去除红细胞。
- 加入胰蛋白酶和胰蛋白抑制剂，消化细胞，制成中性粒细胞悬液。
- 用细胞计数板计数，调整细胞浓度至1×10^6 cells/ml。
2. 实验分组：- 设定对照组：细胞培养液+未标记小吞噬体。
- 设定实验组：细胞培养液+荧光标记小吞噬体。
- 设定不同条件组：不同温度、pH值、细胞浓度等。
3. 实验操作：- 将细胞悬液和荧光标记小吞噬体按比例混合，加入细胞培养板。
- 将细胞培养板放入37℃、pH7.4的细胞培养箱中培养1小时。
- 取出细胞培养板，用磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）洗涤细胞3次。
- 使用荧光显微镜观察中性粒细胞对荧光标记小吞噬体的吞噬情况。
4. 数据分析：- 计算不同条件下中性粒细胞对荧光标记小吞噬体的吞噬率。
大小的吞噬实验报告
1. 掌握吞噬实验的基本原理和方法。
2. 了解巨噬细胞和小吞噬细胞的功能特点。
3. 观察并分析吞噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。
二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
在动物体内，巨噬细胞和小吞噬细胞是主要的吞噬细胞，它们具有识别、摄取、消化和清除病原体、衰老细胞和异物的功能。
吞噬作用在机体非特异性免疫中起着重要作用。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 实验材料：鸡红细胞、无菌生理盐水、6%无菌淀粉液、冷亚甲蓝染色液3. 仪器设备：显微镜、离心机、移液器、培养皿、吸管等四、实验方法1. 诱导巨噬细胞渗出：实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
2. 制备鸡红细胞悬液：取鸡红细胞，用无菌生理盐水洗涤3次，制成鸡红细胞悬液。
3. 观察吞噬现象：实验时，每只小鼠注射鸡红细胞悬液1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
30分钟后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片上。
滴一滴冷亚甲蓝染色液，盖上盖玻片。
在高倍显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。
五、实验结果1. 观察到巨噬细胞形态正常，细胞核清晰可见。
2. 部分巨噬细胞周围有鸡红细胞聚集，说明巨噬细胞已吞噬鸡红细胞。
3. 部分鸡红细胞被吞噬细胞吞噬后，细胞内出现鸡红细胞。
1. 本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，证实了巨噬细胞具有吞噬功能。
2. 吞噬细胞在机体非特异性免疫中起着重要作用，能够清除病原体、衰老细胞和异物，维持机体内环境的稳定。
3. 吞噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，进一步说明了吞噬细胞在清除血液中异物方面的作用。
七、实验讨论1. 吞噬细胞的吞噬能力受多种因素影响，如细胞表面的受体、吞噬物质的性质等。
2. 吞噬细胞在吞噬过程中，需要消耗能量，并分泌多种生物活性物质，如溶酶体酶等。
大小吞噬实验报告
一、实验目的1. 了解吞噬细胞的功能和特点；2. 掌握吞噬细胞吞噬细菌的实验方法；3. 分析吞噬细胞吞噬细菌的过程和结果。
二、实验原理吞噬细胞是一类具有吞噬功能的细胞，如巨噬细胞、中性粒细胞等。
它们能够吞噬和消化各种病原体、细胞碎片等异物。
本实验通过观察吞噬细胞吞噬细菌的过程，了解吞噬细胞的功能和特点。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠；2. 实验试剂：生理盐水、肝素钠、细菌悬液、姬姆萨染色液；3. 实验仪器：显微镜、离心机、移液器、培养皿、试管等。
四、实验方法1. 选取健康小鼠，无菌操作下取小鼠腹腔巨噬细胞；2. 将巨噬细胞悬液用生理盐水洗涤2次，离心后弃上清液；3. 加入肝素钠溶液，使细胞悬液稀释至适当浓度；4. 将细菌悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，37℃孵育30分钟；5. 将混合液离心，弃上清液；6. 加入姬姆萨染色液，染色5分钟；7. 用显微镜观察吞噬细胞吞噬细菌的情况。
五、实验结果1. 巨噬细胞在显微镜下呈圆形或椭圆形，细胞质丰富，细胞核呈蓝色；2. 部分巨噬细胞表面附着有细菌，细菌呈紫色；3. 部分巨噬细胞内部出现细菌，细菌呈紫色；4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌。
六、实验分析1. 巨噬细胞在实验过程中表现出较强的吞噬功能，能够吞噬细菌；2. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后，细菌存在于细胞表面，说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生粘连；3. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后，细菌存在于细胞内部，说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生吞入；4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌，可能是因为吞噬细胞未能成功吞噬细菌或细菌未被染色。
七、实验结论1. 巨噬细胞具有较强的吞噬功能，能够吞噬细菌；2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中可能发生粘连和吞入；3. 本实验成功观察了吞噬细胞吞噬细菌的过程，为研究吞噬细胞的功能和特点提供了实验依据。
八、实验讨论1. 本实验中，吞噬细胞吞噬细菌的过程可能受到多种因素的影响，如细菌种类、巨噬细胞活性等；2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中，可能存在吞噬、消化、排泄等多个阶段；3. 吞噬细胞吞噬细菌的能力与人体免疫力密切相关，研究吞噬细胞的功能有助于提高人体免疫力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中性粒细胞对细菌的吞噬是一个非常迅速的过程，吞噬5min 时吞噬率达45%，10min时接近80%，20min 即达平台。
(4)取“细菌－全血”涂片时，要混匀后再取；制作血涂片要 求推出尾部，过厚或过薄，均不利观察。
(4)待血涂片自然凉干后，用瑞氏染液染色。
瑞氏染色
瑞氏染液数滴覆盖血涂片上 染色1min 再加等量的
PH6.8 PBS与染液混合，染色10~15min
用蒸馏水冲洗
（平持玻片，在一端加水，使染料“漂走” ） 自然干燥
显微镜油镜原理
显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数
接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 表示显微镜辨析物体（两端）两点之 间距离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。 ：镜口角（即入射角）。
吞 噬 示 意 图
吞噬过程
细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能 ——小吞噬实验
将新鲜血液和细菌混合，经合适时间后涂片 染色，即能观察到被吞噬到中性粒细胞内但还未 被消化掉的细菌。
检测中性粒细胞吞噬细菌的能力，可作为辅 助判断机体非特异性免疫力的指标之一。
检测指标：
1. 吞噬百分率＝
100个细胞中吞噬有细菌的细胞数 × 100%
100 人吞噬百分率正常参考值：62%~76%
2. 吞噬指数＝
100个中性粒细胞吞噬的细菌总数 100
人吞噬指数正常参考值：1.32~1.72
实验材料
(1)显微镜、香柏油、小试管、EP管、载玻片、酒精 棉球、吸管、水浴箱等。
(2)肝素抗凝试管、瑞氏染液、双蒸水。
(3)菌液制备：白色葡萄球菌18～24小时内汤培养物 ，经Mc Farland比浊法调整浓度至6～9×109/mL， 加热100℃ 15分钟杀死细菌，置4℃保存备用。
实验一 中性粒细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法
一、实验内容
1. 细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能 2. 微量比色测定——实验基本技能练习
二、目的与要求
1.了解中性粒细胞生物学特性及其意义。
2.熟悉“细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功 能”试验的原理、方法及用途。
1. 小吞噬细胞
• 来 源： 中性粒细胞 • 存在部位： 血液 、 炎症部位（全身） • 功能基础：溶酶体，过氧化物酶及杀菌物质。 • 功 能：主要吞噬化脓菌 • 反应时间及寿命：反应时间快,数分钟到几小时，
实验方法
(1)仔细消毒后，每个班取5ml静脉血于肝素抗凝管内（轻轻摇匀）。
(2)每个组(2~3人)取4滴抗凝血于EP管内，再加入100ul备好的白 色葡萄球菌菌液，充分混匀后，置37℃水浴30min，中途混匀1次。 (3)取出EP管，用吸管吹打混匀后，取50ul“全血-白色葡萄球菌混 合液”置于洁净载玻片上，用另一载玻片推片，制成血涂片。
寿命短.平均数小时
[实验原理]
• 血液中的多形核白细胞是一种小吞噬细胞，其细 胞浆内含有多种酶类，对侵入体内的细菌具有强 大的吞噬和消化功能，是机体非特异性免疫的重 要组成部分。
• 意义：在某些情况下，小吞噬细胞也参与某些超 敏反应和自身免疫疾病的组织损伤和炎症过程， 因此，测定小吞噬细胞的功能可在一定程度上反 映机体的免疫状态，也可作为判定疗效的一种指 标。
[实验原理]
中性粒细胞——来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂，靠“造血”补充； 胞核呈多叶状；胞质内有多种颗粒；
内含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、组织蛋白酶、乳铁 蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学上的标志。
中性粒细胞通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤，吞 噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物；
• 油镜使用的原理
1. 香柏油的折射率与玻璃接 近，提高了视野的照明度。
2 . 提高了显微镜的分辨率
显微镜油镜的使用方法
1.用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 2.调节光亮度 3.低倍镜观察：粗调、细调 4.依次再进行中倍、高倍观察 5.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标
本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看 清物象为止。 6.换片：另换新片，必须从第三条开始操作。 7.用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的 油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用 擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。
油镜观察
首先寻找中性粒细胞——观察胞质中有无吞噬的细菌。如染 色正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而中性粒细
胞胞浆染成淡红色（淡兰色）。
计算吞噬百分率和吞噬指数
实验结果
• 油镜下见中性粒细胞胞浆呈淡兰色，核 分叶、紫红深染，白葡菌呈兰色。可见 中性粒细胞胞浆内吞噬有很多白葡菌。
注意事项
(1)人类白细胞的吞噬活性在37℃时最好，温度过高过低均 会使其吞噬能力减低。 (2)个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能力亦不同。
中性粒细胞产生伪足包围异物——吞噬体或吞噬泡；
吞噬——呼吸爆发——产生大量过氧化物及超氧化物 等毒性效应分子——杀死吞噬的细菌等异物；
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ同时，中性粒细胞本身也死亡， 成为脓细胞。
中性粒细胞：
A.在抗化脓性细菌感染中起重要防御作用； B.引起感染部位急性炎症反应； C.参与超敏反应（如III型超敏反应），引 起机体免疫病理损伤。