生物化学实验1-糖类的性质实验
生物化学实验
⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。
2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮糖的特异反应。
因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。
糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。
本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。
它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。
实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。
碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。
脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。
常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。
脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。
故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。
I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。
⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。
加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。
糖的性质化学性质实验报告
糖的性质化学性质实验报告一、实验目的本实验旨在探究糖(以葡萄糖为例)的化学性质,通过一系列化学反应实验,观察和分析糖在不同条件下的反应现象,从而深入理解糖的化学特性。
二、实验原理1、糖的氧化反应:葡萄糖具有还原性,能被弱氧化剂如托伦试剂(银氨溶液)和斐林试剂(新制的氢氧化铜悬浊液)氧化。
2、糖的成酯反应:糖中的羟基能与酸发生酯化反应。
3、糖的脱水反应:在浓硫酸等强酸作用下,糖会发生脱水反应。
三、实验仪器与试剂1、仪器:试管、烧杯、玻璃棒、酒精灯、石棉网、三脚架、滴管、药匙。
2、试剂:葡萄糖溶液、托伦试剂、斐林试剂、浓硫酸、乙酸、乙醇。
四、实验步骤1、葡萄糖的银镜反应(1)在洁净的试管中,加入 1mL 2%的硝酸银溶液,然后逐滴加入2%的稀氨水,边滴加边振荡,直至生成的沉淀恰好溶解,得到银氨溶液(托伦试剂)。
(2)向上述银氨溶液中加入 1mL 10%的葡萄糖溶液,振荡后,将试管放在水浴中加热 3-5 分钟。
观察到试管内壁出现光亮的银镜。
2、葡萄糖与斐林试剂的反应(1)配制斐林试剂:将 36g 硫酸铜晶体溶解在 50mL 水中,得到硫酸铜溶液;将 173g 酒石酸钾钠和 5g 氢氧化钠溶解在 50mL 水中,得到酒石酸钾钠氢氧化钠溶液。
将两种溶液混合均匀。
(2)在两支洁净的试管中,分别加入 2mL 斐林试剂,然后分别向其中一支试管中加入 1mL 10%的葡萄糖溶液,另一支试管中加入 1mL蒸馏水作为对照。
将两支试管同时放在沸水浴中加热 2-3 分钟。
观察到加入葡萄糖溶液的试管中产生砖红色沉淀,而对照试管中无明显现象。
3、葡萄糖的酯化反应(1)在一支干燥的试管中,加入 1g 葡萄糖,然后加入 2mL 乙酸和 2mL 浓硫酸,振荡均匀。
(2)将试管放在水浴中加热回流 1-2 小时,然后冷却至室温。
将反应混合物倒入盛有 10mL 水的烧杯中,搅拌均匀。
用饱和碳酸钠溶液中和至 pH 约为 7,然后过滤。
得到的滤液进行蒸馏,收集馏分,即为葡萄糖酯。
糖的化学性质
糖的化学性质糖的化学性质篇一:糖类的性质实验糖类的性质一.实验目的1.通过实验加深对糖类物质的主要化学性质。
2.熟悉某些糖类物质的鉴定方法。
3.学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。
4.了解鉴定还原糖的方法及其原理。
二.实验原理还原糖含有半缩醛(酮)的结构,醇羟基,醛基,在化学性质上具有醛的性质和醇的性质。
能和菲林试剂,Benedict试剂和Tollen试剂发生反应;非还原糖不含有半缩醛(酮)的结构。
糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
还原性糖能与过量的苯肼作用生成脎,糖脎是不溶于水的黄色晶体。
三.实验试剂10%a-萘酚、间苯二酚、菲林试剂A和B、Benedict试剂、Tollen 试剂、5%硝酸银、稀氨水、苯肼、浓盐酸、10%氢氧化钠、碘-碘化钾溶液、硝酸、酒精-乙醚液(1:3体积比)、葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、纤维素六.实验过程一.实验目的1.通过实验加深对糖类物质的主要化学性质。
2.熟悉某些糖类物质的鉴定方法。
二.实验原理还原糖含有半缩醛(酮)的结构,醇羟基,醛基,在化学性质上具有醛的性质和醇的性质。
能和菲林试剂,Benedict试剂和Tollen试剂发生反应;非还原糖不含有半缩醛(酮)的结构。
三.实验物理常数四.实验过程五.注意事项1.在Molish实验中,由于反应极为灵敏,如果操作不慎,甚至将滤纸毛或碎片落于试管中,都会得到正性结果。
但正性结果不一定都是糖,因此,不可在样品中混入纸屑等杂物。
2.添加Molish 试剂时切记充分摇匀3.加浓硫酸时用移液管沿管壁缓慢加入,切勿摇动4.注意观察各管紫色环出现时间的先后、环的宽度、颜色的深浅,并做好记录。
5.如果试验是在同一时间进行的话,则要注意药品量要准确,并要同步进行。
糖的化学性质篇二:实验一糖类的性质实验实验一糖类的性质实验(一) 糖类的颜色反应一、目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
生物化学实验
一、实验目的
1.掌握3,5 二硝基水杨酸法定糖的原理及方法。 2.用3,5 二硝基水杨酸比色法测定红薯中总糖。 3.熟悉分光光度计的原理及使用方法。
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二、实验原理
定 是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基和酮 基的糖类。 糖类的测定方法有物理方法和化学方法两类。 由于化学方法比较准确,常常使用之。还原糖的测
实验三 酵母RNA的提取及含量测定
一、实验目的 1.掌握RNA提取的原理及方法。 2.学会使用地衣酚法测定RNA的含量。 二、实验原理 一般的生物细胞中同时含有DNA和RNA,在酵母 中 RNA比 DNA的 含 量 高 得 多 , DNA则 少 于 2% (O. 03%~O.516%),故在实验室常用酵母作为RNA提 取的材料。若要制备具有生物活性的RNA,常用苯 酚法;若对生物活性没有要求,则可使用浓盐法, 稀碱法等。
脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物,此反应 称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相 似,也能发生此反应。可用于蛋白质的定性或定量测定。 ¡ 双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。含有一个 肽键和一个—CS—NH2,—CH2—NH2,—CRH—NH2, —CH2—NH2—CHNH2—CH2OH或—CHOHCH2NH2等基 团的物质以及乙二酰二胺等物质也有此反应。NH3也干扰此 反应,因为NH3与Cu2+可生成暗蓝色的络离子Cu(NH3) 42+。因此,一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反 应,但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
实验四
外界因素对酶活性的影响
一、实验目的 1.了解外界因素对酶活性及酶促反应速度的影响 2.加深对酶特性的认识。 二、实验原理 酶的化学本质是蛋白质,它极易受外界条件 的影响而改变它的构象及性质,因而也必然会影 响到它的催化活性。酶对温度、 pH、酶浓度及 某些离子浓度等变化很敏感。
糖类的性质实验报告
糖类的性质实验报告糖类是一类常见的碳水化合物,它们在日常生活中扮演着重要的角色。
本实验旨在通过对不同糖类的性质进行观察和比较,加深对糖类的认识,进一步了解其化学性质和应用价值。
首先,我们选取了葡萄糖、果糖和蔗糖作为实验对象。
这三种糖类在生活中应用广泛,具有代表性。
我们将分别对它们的溶解性、还原性和甜度进行实验观察。
在实验过程中,我们首先进行了溶解性的比较实验。
将等量的葡萄糖、果糖和蔗糖加入不同的试管中,加入等量的水并摇匀。
观察发现,葡萄糖和果糖能够完全溶解于水中,而蔗糖在水中的溶解度较低。
这说明蔗糖的溶解性较差,而葡萄糖和果糖的溶解性较好。
接下来,我们进行了还原性的实验。
将等量的葡萄糖、果糖和蔗糖溶解于水中,然后加入约等量的硫酸铜溶液。
观察发现,只有葡萄糖在加入硫酸铜溶液后发生了沉淀反应,生成了红棕色的沉淀物。
而果糖和蔗糖没有发生沉淀反应。
这表明葡萄糖具有较强的还原性,而果糖和蔗糖的还原性较弱。
最后,我们进行了甜度的实验。
通过尝试不同浓度的葡萄糖、果糖和蔗糖溶液,我们发现葡萄糖的甜度较高,果糖次之,蔗糖的甜度最低。
这与我们日常生活中的感受一致,也说明了不同糖类的甜度差异。
通过本次实验,我们深入了解了葡萄糖、果糖和蔗糖的性质差异。
葡萄糖具有较好的溶解性和较强的还原性,同时甜度也较高;果糖溶解性和甜度次之,还原性较弱;蔗糖的溶解性较差,还原性较弱,甜度最低。
这些性质差异决定了不同糖类在食品加工、医药、化妆品等领域的应用区别。
总之,本次实验通过对糖类的性质进行观察和比较,加深了我们对糖类的认识,也为我们更好地理解糖类的化学性质和应用价值提供了重要的参考。
希望本次实验结果能对大家有所启发,也为我们的科学研究和生活实践提供一定的帮助。
生物化学实验报告
⽣物化学实验报告实验⼀糖类的性质实验(⼀)糖类的颜⾊反应⼀、实验⽬的1、了解糖类某些颜⾊反应的原理。
2、学习应⽤糖的颜⾊反应鉴别糖类的⽅法。
⼆、颜⾊反应(⼀)α-萘酚反应1、原理糖在浓⽆机酸(硫酸、盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
因为糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫⽒试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100 mL,贮于棕⾊瓶内。
⽤前配制。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL1%淀粉溶液100 mL0.1%糠醛溶液100 mL浓硫酸 500 mL4、实验操作取5⽀试管,分别加⼊1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1 mL。
再向5⽀试管中各加⼊2滴莫⽒试剂,充分混合。
倾斜试管,⼩⼼地沿试管壁加⼊浓硫酸1 mL,慢慢⽴起试管,切勿摇动。
观察记录各管颜⾊。
(⼆)间苯⼆酚反应1、原理在酸作⽤下,酮醣脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮醣的特异反应。
醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
实验条件下蔗醣有可能⽔解⽽呈阳性反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞⽒试剂:0.05%间苯⼆酚-盐酸溶液1000 mL,称取间苯⼆酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中,再⽤蒸馏⽔稀⾄1000 mL。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL4、实验操作取3试管,分别加⼊1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 mL。
再向3⽀试管中各加⼊塞⽒试剂5 mL,充分混合。
将试管同时放⼊沸⽔浴中,。
观察记录各管颜⾊。
(⼆)糖类的还原作⽤⼀、实验⽬的1、理解并掌握糖类的还原性质;2、学习常⽤的鉴定糖类还原性的⽅法。
生物化学实验指南
实验一糖的呈色反应和定性鉴定目的要求(1) 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。
(2) 了解鉴定还原糖的方法及其原理。
Ⅰ. Molish反应——α-萘酚反应实验原理糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称紫环反应。
自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。
此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸以及丙酮、甲酸和乳酸均呈颜色近似的阳性反应。
因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。
试剂Molish试剂:取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL,临用前配制,棕色瓶保存。
1%葡萄糖溶液;1%蔗糖溶液;1%淀粉溶液。
操作方法取试管,编号,分别加入各待测糖溶液1 mL,然后加两滴Molish试剂,摇匀。
倾斜试管,沿管壁小心加入约1mL浓硫酸,切勿摇动,小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。
用水代替糖溶液,重复一遍,观察结果。
Ⅱ. 蒽酮反应实验原理糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10-酮-9,10-二氢蒽)作用生成蓝绿色复合物。
试剂蒽酮试剂:取0.2g 蒽酮溶于100mL 浓硫酸中,当日配制。
待测糖溶液,同Molish试验。
操作方法取试管,编号,均加入1mL蒽酮溶液,再向各管滴加2 ~ 3滴待测糖溶液,充分混匀,观察各管颜色变化并记录。
Ⅲ. 酮糖的Seliwanoff反应实验原理该反应是鉴定酮糖的特殊反应。
酮糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟甲基糠醛。
后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物,反应仅需20-30秒。
醛糖在浓度较高时或长时间煮沸,才产生微弱的阳性反应。
试剂Sediwanoff试剂:0.5g 间苯二酚溶于1升盐酸(H2O∶HCl=2∶1)(V/V)中,临用前配制。
1%葡萄糖;1%蔗糖;1%果糖。
操作方法取试管,编号,各加入Sediwanoff试剂1mL,再依次分别加入待测糖溶液各4滴,混匀,同时放入沸水浴中,比较各管颜色的变化过程。
糖类测定实验报告
一、实验目的1. 掌握糖类检测的基本原理和方法。
2. 学习使用化学试剂对糖类进行定量和定性分析。
3. 了解糖类在生物体中的重要性及检测方法在生物学研究中的应用。
二、实验原理糖类是一类生物大分子,广泛存在于自然界中,是生物体的重要营养物质。
本实验采用化学试剂法对糖类进行检测,主要利用糖类与特定试剂发生颜色变化的原理。
1. 斐林试剂法:还原糖在斐林试剂的作用下,加热后生成砖红色沉淀,根据沉淀的量可以定量分析还原糖的含量。
2. 苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂法:脂肪在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下,呈现红色或橙色,可以定性检测脂肪的存在。
3. 双缩脲试剂法:蛋白质与双缩脲试剂反应,产生紫色复合物,可以定性检测蛋白质的存在。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:待测生物组织样品、斐林试剂、苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂、双缩脲试剂、蒸馏水、移液器、试管、酒精灯、烧杯、显微镜等。
2. 实验仪器:分析天平、恒温水浴锅、显微镜、电子天平等。
四、实验步骤1. 糖类检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。
(2)取2 mL匀浆于试管中,加入2 mL斐林试剂,混合均匀。
(3)将试管放入50-65℃的恒温水浴锅中加热2分钟。
(4)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。
2. 脂肪检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。
(2)取2 mL匀浆于试管中,加入3滴苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂,混合均匀。
(3)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。
3. 蛋白质检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。
(2)取2 mL匀浆于试管中,加入1 mL双缩脲试剂A液,摇匀。
(3)加入4滴双缩脲试剂B液,摇匀。
(4)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。
五、实验结果与分析1. 糖类检测实验结果显示,待测生物组织样品在斐林试剂的作用下,溶液呈现砖红色沉淀,说明其中含有还原糖。
2. 脂肪检测实验结果显示,待测生物组织样品在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下,溶液呈现红色,说明其中含有脂肪。
3. 蛋白质检测实验结果显示,待测生物组织样品在双缩脲试剂的作用下,溶液呈现紫色,说明其中含有蛋白质。
《生物化学》课程实验教学大纲
《生物化学》课程实验教学大纲课程名称:生物化学课程编号:437007总学时:82 总学分: 4.5开设时间:第三学期适用专业:生物技术、食品科学与工程主撰人:审核人:一、实验性质、目的与任务1、生物化学实验是以生物为研究对象,利用生物化学的原理和方法,阐明生物生长,发育,遗传变异机制,揭示生命现象和本质,并为人类服务的一门实验科学,是农学、食品科学与工程专业、生物技术学科相关专业本科生及与中学生物学教师及科技人员重要的专业基础技术。
2、本课程是在植物生物学、动物生物学、微生物学等普通生物学实验有比较全面了解及一定基础训练基础上而开设的实验技术实验,是生物技术、农学、食品科学与工程专业的专业基础课,是深入学习上述三个专业专业知识的必备课程。
3、掌握层析技术、核酸的分离及组分鉴定、酶的特性、透析技术、等电点分离蛋白质等生物化学技术。
二、教学基本要求:1、掌握还原糖与非还原糖的鉴别方法;2、掌握测定酶的最适pH、最适温度等的方法;3、掌握蛋白质与糖的透析技术;4、掌握层析原理、蛋白质层析方法;5、掌握等电点纯化蛋白质的方法;6、掌握核酸组分鉴定的方法;7、掌握滴定法测定Vit C的方法(还原型Vit C的测定方法)。
三、实验项目与类型:四、实验教学内容及学时分配:实验一糖类的颜色反应4学时1、实验目的了解糖类颜色反应的原理;学习应用糖类颜色反应鉴别还原糖与非还原糖的方法。
2、方法原理(1)Molish(莫氏)反应糖与强酸的作用形成糠醛及其衍生物。
糠醛及其衍生物与α-萘酚反应作用生成紫色的化合物,原理是羰基于酚类进行了缩合,这样,将糖与浓酸作用后再与α-萘酚反应作用就能生成紫色的化合物,可鉴别糖(多羟、醛基)。
Molish反应非常灵敏,0.001%葡萄糖和0.0001%蔗糖即能呈现阳性反应。
因此,不可使碎纸屑或滤纸毛混入样品中。
过浓的糖溶液,由于硫酸对它的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈紫色。
需稀释糖溶液后重做。
食品生物化学实验 课件 实验二 糖类性质实验 (一) ———糖类颜色反应(共10张PPT)
因α-为萘糠酚醛反及应糠2(醛.试M衍剂o生l物i对s此c反h应反均应呈)阳性,故此反应不是糖类的
将3支试管同时放入沸水浴中,注意观察 /L阿拉伯糖(溶1液),莫混氏匀(。Molisch)试剂50g/
Lα-萘酚的酒精溶液,称取α-萘酚
α-萘5酚g反,应溶(于M9o5l%i乙s醇c中h,反总应体)积100mL,贮于棕色瓶内,使用前配制。 衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
3.杜氏实验 戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛,后者与间苯三酚结合成樱桃红
色物质。
三、器材与试剂
(2)塞氏(Seliwanoff)试剂0.
(1)莫氏(1M.器o材lisch)试剂50g/
取3支试管分别加入10g/L的葡萄糖溶液、10g/L
戊糖在浓酸溶试液管中,脱试水管生架成糠,醛滴,管后,者水与浴间苯锅三。酚结合成樱桃红
,记录各管颜色的变化及变化时间。
3.杜氏实验取3支试管分别加入杜氏试剂1mL,再分别加入
1滴10g/L葡萄糖溶液、10g/L半乳糖溶液、10g
/L阿拉伯糖溶液,混匀。将试管同时放入沸水浴中,观察颜色的 变化,并记录颜色变化的时间。
思考题
α-萘酚反应(Molisch反应) 间苯二酚反应(Seliwanoff反应) 05g溶于30mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100mL。 杜氏实验取3支试管分别加入杜氏试剂1mL,再分别加入
将3支试管2同时ư放入沸α水-浴萘中,酚注反意应观的察原理是什么?
,记录各管颜色的变化及变化时间。 间苯二酚反应(Seliwanoff反应) 取3支试管分别加入10g/L的葡萄糖溶液、10g/L (2)塞氏(Seliwanoff)试剂0. 糖类性质实验(一)———糖类颜色反应 (1)莫氏(Molisch)试剂50g/ 硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,在液面交界处有紫红色环 果糖溶液、10g/L蔗糖溶液各0.
生物化学经典实验——糖的定量测定
完全水解后, 冷却并加入酚酞试剂一滴, 以 10% NaOH中和至溶液呈微红色, 先用双层纱布 过滤, 再用滤纸过滤并定容至100ml。精确吸取上 述溶液10ml放入100ml容量瓶、稀释至刻度, 备用。
h
4
2、制作葡萄糖标准曲线
项目 葡萄糖液(ml) 蒸馏水(ml) DNS试剂(m1)
加热 冷却 蒸馏水(ml)
光密度
(O.D.520nm)
h
5
2、制作葡萄糖标准曲线
➢ 将以上各管溶液混匀后,用分光光度计
(520nm)进行比色测定,用空白管溶液调零点, 记录光密度值,以葡萄糖浓度为横坐标,光密 度为纵坐标,绘制出标准曲线。
3、样品中含糖量的测定
取4支大试管,分别按下表加入各种试剂。
h
6
测定样品中含糖量时各试剂的用量
实验一 糖类的定量测定
——3,5-二硝基水杨酸比色定糖法
一、实验目的
1、掌握3,5-二硝基水杨酸法定糖的原理及方 法。
2、用3,5-二硝基水杨酸比色法测定山芋粉中 总糖。
3、熟悉分光光度计的原理及使用方法。
h
1
二、实验原理
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。 还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类,单糖都 是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳 糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。
项 目 空白 1 2 3
样品量(ml) 0 1.0 1.0 1.0 蒸馏水(ml) 2.0 1.0 1.0 1.0
DNS试剂(m1) 1.5 1.5 1.5 1.5
加热
均在沸水浴中加热5min
冷却
立即用流动冷水冷却
蒸馏水(ml) 21.5 21.5 21.5 21.5
生物化学实验报告
实验一糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应一、实验目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应(一)α-萘酚反应1、原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100 mL,贮于棕色瓶内。
用前配制。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL1%淀粉溶液100 mL0.1%糠醛溶液100 mL浓硫酸 500 mL4、实验操作取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1 mL。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
倾斜试管,小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
观察记录各管颜色。
(二)间苯二酚反应1、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮醣的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:0.05%间苯二酚-盐酸溶液1000 mL,称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000 mL。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL4、实验操作取3试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 mL。
再向3支试管中各加入塞氏试剂5 mL,充分混合。
将试管同时放入沸水浴中,。
观察记录各管颜色。
(二)糖类的还原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的还原性质;2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。
糖类的性质实验报告
糖类的性质实验报告糖类是一类常见的有机化合物,其性质和用途在日常生活中都具有重要意义。
本实验旨在通过对糖类的一系列实验,探究其性质特点,为进一步的研究和应用提供参考。
首先,我们进行了对糖的溶解性实验。
我们选取了蔗糖、葡萄糖和果糖三种常见的糖类,分别加入到水中,观察其溶解情况。
实验结果表明,葡萄糖和果糖在水中的溶解度较高,而蔗糖的溶解度较低。
这是因为葡萄糖和果糖都是单糖,分子较小,易于溶解;而蔗糖是双糖,分子较大,溶解度相对较低。
其次,我们进行了对糖的还原性实验。
我们将蔗糖、葡萄糖和果糖分别与硫酸铜溶液混合,观察其在加热的情况下是否发生还原反应。
实验结果显示,蔗糖在加热后未发生还原反应,而葡萄糖和果糖则发生了还原反应,生成了红色沉淀。
这说明葡萄糖和果糖具有还原性,而蔗糖则不具备这一性质。
接着,我们进行了对糖的发酵性实验。
我们将葡萄糖和果糖与酵母混合,观察其在一定条件下是否发生发酵反应。
实验结果表明,葡萄糖和果糖均能够与酵母发生发酵反应,产生了气泡和香味。
这说明葡萄糖和果糖具有发酵性,可以成为酵母的发酵底物。
最后,我们进行了对糖的燃烧性实验。
我们将蔗糖、葡萄糖和果糖分别加热至高温,观察其在燃烧过程中的表现。
实验结果显示,葡萄糖和果糖在加热后发生了燃烧,产生了火焰和气体,而蔗糖在加热后未发生燃烧。
这说明葡萄糖和果糖具有燃烧性,而蔗糖则不具备这一性质。
综上所述,通过本次实验,我们对糖类的性质有了更深入的了解。
糖类的溶解性、还原性、发酵性和燃烧性都是其重要的性质特点,这些性质不仅对于化学研究具有重要意义,也在食品加工、生物发酵等领域有着广泛的应用价值。
希望本实验能为相关领域的研究和实践提供一定的参考和借鉴。
生物化学实验内容3篇
生物化学实验内容实验一:糖类的定性和定量分析糖类是重要的生物分子之一,无论是在生物体内还是在工业领域都有着重要的应用。
本实验旨在通过定性和定量分析糖类的实验,让学生了解糖类的性质和分析方法。
实验一、糖类的定性实验材料:葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、碘液、硝酸银、硫酸、苯酚、NaOH、酚酞指示剂步骤:1.将葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉各取一份,用水溶解。
2.取5ml的各种糖溶液于试管中,加入2滴苯酚,再加入1ml NaOH溶液和1滴酚酞指示剂,观察是否变色。
3.将1ml的碘液加入每种糖溶液中,观察反应结果。
4.将1ml的硝酸银溶液加入每种糖溶液中,放置后观察反应结果。
结果分析:1.苯酚试剂可以检测出葡萄糖和果糖的存在,经反应产物为红褐色。
2.加入碘液后,葡萄糖和淀粉溶液会呈现出蓝色复合物;果糖溶液则无反应;麦芽糖和蔗糖溶液则会出现棕色沉淀。
3.加入硝酸银溶液后,蔗糖会产生白色沉淀,而麦芽糖和淀粉则无明显反应。
实验二、糖类的定量实验材料:葡萄糖溶液、NaOH溶液、硫酸、费林试剂步骤:1.将试样称取10mg,加入5ml的NaOH溶液,在沸水浴中加热10min,冷却后将pH值调节至7-8。
2.将所有试剂进行融合,称取0.1g的硫酸和0.5g的费林试剂,放入10ml的水中混合均匀。
3.加入数滴试样到试剂溶液中,混合均匀后沸腾2min,冷却后去除浮渣并将溶液转移到5ml容量瓶中。
4.在溶液中加入几滴酚酞指示剂,并用2.5%NaOH溶液滴加,直至出现红色,记录加滴量。
结果分析:1.根据加入NaOH溶液的体积和试样的含量,可以计算出糖类物质的浓度。
2.费林试剂可以与糖类发生反应,生成物质的深度颜色与糖的含量成正比。
实验三、酵母的发酵过程酵母是一类单细胞真菌,可以通过发酵过程产生乙醇和二氧化碳。
本实验旨在观察酵母在不同条件下的发酵过程,了解发酵原理和条件对发酵有何影响。
材料:酵母、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、发酵管、氢氧化钠溶液、氢氧化钠的饱和的饱和的水解液、试剂瓶、称瓶步骤:1.称取3g酵母溶解在50ml水中。
最新糖类的性质实验(实验报告)
最新糖类的性质实验(实验报告)实验目的:探究最新发现糖类的性质,包括溶解性、稳定性、反应活性等,并通过实验数据分析糖类在不同条件下的行为。
实验材料:1. 多种新型糖类样品2. 蒸馏水3. 有机溶剂(如乙醇、丙酮)4. 酸碱指示剂5. 热量计6. 旋光仪7. 恒温水浴8. pH计9. 电导率仪10. 标准溶液(如葡萄糖标准溶液)实验方法:1. 溶解性测试:将不同糖类样品分别溶于蒸馏水和有机溶剂中,记录溶解度和溶液的透明度。
2. 稳定性分析:将糖类样品置于不同pH值的溶液中,观察其分解情况,并使用热量计测定反应热。
3. 反应活性评估:通过旋光仪测定糖类样品的旋光性,以及在特定条件下(如加热、加入催化剂)其反应速率的变化。
4. 电导率测量:测量糖类溶液的电导率,分析其离子化程度和导电性质。
5. 酸碱性测试:使用pH计测定糖类溶液的pH值,并加入酸碱指示剂观察颜色变化。
实验结果:1. 溶解性测试结果表明,新型糖类A在水中的溶解度高于传统糖类,而糖类B在有机溶剂中的溶解性更佳。
2. 稳定性分析发现,糖类C在酸性环境下相对稳定,而糖类D在碱性环境下分解速度较快。
3. 反应活性评估显示,糖类E在加热条件下反应速率显著提高,而糖类F在特定催化剂作用下活性增强。
4. 电导率测量结果显示,糖类G的溶液具有较高的电导率,表明其具有较强的离子化倾向。
5. 酸碱性测试结果揭示,糖类H的pH值接近中性,而糖类I在加入指示剂后呈现明显的酸碱变化。
实验结论:通过本次实验,我们对新型糖类的性质有了更深入的了解。
不同糖类在溶解性、稳定性、反应活性、电导率和酸碱性方面表现出不同的特性,这些结果对于糖类的应用开发和工业生产具有重要的指导意义。
未来的研究将进一步探索这些糖类在生物体内的作用机制及其在食品、医药等领域的潜在应用。
生物化学实验课件
常用碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加 成作用。脂肪的不饱和程度越高,所含的不 饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作用的碘 量就越多,碘值就越高。故可用碘值表示脂 肪的不饱和度。
I2 + -CH=CH-
-CHI-CHI-
本实验用溴化碘(Hanus试剂)代替碘。用一 定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作用后, 用硫代硫酸钠滴定的方法测定溴化碘的剩余量, 然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的 碘值。
加成作用:IBr + -CH=CH-
CHBr-
剩余溴化碘中碘的释放:
IBr + KI
KBr + I2
-CHI-
再用硫代硫酸钠滴定释放出来的碘: I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI
CHO
O
-CH2OH
2. 间苯二酚反应
在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛, 后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮糖的特异反应。因为醛糖在同 样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高 或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
(二) 还原作用
许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基 或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等金属离 子还原,同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖 类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定 量测定。
1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%蔗糖溶液
各加0.5ml
3 支
试 管
各加5ml
赛氏试剂
混
均
同时 置沸 水浴 中
观察 记录 各管 颜色
3、糖与斐林试剂的反应
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塞氏试剂: 塞氏试剂: 溶解50mg间苯二酚(resorcinol)于100mL盐酸(盐 酸:水=1:2v/v)中
Seliwanoff反应
操作方法
在试管中加入5滴2% (1滴5%)的样品溶液,再加 人10滴(1 mL)间苯二酚盐酸试剂,在沸水浴中加 热,记录溶液转变为红色所需要的时间。若溶液 在1~2分钟内变为红色,说明样品为酮糖。否则 为醛糖。
实验记录
实验课前应认真预习,将实验名称、目的和要求、原理、实验内 容、操作方法和步骤简单扼要地写在记录本上 实验中观察到的现象,结果和数据应及时如实地记在记录本上。 绝对不可以用单片纸做记录或草稿。原始记录必须准确、简练详 尽、清楚。从实验开始就应养成这种良好的习惯。 记录时应做到正确记录实验结果,切勿夹杂主观因素,并根据仪 器的精确度准确记录有效数字。重复观测时即使数据完全相同也 应如实记录下来 实验中使用仪器的类型,编号以及试剂的规格、化学式、分子量 准确的浓度等,都应记录清楚,以便总结实验时,进行核对和作 为查找失败原因的参考依据
还原糖的鉴定原理
糖类分子中的还原性基团在碱性条件下将 Cu2+还原成Cu+,生成Cu2O沉淀。 沉淀颜色与沉淀颗粒大小有关,沉淀颗粒大 小与反应速度有关:速度慢颗粒大颜色偏红, 速度快颗粒小颜色偏黄。 反应速度取决于糖的浓度和还原性的强弱 Nhomakorabea还原糖的鉴定
还原糖鉴定实验操作要点
实验前鉴定试剂有效性:试剂与水1:4,加热煮 沸无沉淀方可使用。 先加鉴定试剂后加糖 从沸水浴(2-3min)中同时取出后 2-3min 取出后观察试管中的 取出后 变化 注意Benedict试剂与Fehling试剂在反应时间和沉 淀生成量等方面的区别。
验结果和数据进行整理、归纳,分析和对比,并尽量总结成各种 图表,如原始数据及其处理的表格,标准曲线图以及比较实验组 与对照实验结果的图表等。另外,还针对实验结果进行必要的说 明和分析。
讨论部分: 讨论部分:可以包括关于实验方法(或操作技术)的一些问题、
实验的正常结果和异常现象以及思考题进行探讨,对于实验设计 的认识、体会和建议,对实验课的改进意见等。
问 题
本实验提供的试样中,哪些糖具有还原 性?并对其还原性强弱排序。 Benedic试剂和Fehling试剂同为检验糖类 还原性的试剂,使用效果上有何区别? 为什么?
还原糖的鉴定
考核方式
实验操作占35%,实验报告占60%, 考勤占5% 操作分主要根据预习记录和实验过程 记录,结合课堂表现评分
实验一
糖类的性质实验
实验目的: 实验目的:
了解某些糖类颜色反应的原理 学习用糖的颜色反应鉴别糖类的方法 通过实验手段了解糖的基本性质及还原糖 的鉴定方法 为后续课程中有关糖类的知识的学习打下 基础;为后续设计行、研究性实验提供定 性检测的方法与手段
添加Molish试剂时切记充分摇匀 加浓硫酸时用移液管沿管壁缓慢加入, 切勿摇动 注意观察各管紫色环出现时间的先后、 环的宽度、颜色的深浅,并做好记录。
Molish反应
操作方法
在试管中加入1 mL 样品水溶液,滴入4滴 10%的α-萘酚乙醇溶液,混合均匀后将试 管倾斜约45度,沿管壁慢慢加入1 mL浓硫 酸(勿摇动)。此时样品在上层,硫酸在下 层、若在两层交界处出现紫色的环,表明 样品中含有糖类化合物。
α-萘酚反应(Molisch Test)
Seliwanoff(谢里瓦诺夫)反应(间苯二酚反应)
酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者与间苯 二酚作用生成红色物质 醛糖在同样条件下反应缓慢,只有在糖 浓度较高或煮沸时间较长时才呈微弱的 阳性反应
Seliwanoff反应
Seliwanoff反应操作要点
注意试剂添加量:糖溶液0.5ml,塞氏试 剂1-2ml混匀,同时 同时放入沸水浴 同时 注意观察各管颜色变化的时间及颜色的 变化过程,并做好记录
还原糖的鉴定
操作方法
Fehling试剂A,B两种溶液各1.0mL在试管中混匀 试剂A,B两种溶液各1.0mL在试管中混匀, 取Fehling试剂A,B两种溶液各1.0mL在试管中混匀, 再加入4 1%的样品溶液 在沸水浴中加热2 的样品溶液, 再加入4滴1%的样品溶液,在沸水浴中加热2~3分 红色或黄绿色沉淀生成 若有红色或黄绿色沉淀生成, 钟,若有红色或黄绿色沉淀生成,表明样品为还原 性糖。 性糖。
实验一 糖的性质实验
Molish(紫环)反应原理
糖在浓无机酸作用下脱水生成糠醛及糠醛衍生 物,后者与α-萘酚生成紫红色物质。 该反应不是糖类的特异性反应(丙酮、甲酸、乳酸、草
酸和葡萄糖醛酸 )
对葡萄糖的检出极限可达0.001%,对蔗糖的 检出极限可达0.0001%。
Molish反应
10
Molish反应操作注意事项
生物化学实验
一、糖类的性质实验 二、可溶性蛋白质含量的测定 三、粗脂肪的提取和定量测定 四、维生素C含量测定 五、氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 六、蛋白质的性质实验
课程任务
对理论知识的巩固和应用,培养理论联 系实际的意识,培养用基础知识分析问 题、解决问题的能力 复习巩固实验基本技能,学习新的实验 方法和操作技能,学习仪器设备的使用 培养进行科学实验应具备的基本素质: 诚实、科学、严谨、探索创新精神、能 吃苦耐劳等。
纪
律
每批次人员、分组固定,上课准时点名,迟到5min以上者拒绝进 入教室 实验室内不得高声闲谈嬉笑,必须保持安静的实验环境。 爱护仪器,不浪费药品,节约水电,遵守实验室的安全措施。 滤纸、火柴棒、碎玻璃等固体废弃物切勿丢入水池内,有毒有害 试剂应统一回收入废液桶。 仪器或实验器材如有损坏,应自行登记,并立即向指导老师报告。 保持实验室的整齐清洁,个人所带与实验无关的东西,不得乱放 在实验桌上。 实验室内一切物品,未经实验室负责老师批准严禁带出室外,借 物必须办理登记手续。 每次实验后各小组清洗干净实验器材、打扫本组实验台桌、 每次实验后各小组清洗干净实验器材、打扫本组实验台桌、提 交实验记录,老师验收合格后方可离开实验室; 交实验记录,老师验收合格后方可离开实验室;每次留下一个大 组负责当天实验室的地面卫生和公用仪器设备整理复位, 组负责当天实验室的地面卫生和公用仪器设备整理复位,以及一 些其它服务性工作。最后离开实验室时,应检查水、 些其它服务性工作。最后离开实验室时,应检查水、电、门窗等 是否关好。 是否关好。 实验课上禁止播放音乐、禁止玩游戏。实验室禁止饮食和吸烟。
实验要求
每次实验前必须详细预习 预习实验教材,明了实验目的、原理方法及操作步骤, 预习 并在记录本上拟出简单的操作步骤、仪器使用方法及实验操作注意事项。 在实验过程中,要听从老师的指导,严格按照实验步骤进行,不能任意更改, 不熟悉的仪器设备,切勿随意乱动,应先请老师指导后使用 不熟悉的仪器设备,切勿随意乱动 实验时如有问题发生,应首先用自己学过的知识,独立思考加以解决,努力 培养独立分析问题和解决问题的能力,如自己不能解决可与指导老师共同讨 论研究,提出解决问题的办法。 实验进行时,必须随时把观察到的现象和实验数据,如实地记录在记录本上, 不得记在散页纸上,要养成良好的做原始记录的习惯 养成良好的做原始记录的习惯。 养成良好的做原始记录的习惯 环境和仪器的清洁整齐是搞好实验的重要条件,实验台面试剂药品架上必须 保持整洁,仪器药品要井然有序,所用的试剂,用完应立即盖严放回原处。 用完应立即盖严放回原处。 用完应立即盖严放回原处 注意瓶塞切勿张冠李戴。勿使试剂药品洒在实验台面和地上。实验完毕后, 实验完毕后, 实验完毕后 需将药品试剂排列整齐,仪器设备要恢复原状。将实验台面打扫干净, 需将药品试剂排列整齐,仪器设备要恢复原状。将实验台面打扫干净,经教 师验收仪器后,方可离开实验室。 师验收仪器后,方可离开实验室。 对实验的内容和安排不合理的地方可提出改进意见.对实验中出现的一切反 常现象应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到生动活泼,主动地学习。
实验报告的格式
实验结束后,应及时整理和总结实验结果, 写出实验报告,报告的形式可参照下列方式: 实验时间 实验项目名称 实验地点 一、目的和要求: 二、原理: 三、实验材料及预处理 四、试剂及配制 五、实验仪器: 六、操作步骤: 七、实验结果(数据记录及处理): 八、讨论:
报告书写总体说明
在实验报告中,目的和要求、原理以及操作步骤部分 应简单扼要的叙述。但是,对于实验条件(试剂配制及 仪器)和操作的关键环节必须写清楚。 实验结果部分: 实验结果部分 应根据实验的要求将一定实验条件下获得的实