脱水蔬菜中沙门氏菌不同检测方法的对比研究
食品中沙门氏菌快速检测方法的研究
食品中沙门氏菌快速检测方法的研究作者：刘宇来源：《科学与财富》2016年第23期摘要：沙门氏菌（Salmonella）是一种常见的病原菌，作为温血和冷血动物的肠道菌，分布范围十分广泛，它经污染食品传播，能在人类肠道中迅速繁殖，侵入肠粘膜组织，产生肠毒素，导致发热、腹痛、腹泻等全身症状，严重者出现败血症，由沙门氏菌引起的食物中毒一直占世界食物中毒病例前列。
近年来，沙门氏菌食物中毒和动物感染沙门氏菌十分严重。
由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎在世界各国有增加的趋势，已成为国际公共卫生的一个重要课题。
本文主要针对食品中沙门氏菌快速检测方法进行分析和讨论。
关键词：食品；沙门氏菌；快速检测；检测方法近些年来，为了控制和预防某些细菌感染，在饲料添加剂及治疗中常盲目使用一些抗菌药物，导致产生许多耐药菌株，像沙门氏菌就属于此类细菌。
一般情况下，在肉类食品、奶制品以及蛋制品中出现沙门氏菌污染的情况较多，而这些均是人们日常生活中食用较多的食品种类，因此，必须要加大对食品致病菌安全检测工作的力度，寻找更加敏感和准确的沙门氏菌检测剂。
1 食品中沙门氏菌快速检测重要性沙门氏菌是肠杆菌科革兰氏阴性杆菌，广泛存在于环境或寄居于人和动物肠道内，绝大多数对人和动物具有致病性，对营养要求不高，耐胆盐，对外界的抵抗力较强。
感染沙门氏菌或食用被带菌者粪便污染的食品，可使人发生食物中毒。
带菌者，或是感染沙门菌人的粪便会在一定程度上污染食物，导致人体食物中毒。
沙门菌极易导致人体发生细菌性食物中毒，主要表现有败血症、肠胃炎以及肠伤寒等，而且具有一定的传染性，可以通过消化道致病。
沙门菌就从数量上来说是世界上比较常见的细菌种类之一，在我国，食物中毒问题中首要的也是由于沙门菌而产生的中毒问题，人类受到细菌感染的主要的来源也是受到沙门菌污染的相关食品，如：肉和奶等，因此食品、医疗卫生以及商检等部门对沙门菌的检测是相当严格。
沙门氏菌中毒常常是大面积的，致病速度快，给人类健康带来极大威胁。
沙门氏菌检测的三种方法比对的结果与讨论
沙门氏菌检测的三种方法比对的结果与讨论
梁先龙 代真真 白莉敏 戚修欢(安徽中青检验检测有次能力验证再次确认实验室检测能力；探 求快速、灵敏、可靠的食品中沙门氏菌的检测方法。方法：采用 沙门氏菌的国标方法、PetrifilmTM 测试纸片法和 VIDAS 免疫法 的定性研究。结果：编号为 CODE 2 和 CODE4 的样品为阳性 结果，其余四个样品均未检出。结论：3 种方法检测沙门氏菌均 取得满意结果；进一步确认了本实验室对本实验的能力；Petri⁃ filmTM 测试纸片法，简单，方便准确率高，在食品检测中应用中 值得推广。
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2018 年 09 月
质量与检测
1.5.3.3 接种与判读:使用无菌接种环(直径 3mm 左右)蘸取每
份样品，打开测试片并快速移动到凝胶上，进行一步划线。将
上层薄膜放下遮住测试片。然后去气泡。在 41.5 C 的田建霞培
养 24h. 将测试片的有色面朝上，最多可叠加 20 个测试片。取出
测试片进行判读，测试片上带黄色圈或有气泡或以上两者都有
ClassⅡBSC 生物安全柜 (中国海尔)、高压灭菌锅(上海博 讯)、生 化 培 养 箱 ( 上 海 博 讯)、、生 物 显 微 镜 、移 液 器（Eppen⁃ dorf）。 1.5 方法
三 种 方 法 ：国 标 方 法 、PetrifilmTM 测 试 纸 片 法 和 酶 标 免 疫法
样品前处理根据 GB4789.4-2016《食品微生物学检验 沙门
氏菌检验》和安徽省食品安全检验机构提供的作业指导书进行 检测。
1.5.1 国标方法 1.5.1.1 前增菌 吸取 5ml 灭菌 BPW 稀释样品作为原液，吸取 4ml 原液至 36ml 缓冲蛋白胨溶液中,为预防及保证样品的准确性，同时在食 药局发的无菌离心管中加入 9ml 缓冲蛋白胨水，漩涡振荡均 匀, 放入生化培养箱中 36℃培养 18 h。取标准菌株肠炎沙门氏 菌 CICC21482 和伤寒沙门氏菌 ATCC14028 一环接种于 10m L 灭菌的 BPW 增菌液同步培养，作为阳性对照。 1.5.1.2 选择性增菌 前增菌样液用移液枪轻吹打均匀，取其增菌液 1 m L 于 10 m L SC 增菌液中,36℃培养 24 h, 同时另取 1 m L 于 10 m L TTB 增菌液中,42℃培养 24 h。 1.5.1.3 选择性分离 取增菌液 1 环, 用接种环分别划线于沙门氏菌属显色平板、 XLD 平板和 BS 平板。XLD 琼脂平板和沙门显色培养基平板 36℃培养 24 h，而 BS 琼脂平板于 36℃培养 48 h, 培养至上述时 间后观察各平板上是否有可疑沙门氏菌属菌落。 1.5.1.4 生化鉴定实验 挑取上述选择性分离中的平板的可疑菌落 2 个或以上, 纯 化至 NA 平板上 36℃培养 18h,而后接种于沙门氏菌干制生化鉴 定盒中进行生化实验。 1.5.1.5 血清学鉴定 将生化实验符合沙门氏菌的菌株做血清凝集实验。采用 玻片凝集法, 在洁净玻片上滴加 1 滴 A-F 群多价 O 抗血清, 用 接种针挑取菌落与血清混合, 并轻碾均匀, 将玻片倾斜摇动混 合 1 min, 观察有无凝集现象, 同时生理盐水作为对照。A-F 群多价 O 抗血清凝集的菌落按 GB 4789.4-2010[2]标准中血清 分型进行 O 抗原的鉴定。将菌落点种于 Swarm 琼脂平板过夜 培养, 取远端菌进行 H 抗原的鉴定。 1.5.2 酶标抗体（ELISA）法
食品中沙门氏菌检测现状分析
食品中沙门氏菌检测现状分析作者：李惠静来源：《现代食品》 2019年第9期◎ 李惠静(广西壮族自治区贺州市食品药品检验所,广西?贺州?542800)Li Huijing(Hezhou Institute for Food and Drug Control, Hezhou?542800, China)摘?要:沙门氏菌是食品中一类较为常见的致病微生物。
近年来世界各地发生过多起沙门氏菌食物中毒事件。
因此,对食品中沙门氏菌的检测进行研究意义重大。
本文对食品中沙门氏菌检测的传统方法、ELISA法、免疫荧光标记法、PCR法、电阻抗测定法以及生物发光法进行了系统分析,为更好地实施食品中沙门氏菌的检测提供依据。
关键词:食品;沙门氏菌;检测方法Abstract:Salmonella is a relatively common pathogenic microorganism in food. In recent years, many Salmonella-related food poisoning incidents have occurred around the world. Therefore, research on the detection of Salmonella in food is of great significance. In this paper, the traditional methods of detection of Salmonella in food, ELISA, immunefluorescence labeling, PCR, electrical impedance measurement and bioluminescence were systematically analyzed, which provided a basis for better detection of Salmonella in food.Key words:Food; Salmonella; Detection method中图分类号:TS201.3沙门氏菌是一类威胁人们健康的致病微生物。
不同培养基检测沙门氏菌的效果对比
分析检测不同培养基检测沙门氏菌的效果对比李秀秀1，汪 琦2*（1.德州市德城区疾病预防控制中心，山东德州 253000；2.乐陵市疾病预防控制中心，山东德州 253600）摘 要：本研究为筛选适用于沙门氏菌检测的培养基，比较了4种不同选择性培养基对沙门氏菌的检测效果。
研究发现，4种培养基中，鼠伤寒沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌的生长率均较高，相较于甲型副伤寒沙门氏菌，鼠伤寒沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂培养基、沙门氏菌显色培养基、HE琼脂培养基和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐培养基中较易分辨；4种干扰菌中，除木糖赖氨酸脱氧胆酸盐培养基中的奇异变形杆菌难与鼠伤寒沙门氏菌相区分外，其他条件下均可与沙门氏菌区分；4种培养基均对以粪肠球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用。
关键词：选择性培养基；沙门氏菌；检测技术；效果对比Comparative Analysis of Different Culture Media forSalmonella DetectionLI Xiuxiu1, WANG Qi2*(1.Dezhou Decheng District Center for Disease Control and Prevention, Dezhou 253000, China; oling Center forDisease Control and Prevention, Dezhou 253600, China)Abstract: This study compared the detection effects of four different selective culture media on Salmonella in order to screen suitable culture media for Salmonella detection. Research has found that among the four culture media, Salmonella typhimurium and Salmonella paratyphi A have higher growth rates. Compared to Salmonella paratyphi A, Salmonella typhimurium is more easily distinguished in bismuth sulfite agar, Salmonella chromogenic medium, HE agar medium, and xylose lysine deoxycholate medium; among the four interfering bacteria, except for Proteus mirabilis in xylose lysine deoxycholate medium, which is difficult to distinguish from Salmonella typhimurium, it can be distinguished from Salmonella under other conditions; all four culture media showed significant inhibitory effects on Gram positive bacteria represented by Enterococcus faecalis.Keywords: selective culture media; Salmonella; detection technology; comparative analysis沙门氏菌（Salmonella）是一类常见的食源性病原菌，为革兰氏阴性杆菌，被认为是食品和水源中最主要的致病菌之一[1]。
沙门氏菌几种检测方法简介与比较共34页
沙门氏菌几种检测方法简介与比较
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。—ห้องสมุดไป่ตู้希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
沙门氏菌检测方法的研究进展
沙门氏菌检测方法的研究进展摘要：沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌，而且，沙门氏菌的检验在食品检测中具有重要意义。
建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。
本文通过查阅大量文献，详细阐明了沙门氏菌的各种快速检测方法的原理，对近年来沙门氏菌的检测进展进行了综述。
认为，传统方法可以对沙门氏菌做出鉴定，但需要4~7 d的时间；以抗体为基础的ELISA方法和免疫荧光标记方法将检测时间缩短了一半，且灵敏性高和特异性强；以核酸为基础的PCR技术由于灵敏、简单、快速和特异已被广泛用于沙门氏菌检测。
但是这些方法仍然存在一定的不足，需要进一步加以改进，关于食品中沙门氏菌的检测方法的研究还有待进一步深入。
关键词：沙门氏菌；检测；传统方法；免疫；分子前言沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人兽共患病之一，沙门氏菌属于肠杆菌科细菌，由此类细菌引起的各种动物的疾病称为沙门氏菌病。
沙门氏菌在自然界有广泛的宿主，少数沙门氏菌对宿主有选择性，属于偏嗜性沙门氏菌，绝大多数对人和动物均适应，可寄居在哺乳类、爬行类、鸟类、昆虫及人的胃肠道中，种类繁多的家养和野生动物的感染率在1%—20%或者更高。
故各种家禽、家畜在喂养、屠宰、运输、包装等加工处理过程中均有污染的机会。
各种动物源性食物是引起沙门氏菌感染的最常见媒介物。
除初生动物，人畜感染后一般呈无症状带菌状态,长期排菌，污染肉蛋产品，同时它们也可表现为有临床症状的致死疾病，可能加重病情或者增加死亡率，或者降低动物生产力等，对养殖业的经济效益影响较大，并严重影响人类健康。
近年来，随着免疫学实验技术和分子生物学技术的发展，沙门氏菌检验技术的研究也有了新的研究进展。
本文将近年来国内外关于沙门氏菌检验技术研究进展情况作以概述，供参考。
1 传统的检测方法（国标法）常规检验技术基本特征与步骤:沙门氏菌常规检验技术具有以下3项特征：常规方法是编入国标方法或国际方法中的基本方法，是检验其他检测方法准确性、敏感性的参照；常规方法最终将能分离到细菌纯培养物；常规方法简单、准确、可重复性强、有一定的灵敏性。
五种方法检测食品中沙门氏菌的结果比较
业标准 （ Ｓ Ｎ ） ；免 疫 学 方 法 ，如 酶 联 免 疫 技 术 的 Ｖ Ｉ ． Ｄ Ａ Ｓ 法 和Ｅ Ｌ Ｉ Ａ Ｓ 法 ；分 子 生 物 学 方 法 ，如 Ｐ Ｃ Ｒ法 ；气
１ ． １ ． １ 样品 来 源
编号 为 Ｓ Ｄ Ｐ ＇ Ｉ Ｏ ５ Ｂ、Ｓ Ｄ ｐ ｒ ｌ ￣ ５ Ｃ的 样 品 ，
进行 实验是 完全有必要的 。
Hale Waihona Puke 关键 词 ：Ｓ Ｎ ０ １ ７ ０ — １ ９ ９ ２ ；ｍ ｉ ｎ ｉ — Ｖ Ｉ Ｄ Ａ Ｓ ；Ａ Ｐ Ｉ ２ ０ Ｅ ；科玛 嘉显 色培养基 ；Ｉ Ｓ Ｏ ６ ５ ７ ９ — ２ ０ ０ ２ ；沙 门氏菌
沙 门氏菌是一种可以引起沙 门氏菌病 的革兰氏阴性 菌 ，是最常见的人畜共患型食源性致病菌之一。消费者 食用被沙 门氏菌污 染的食物 １ ２ ＿７ ２ ｈ后 即可 出现腹泻 、 腹痛 、恶心 、呕吐 、发热等症状。近年来 ，沙门氏菌在 全球范围内引起 的危害呈不断上升趋势。在美 国，每年 有超过 １ ４ ０ 万人感染沙门氏菌 ，直接经济损失超过 ２ ４ 亿
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔ ｈ ｅ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｏ ｆ Ｊ ａ ｐ ａ ｎ ｅ ｓ ｅ ｍｉ ｌ ｋ ａ ｎ ｄ ｍｉ ｌ ｋ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ ａ ｆ ｅ ｔ ｙ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｓ ｗａ ｓ ｉ ｎ ｔ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ，ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｄ ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｂ ａ ｓ ｉ ｃ
美元 。在 中 国 ，每 年 由沙 门 氏菌 引起 的 食 物 中 毒 事 件
沙门氏菌鉴定和分型方法比对研究
中图分类号：R155.5
沙门氏菌是食源性疾病重要的致病菌，我国每年 由沙门氏菌引起的中毒事件屡居首位 [1]。依据现有食 品安全国家标准 [2]，食品中沙门氏菌的鉴定和分型多 采用常规生化鉴定的方法，检测周期长，操作烦琐， 费力、耗时，无法满足食品安全突发事件应急检验的 要求 [3]。采用合适的鉴定和分型方法，对致病菌的快
速溯源具有重要意义 。 [4-5] 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-
TOF-MS）是近几年发展起来的一种全新的用于微生 物鉴定和分型的生物质谱技术，该方法基于细菌全细 胞蛋白质组指纹图谱分析，通过与标准物质图谱数据 库或者自建数据库进行比较，可以鉴定至属、种，乃
基金项目：国家市场监督管理总局科技计划项目（2019MK004）。 作者简介：李赫婧（1990—），女，本科，助理工程师，研究方向为食品生物安全检测。 通信作者：王丹（19819810436@ 。
◎ 李赫婧，王立平，杨红莲，薛晨玉，王 丹 （北京市食品安全监控和风险评估中心，北京 100094） LI Hejing, WANG Liping, YANG Honglian, XUE Chenyu, WANG Dan (Beijing Municipal Center for Food Safety Monitoring and Risk Assessment, Beijing 100094, China)
关键词：沙门氏菌；基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；多位点序列分型
Abstract：Objective: To compare the identification ability of Biochemical Culture and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) for Salmonella, and to compare the difference between serology and MLST methods. Methods: The suspected Salmonella was isolated from raw chicken samples, and the bacteria were identified by biochemical and MALDI-TOF-MS, and then the serotype was identified by serum and MLST. Results: Biochemical method and MALDI-TOF-MS were consistent, and the accuracy of MLST typing was 90.9% with the method of serum typing as the participation method. Conclusion: MALDI-TOF-MS was a rapid and low cost method, which could be used as a supplementary method for rapid identification of Salmonella. MLST and serum typing ability were similar, each had advantages, and the appropriate method could be selected according to their own situation.
食品中沙门氏菌检出能力验证结果与分析
术有限公司; 沙门氏菌显色培养基、三糖铁琼脂 (TSI)、 赖氨酸脱羧酶试验培养基, 均购自北京陆桥技 术有限责任公司 ; 沙门氏菌属诊断血清购自宁波天 润生物药业有限公司 ; DNA 提取试剂盒 (KG203) 、 PCR 所用试剂均购自天根生化科技(北京)有限公司。
2.3
仪
器
HFsafe-1500 生物安全柜 ( 上海力申科学仪器有 限公司)、生化培养箱(上海一恒科学仪器有限公司)、 XG1 高压蒸汽灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公 司 ) 、 VIDAS( 法 国 生 物 梅 里 埃 公 司 ) 、 VITEK2 COMPACT 全自动微生物鉴定/药敏分析系统(法国生 物梅里埃公司)、RiboPrinter 基因指纹图谱鉴定系统 (美国杜邦公司)、PCR 扩增仪(美国 ABI 公司)等。
第6卷 第5期 2015 年 5 月
食品安全质量检测学报 Journal of Food Safety and Quality
Vol. 6 No. 5
May. , 2015
食品中沙门氏菌检出能力验证结果与分析
江志杰*, 王似锦, 高
(北京市药品检验所要 : 目的
为了提升实验室的食品中沙门氏菌检测能力, 增强实验室竞争能力, 本实验室参加了中国食品 利用全自动免疫检测系统(VIDAS)
1930
食品安全质量检测学报
第6卷
菌。 而试验结果的准确性直接关系到一个单位的实验 室工作技术能力水平 。通过能力验证, 可以综合判 断某实验室检测水平和检测能力 , 因能力验证是利 用实验室间比对测试来判定实验室和检查机构能力 的活动 。能力验证是实验室重要的外部质量保证手 段 , 能增加客户及相关方对实验室出具可靠数据的 信心[8]。通过能力验证能够评定实验室从事特定检测 或测量的能力 , 识别实验室存在的问题并启动改进 措施, 提高实验室的检测能力等[9]。为提高食品中沙 门氏菌检出能力 , 2014 年本实验室参加中国食品药 品检定研究院组织的 NIFDC-PT-010 食品中沙门氏菌 检出能力验证, 取得了优异成绩。
关于食品中沙门氏菌快速检测方法的新进展
133关于食品中沙门氏菌快速检测方法的新进展刘晓霞（山西省临汾市质量技术监督检验测试所，山西临汾 041000）摘要：沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一，其文章通过对这种菌类检测方法进展的探讨人们在探索沙门氏菌检测方法的过程中作出的不懈的努力。
关键词：食品；检测；沙门氏菌自19世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来，检测方法学都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。
此后的60年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。
但有很多因素限制了用于临床病料的方法应用在食品分析上。
为克服这些困难因素，人们建立了一种简单的微生物增殖步骤，专门针对以食品为传播载体的病原。
虽然这些方法本身证明是可靠的，但却很费力、耗时，需要4～7天才能完成。
因此，在需要及时、快速评价食品中微生物的安全性时，通常不被采用。
随着DNA和抗体技术的发展，近10～15年间发展了无数改进的方法，其中许多可以在48h内检出沙门氏菌，这些方法通称为快速检测。
1 传统的培养方法用于沙门氏菌分析的传统方法是食物样品分步增菌，以增加病原的可检出率，这种培养方法总体可分4个不同阶段或步骤。
（1）(预增菌)，将样品加到一种高营养、无选择性的培养基中，温度37℃，使那些“致伤”的细菌复苏及使所有微生物生长。
虽然缓冲胨水被建议常规使用(由于其可保持溶液pH值稳定)，但对培养基的选择仍存有争论。
（2）选择性增菌步骤，它使沙门氏菌生长而使肉汤中同时存在的微生物数量减少，与预增菌培养基相似，对选择性培养基的选择，也存在许多不同的观点。
目前应用的主要有如下3种类型：连四硫基盐肉汤、硒酸盐胱氨酸肉汤和RV培养基。
由于没有任何一种培养基可以全面地保持所有食品基质或各种沙门氏菌血清型，所以，较适当的做法就是使用两种培养基平行地进行试验。
（3）分离步骤，即选择性培养物在含一种或多种抑制非沙门氏菌生长制剂的琼脂平板上划线培养，然后对平板上肉眼可见的特征性菌落进行确认，并对该菌落分离物进行一系列生化和血清学检测，以作出鉴定。
沙门氏菌几种检测方法简介与比较
VITEK
商品化生化鉴定系统
API 20E API 20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产 物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应 用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
API 20E
第1位数
O N P G 1
反应 结果
第2位数
O D C 1 CI T
第3位数
T D A 2 4 IN D
沙门菌生物学性状
不分解乳糖（亚利桑那菌除外）。分解
葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产 气）。多数产生H2S，不产生靛基质， 不液化明胶，不分解尿素，不产生乙酰 甲基甲醇，多数能利用枸橼酸盐，能还
原硝酸盐为亚硝酸盐，在氰化钾培养基
上不生长。
沙门菌常用生化试验
三糖铁（TSI）
尿素酶试验
阴性（黄）阳性（红）
VIDAS（生物梅里埃公司） BAX （杜邦公司）
沙门菌仪器检测法
VIDAS 应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪 ， 用荧光分析技术通过固相吸附器，用已知抗体来捕 捉目标生物体，然后以带荧光的酶联抗体再次结合， 经充分冲洗，通过激发光源检测，即能自动读出发 光的阳性标本，其优点是检测灵敏度高，速度快， 可以在48小时的时间内快速鉴定沙门氏菌、大肠杆 菌O157：H7、单核李斯特菌，空肠弯曲杆菌和葡 萄球菌肠毒素等。
急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、
肠炎杆菌等引起。
败血症：常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。
沙门菌生物学性状
大小0.6～1.0×2～3um，无芽胞， 一般有鞭毛(鸡沙门菌除外)，无荚 膜，多数有菌毛，革兰氏阴性杆菌， 需氧或兼性厌氧，最适生长温度为 35～37℃，最适pH值为6.8～7.8。
食品中沙门氏菌检验方法的研究
食品中沙门氏菌检验方法的研究摘要：目的：从各类食品中分离沙门氏菌。
方法：按照国家标准检验方法从各类食品中分离培养出沙门氏菌，用VITEK-2 Compact进行鉴定，再以血清凝集实验进行分型；采用荧光定量PCR 方法进行鉴定。
结果： 100份食品样品中，共分离出沙门氏菌6株，阳性率为6%。
采用荧光定量PCR 方法进行鉴定，结果全部相符。
结论：要针对地域特点，食品种类，对沙门氏菌进行有效的预防控制。
关键词：沙门氏菌；食品；荧光定量PCRAbstract: Objective: to isolate Salmonella from various foods. Methods: Salmonella was isolated and cultured in all kinds of food according to the national standard test method. VITEK-2 Compact was used to identify the bacteria, and thenthe serological agglutination test was used to identify the bacteria. The fluorescence quantitative PCR method was used to identify the bacteria. Results: among the 100 food samples, 6 strains of Salmonella were isolated, with a positive rate of 6%. The results were all confirmed by fluorescence quantitative PCR. Conclusion: Salmonella should be effectively prevented and controlled according to regional characteristicsand types of food.Keywords: Salmonella; food; fluorescent quantitative PCR沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一，其病原沙门氏菌属于肠道细菌科【1】。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种能够引起食物中毒的细菌，它会在食品生产和加工过程中引起污染，导致食品中毒事件的发生。
对食品中的沙门氏菌进行检验及分析是非常重要的，可以保障食品安全，保护消费者的健康。
一、沙门氏菌的检验方法1. 检验样品的选择要进行沙门氏菌的检验，首先需要选择检验样品。
常见的样品包括生鲜肉类、禽类、蛋类、奶制品、水产品、蔬菜和水果等。
2. 检验方法沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。
传统培养法：通过在适宜的培养基上培养样品中的沙门氏菌，并进行培养时间、培养温度和培养后的观察来进行检验。
分子生物学方法：包括PCR、实时荧光PCR、蛋白质芯片技术等。
3. 检验过程（1）样品的制备：将样品进行预处理，如样品减容、均质化、稀释等。
（2）沙门氏菌的分离：将样品在培养基上进行分离培养，并进行相应的筛选和鉴定。
（3）菌落的计数：通过计数方法，对沙门氏菌的数量进行测定。
（4）沙门氏菌的鉴定：对分离出的沙门氏菌进行鉴定，确认其种属和毒力类型。
4. 结果分析通过检验分析得到的结果，对样品是否超标、是否存在沙门氏菌污染等进行判断和分析。
二、沙门氏菌的分析意义2. 生产质量对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以对生产工艺进行控制，确保生产过程的卫生安全，保障产品的质量。
3. 公共卫生及时对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以帮助卫生监管部门掌握食品安全情况，及时采取措施，有效保护公共卫生。
4. 营养健康保障食品安全，避免食品中毒事件的发生，对促进人们的营养健康具有重要意义。
三、沙门氏菌的预防控制为了有效预防和控制沙门氏菌污染，可以采取以下措施：1. 生产环节控制合理设计食品生产线，加强生产卫生管理，确保生产过程中的卫生安全。
2. 原料筛选选择优质原料，确保原料的卫生安全性。
3. 加工控制加强食品加工的卫生监管，保障食品加工过程中的卫生安全。
4. 检验监控加强对食品中沙门氏菌的检验监控，确保食品质量和食品安全。
食品中沙门氏菌检测方法比对
食品中沙门氏菌检测方法比对摘要：本实验采用国标、VIDAS和快速测试片三种检测方法，对ACAS组织的冻干粉（模拟食品）中沙门氏菌的测定能力验证样品进行检测，证明VIDAS和快速测试片具有检测灵敏度高、特异性强、时耗短和效率高等特点。
关键词：GB 4789.4-2016； VIDAS；快速测试片；沙门氏菌沙门氏菌是一群寄生于人或动物肠道内的革兰氏阴性肠道杆菌，是一种重要的人畜共患病原菌。
主要通过动物的消化道传染致病，可引起伤寒、食物中毒、急性肠胃炎等多种疾患，由于沙门氏菌在自然界广泛存在，且对人类健康具有很大的威胁，故世界各国普遍规定食品中不得检出沙门氏菌。
我实验室在2022年ACAS组织的“冻干粉（模拟食品）中沙门氏菌的测定的能力验证”中应用 VIDAS、快速测试片和GB 4789.4-2016三种不同的检测方法检出了四例沙门氏菌，现报告如下：１．材料和方法1.1供试样品ACAS提供的四份能力验证样品、一份自制阳性质控样品和一份自制阴性质控样品。
1.2仪器VIDAS：购于法国生物梅里埃公司。
生化培养箱：购于上海一恒科技公司。
实验菌株：沙门氏菌标准菌株和粪肠球菌标准菌株，由CICC菌种保藏中心提供。
1.3试剂VIDAS沙门氏菌试剂盒：购于法国梅里埃公司。
沙门氏菌生化鉴定试剂盒：购于北京陆桥技术股份有限公司。
沙门氏菌诊断血清：购于兰州生物制品研究所。
1.4培养基沙门氏菌增菌培养基:BPW、SC、TTB、RVS和M肉汤。
沙门氏菌选择性培养基：BS、XLD和沙门氏菌显色培养基。
沙门氏菌初步鉴别培养基：三糖铁琼脂（TSI）。
沙门氏菌快速测试片，以上培养基均购于北京陆桥技术股份有限公司1.5检测方法1.5.1 VIDAS法：按VIDAS工业试剂培训手册执行1.5.2国标法：GB 4789.4-20161.5.3快速测试片法：快速测试片使用说明1.6检测步骤1.6.1GB 4789.4-2016检测步骤1.6.1.1无菌操作吸取25mL样品于225mL灭菌BPW中，拍打均质1min，36℃培养18h。
四种分离式培养基检测沙门氏菌的效果比对
四种分离式培养基检测沙门氏菌的效果比对作者：黄耀雄，胡海艳，郑苗，张显勇，梁翠琴来源：《现代食品》 2017年第6期摘要：目的：为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作,使检测工作更加准确、高效，保障食品安全，开展此项目的研究。
方法：参照食品国家标准食品微生物检验GB 4789.4-2010食品中沙门氏菌的检验和GB4789.28-2013培养基和试剂的质量要求。
结果：本次研究选用的沙门氏菌显色培养基（CAS）、亚硫酸铋琼脂（BS）、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）和HE琼脂（HE）4种培养基的生长率、选择性、特异性均符合GB4789.28-2013中的要求，通过实际加标的结果对比分析发现，显色培养基CAS要优于BS、XLD、HE培养基。
结论：在这四种分离式培养基中，显色培养基CAS在分离食品中的沙门氏菌过程中特异性和敏感性是最好。
在实际的检测过程中，应灵活运用选择合适的培养基，减少漏检。
关键词：沙门氏菌；培养基；分离效果比较揶浍卸室卸巍揶浍卸卸，垓萋�橥砘嬖停，瘾椹瞍煅�世�讵猿婿哝，憷煅蹂挽�钴猿芑戢卸，爿讵憷徐跆瘾椹钴麟刳丝。
瞍洳卸圊爿讵耖愿耖70%ⅵ80%毽揶浍卸熠衙钴，蘖爿�憷呷钴肟、颖�世黏�[1]，对分离出的沙门氏菌流行病的研究十分必要。
现如今在食品中检测沙门氏菌的方法主要是常规的生化检测方法、分子生物学方法以及免疫学检测，把目标检测菌从样品中分离出来主要采用常规培养基培养分离。
为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作，做好食品安全风险检测，保障食品安全，开展如下研究。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311、金黄色葡萄球菌ATCC6538、奇异变形杆菌CMCC49106、粪肠球菌ATCC19433（广东省微生物种质资源库）。
1.1.2 培养基与试剂沙门氏菌显色培养基（CAS）（法国科玛嘉公司），缓冲蛋白胨水（BPW）、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）、亚硫酸铋琼脂（BS）、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、HE琼脂（HE）、胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）（北京陆桥技术股份有限公司）。
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脱水蔬菜中沙门氏菌不同检测方法的对比研究
陈炜,王德军,马巧兰,纳秀萍
(宁夏出入境检验检疫局,宁夏银川750001)
摘要:运用自动荧光酶标分析仪和国家标准(常规方法)分别对同一种脱水蔬菜样品和沙门氏菌的标准菌株进行检测。
经对检测结果进行对比,运用自动荧光酶标分析仪检测脱水蔬菜中的沙门氏菌灵敏度高、速度快,完全满足检验检疫系统快速检测的需要。
关键词:脱水蔬菜;沙门氏菌;检测方法
中图分类号:TS255.52;S41-33;R378.22文献标识码:B文章编号:1002-204X(2003)01-0024-02
脱水蔬菜是我区重要的出口产品之一,其质量直接影响创汇。
近几年来无论是消费者还是检验机构对食品的安全卫生问题日趋重视,在我国加入WTO后,越来越多的外商在外贸合同中严格规定了对脱水蔬菜中沙门氏菌进行检测的条款,而现在常用的检测沙门氏菌的方法是按国家标准GB4789.4-94(1)进行的,该方法繁琐复杂,检测时间太长,已远远不能满足对外贸易的需要。
近些年来,随着科学技术的飞速发展,出现了一种新型的微生物检测仪器)))自动荧光酶标分析仪(MINI VIDAS),并已在禽肉制品、乳制品沙门氏菌检测中得到了初步试验(2),但在脱水蔬菜的沙门氏菌检测中,报道较少。
本课题的研究,主要应用/自动荧光酶标分析仪0检测沙门氏菌并与国家标准GB4789.4-94检测方法进行比较,以加快脱水蔬菜检验微生物指标的检测速度,从而进一步把好出口脱水蔬菜的质量关。
1方法和器材
1.1仪器及试剂
仪器:自动荧光酶标分析仪(MINI VIDAS)
培养基:按国家标准和自动荧光酶标分析仪操作手册分别制备相应的培养基。
标准菌株:伤寒沙门氏杆菌,菌株编号50086-4,来自于国家质检总局商检研究所。
1.2样品制备
两种检测方法的采样制样方式基本相同,均按国家标准GB4789.1-94(3)和GB4789.4-94中的要求进行。
1.3实验方法
1.3.1GB4789.4-94方法
收稿日期:2002-12-20
最为适宜,以后视墒情适当浇水。
宁夏3月下旬栽根段,4月下旬~5月初苗芽出土。
4.2嫁接繁殖法
为加快香花槐繁殖速度,满足社会需求,在1999年秋和2000年春采用不同时间不同方法进行嫁接试验,发现春季低位切接最好,成活率95%,当年苗高达3m以上。
现将低位切接法介绍如下:
4.2.1砧木准备
用50cm行距播种刺槐种子,第二年春季苗木基部粗度达0.8cm的均可嫁接,1~1.5cm最好,当年秋季即可出圃。
如果培育大苗,可留株距40cm,多余苗以相同株行距移栽另地继续培育;也可用40cm@50cm株行距栽植1年生刺槐苗,第二年春天嫁接。
4.2.2剪砧、切砧
播种苗留10cm高剪砧,移栽苗要低于lOcm剪砧。
剪口略倾斜,要光滑,或用嫁接刀削光斜面,然后在斜面的低处用嫁接刀略带木质向下削1个3cm长,且要光滑平整的切口,并留住切下略带木质的部分。
4.2.3选削接穗
选取无病虫、枝皮光滑、接芽饱满的枝段,离芽下3cm 剪断。
靠砧木面也是接芽对面,削长3cm,,厚略带木质的光滑平整削面,将背砧木面削一短小削面即可,在小削面上面保留一芽剪断接穗备用。
4.2.4插接穗、绑缚和松绑
将砧木、接穗形成层对端并插入接穗,深度达接穗削口基部并将砧木上削下的小薄部分扶上,借以包住接穗外部,用左手指固定接穗,用右手持薄膜带先绑砧木部分,然后向上将接穗剪口及除接芽外的其余部分绑缚严密,并绕回至砧木部分打结固定即成。
当接芽生长至20~30cm高时,可从砧木面用利刀划破绑膜带取掉绑膜。
以后的管理同一般嫁接苗。
责任编辑:褚庆芳
242003年第1期宁夏农林科技
称取25g脱水蔬菜样品加入装有225ml缓冲蛋白胨水的瓶中,于36?1e培养4h,然后各吸取10ml分别转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液和100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,于36?1e培养18~24h。
取上述增菌液1环划线接种于1个亚硫酸铋琼脂平板(BS)和1个DHL琼脂平板上,于36?1e培养18~24h(D HL)或40~48h(BS),观察菌落。
挑取可疑菌落分别接种于三糖铁琼脂、蛋白胨水(靛基质)、尿素琼脂、氰化钾培养基和赖氨酸脱羧酶培养基,于36?
1e培养18~24h,对以上生化反应进行结果判断,必要时补做ONPG、甘露醇和山梨醇试验。
报告结果。
1.3.2自动荧光酶标分析仪(MINI VIDAS)方法
原理:以酶联荧光免疫(ELFA)为基础检测沙门氏菌抗原,所有试验步骤均由VIDAS系统自动完成。
固相容器(SPR)起固相和加样器作用,SPR用高度特异的单克隆抗体包被。
待测样本经过前增菌、选择性增菌和后增菌后,再将煮沸过的增菌肉汤加于试剂条上,样本将在SPR内自动定时循环,如果样本中有沙门氏菌抗原则与SPR内侧包被的单克隆抗体结合,所有未结合的样本则被洗去。
标记有碱性磷酸酶的抗体在SPR内、外循环并与SPR壁上的任何沙门氏菌抗原结合,最后洗去未结合的复合物。
底物磷酸4-甲基伞形酮则被SPR壁上的酶分解成有荧光的产物4-甲基伞形酮,VIDAS的光扫描仪自动测定其荧光强度,根据所测荧光强度得出试验值(RFV)并和标准比较,然后判断出样本阳性或阴性结果。
方法:将脱水蔬菜样品按1B10比例稀释于缓冲蛋白胨水中,在36?1e培养18~24h。
以下操作分两步进行:(1)吸取0.1ml缓冲蛋白胨水加于10ml RV肉汤中,在41~42e 培养6~8h,然后吸取1ml RV肉汤加到10ml M肉汤中于41 ~42e培养18h;(2)吸取1ml缓冲蛋白胨水加于10ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液中在35~37e培养6~8h,然后吸取1ml 亚硒酸盐胱氨酸增菌液加到10ml M肉汤中于41~42e培养18h。
最后再从(1)(2)两步中的M肉汤里各吸取1ml放入同一试管中于100e水浴中煮沸15min,然后吸取500L l按仪器使用说明注入试剂条中,上机操作。
仪器运行45min后自动分析结果并打印出报告。
1.3.3用沙门氏菌标准菌株按以上两种方法增菌培养并和脱水蔬菜样品同步进行测试。
2结果(附表)
3讨论
3.1运用以上两种方法对同一种脱水蔬菜样品和沙门氏菌标准菌株进行对比试验,其结果完全一致(见附表)。
3.2国家标准GB4789.4-94作为检验沙门氏菌的常规经典培养方法,其检验结果是准确可靠的,但是检验时间太长(一般需要5~7天),过程复杂,已经不太适应进出境食品快速检验的要求,而且沙门氏菌作为一种食源性的致病菌是食品安全卫生检验中的必检项目,其危害性也要求医疗机构和检验机构能够快速鉴别。
3.3本次实验初步验证了自动荧光酶标分析仪(MINI VI-DAS)检测脱水蔬菜中的沙门氏菌具有自动化程度高、时间短(48小时即可出结果)、操作简便、灵敏度强等优点,但是该仪器所配备的试剂价格较贵,导致其检测费用比常规培养方法略高,因此较为适合样品检测量多的检验机构、食品企业以及医疗卫生机构。
3.4常规培养方法是通过增菌、分离、生化试验、血清学分型鉴定等过程来检测沙门氏菌,而自动荧光酶标分析仪(M INI VIDAS)只需要对增菌液进行检验,就能用已知的抗体来检测相对应的抗原,从而判定样品中是否含有沙门氏菌。
3.5本次实验仅限于脱水蔬菜样品的检验,对于其它种类的食品有待于作进一步更深入的试验研究。
4结论
通过本次对比实验我们初步认为,自动荧光酶标分析仪(MINI VIDAS)检测脱水蔬菜中的沙门氏菌,其结果是较为可靠的,检测时间也比常规培养方法大为缩短。
因此作为一种快速初筛方法用来检测沙门氏菌是完全可行的,符合快速检测的要求。
附表两种检测方法的结果对照
样品
方法常规法
GB4789.4-94
自动荧光酶标分析仪
(MINI VIDAS)方法青刀豆阴性阴性
青刀豆阴性阴性
芹菜粒阴性阴性
芹菜粒阴性阴性
菠菜粉阴性阴性
菠菜粉阴性阴性
枸杞子阴性阴性
枸杞子阴性阴性
青椒粒阴性阴性
青椒粒阴性阴性伤寒沙门氏菌标准菌株1阳性阳性
伤寒沙门氏菌标准菌株2阳性阳性
参考文献:
[1]中华人民共和国国家标准GB4789.4-94食品卫生微
生物学检验.沙门氏菌检验.1994.
[2]工业微生物系统介绍.法国生物)梅里埃公司.1997.
[3]中华人民共和国国家标准GB4789.1-94食品卫生微
生物学检验.总则.1994.
责任编辑:褚庆芳
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宁夏农林科技2003年第1期。