霍乱的实验室检测课件
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霍乱ppt课件
和健康教育等。
03
疫苗研发与应用
目前尚无针对霍乱的特效药物，疫苗是预防霍乱的重要手段。然而，现
有疫苗保护效果有限，且存在接种不便、成本较高等问题。
未来发展趋势预测
1 2 3
加强全球合作
随着全球化进程的加速，各国在霍乱防控领域的 合作将更加紧密，共同应对全球公共卫生挑战。
提升防控能力
各国将加大对霍乱防控的投入，提高卫生设施水 平、加强疫情监测和预警能力，以及推动疫苗研 发和应用。
保护易感人群
加强健康教育，提高公众 对霍乱的认知水平。积极 锻炼身体，提高身体免疫 力。
疫苗接种与免疫保护
疫苗接种
接种霍乱疫苗是预防霍乱的有效措施之一。目前主要有注射 疫苗和口服疫苗两种类型。接种对象主要为旅行者、军人、 儿童等高危人群。
免疫保护
接种疫苗后，人体会产生免疫力，从而有效预防霍乱的发生 。疫苗的保护期限一般为数年，需定期接种以维持免疫力。 同时，保持良好的个人卫生习惯和生活方式也有助于增强免 疫力，预防霍乱的发生。
分型
根据病情严重程度和病程长短，霍乱可分为轻型、中型和重型三种类型。其中 轻型患者症状较轻，中型患者症状明显，重型患者则病情严重，死亡率较高。
02
霍乱诊断与鉴别诊断
诊断依据及标准
80%
流行病学史
在霍乱流行区域或季节内，有与 霍乱患者接触史或饮用了可能被 污染的水源。
【传染病学】霍乱PPT课件
（三）带菌者：
无霍乱临床表现，但粪便、呕吐物或肛拭子细
培养分离到O1群和（或）O139群霍乱弧菌者。
鉴别诊断（1）
细菌性食物中毒 * 不洁食物史 * 集体发病 * 先吐后泻，剧烈腹痛、发热 * 无米泔样粪便及肌痉挛 * 呕吐物及粪便培养 副溶血性弧菌、葡萄球菌、变性杆菌、 蜡样芽孢杆菌等
鉴别诊断（2）
流行病学（1）
传染源：病人和带菌者
中、重型病人 （重要传染源） 轻型、隐性感染病者 （危险传染源） 潜伏期和恢复期带菌者 （ 次要地位）
传播途径：借污染的水和食物经口感染
污染的海产品如鱼虾等 日常生活接触（手）和苍蝇
流行病学（2）
人群易感性：普遍易感，感染后一定免疫
力（抗菌抗体和抗肠毒素抗体），但再感 染报道
腹泻停止，脱水纠正，症状逐渐消失，生 命体征稳定（血压脉搏体温），少数有反应 性低热（循环改善肠毒素吸收可能），持续 1-3天自行消退。
临床表现（4）
临床类型： * 按脱水程度、血压、脉搏及尿量 分为：轻、中、重三型
* 干性霍乱（暴发性霍乱）：罕见 起病急骤，发展迅速，尚未出现明
显吐泻症即进入中毒性休克而死亡。
WHO:ORS配方：葡萄糖20g，氯化钠3.5g 碳酸氢钠2.5g,氯化钾1.5g溶于
1000ml饮用水内。
治 疗（4）
抗菌药物治疗：辅助措施 缩短病程
无霍乱临床表现，但粪便、呕吐物或肛拭子细
培养分离到O1群和（或）O139群霍乱弧菌者。
鉴别诊断（1）
细菌性食物中毒 * 不洁食物史 * 集体发病 * 先吐后泻，剧烈腹痛、发热 * 无米泔样粪便及肌痉挛 * 呕吐物及粪便培养 副溶血性弧菌、葡萄球菌、变性杆菌、 蜡样芽孢杆菌等
鉴别诊断（2）
流行病学（1）
传染源：病人和带菌者
中、重型病人 （重要传染源） 轻型、隐性感染病者 （危险传染源） 潜伏期和恢复期带菌者 （ 次要地位）
传播途径：借污染的水和食物经口感染
污染的海产品如鱼虾等 日常生活接触（手）和苍蝇
流行病学（2）
人群易感性：普遍易感，感染后一定免疫
力（抗菌抗体和抗肠毒素抗体），但再感 染报道
腹泻停止，脱水纠正，症状逐渐消失，生 命体征稳定（血压脉搏体温），少数有反应 性低热（循环改善肠毒素吸收可能），持续 1-3天自行消退。
临床表现（4）
临床类型： * 按脱水程度、血压、脉搏及尿量 分为：轻、中、重三型
* 干性霍乱（暴发性霍乱）：罕见 起病急骤，发展迅速，尚未出现明
显吐泻症即进入中毒性休克而死亡。
WHO:ORS配方：葡萄糖20g，氯化钠3.5g 碳酸氢钠2.5g,氯化钾1.5g溶于
1000ml饮用水内。
治 疗（4）
抗菌药物治疗：辅助措施 缩短病程
霍 乱 PPT课件
[预防] 一．控制传染源 二．切断传播途径 三．提高人群免疫力
谢谢
2．抑制绒毛细胞对Na-，cl- 离子的吸收， 使Nacl在肠腔中积聚，引起水样腹泻。
3. CT作用于肠道杯状细胞，使大量粘液 微粒出现于粪便中，形成泔样大便。
一．病理解剖 严重脱水 内脏体积缩小，变性，坏死 [临床表现] 潜伏期1—3d（数h—6d）
一．典型霍乱：病程分三期 A． 泻吐期，无痛性腹泻，不发热，腹泻剧烈, 米 泔水样大便1—2d，无里急后重。 B． 脱水期 中 重：BP↓循环衰竭，水电解质平衡紊 乱低Na,K），酸中毒, 急性肾衰 C.恢复期 反应性发热 1—3d 儿童多见
[流行病学] 一．传染源 二．传播途径 三．易感人群 四．流行特征 1. 季节：夏秋 2.地方性：印度恒河三角洲地区：古典型的地方 性疫源地。 印尼苏拉威西岛：埃尔托型的地方性 疫源地。 3.O139霍乱流行特征：疫情来势猛,传播快,人群遍 易感。
[发病机制与病理解剖]
一．发病机制
霍乱弧菌
小肠，在碱性环境
根据其O抗原由3种抗原因子。 A，B，C组成，又可分三个血清型:
小川型（A.B） 稻叶型（A.C） 彦岛型（A.B.C）
毒素： 肠毒素（即霍乱毒素Cholera foxin , CTX）
是致泻毒素中最为强烈的毒素， 不耐热，56℃，30分钟被破坏。 神经氨酸酶 血凝素 内毒素 五．抵抗力 对干，热消毒剂均敏感，煮沸1~2分钟可 杀死，在正常胃酸仅存活4分钟。
谢谢
2．抑制绒毛细胞对Na-，cl- 离子的吸收， 使Nacl在肠腔中积聚，引起水样腹泻。
3. CT作用于肠道杯状细胞，使大量粘液 微粒出现于粪便中，形成泔样大便。
一．病理解剖 严重脱水 内脏体积缩小，变性，坏死 [临床表现] 潜伏期1—3d（数h—6d）
一．典型霍乱：病程分三期 A． 泻吐期，无痛性腹泻，不发热，腹泻剧烈, 米 泔水样大便1—2d，无里急后重。 B． 脱水期 中 重：BP↓循环衰竭，水电解质平衡紊 乱低Na,K），酸中毒, 急性肾衰 C.恢复期 反应性发热 1—3d 儿童多见
[流行病学] 一．传染源 二．传播途径 三．易感人群 四．流行特征 1. 季节：夏秋 2.地方性：印度恒河三角洲地区：古典型的地方 性疫源地。 印尼苏拉威西岛：埃尔托型的地方性 疫源地。 3.O139霍乱流行特征：疫情来势猛,传播快,人群遍 易感。
[发病机制与病理解剖]
一．发病机制
霍乱弧菌
小肠，在碱性环境
根据其O抗原由3种抗原因子。 A，B，C组成，又可分三个血清型:
小川型（A.B） 稻叶型（A.C） 彦岛型（A.B.C）
毒素： 肠毒素（即霍乱毒素Cholera foxin , CTX）
是致泻毒素中最为强烈的毒素， 不耐热，56℃，30分钟被破坏。 神经氨酸酶 血凝素 内毒素 五．抵抗力 对干，热消毒剂均敏感，煮沸1~2分钟可 杀死，在正常胃酸仅存活4分钟。
霍乱实验室检测
O1群和O139群抗原构造与血清分型
群特异性抗原 型 别 A 小川 + O139 B + C +少量 型特异性抗原
稻叶
彦岛 O139
+
+ — +
—
+ —
+
+ —
国内商品化的霍乱检测血清
国外血清：日本生研，泰国S&A血清等
进一步实验
氧化酶试验 1％盐酸对氨基二甲基苯胺或盐酸 二甲基对苯二胺水溶液
胶体金检测条 荧光PCR检测
检测工作中应关注的事项
样品的采集和运输
采集：
病例：粪便、肛拭子、呕吐物 未使用抗生素之前 “健康”人：粪便、肛拭子 其他传播环节的标本：食物、水、环境类样品…… 监测：水样，水产品等
运输：
一般要求在3小时内室温（20-25 ℃ ）条件下送达实验室检测 C-B运输培养基（pH8.4）; （或文腊二氏保存液） 碱性蛋白胨水（pH8.4-9.2） ：不是最佳的，尤其6小时内还不能进 行培养时，尽量采用 C-B运输培养基。
霍乱的实验室检测
霍乱概述
什么是霍乱?
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae） 引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波 及范围广、危害严重的甲类传染病。
古典生物型 O1群 埃尔托生物型 霍乱弧菌 O139群（Bengal） 非O1群 O2-O200群 腹泻病原菌 小川型 Ogawa (AB) 稻叶型 Inaba (AC) 彦岛型 Hikojim (ABC) 霍乱病原菌
霍乱弧菌实验室检验技术PPT课件
+ 颈椎病治疗的新进展 + 脊柱生物学的新进展
+ 脊柱畸形手术的新进展
+ 脊髓损伤治疗的新进展 + 腰椎疾病治疗的新进展
+ 关于脊髓型颈椎病的多项观察性研究及一系列系统回顾分析
为颈椎病的临床治疗提供了依据。
+ 颈椎的矢状位对齐对脊柱总体的平衡性和其与颈椎疼痛，神
经功能障碍的相关性也得到了较准确的评估。
+ 重组骨诱导蛋白质
临床使用“INFUSE”的风险和收益需要进行充分的权衡。在
前路颈椎手术中使用“INFUSE”，术后出现血清肿和食道吞咽困 难的发生率增加。近期的研究已经证实， “INFUSE”的局部副 反应和剂量呈现相关性。在多节段颈椎前路融合术中，若
“INFUSE”的使用量不超过 1.1mg/ 节段，则在提高脊柱融合率
（rhBMPs ）上。
+ 关于椎间盘退变的生物学治疗方法的相关研究。
+ 重组骨诱导蛋白质
2013 年整年，脊柱外科学界对 rhBMP-2 在脊柱手术中的应用给予 了极大的关注。自 2011 年开始，“INFUSE” （一种 RhBMP 物质）和 逆行性射精，肿瘤发生等相关性已经开始为学者所重视。 在 2013 年的七月份，两个独立的评估小组对美国耶鲁大学的 OA 数据库内的美敦力公司明星产品“ INFUSE”的相关实验数据进行汇 总分析： 1.一个 meta 分析结论认为使用 “INFUSE”可以获得更高的融合 率，另一项 meta 分析则认为使用 “INFUSE”仅可轻度提升融合率。 2.一项研究发现在术后 24 月内会增高肿瘤的发生风险，但在 48 月时上述差异消失，而另一项研究则未发现肿瘤发生率有显著差别。 3. 两项研究均未发现使用 “INFUSE”会增加逆行性射精发生的风 险。
+ 脊柱畸形手术的新进展
+ 脊髓损伤治疗的新进展 + 腰椎疾病治疗的新进展
+ 关于脊髓型颈椎病的多项观察性研究及一系列系统回顾分析
为颈椎病的临床治疗提供了依据。
+ 颈椎的矢状位对齐对脊柱总体的平衡性和其与颈椎疼痛，神
经功能障碍的相关性也得到了较准确的评估。
+ 重组骨诱导蛋白质
临床使用“INFUSE”的风险和收益需要进行充分的权衡。在
前路颈椎手术中使用“INFUSE”，术后出现血清肿和食道吞咽困 难的发生率增加。近期的研究已经证实， “INFUSE”的局部副 反应和剂量呈现相关性。在多节段颈椎前路融合术中，若
“INFUSE”的使用量不超过 1.1mg/ 节段，则在提高脊柱融合率
（rhBMPs ）上。
+ 关于椎间盘退变的生物学治疗方法的相关研究。
+ 重组骨诱导蛋白质
2013 年整年，脊柱外科学界对 rhBMP-2 在脊柱手术中的应用给予 了极大的关注。自 2011 年开始，“INFUSE” （一种 RhBMP 物质）和 逆行性射精，肿瘤发生等相关性已经开始为学者所重视。 在 2013 年的七月份，两个独立的评估小组对美国耶鲁大学的 OA 数据库内的美敦力公司明星产品“ INFUSE”的相关实验数据进行汇 总分析： 1.一个 meta 分析结论认为使用 “INFUSE”可以获得更高的融合 率，另一项 meta 分析则认为使用 “INFUSE”仅可轻度提升融合率。 2.一项研究发现在术后 24 月内会增高肿瘤的发生风险，但在 48 月时上述差异消失，而另一项研究则未发现肿瘤发生率有显著差别。 3. 两项研究均未发现使用 “INFUSE”会增加逆行性射精发生的风 险。
霍乱弧菌实验室检测完整版
PCR检测阳性或粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱弧菌快速辅助检测试验阳性 ；
中、重型病例 。 临床诊断病例：符合下列任一类病例均为临床诊断病例。 临床表现为轻、中、重型或中毒型病例，并在腹泻病患者日常生活用品或家居环境中
检出O1群或/和O139群霍乱弧菌；
在一起确认的霍乱暴发疫情中，暴露人群中临床表现为轻、中、重型或中毒型病例。 实验室确诊病例： 临床病人并粪便、呕吐物或肛拭子细菌培养分离到O1群或/和O139群霍乱弧菌 ； 在疫源检索中，粪便培养检出O1群或O139群霍乱弧菌前后各5天内有腹泻症状者。
Variant B
Outbreak
C
关系? 关联? 溯源：
- 流行病学证据? - 实验室证据?
获得一个细菌染色体DNA的指纹图谱:
细菌染色体DNA 限制性内切酶 凝胶和专用电泳仪
电泳图谱
BioNumerics --- 数据管理和分析
实验室网络化监测的作用：暴发的发现和溯源
S
SS
流行特征：
➢ 发病急 ➢ 传播快 ➢ 波及范围广 ➢ 能引起大流行
霍乱诊断标准
带菌者：
无霍乱临床表现，但粪便或肛拭子细菌培养检出O1群或/和O139群霍乱弧菌者。
疑似病例：下列任一类病例均为疑似病例。 与霍乱病人或带菌者有密切接触史或共同暴露史，临床表现为轻型病例 ； 临床表现为轻型病例 或中毒型病例，并粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱毒素基因
中、重型病例 。 临床诊断病例：符合下列任一类病例均为临床诊断病例。 临床表现为轻、中、重型或中毒型病例，并在腹泻病患者日常生活用品或家居环境中
检出O1群或/和O139群霍乱弧菌；
在一起确认的霍乱暴发疫情中，暴露人群中临床表现为轻、中、重型或中毒型病例。 实验室确诊病例： 临床病人并粪便、呕吐物或肛拭子细菌培养分离到O1群或/和O139群霍乱弧菌 ； 在疫源检索中，粪便培养检出O1群或O139群霍乱弧菌前后各5天内有腹泻症状者。
Variant B
Outbreak
C
关系? 关联? 溯源：
- 流行病学证据? - 实验室证据?
获得一个细菌染色体DNA的指纹图谱:
细菌染色体DNA 限制性内切酶 凝胶和专用电泳仪
电泳图谱
BioNumerics --- 数据管理和分析
实验室网络化监测的作用：暴发的发现和溯源
S
SS
流行特征：
➢ 发病急 ➢ 传播快 ➢ 波及范围广 ➢ 能引起大流行
霍乱诊断标准
带菌者：
无霍乱临床表现，但粪便或肛拭子细菌培养检出O1群或/和O139群霍乱弧菌者。
疑似病例：下列任一类病例均为疑似病例。 与霍乱病人或带菌者有密切接触史或共同暴露史，临床表现为轻型病例 ； 临床表现为轻型病例 或中毒型病例，并粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱毒素基因
《霍乱培训》课件
现场消毒隔离措施实施
消毒范围 对患者接触过的环境、物品进行全面 消毒，包括病房、卫生间、餐具等。
消毒方法
使用含氯消毒剂擦拭、喷洒等方式进 行消毒。
隔离措施
设立隔离区，限制人员出入，避免交 叉感染。
废弃物处理
患者产生的废弃物应按照医疗废物进 行处理，避免病毒传播。
人员安全防护要求
01
个人防护
救援人员应穿戴防护服、口罩、手 套等个人防护用品。
消灭传染源
对患者进行隔离治疗，减少病毒传播；对密切接触者进行医学观察和管理，防止疫 情扩散。
03
实验室检测与诊断技术
标本采集与保存方法
采集对象
保存方法
疑似霍乱患者的粪便、呕吐物、肛拭 子等。
将采集的标本放入无菌容器中，加入 保存液，并立即送往实验室进行检测。
采集时间
在发病早期，症状出现后的24小时内 采集。
疫情监测与报告制度
疫情监测
建立灵敏、准确的疫情监测体系，及 时发现和报告霍乱病例。
报告制度
医疗机构发现霍乱病例后，应按照相关 规定及时上报，同时做好病例的调查和 处置工作。
控制传播途径和消灭传染源
控制传播途径
加强食品卫生监管，防止食品污染；加强水源保护，确保饮用水安全；加强环境卫 生整治，减少环境污染。
仪器使用
使用全自动细菌鉴定仪、全自动生化 分析仪等仪器进行细菌鉴定和生化分 析。
霍乱的实验室检查
霍乱的实验室检查
(一)血液检查红细胞和血红蛋白增高，白细胞计数
（10~20）×109/L或更高，中性粒细胞及单核细胞增多。血清钾、钠、氯化物和碳酸盐降低，血pH下降，尿素氮增加。治疗前由于细胞内钾离子外移，血清钾可在正常范围内，当酸中毒纠正后，钾离子移入细胞内而出现低钾血症。
(二)尿检查少数病人尿中可有蛋白质、红白细胞及管型。
(三)病原菌检查
1.常规检查
(1)粪便镜检可见黏液和少许红、白细胞。取粪便或早
期培养物涂片作革兰染色镜检，可见革兰阴性稍弯曲的弧菌，无芽孢，无荚膜。O139群弧菌除了可产生荚膜外，其余与
O1群弧菌同。
(2)悬滴检查将新鲜粪便作悬滴或暗视野显微镜检，可
见运动活泼呈穿梭状的弧菌。 2.培养
(1)增菌培养所有疑为霍乱病人的粪便，除作显微镜检外，均应作增菌培养。粪便留取应在使用抗菌药物之前，且应尽快送到实验室作培养。增菌培养基一般用pH8.4的碱性蛋白胨水，36~37℃培养6～8小时后表面能形成菌膜。应进一步作分离培养、动力观察和制动试验。
(2)分离培养常用庆大霉素琼脂平皿或碱性琼脂平板。前者为强选择性培养基，36~37℃培养8~10小时霍乱弧菌即可长成小菌落。采用后者则需培养10~20小时。选择可疑或典型菌落，用霍乱弧菌“O”抗血清作玻片凝集试验，若阳性即可出报告。近年来国外亦有应用霍乱毒素基因的DNA探针作菌落杂交，可迅速鉴定出产毒素O1群霍乱弧菌。
3.免疫学试验
制动试验取急性期病人的水样粪便或碱性胨水增菌培养6小时左右的表层生长物，先作暗视野显微镜检，观察动力。如有穿梭样运动物时，则加入O1群多价血清一滴，若是O1群霍乱弧菌，由于抗原抗体作用，则凝集成块，弧菌运动停止。如加O1群血清后，不能制止运动，应再用O139血清重复试验。
霍乱弧菌医学课件
积极锻炼身体
3
加强体育锻炼、增强免疫力、提高抗病能力等 。
科学的饮食习惯
保持均衡饮食
01
多吃蔬菜、水果、全谷类和蛋白质食品，避免过多摄入高糖、
高盐、高脂肪食品。
注意饮水卫生
02
选择清洁饮用水、避免喝生水或不洁饮料等。
避免食物中毒
03
注意食品的新鲜程度和贮存条件、避免食用变质或过期食品等
。
疫苗接种建议
培养特性
霍乱弧菌对理化因素抵抗力不强，一般培养基上生长良好，在碱性环境（pH 8.8～9.0） 中繁殖迅速。
抗原结构
霍乱弧菌有O抗原和H抗原，O抗原分为137个血清型，H抗原分为1～21个血清型。
感染途径
01
水源性传播
患者和带菌者的粪便污染水源，通过水、食物等途径传播。
02
食物性传播
食物被污染后，通过食物链传播。
地区性
霍乱弧菌的流行与地理环境有关，沿海地区和内陆地区都可能发生霍乱弧菌的传播。
人群易感性
人群普遍易感，尤其是体弱多病、免疫力低下的人群更容易受到感染。
控制策略
01
预防和控制
加强水源管理，定期检测水质，做好食品卫生监督，加强健康教育，
提高人群的卫生意识和自我保护能力。
02
流行病学调查
及时开展流行病学调查，发现和控制疫情，追踪病人的接触史和流行
霍乱弧菌实验室检测
2019/8/13
注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将转种好的胨 水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步骤由微生物室来完成： 门诊在上午11：00以后收到的标本，需将转种好的胨水和患者化验单 一起放置门诊35°C的培养箱中培养，门诊拖班人员需跟当晚住院部夜 班人员交班，夜班人员需在转种胨水6-8h后看动力和转种庆大平板， 记录并审核结果，第二天由师傅将平板和化验单转运至微生物室，后 续步骤由微生物室来完成。
革兰染色
2019/8/13
电镜负染色—鞭毛
2019/8/13
• 霍乱弧菌动力视频链接 http://v.youku.com/v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
2019/8/13
三、霍乱弧菌常规检验
样本采集、送检和保存 标本的检验流程
2019/8/13
样本采集、送检和保存 • 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～3mL，亦
2019/8/13
霍乱弧菌抗原结构及分类
• 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的鞭毛（H） 抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗原有群特异性和型特异性 两种抗原，是霍乱弧菌分群和分型的基础。
• WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde）和 埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的特异抗 原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A抗原与其他B 与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC（稻叶，Inaba）、异 型——AB（小川，Ogawa）和中间型——ABC（彦岛， Hikojima）。
注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将转种好的胨 水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步骤由微生物室来完成： 门诊在上午11：00以后收到的标本，需将转种好的胨水和患者化验单 一起放置门诊35°C的培养箱中培养，门诊拖班人员需跟当晚住院部夜 班人员交班，夜班人员需在转种胨水6-8h后看动力和转种庆大平板， 记录并审核结果，第二天由师傅将平板和化验单转运至微生物室，后 续步骤由微生物室来完成。
革兰染色
2019/8/13
电镜负染色—鞭毛
2019/8/13
• 霍乱弧菌动力视频链接 http://v.youku.com/v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
2019/8/13
三、霍乱弧菌常规检验
样本采集、送检和保存 标本的检验流程
2019/8/13
样本采集、送检和保存 • 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～3mL，亦
2019/8/13
霍乱弧菌抗原结构及分类
• 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的鞭毛（H） 抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗原有群特异性和型特异性 两种抗原，是霍乱弧菌分群和分型的基础。
• WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde）和 埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的特异抗 原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A抗原与其他B 与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC（稻叶，Inaba）、异 型——AB（小川，Ogawa）和中间型——ABC（彦岛， Hikojima）。
霍乱弧菌检测ppt
-
标本采集和送检
1、粪便采集
（1）采样 应在发病早期，服用抗菌药物之 前完成，并尽快送到检验室。粪便标本采 集方法如下：用棉拭子采取自然排出的新 鲜大便，也可用直肠棉拭或采便管由肛门 插入直肠内3cm-5cm处采取，水样便采取 1ml-3ml，成型便采取指甲大小的粪便量。 病人的呕吐物，沾染粪便的衣服和用具，也 可作为检材。
TCBS 琼脂平板和一个碱性琼脂平板进行划线 分离培养。 同时，以无菌吸管吸取0.2-0.5ml 增菌液接种 到新的碱性蛋白胨水中，进行二次增菌培养后， 再如上述步骤进行划线分离培养。 特别强调所有环境样品的增菌分离培养步骤必 须包括上述二次增菌和强、弱双平板分离。
-
鉴定
TCBS上出现黄色菌落，4号琼脂或庆大霉素 平板上出现灰褐色中心的菌落，均为可疑 菌落，应使用O1群和O139群霍乱弧菌的多 价和单价抗血清进行玻片凝集试验，结合 菌落特征和菌体形态，作出初步报告。
-
霍乱弧菌染色图片
革
鞭
兰
毛
染
染
色
色
-
分群和分型：
根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个 血清群。
根据是否与O1抗血清凝集分两大群， O1群霍乱弧菌：凡能与O1群抗血清发生凝集 非O1群霍乱弧菌：凡不被O1群抗血清凝集的。
-
O1群霍乱弧菌的生物型
1、古典生物型（前六次大流行） 2、E1 Tor 生物型（第7次 1961年来）。 两个生物型具有相同的血清型。我国流行以
标本采集和送检
1、粪便采集
（1）采样 应在发病早期，服用抗菌药物之 前完成，并尽快送到检验室。粪便标本采 集方法如下：用棉拭子采取自然排出的新 鲜大便，也可用直肠棉拭或采便管由肛门 插入直肠内3cm-5cm处采取，水样便采取 1ml-3ml，成型便采取指甲大小的粪便量。 病人的呕吐物，沾染粪便的衣服和用具，也 可作为检材。
TCBS 琼脂平板和一个碱性琼脂平板进行划线 分离培养。 同时，以无菌吸管吸取0.2-0.5ml 增菌液接种 到新的碱性蛋白胨水中，进行二次增菌培养后， 再如上述步骤进行划线分离培养。 特别强调所有环境样品的增菌分离培养步骤必 须包括上述二次增菌和强、弱双平板分离。
-
鉴定
TCBS上出现黄色菌落，4号琼脂或庆大霉素 平板上出现灰褐色中心的菌落，均为可疑 菌落，应使用O1群和O139群霍乱弧菌的多 价和单价抗血清进行玻片凝集试验，结合 菌落特征和菌体形态，作出初步报告。
-
霍乱弧菌染色图片
革
鞭
兰
毛
染
染
色
色
-
分群和分型：
根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个 血清群。
根据是否与O1抗血清凝集分两大群， O1群霍乱弧菌：凡能与O1群抗血清发生凝集 非O1群霍乱弧菌：凡不被O1群抗血清凝集的。
-
O1群霍乱弧菌的生物型
1、古典生物型（前六次大流行） 2、E1 Tor 生物型（第7次 1961年来）。 两个生物型具有相同的血清型。我国流行以
霍乱PPT课件
季节性（夏秋季7-10月），近、远 距离传播。
2、O139血清型特点: A、来势猛 ,传播快,散发 ,病情较重. B、沿海地区多发. C、水、食物传播. D、与O1群及非O1群无交叉免疫力.
15
发病机制
霍乱孤菌 胃 小肠
霍乱毒素
?
肠液过度分泌
16
肠腔
霍乱毒素
细胞膜
GM1受体 前列腺素（ＰＧＥ） 腺苷酸环化酶（ＡＣ）
10
1961－2000年全球报告霍乱病例数
700000 600000 500000
病例数
400000 300000
200000 100000
0
60
65
70
75
80
85
90
95
00
11
传染源 病人、带菌者
流
行
传播途径 水、食物
病
学
Biblioteka Baidu
易感人群 普遍、隐性感染
12
霍乱传播流程图
13
14
流行病学特征： 1、地方性及流行扩散(沿海沿江地区)，
肠液分泌增加
三磷酸腺苷 （ＡＴＰ）
环磷酸腺苷 （ＣＡＭＰ）
细胞质
细胞分泌功能增强
17
霍乱孤菌 胃 小肠 霍乱毒素
循环衰竭 代谢性酸中毒 低钾综合征 急性肾功能衰竭
2、O139血清型特点: A、来势猛 ,传播快,散发 ,病情较重. B、沿海地区多发. C、水、食物传播. D、与O1群及非O1群无交叉免疫力.
15
发病机制
霍乱孤菌 胃 小肠
霍乱毒素
?
肠液过度分泌
16
肠腔
霍乱毒素
细胞膜
GM1受体 前列腺素（ＰＧＥ） 腺苷酸环化酶（ＡＣ）
10
1961－2000年全球报告霍乱病例数
700000 600000 500000
病例数
400000 300000
200000 100000
0
60
65
70
75
80
85
90
95
00
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传染源 病人、带菌者
流
行
传播途径 水、食物
病
学
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易感人群 普遍、隐性感染
12
霍乱传播流程图
13
14
流行病学特征： 1、地方性及流行扩散(沿海沿江地区)，
肠液分泌增加
三磷酸腺苷 （ＡＴＰ）
环磷酸腺苷 （ＣＡＭＰ）
细胞质
细胞分泌功能增强
17
霍乱孤菌 胃 小肠 霍乱毒素
循环衰竭 代谢性酸中毒 低钾综合征 急性肾功能衰竭
霍乱弧菌医学课件
2023霍乱弧菌医学课件
•霍乱弧菌简介
•霍乱弧菌感染的诊断与治疗
•霍乱弧菌的流行病学及控制
•霍乱弧菌感染的预防与控制建议目
•总结
录
01
霍乱弧菌简介
培养特性
霍乱弧菌对生长条件要求不高，在普通培养基上生长良好，兼性厌氧，最适生长温度为37℃，
最适pH值为8.8～9.0。
形态与染色
霍乱弧菌为革兰氏阴性杆菌，呈弧形或逗点状，菌体大小为（1～2）μm×（0.5～1）μm，无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结
构。
抵抗力
霍乱弧菌对理化因素抵抗力不
强，对常用消毒剂敏感。
生物学特性
水源性感染食物性感染接触性感染
食用被霍乱弧菌污染的食物可引起感染。与患者或带菌者直接接触可引起感染。
03
感染途径
02 01
霍乱弧菌存在于水中，经
口进入人体引起感染。
临床表现
腹泻轻，无发热，无恶心呕吐，无脱水症状，病程短，恢复快。
轻型
中型
重型
暴发型
腹泻较重，有发热、恶心呕吐、脱水症状，但无严重并发症。
腹泻严重，有严重脱水症状，伴有发热、恶心呕吐、循环衰竭等严重并发症。
起病急骤，病情进展迅速，腹泻症状严重，出现严重脱水、休克、电解质紊乱等严重并发症。
02
霍乱弧菌感染的诊断与治疗
观察患者是否有腹泻、呕
吐、发热等霍乱症状。
临床表现
通过采集患者粪便、呕吐物等样本进行培养和检测，以确定是否存在霍乱弧菌。
实验室检查
了解患者是否接触过霍乱弧菌感染者或食用过污染食物等，有助于诊断。
流行病学调查
补充患者因腹泻丢失的水分和
电解质，防止脱水。
补液治疗
使用抗生素杀死霍乱弧菌，缩短病程和降低死亡率。
抗菌治疗
针对患者出现的恶心、呕吐、腹痛等症状进行对症治疗。
支持治疗
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霍乱弧菌的分离与鉴定 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
1、样本的采集
患者的粪便、呕吐物、肛拭子为必须标本。
水样便或呕吐物采样量一般为1mL-3mL，成型 便采取指甲大小的粪量；肛拭子可用直肠棉拭 或采便管由肛门插入直肠内3cm-5cm处旋转 后取出。
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4、菌株鉴定
4.1 染色
O1群霍乱弧菌为革兰阴性、弯曲呈弧状，无芽孢， 无荚膜，菌体两端钝圆或稍平，单端鞭毛；
O139群霍乱弧菌的形态及运动与O1群霍乱弧菌 近似，但是O139群霍乱弧菌菌体周围有一层比较 薄的荚膜。
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3、分离培养
増菌后的分离培养： 所有标本均应接种碱性蛋白胨水培养基，
37℃増菌6h-8h。 从菌膜下表层取一接种环培养物，划线接种
于强、弱选择培养基各一个，37℃培养18h24h。
必要时进行二次増菌。
庆大霉素琼脂和四号琼脂：透明性略差，多呈半透明状，菌 落中央常呈灰色或灰黑色，并随培养时间的延长而加深
TCBS琼脂：黄色发亮，表面光滑、润湿、稍凸起、边缘整 齐
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3、分离培养
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落特征（18h-24h）
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4、菌株鉴定
4.4 菌株复核
经初筛阳性或可疑阳性的菌株，应尽快送当地疾病 预防控制中心进行复核鉴定。
复核结果符合O1群或O139群霍乱弧菌的菌株， 按菌株管理的要求进行保存与上送；如复核结果出 现疑问，应尽快将菌株上送省级或省级以上CDC进 行确认分析。
2、样本的送检
采得的标本应立即接种于培养基，不能立即接种 的，应放入PH值8.8-9.0碱性蛋白胨水或文腊二 氏保存液或插入Carry-Blair半固体保存培养基 中送检。 标本与保存液的比例约为1:5。
病人标本含有大量病菌，标本装入试管或小瓶时， 注意勿污染容器口外壁，必须妥善包装，运送中 注意安全。
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3、分离培养
直接分离培养： 对急性期患者水样便标本，在进行増菌培养
的同时可取一接种环或用肛拭子直接接种在选择 性培养基上，37℃培养18h-24h。
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4、菌株鉴定
霍乱弧菌纯培养的镜下形态（革兰染色）
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4、菌株鉴定
4.2 玻片凝集试验
取纯培养物与O1群霍乱弧菌诊断用单克隆抗 体或O1群多价诊断血清及O139群霍乱弧菌诊断 用单克隆抗体或诊断血清做玻片凝集试验。
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4、菌株鉴定
4.3 氧化酶试验
试剂：1%盐酸对氨基二甲苯胺或盐酸二甲基对苯 二胺水溶液
试验方法：取生长在非选择性培养基上的新鲜培养 物涂抹在清洁的滤纸上，然后滴加上述试剂，如培 养物在1-2min内出现粉红-紫红-紫蓝色，有的最 后呈紫黑色，判断为氧化酶试验阳性；培养物不显 色判为阴性。
剩余菌落亦可用来做单价血清的玻片凝集，以 确定血清型。
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4、菌株鉴定
4.2 玻片凝集试验
生长在TCBS上的疑似菌落常因培养基中蔗糖 的影响造成难于乳化，不能直接进行玻片凝集试验。
要注意同一标本存在O1群和O139群等多个 血清群霍乱弧菌混合的可能，每份标本至少挑选5 个以上的疑似菌落逐一进行鉴定。
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霍乱实验室诊断的相关实验技术
1、霍乱弧菌基因PCR检测
霍乱毒素是霍乱弧菌主要的致病因子，在霍乱诊断 上霍乱毒素基因（ctxAB）的PCR检测具有重要 的诊断价值。
特异性和灵敏度均较高， 需符合PCR试验条件的实验室， 需要严格的核酸提取操作， 直接检测是否为产毒株。
3、分离培养
强选择性培养基：庆大霉素琼脂，TCBS琼 脂和四号琼脂等 弱选择性培养基：碱性营养琼脂
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3、分离培养
不同选择培养基上生长的霍乱弧菌典型菌落ห้องสมุดไป่ตู้征：
碱性营养琼脂：较大，无色，圆形，透明或半透明、表面光 滑、湿润、扁平或稍凸起、边缘整齐，水滴状，菌落直径一 般约为2mm
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4、菌株鉴定
4.4 菌株复核 菌株的复核鉴定应以纯培养物为基础，至少应包括 以下项目：血清凝集试验与血清分型、革兰染色、 黏丝试验、氧化酶试验、动力试验。
生化反应： 葡萄糖（+）、麦芽糖（+）、 阿拉伯胶糖（-）、氧化酶（+）、 DNA酶（+）、霍乱红（+）
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霍乱的实验室检测
一 霍乱弧菌的分离与鉴定 二 霍乱实验室诊断的相关实验技术
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霍乱弧菌的分离与鉴定
1、样本的采集 2、样本的送检 3、分离培养 4、菌株鉴定