葡萄糖氧化酶生产
混合型饲料添加剂 葡萄糖氧化酶
Q/370502HLL山东好利来动物药业有限公司企业标准Q/370502HLL 012-2019 混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶Q/370502HLL 012-2019前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由山东好利来动物药业有限公司提出并起草。
本标准主要起草人：赵景强、张令令、盖超超。
混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶1 范围本标准规定了混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶产品的分类和代号、要求、抽样、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。
本标准适用于以葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，下文用GOD表示）为原料，以纯化水为载体生产的混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 10648 饲料标签GB 13078 饲料卫生标准GB/T 14699.1 饲料采样GB/T 18823 饲料检测结果判定的允许误差GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则中华人民共和国兽药典饲料添加剂目录（中华人民共和国农业农村部）2005年国家质量监督检验检疫总局第75号令《定量包装商品计量监督管理办法》3 分类和代号分类和代号见表1。
表1 分类和代号4 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
4.1 GOD活力单位在pH为5.6的磷酸缓冲液，30℃温度条件下，每分钟催化1μmol葡萄糖转化为葡萄糖酸所消耗的GOD 的量为一个活力单位，用U表示。
5 要求5.1 鉴别感官指标淡黄色至橙色透明均匀液体，气味微酸。
理化指标应符合表2的规定。
表2 理化指标5.2 pH值4.0～6.05.3 卫生指标符合GB 13078的规定。
5.4 净含量符合标签标注，偏差符合《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。
葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法关于《葡萄糖氧化酶法》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。
葡萄糖氧化酶法在生活起居中大部分人可能也没有听闻过，实际上葡萄糖氧化酶法是一种检测病人是不是高血糖，是不是患糖尿病的一种查验方式，一般较为普遍应用与医院门诊，假如高血糖或是是糖尿病人用葡萄糖氧化酶法来检验結果是十分精确的，下边实际详细介绍葡萄糖氧化酶法。
葡萄糖氧化酶法精确测量血糖浓度的详解生产基本原理疫苗葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)运用氧和水将葡萄糖空气氧化为葡萄糖酸，并释放出来双氧水。
乳酸脱氢酶(peroxidase，POD)在色原性氧蛋白激酶存有时将双氧水溶解为水和氧，并使色原性氧蛋白激酶4-羟基安替比林和酚去氢缩合反应为鲜红色醌类化合物，即Trinder反映。
鲜红色醌类化合物的产生量与葡萄糖成分正比。
生产实验试剂疫苗1．0.1mol/L聚磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)称量没有水磷酸氢二钠8.67g及没有水磷酸二氢钾5.3g溶解纯净水800ml中，用1mol/L 氢氧化钠溶液(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用纯净水定容至1L。
2．酶实验试剂称量乳酸脱氢酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-羟基安替比林10Mg，叠氮钠100mg，溶解聚磷酸盐缓冲溶液80Ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用聚磷酸盐缓冲溶液定容至100ml，置4℃储存，可平稳3月。
3．酚水溶液称量重水蒸气蒸馏酚100mg溶解纯净水100ml 中，用深棕色瓶存储。
4．酶酚混和实验试剂酶实验试剂及酚水溶液相等混和，4℃能够储放1月。
5．12mmol/L苯甲酸水溶液融解苯甲酸1.4g于纯净水约800ml 中，升温助溶，制冷后加纯净水定容至l L。
6．100mmol/L葡萄糖标准存储液称量已干躁恒重的无水葡萄糖1.802g，溶解12mmol/L苯甲酸水溶液约70Ml中，以12mmol/L 苯甲酸水溶液定容至100ml。
葡萄糖氧化酶
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直到1928年，Muller首先从黑曲霉的无细胞提取液中发现葡萄糖 氧化酶，并研究了其催化机理才正式将其命名为葡萄糖氧化酶，将其 归入脱氢酶类。此后Nakamatsu、Fiedurek、Rogalski等先后对此做了 大量研究工作并投入生产。中国从20世纪70年代开始成立了葡萄糖氧 化酶研究协作组，对其展开了系统研究工作。目前国外的葡萄糖氧化 酶生产厂家主要是德国的Boehringer和日本的Toyobo。近年来国内外 多位学者对葡萄糖氧化酶的作用机理、酶学性质、酶固定化、基因克 隆表达等方面做了大量工作取得了明显进展。
葡萄糖氧化酶
生物132班何岚
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1.葡萄糖氧化酶的介绍
葡萄糖氧化酶（Glucoseoxidase，E.C.1.1.3.4,简 称GOD）能够在有氧气的条件下专一性催化β－Ｄ－葡萄 糖生成葡萄糖酸和过氧化氢，其主要成分为β-D-葡萄糖 氧化还原酶，辅基为黄素腺嘌呤二核苷酸。它广泛地分布 于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖 速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源 ，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。
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2.2葡萄糖氧化酶开创一种全新的动物保护模式
我们知道，无论哪一种控制病原菌生长的防病措施，都有一个 防卫限度。当病菌数量多到足以突破某种防病措施的防卫限度时， 动物发病。此时，传统的使用药物防病保健放的方式就没有其他办 法了。葡萄糖氧化酶则不同，首先提升机体自身的防御功能，使防 卫限度提高，其次，即使病菌突破了葡萄糖氧化酶的防卫限度，导 致畜禽感染，它的其它功效还在继续尽力维护着机体健康。其一， 葡萄糖氧化酶改善消化吸收的功效还在持续发挥着作用，较好的保 持畜禽发病期间的采食，使畜禽有充足的营养抵抗疾病；其二，葡 萄糖氧化酶保持肠道菌群平衡的功效还在持续发挥作用，某些疾病 引起的腹泻不至于过分严重，使动物体质不至于快速下降；其三， 葡萄糖氧化酶抗氧化的功效还在持续发挥作用，较好的保持机体细 胞完整，使病菌侵害细胞的速度减缓、侵害程度减轻；其四，葡萄 糖氧化酶解除霉菌毒素的功效还在持续发挥作用，霉变饲料产生的 毒素不会对病弱畜禽造成更严重的危害。
葡萄糖氧化酶在蛋鸡生产中的应用
催化 ｐ — Ｄ 一 葡萄糖的速度要 比催化 ｏ ｚ － Ｄ 一 葡萄糖
的速度 快 １ ５ ０倍 。 ２ 葡 萄糖 氧化 酶 的生物 学功 能
ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｉ ｍｐｒ ｏ ｖ ｅ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎｍｅ ｎ ｔ ，ｉ ｍｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｆ ｅ ｅ ｄ ｃ ｏ ｎｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｏ ｎ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｃ ｙ，ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｅ ａ ｎ ｉ －
１ ． １ 葡 萄糖 氧化酶 的理 化性质 高 纯度葡 萄糖 氧化 酶为淡 黄 色粉末 ， 分 子量
为 １ ５万 左 右 。 最大光 吸收波长 为 ３ ７ ７ ｎ ｍ 和
４ ５ ５ ｎ ｍ。易溶 于水 ， 不 溶 于 乙醚 、 氯仿 、 丁醇 、 甘
油和 乙二 醇等有 机溶 剂 ， ５ ０ ％丙 酮和 ６ ０ ％ 甲醇 溶
ｔ ｒ ｙ ． Ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｓ ｃ ｏ ｎ ｓ ｉ ｄ ｅ ｒ ｅ ｄ ｔ ｏ ｂ ｅ ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｓ ｔ ｓ ａ ｆ ｅ ｆ ｅ ｅ ｄ ａ ｄ ｄ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ，ｉ ｔ ｉ ｓ ａ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｏ ｆ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ａ ｌ ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ．ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｉ ｓ ｃ ａ ｌ ｌ ｅ ｄ“ ｇ ｒ ｅ ｅ ｎ ’ ’ ａ ｄ ｄ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ． Ｇｌ ｕ ｃ ｏ ｓ ｅ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｓ ｅ ｉ ｓ ａ ｎ ｅ ｗ ｔ ｙ ｐ ｅ ｏ ｆ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ —
葡萄糖 酸、 乙醛 和水 ［ ５ ห้องสมุดไป่ตู้ ６ ］ 。此外 ， 葡萄糖 氧化 酶
葡萄糖氧化酶生产
23、6% 5% 9、2% 1、5% 1、2% 2% 15%
工厂投产后年产1000吨,实现总销售收入7200万人民币,除去 原料、设备折旧费、员工工资、管理销售等费用,每年可产生纯 利润1500万。预计三年收回投资成本。
四:目前葡萄糖氧化酶生产方法及存在得问题
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分
析
建设条件 与企业组
织
生产工艺 流程
经济与社 会效益分
析
目前已经得到商业化应用得葡萄糖氧化酶多来 源于黑曲霉或青霉发酵,但黑曲霉和青霉菌发酵过程 中会产生纤维素酶,淀粉酶,过氧化氢酶等其她多种 副产物,大量得杂蛋白对后期得分离纯化工作造成很 大得困难,也增加了生产成本。为了解决这些问题, 近年来使用基因工程菌重组表达葡萄糖氧化酶成为 研究得热点。
经济与社 会效益分
析
提问环节
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分
析
建设条件 及企业组
织
生产工艺 流程
一:建设规模
建设规模:我厂将投资4000万左右,注册资金2000万 元。建设场地面积100公亩,建筑面积80公亩,预计 年产葡萄糖氧化酶1000吨。 建设期限:2012年—2013年。
经济与社 会效益分
析
提问环节
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分
析
建设条件 与企业组
织
生产工艺 流程
经济与社 会效益分
析
一:葡萄糖氧化酶简介
葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,简称GOD)就是 一种需氧脱氢酶,能专一地氧化B—D一葡萄糖成 为葡萄糖酸和过氧化氢。高纯度GOD得制剂为淡 黄色粉末、易溶于水,完全不溶于乙醚、氯仿、 吡啶、甘油和乙二醇等。50%丙酮、66%甲醇能 使其沉淀。GOD分子中含有16%得碳水化合物(包 括大量甘露糖、半乳糖及微量葡萄糖),对碳水化 合物水解酶有抵抗性,酶蛋白氨基酸组成中天门 冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和亮氨酸含 量较高。
生产葡萄糖氧化酶流程
生产葡萄糖氧化酶流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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在进行葡萄糖氧化酶的生产之前，需要进行一系列准备工作。
葡萄糖氧化酶
发现与历史
发现
葡萄糖氧化酶最早是在1933年由德国 科学家在面包酵母中发现的。
历史
自发现以来，葡萄糖氧化酶在多个领 域得到了广泛的应用和研究，特别是 在食品工业和生物传感器领域。
结构与功能
结构
葡萄糖氧化酶是由两个相同的亚基组成的二聚体，每个亚基包含一个铜离子和 一个蛋白质分子。
功能
该酶的主要功能是催化葡萄糖与氧气的反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢。此外， 葡萄糖氧化酶还具有一些其他的功能，如抑制肿瘤细胞生长和调节免疫反应等。
葡萄糖氧化酶还可用于生物传感器制造，通过 检测葡萄糖含量变化来监测环境中的污染物或 有毒物质。
葡萄糖氧化酶在环境保护领域还有潜在的应用 价值，如用于土壤修复和生态恢复等。
04
葡萄糖氧化酶的提取与 纯化
提取方法
01
02
03
04
酸提取法
利用酸性条件溶解细胞，释放 出葡萄糖氧化酶，再经过离心
分离得到粗酶液。
葡萄糖氧化酶还可用于药物研发，作为药物筛选的工具酶，帮助筛选具有药理活性的小分子化合物。
葡萄糖氧化酶在医疗领域还有潜在的应用价值，如用于治疗糖尿病等代谢性疾病，以及用于肿瘤免疫治 疗等。
在环境保护领域的应用
葡萄糖氧化酶可用于废水处理，通过催化葡萄 糖氧化反应产生过氧化氢，利用过氧化氢的强 氧化性降解废水中合成也有影响， 过高或过低的温度和pH值可能会抑制酶的合成。
3
基因表达调控
基因表达的调控也会影响葡萄糖氧化酶的合成， 如转录因子、miRNA等对基因表达的调控。
03
葡萄糖氧化酶的应用
在食品工业中的应用
葡萄糖氧化酶可用于食品加工过程中，如面包、糕点、饮 料等，作为防腐剂和抗氧化剂，延长食品的保质期。
葡萄糖氧化酶
葡萄糖氧化酶能增进肝脏中微粒体的氧化作用，对霉菌毒 素进行生物学转化，通过分裂霉菌毒素的功能性原子组，将毒 素降解为无毒代谢物，被机体迅速排出。并可解除霉菌及其毒 素造成的肝肿大、胸腺萎缩、巨噬细胞受到的毒害和免疫抑制 。
2021/3/10
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2.1-4消除肠道病菌生存环境，减少沙门氏菌等感染
2021/3/10
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2.1-2 保持肠道菌群生态平衡，提高机体免疫力
葡萄糖氧化酶催化生成的葡萄糖酸，降低了胃肠内pH值， 为乳酸菌生长制造了酸性环境。有益菌增殖形成微生物竞争优 势，避免肠道菌群在生态上比例失调、定位转移、血行感染， 具有营养作用，参与氨基酸代谢，合成维生素B1、B2、B6、 B12、叶酸及维生素K等，在一定程度上抑制大肠杆菌，控制 感染，排除腐败物质，提高巨噬细胞活性，提高机体免疫力。
葡萄糖氧化酶
2021/3/10
生物132班何岚
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1.葡萄糖氧化酶的介绍
葡萄糖氧化酶（Glucoseoxidase，E.C.1.1.3.4,简 称GOD）能够在有氧气的条件下专一性催化β－Ｄ－葡萄 糖生成葡萄糖酸和过氧化氢，其主要成分为β-D-葡萄糖 氧化还原酶，辅基为黄素腺嘌呤二核苷酸。它广泛地分布 于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖 速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源 ，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。
葡萄糖氧化酶的物理性质化学性质
密度:：1.00 g/mL 1at 20 °C
颜色：近白色粉末至棕色液体
溶解性：溶于水，几不溶于乙醇，氯仿和乙醚。
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2.葡萄糖氧化酶的用途
2.1-1 保护肠道上皮细胞完整，控制球虫病爆发
葡萄糖氧化酶的微生物发酵生产工艺研究
葡萄糖氧化酶的微生物发酵生产工艺研究摘要：本文针对葡萄糖氧化酶基本特性、应用结构、作用机理等内容展开分析，通过研究做好菌种选育工作、进行发酵条件优化、做好提取纯化工作、进行化学修饰处理等工艺应用要点，其目的在于积累有价值的数据信息，为微生物发酵生产工艺的优化提供参考。
关键词：葡萄糖氧化酶；发酵条件；微生物发酵生产工艺葡萄糖氧化酶在自然界中的来源范围较广，包括动物、植物和微生物，动植物来源的葡萄糖氧化酶种类较多，但产出效率较低。
通过整理微生物发酵生产工艺的相关内容，对于提升葡萄糖氧化酶产出率有着积极地意义。
1葡萄糖氧化酶基本内容概述1.1基本特性葡萄糖氧化酶分子量范围很广，一般在 130kD～175kD之间，具有底物特异性，只能氧化β型葡萄糖，α型葡萄糖则不能被氧化，但是发酵法制备葡萄糖氧化酶过程中菌体可利用的底物除了葡萄糖之外，还有甘露糖、氨基己糖、2-去氧-D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖等。
在葡萄糖氧化酶发酵处理过程中，经常使用到的抑制剂有Ag+、Hg2+、Gu2+等。
葡萄糖氧化酶的作用温度在30-60℃，同时其最大的光吸收波长在377nm-455nm，处于紫外条件下不会出现荧光问题。
另外固体状态下的葡萄糖氧化酶，其可以在0℃环境下保存1-2年，在-15℃条件下可以存储7-8年。
1.2应用结构从应用结构展开分析，葡萄糖氧化酶属于一种同型二聚体糖蛋白，即是将硫化物共价键作为载体，连接了两个相同的多肽链，其中含有大约11%-13%的糖，同时超过80%的糖属于甘露糖，可将其归类于高露糖型。
同时该氧化酶包含了两个亚基，每一个亚基都包含了一个二核苷酸和黄素腺嘌呤，并且在其结合位点处，也连接着FAD，这也是确保氧化反应链可逆的重要基础。
1.3作用机理葡萄糖氧化酶在应用中的作用机理可以细分为还原反应和氧化反应两部分内容：①在还原反应处理中，葡萄糖氧化酶在应用中也会借助催化氧化反应，将β-D-葡萄糖转换为δ-D-葡萄糖内酯，随后在非酶水解作用下，顺利转换为葡萄糖酸，在此过程中，FAD也会失去电子并转换为FADH；②在氧化反应处理中，2也会在氧气作用下，重新倍氧化成FAD，并且此过程也会产生过氧化氢这一FADH2产物。
葡萄糖氧化酶
登录 | 下载 | 刷新注意：如果你不能正常浏览本页，请关闭上网助手等拦截工具的所有拦截选项!商务版 | 政务版 | 短信 | ENGLISH新型饲料添加剂———葡萄糖氧化酶作者：摘自：中国饲料添加剂网日期：2005-06-09葡萄糖氧化酶(ＧｌｕｃｏｓｅＯｘｉｄａｓｅ,简称ＧＯＤ)是一种需氧脱氢酶,能专一地氧化β-Ｄ-葡萄糖成为葡萄糖酸和过氧化氢。
1928年Ｍｕｌｌｅｒ首先从黑曲霉的无细胞提取液中发现葡萄糖氧化酶。
1960年Ｋｕｓａｉ等、1964年Ｐａｚｕｒ和Ｓｗｏｂｏｄ-ｄａ分别从青霉素和黑曲霉中提纯葡萄糖氧化酶。
1995年,Ｐｅｔｒｕｃｃｉｏｌｉ等用青霉素的突变株生产出葡萄糖氧化酶。
我国自1986年开始研究葡萄糖氧化酶的制备提纯工艺,1998年正式投入生产,1999年农业部将其定为12种允许使用的饲料酶制剂添加剂之一。
1 葡萄糖氧化酶的理化性质高纯度葡萄糖氧化酶为淡黄色粉末,易溶于水,不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂,50%丙酮、60%甲醇能使其沉淀。
一般制品中均含有氧化氢酶,酶的最大光吸收波长为377～455ｎｍ。
在紫外光下无荧光,但在热、酸或碱处理后具有特殊的绿色。
固体葡萄糖氧化酶制剂在0℃下保存至少稳定2年,在-15℃下则可稳定8年。
葡萄糖氧化酶稳定的ｐＨ值范围为3～4,最适ｐＨ值为5,如果没有葡萄糖等保护剂的存在,ｐＨ值大于8或小于3葡萄糖氧化酶将迅速失活。
葡萄糖氧化酶的作用温度为30～60℃,该酶不受乙二胺四乙酸、氰化钾及氟化钠抑制,但受氯化汞、氯化银、对氯汞苯甲酸和苯肼抑制。
2 葡萄糖氧化酶在饲料行业中的应用作为国家允许使用的饲料酶制剂之一,葡萄糖氧化酶在食品、医药、饲料等行业中得到了广泛应用。
葡萄糖氧化酶是一种新型的酶制剂,能够改善动物肠道环境,调节饲粮消化,促进动物生长。
含葡萄糖氧化酶、乳酸过氧化物(ＬＰＯ)和乳铁蛋白的混合饲料添加剂,可用于预防牲畜胃肠道感染、腹泻,并有促进动物生长作用。
葡萄糖氧化酶生产工艺流程
葡萄糖氧化酶生产工艺流程英文回答：Glucose oxidase is an enzyme that is widely used in various industries, including food, pharmaceutical, and diagnostic industries. It is primarily used for the production of glucose biosensors, which are used for blood glucose monitoring in diabetic patients. The production process of glucose oxidase involves several steps.Firstly, the enzyme is obtained from a suitable source, such as Aspergillus niger or Penicillium species. These fungal strains are known to produce high levels of glucose oxidase. The source organism is cultured in a suitable growth medium, which provides the necessary nutrients for enzyme production.After the culture reaches the desired biomass, thecells are harvested and the enzyme is extracted. This can be done through various methods, such as cell disruption,centrifugation, or filtration. The extracted enzyme is then purified to remove any impurities or contaminants. This is typically done using techniques like chromatography or ultrafiltration.Once the enzyme is purified, it is immobilized or stabilized to improve its stability and longevity. Immobilization can be achieved through various methods, such as covalent attachment to a solid support or encapsulation within a matrix. This immobilized enzyme can then be used for various applications, including glucose biosensor production.In the case of glucose biosensor production, the immobilized enzyme is typically combined with other components, such as an electrode and a mediator. The electrode provides a surface for the enzyme to react with glucose, while the mediator helps in transferring electrons between the enzyme and the electrode. This combination is then encapsulated within a suitable housing to protect it from external factors.The final step in the production process is quality control and testing. The produced glucose oxidase is tested for its activity, stability, and other parameters to ensure its effectiveness and reliability. This includes testingits performance in various conditions, such as pH and temperature variations.Overall, the production process of glucose oxidase involves steps like culture, extraction, purification, immobilization, and quality control. Each step is crucial to ensure the production of a high-quality enzyme for various applications, including glucose biosensor production.中文回答：葡萄糖氧化酶是一种广泛应用于食品、制药和诊断等多个行业的酶。
葡萄糖氧化酶的发酵生产与发酵工艺的研究
２．２ 青霉菌发酵生产葡萄糖 氧化酶
工业化生产多采用黑曲霉， 其产酶水平较高。但青霉葡萄糖 氧化酶米氏常数小，反应速度 快，也引起人们较大的兴趣。
胡常英等人［６］以产葡萄糖氧 化酶的点青霉（ Ｐ ｅ ｎ ｉ ｃ ｉ ｌ ｌ ｉ ｕ ｍ ｎｏｔａｔｕｍ）．８３１２为出发菌株，经紫外 线诱变处理，初筛、复筛得到了 一株（Ｎｏ Ｔ１１１）高产葡萄糖氧化酶 的菌株，连续 １２次对其传代试验， 该突变株遗传性状稳定，摇瓶产 酶水平达到 ５５．７Ｕ／ｍＬ，比出发株 （３６．２Ｕ／ｍＬ）提高了５３．９％。发酵液未 检出青霉素的成份。该诱变株的 建立和对所产酶的研究，为促进 青霉葡萄糖氧化酶工业化生产， 提高酶的应用质量，降低生产成 本提供了科学依据。
葡萄糖氧化酶的发酵生产
与发酵工艺的研究
宫艳艳，徐学明
（江南大学食品学院，无锡 ２ １ ４ ０ ３ ６ ）
摘 要：葡萄糖氧化酶是酶应用技术领域中一种非常重要的酶，作为国 家允许使用的酶制剂之一，它在食品、医药、饲料等行业中得到了广泛应用。 该文简要介绍了葡萄糖氧化酶及两种菌种的葡萄糖氧化酶的发酵生产，对发 酵工艺的影响进行了探讨，并展望了其在食品工业上的应用前景。
切关系，导致了它在科研、医药
和食品工业生产上广泛的应用。
２０ 世纪初 Ｍａｘｉｍｏｕ 在黑曲霉
培养物中发现吸氧酶系统。１ ９ ２ ４
年Ｍａｌｌｉａｒｄ发现了葡萄糖酸。１９２８
年，Ｍｕｌｌｅｒ 用黑曲霉菌丝体压制
进行葡萄糖酸形成的酶学研究，
探明在葡萄糖存在时能消耗氧，
葡萄糖氧化酶
葡萄糖氧化酶一、酶的简介葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够在有氧气的条件下专一性催化β-D- 葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,高纯度GOD的制剂为淡黄色粉末、易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、甘油和乙二醇[1]。
50%丙酮、66%甲醇能使其沉淀。
它广泛地分布于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。
葡萄糖氧化酶是用黑曲霉等发酵制得的一种需氧脱氢酶，对人体无毒、副作用，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等功能，它广泛应用于食品、饲料、医药等行业中，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。
【2】二、菌种及培养基2.1 菌种：以黑曲霉H1-9b为菌种，在发酵罐中装入培养基2.2 发酵培养基(g/L)：蔗糖80、蛋白胨3、KH2PO4 2、MgSO4·7H2O 0.7、KCl 0.5、NaNO3 4，pH5.5；斜面培养基(g/L)：蔗糖30、NaNO32、K2HPO41、KCl 0.5、MgSO4 0.5、FeSO40.01、琼脂20，pH5.5【3】。
发酵条件为：26～29摄氏度，pH值自然，通风量0．3m3／(m3·min)，搅拌速度400r／min。
发酵液离心分离得菌丝体，经研磨(因葡萄糖氧化酶是一种胞内酶，提取时首先必须先研磨破壁)后过滤，得到含葡萄糖氧化酶的滤液即酶液。
[4]三、工艺流程葡萄糖氧化酶制备流程图原料预处理培养基配制灭菌无菌空气制备发酵产品的分离纯化菌种的制备和种子培养葡萄糖氧化酶下游工艺流程图3.1葡萄糖氧化酶的发酵3.1.1种子液培养在斜面培养基上接种黑曲霉H1-9b 孢子，28℃培养4 ～5 d 。
3.1.2摇瓶发酵250mL 锥形瓶中分装50mL 发酵培养基，121℃灭菌20min，接种黑曲霉H1-9a 孢子浓度为104个/mL，28℃、200r/min 摇床培养80h 即达产酶高峰。
葡萄糖氧化酶
葡萄糖氧化酶一、酶的简介葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够在有氧气的条件下专一性催化β-D- 葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,高纯度GOD的制剂为淡黄色粉末、易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、甘油和乙二醇[1]。
50%丙酮、66%甲醇能使其沉淀。
它广泛地分布于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。
葡萄糖氧化酶是用黑曲霉等发酵制得的一种需氧脱氢酶，对人体无毒、副作用，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等功能，它广泛应用于食品、饲料、医药等行业中，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。
【2】二、菌种及培养基2.1 菌种：以黑曲霉H1-9b为菌种，在发酵罐中装入培养基2.2 发酵培养基(g/L)：蔗糖80、蛋白胨3、KH2PO4 2、MgSO4·7H2O 0.7、KCl 0.5、NaNO3 4，pH5.5；斜面培养基(g/L)：蔗糖30、NaNO32、K2HPO41、KCl 0.5、MgSO4 0.5、FeSO40.01、琼脂20，pH5.5【3】。
发酵条件为：26～29摄氏度，pH值自然，通风量0．3m3／(m3·min)，搅拌速度400r／min。
发酵液离心分离得菌丝体，经研磨(因葡萄糖氧化酶是一种胞内酶，提取时首先必须先研磨破壁)后过滤，得到含葡萄糖氧化酶的滤液即酶液。
[4]三、工艺流程葡萄糖氧化酶制备流程图原料预处理培养基配制灭菌发酵产品的分离纯化菌种的制备和种子培养葡萄糖氧化酶下游工艺流程图3.1葡萄糖氧化酶的发酵3.1.1种子液培养在斜面培养基上接种黑曲霉H1-9b 孢子，28℃培养4 ～5 d 。
3.1.2摇瓶发酵250mL 锥形瓶中分装50mL 发酵培养基，121℃灭菌20min，接种黑曲霉H1-9a 孢子浓度为104个/mL，28℃、200r/min 摇床培养80h 即达产酶高峰。
葡萄糖氧化酶简介及其应用
葡萄糖氧化酶简介及其应用1.葡萄糖氧化酶简介葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）是动物体内消化道不能分泌的酶；是一种需氧脱氢酶，系统命名为β-D-葡萄糖氧化还原酶，能专一地氧化分解β-D-葡萄糖为葡萄糖酸和过氧化氢，同时消耗大量的氧气。
葡萄糖氧化酶反应的最初产物不是葡萄糖酸，而是中间产物δ-葡萄糖酸内酯，δ-葡萄糖酸内酯以非酶促反应自发水解为葡萄糖酸。
葡萄糖氧化酶通常与过氧化氢酶组成一个氧化还原酶系统。
葡萄糖氧化酶在生产上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉属菌株。
早在1904年人们就发现了葡萄糖氧化酶，直到1928年Muller 才首先从黑曲霉的无细胞提取液中发现葡萄糖氧化酶，在研究了其催化机理后正式将其命名为葡萄糖氧化酶，并将其归入脱氢酶类。
我国自1986年开始研究葡萄糖氧化酶的制备提纯工艺，1998年正式投入生产，1999年农业部将其定为可以使用的饲料酶制剂。
产自特异青霉和黑曲霉的葡萄糖氧化酶已被列人农业部《饲料添加剂品种目录（2013)》第四大类酶制剂。
1.1葡萄糖氧化酶形态及特性高纯度葡萄糖氧化酶分子质量为150~152ku,为淡黄色粉末，易溶于水，不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂，50%丙酮溶液和60%甲醇溶液能使其沉淀。
1.1.1耐受PH值葡萄糖氧化酶在pH为3.0~7.0时具有很好的稳定性，最适pH为5-6。
如果没有葡萄糖等保护剂的存在，pH大于8或小于3时葡萄糖氧化酶将迅速失活。
1.1.2耐受温度葡萄糖氧化酶作用温度为30~60℃，固体葡萄糖氧化酶制剂在0℃下至少可稳定保存2年，在－15℃下则可稳定保存8年。
实际生产的耐高温的葡萄糖氧化酶有两类：①常规菌种产生的葡萄糖氧化酶经过包被工艺处理；②耐高温菌株产生的葡萄糖氧化酶，不用包被就能耐高温。
1.1.3光谱葡萄糖氧化酶的最大光吸收波长为377~455nm，在紫外光下无荧光，但经热、酸或碱处理后具有特殊的绿色。
葡萄糖氧化酶电极原理
葡萄糖氧化酶电极原理
葡萄糖氧化酶电极是一种用于测量血糖浓度的传感器。
它的工作原理基于葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖产生电子，进而产生电流的效应。
葡萄糖氧化酶是一种在生物体内广泛存在的酶，它能够促使葡萄糖分子发生氧化反应。
在葡萄糖氧化酶电极内部，一个薄膜通常被涂覆在电极表面，并含有葡萄糖氧化酶。
当血液样品加到电极的葡萄糖氧化酶表面时，葡萄糖分子会与葡萄糖氧化酶结合。
这种结合形成一个葡萄糖-葡萄糖氧化酶
复合物。
葡萄糖氧化酶在复合物的催化下，将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并释放出电子。
这些电子将通过电极表面的电导体传输，并导致电流的产生。
电流的大小和葡萄糖浓度之间存在一定的线性关系。
通过测量电流的强度，可以间接推断出血液中的葡萄糖浓度。
葡萄糖氧化酶电极的优点在于其快速、灵敏和准确的测量结果。
它被广泛应用于血糖仪和其它葡萄糖监测设备中。
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项目工程工程期共需十二个月，分为三期完成 。 一期准备工作：（1）主要负责与政府相关部门 的沟通包括 政府批文和有关优惠条件的落实。 （2）各项工程款项资金到位，工程建设单位的 招投标。 二期工作：厂区相关公用设施和车间厂房的建设 施工阶段， 设备的安装，环保设施的建设以及厂 区内绿化工作的完成。 三期工作：设备的调试，厂区各类设施的检查， 确认后工厂 正式投入生产。
生产工艺 流程
经济与社 会效益分 析
提问环节
生产工艺流程
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析
技术创新点
建设条件与 企业组织
基因改造与发酵过程
下游工艺流程
生产工艺 流程
环境保护
经济与社会 效益分析
提问环节
一：技术创新点
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析
建设条件与 企业组织
葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，GOD ）最初 是在黑曲霉中被发现并制备。但黑曲霉和青霉菌 发酵过程中会产生纤维素酶，淀粉酶，过氧化氢 酶等其他多种副产物，大量的杂蛋白对后期的分 离纯化工作造成很大的困难，也增加了生产成本。
提问环节
三：社会效益分析
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析
建设条件 与企业组 织
1.本工厂建成后可带动当地经济发展，增加农 民收入。 2.促进社会就业：本项目有600个用工岗位，能 增加600人就业，有利于社会稳定和地方经济的 发展。 根据以上分析，本项目确是既有经济效益又有 社会效益的好项目。
生产工艺 流程
建设条件与 企业组织
生产工艺 流程
经济与社会 效益分析
毕赤酵母发酵生产GOD
提问环节
三：下游工艺过程
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析
葡萄糖氧化酶下游工艺流程
建设条件与 企业组织
生产工艺 流程
经济与社会 效益分析
提问环节
四：环境保护
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析
发酵染菌对环境保护的影响
发酵过程中会排出气体，若发酵污染噬菌体，则噬菌体 将通过排气传播到空气中，进而再污染其它发酵罐，对生 产造成极大的危害。被噬菌体污染的大气环境，能改变环 境中菌群体系，破坏生态平衡。因此，为了减少噬菌体的 危害，加强车间环境中噬菌体噬斑的监测，改善环境卫生， 对厂房、车间周围环境定期进行消毒灭菌是非常重要的。 这些措施虽然不能完全防止噬菌体污染，但可以减少污染 机会，有利于环境保护。现阶段采用120℃蒸汽灭菌。
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析
建设条件 与企业组 织
投资规模与资金筹措
经济效益分析
社会效益分析
生产工艺 流程
投资规模 与效益 分析
提问环节
一：投资规模与资金筹措
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析
建设条件 与企业组 织
• 经济核算
工程费用 2000万 专项费用 600万 预备费用 640万 其他费用 760万 合计 4000万
生产工艺 流程
经济与社会 效益分析
为了解决这些问题，近年来使用基因工程菌重 组表达葡萄糖氧化酶成为研究的热点。我们的创 新点在于将来源于黑曲霉中的GOD基因整合到毕 赤酵母中，使其成功表达，继而经发酵生产，提 纯制成粗酶制剂和精酶制剂。
提问环节
二：基因改造与发酵过程
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析
工程菌的构建与选育
生产工艺 流程
• 资金筹措
本项目资金共需4000万元。 项目的建成将极大的推动当地经济的发展，故项目争取 政府资金500万，国内银行贷款1000万，其余部分通过合 资形式筹措。
投资规模 与效益 分析
提问环节
二：经济效益分析
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析
序号 工程或费用 名 称 估算值/万元 设备购置 费 1. 2. 工程费用 主要生产项目 辅助生产项目 公用工程 服务性工程 生活福利设施 厂外工程 投资方向调节税 建设期利息 铺底流动资金 合计 700万 80万 15万 25万 20万 40万 40万 80万 100万 150万 50万 103万 15万 10万 20万 25万 60万 80万 50万 40万 71万 10万 10万 12万 20万 40万 80万 44万 30万 44万 5万 8万 8万 11万 24万 40万 建筑工程 费 安装工程 费 其他基建 费 合计 占总估算比 例%
经济与社 会效益分 析
提问环节
三：企业组织
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 及企业组 织
组织原则——实行法人代表制，厂长是企业的 法人代表。
生产工艺 流程
经济与社 会效益分 析
生产制度——原料生产部发酵车间实行三班制， 制剂车间实行两班制，全年生产300天，其余 60天为设备维修，更新时间，生产工人节假 日采用双轮休制度。
投资规模 与效益 分析
提问环节
提问环节
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分
建设条件 与企业组 织
欢迎大家提问„„
生产工艺 流程
投资规模 与效益 分析
提问环节
经济与社 会效益分 析
提问环节
二：葡萄糖氧化酶的应用
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析
建设条件 与企业组 织
目前，根据葡萄糖氧化酶的发展应用来看， 主要应用于以下几点：
生产工艺 流程
经济与社 会效益分 析
（1）作为食品添加剂，具有转化葡萄糖和除 去残存氧——保持食品的色、香、味的功能， 稳定产品质量，延长了保存时间。 （2）经过精制后的酶，可用于临床诊断，快 速、准确测定体液中葡萄糖含量，为医生准 确判断病人的病情提供可靠的数据。 （3）粗品酶制剂可用于动物养殖业。长期配 合饲料喂养动物，可调解胃肠菌群平衡，促 进饲料的消化吸收，增加食欲；同时增强机 体免疫力，减少疾病发生。显著提高养殖业 的经济效益。
2000万 944万 200万 368万 60万 48万 80万 96万 204万 300万 600万
50% 23.6% 5% 9.2% 1.5% 1.2% 2% 15%
建设条件 与企业组 织 生产工艺 流程
3. 4. 5. 6. 7． 8. 9. 10.
投资规模 与效益 分析
工厂投产后年产1000吨，实现总销售收入7200万人民币，除 去原料、设备折旧费、员工工资、管理销售等费用，每年可产 生纯利润1500万。预计三年收回投资成本。
提问环节
三：企业组织
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 及企业组 织
人力资源部
工厂组织结构示意图
厂长
生产部
销售部
办公室
生产工艺 流程 生产车 间
技术开发 部 物资供应部
质监部
经济与社 会效益分 析
销售职能团 队
基层员工
研发团队
提问环节
四：项目实施进度安排
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 及企业组 织
提问环节
四：目前葡萄糖氧化酶生产方法及存在的问题
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 与企业组 织
生产工艺 流程
目前已经得到商业化应用的葡萄糖氧化酶多来 源于黑曲霉或青霉发酵，但黑曲霉和青霉菌发酵过 程中会产生纤维素酶，淀粉酶，过氧化氢酶等其他 多种副产物，大量的杂蛋白对后期的分离纯化工作 造成很大的困难，也增加了生产成本。为了解决这 些问题，近年来使用基因工程菌重组表达葡萄糖氧 化酶成为研究的热点。 本公司利用点青霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母 中的高效表达进而生产葡萄糖氧化酶制剂。利用微 生物易培养，成本低廉，可进行高密度发酵，便于 大规模生产，将为本公司创造良好的经济利益，
建设条件与 企业组织
生产工艺 流程
“三废”问题
经济与社会 效益分析
提问环节
废水是葡萄糖氧化酶厂中“三废”的重点，废水量大， 里面成分种类多，对环境的污染度也特别严重，因此废水 的处理是我们厂此次设计中的重点。我厂采用吸附法，使 用活性白土吸附去除发酵废水中的有机物，如：醛、醇、 糖。
投资规模与效益分析
葡萄糖氧化酶的应用
葡萄糖氧化酶市场分析 目前生产方法及存在的问题
ห้องสมุดไป่ตู้
生产工艺 流程
经济与社 会效益分 析
提问环节
一：葡萄糖氧化酶简介
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 与企业组 织
生产工艺 流程
葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)是 一种需氧脱氢酶，能专一地氧化B—D一葡萄糖成 为葡萄糖酸和过氧化氢。高纯度GOD的制剂为淡 黄色粉末、易溶于水,完全不溶于乙醚、氯仿、 吡啶、甘油和乙二醇等。50%丙酮、66%甲醇能 使其沉淀。GOD分子中含有16%的碳水化合物 （包括大量甘露糖、半乳糖及微量葡萄糖），对 碳水化合物水解酶有抵抗性，酶蛋白氨基酸组成 中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和亮 氨酸含量较高。
生产工艺 流程
经济与社 会效益分 析
提问环节
二：厂址选择
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 及企业组 织
生产工艺 流程
本设计中，根据地理、水文、气象等自然条 件，以及原料来源、产品销售、供能供水、交通 运输等技术经济条件，结合地方方针、政策，决 定选址在湘江的支流浏阳河附近，靠近京广铁路 线，黄花机场附近的浏阳生物医药园。
年产1000吨葡萄糖氧化酶
可行性研究报告
项目组长：
项目组员：
年产1000吨葡萄糖氧化酶可行性研究报告
葡萄糖氧化 酶简介及市 场分析 建设条 件与企 业组织
生产工 艺流程
提问环节
经济与 社会效 益分析
葡萄糖氧化酶简介及市场分析
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析 建设条件 与企业组 织
葡萄糖氧化酶简介
提问环节
三：葡萄糖氧化酶的市场分析
葡萄糖氧 化酶简介 及市场分 析