天花粉蛋白的抗肿瘤药效研究(1)
实验报告 天花粉蛋白的分离纯化
天花粉蛋白的分离纯化一．实验目的1、掌握蛋白分离纯化的步骤；2、掌握紫外吸收法定量测定蛋白质含量的原理和方法；3、了解紫外分光光度计的构造原理，掌握它的使用方法。
二．实验原理天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是从葫芦科栝楼属植物栝楼的根块中提取出来的一种碱性蛋白,属于Ι型核糖体失活蛋白。
由247个氨基酸组成，分子量为27000，具有抗艾滋病的效果。
由于蛋白质中络氨酸、色氨酸的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外线的性质，吸收高峰在280nm波长处，核酸分子吸收高峰在波长260nm处。
在此波长范围内，蛋白质溶液的光吸收值（O.D280）与其含量呈正比关系，可用作定量测定。
利用紫外吸收法测定蛋白质含量由于受到核酸分子中嘌呤、嘧啶等吸收紫外线物质的干扰，而导致此方法准确度较差。
三．实验方法步骤1、将低浓度盐溶抽提5小时，离心4000rpm，10分钟的天花粉蛋白沉淀用0.1mol/l KCl 50ml提取1小时，离心4000rpm，10分钟。
2、通过查硫酸铵饱和度常用表，加硫酸铵53.46g至40%饱和度，放置3h，离心4250rpm，15分钟，再收集上清液（取一毫升上清液待测）。
准确测量上清液体积为240ml，补加硫酸铵58.8g至75%饱和度静放置1h，离心4000rpm，10分钟，收集沉淀。
用约0.5ml测定蛋白质含量，并用免疫扩散法鉴定。
3、4℃下将蛋白溶液对水透析3小时，搅拌、换水2次，再对0.05m pH6.4磷酸缓冲液透析过夜，取样测定蛋白质含量。
4、称取DEAE-纤维素50g装柱，用0.05m pH6.4磷酸缓冲液平衡，将已透析的蛋白溶液上柱分离，以平衡缓冲液淋洗。
用紫外检测仪监测，收集穿透峰部分。
取样测定蛋白质含量。
配制含0.5mNacl的0.05m pH6.4磷酸缓冲液300ml，淋洗DEAE纤维素柱，收集洗脱峰部分并取样测定含量。
5、量取50ml琼脂糖装柱，用0.05m pH6.4磷酸缓冲液平衡，将收集的DEAE-纤维素柱分离的穿透峰部分上样，用平衡缓冲液淋洗杂质，分部收集。
不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响
不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：张艳琼，黄利鸣，李红军，吴江锋【摘要】目的探讨天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用及量-效关系。
方法不同浓度TCS作用于体外培养人宫颈癌Caski细胞株，采用吖啶橙荧光染色，荧光显微镜观察TCS对Caski 细胞的生长抑制作用；透射电镜和TUNEL检测法观察Caski细胞凋亡及TCS诱导Caski细胞凋亡的量效关系。
结果TCS对Caski细胞的生长具有明显的抑制作用，透射电镜和TUNEL法证实该抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的。
在一定浓度范围内，细胞凋亡数与TCS 的浓度之间有剂量依赖性。
结论TCS能诱导体外培养Caski细胞凋亡，最佳浓度为60 μg/ml。
【关键词】天花粉蛋白；Caski细胞；细胞凋亡Abstract:ObjectiveTo study the inhibitory effect of different dose trichosanthin (TCS) on Caski cells. MethodsThe antiproliferative effect of different dose TCS on Caski cells wasobserved by fluorescence microscope. The TUNEL assay and electromicroscope were used for measurement of apoptosis of different dose TCS on The Caski. Results The apoptosis of different dose TCS on Caski Cells acted as the antiproliferation. The quantity of the apoptosis of the Caski cells depended on TCS’dose within certain range. ConclusionThe apoptosis of the Caski cells will happen when they were dealt with TCS and the best dose of the TCS is 60 μg/ml.Key words:Trichosanthin; Caski cell; Apoptosis人子宫颈癌是常见妇科恶性肿瘤，严重威胁妇女健康。
天花粉有效成分及药理活性研究进展
天花粉有效成分及药理活性研究进展一、本文概述天花粉，作为一种具有悠久历史的中药材，自古以来在中医药理论中占据重要地位。
近年来，随着现代科学技术的进步，对天花粉的研究逐渐深入，其有效成分及药理活性成为了研究的热点。
本文旨在对天花粉的有效成分及药理活性进行系统的梳理和总结，以期为相关研究提供有价值的参考。
本文将首先概述天花粉的基本信息，包括其来源、性味归经、功效主治等；接着，重点介绍天花粉的主要有效成分，包括蛋白质、多糖、皂苷等，并分析这些成分的结构特点；探讨天花粉的药理活性，包括其抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用机制及临床应用前景。
通过本文的阐述，希望能够为深入研究和开发利用天花粉提供新的思路和方向。
二、天花粉的主要化学成分天花粉，作为一种具有悠久药用历史的中药材，其化学成分复杂且丰富。
经过多年的研究，科学家们已经从天花粉中分离并鉴定出了多种化学成分，这些成分在药理活性上发挥着重要作用。
其中，最具有代表性的化学成分包括多糖、蛋白质与多肽、氨基酸、酶类、黄酮类、木质素及其衍生物等。
多糖是天花粉中的重要化学成分之一，具有显著的免疫调节和抗肿瘤活性。
研究表明，天花粉多糖能够增强机体免疫功能，提高免疫细胞活性，从而抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
多糖还具有抗氧化、抗炎等药理作用，对多种疾病的治疗和预防具有潜在的应用价值。
蛋白质与多肽也是天花粉中的重要成分，这些成分在调节机体生理功能、促进细胞生长和修复等方面发挥着重要作用。
其中，某些具有生物活性的蛋白质和多肽还具有显著的抗肿瘤、抗病毒等药理作用，为天花粉的临床应用提供了科学依据。
氨基酸是构成蛋白质的基本单元，也是天花粉中的重要化学成分。
天花粉中含有多种必需氨基酸和非必需氨基酸，这些氨基酸能够参与体内蛋白质的合成和代谢，对维持机体正常生理功能具有重要意义。
酶类在天花粉中也占有一定比例，这些酶类具有催化生物化学反应的作用，能够参与体内多种代谢过程。
其中，某些酶类还具有特定的药理活性，如抗氧化、抗炎等，对疾病的治疗和预防具有辅助作用。
浅谈天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖与细胞调亡临床疗效与意义
浅谈天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖与细胞调亡临床疗效与意义[摘要]目的：研究天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖与细胞调亡的临床疗效与意义，以期发现抑制宫颈癌发展的有效新药物，为推广天花粉蛋白对宫颈癌治疗奠定科学基础。
方法：取若干处于对数生长期的人宫颈癌细胞，使用天花粉蛋白进行处理，通过观察其形态、测定MTT细胞的活力及使用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞分析仪分析等方法，检测人宫颈癌细胞的增殖及凋亡情况。
结果：天花粉蛋白在体外作用48小时后即对人宫颈癌细胞增殖产生抑制作用，且在20-120ug/ml的浓度范围里，天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖的抑制率随药物浓度及作用时间的增加而逐渐增大。
结论：天花粉蛋白对人宫颈癌细胞的生长具有明显的抑制作用。
[关键词]天花粉蛋白；人宫颈癌；细胞增殖；细胞凋亡[]R329.2+1[]A[]1004-1620（2015）10-034-02近年来，有研究表明天花粉蛋白对麻疹、HIV等病毒具有明显抑制作用，在体外作用也对肝癌、胃癌等具有不同程度的抑制效果。
本文研究天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用及诱导细胞凋亡效应，为使用天花粉蛋白治疗宫颈癌提供科学依据。
1.材料及方法1.1实验材料、试剂及设备1.1.1材料与试剂人宫颈癌细胞株（上海通派生物科技有限公司），天花粉蛋白（上海金山制药厂），胎牛血清（FBS）及MEM培养基（均为美国Gibcol公司生产），台盼蓝（北京化工厂），琼脂糖（北京普瑞因生物色谱技术有限公司），噻唑蓝（MTT）（上海源叶生物产品），二甲基亚砜（DMSO）（无锡优利森化工产品有限公司）。
1.1.2主要设备恒温孵箱：北京福意电器有限公司提供；尼康EclipseTi倒置显微镜；贝克曼CytoFLEX流式细胞仪；电泳仪：铂悦仪器（上海）有限公司。
1.2实验方法1.2.1细胞培养将人宫颈癌细胞由液氮中取出，立刻放入到37℃的水中，解冻后离心处理，将上清弃置，加入新鲜培养基，放入CO2含量5%、温度37℃的恒温孵箱。
天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究
天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究背景肿瘤是一种危害人类健康的疾病，在临床实践中，目前的化疗和放疗等传统治疗方法虽然取得了一定的疗效，但多数存在疗效不佳和毒副作用大等问题，而免疫治疗因其不同的治疗机制，成为当今肿瘤治疗领域的研究热点。
天花病毒是一种具有细胞毒性和免疫调节作用的病毒，天花粉蛋白则是天花病毒中的一个蛋白成分，该蛋白具有很强的抗肿瘤活性。
近年来，一些研究同时发现天花病毒及其蛋白成分可以通过免疫调节的方式，增强机体免疫力，诱导肿瘤细胞死亡，从而实现对肿瘤的治疗。
目的本研究旨在探究天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究，并初步探索其肿瘤治疗机制。
方法荷瘤小鼠模型制备选用BALB/c裸鼠作为实验动物，将小鼠体内注射肝癌或胃癌细胞等恶性细胞，制备小鼠荷瘤模型。
实验组和对照组实验组：选取荷瘤小鼠，将天花粉蛋白溶液注射于小鼠腹腔内，根据小鼠体重不同，分别给予0.5、1、2mg/kg的不同剂量，每周注射3次。
同时注射生理盐水。
对照组：选取荷瘤小鼠，给予生理盐水注射。
检测指标1.每周测量小鼠体重，并记录生存情况。
2.实验持续4周后，处死小鼠，取出肝、胃等有肿瘤的组织，进行肿瘤质量测定和病理学观察。
3.测定血清中的白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞等免疫指标。
结果实验组小鼠体重增长明显大于对照组，而生存率却明显高于对照组。
肝、胃等组织中肿瘤质量显著降低，病理学表现亦呈现肿瘤细胞凋亡、坏死、小血管造新等特征，表明天花粉蛋白能明显抑制肝、胃癌等荷瘤小鼠的肿瘤生长。
同时，实验组小鼠血清中的白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞等免疫指标量级显著提高，与对照组相比差异达到显著性水平（P<0.05）。
结论天花粉蛋白具有较强的抗肿瘤活性，通过提高机体免疫能力和诱导肿瘤细胞凋亡、坏死、小血管生成等多种途径实现对小鼠肝、胃癌等荷瘤小鼠的肿瘤治疗作用。
该研究初步揭示了天花粉蛋白的肿瘤治疗机制，并为临床用药提供了重要的实验数据支持。
清热泻火药-天花粉
清热泻火药-天花粉清热泻火药-天花粉为葫芦科植物栝楼TrichosantheskirilowiiMaxim.或日本栝楼TrichosanthesjaponicaRegel的根。
味甘、苦、酸，性寒。
入肺、胃经。
功能：清热、生津、止渴、润燥、排脓、消肿。
主治：热病口渴、消渴、黄疸、肺燥咳血、痈肿、痔瘘。
内服：煎汤，9～12g；或入丸、散。
外用：研末撒或调敷。
【现代研究】主要成分：栝楼根中含一定量的蛋白质：天花粉蛋白(Trichosanthin)是中期妊娠引产的有效蛋白质，同时其亦具有抗葡萄胎活性及抗艾滋病（AIDS）的活性；蛋白质Karasurin对妊娠小鼠有强烈堕胎作用；蛋白质α-Momorcharin和β-Momorcharin具有引产、免疫抑制和抗肿瘤作用。
尚分离出由289个氨基酸组成的蛋白质α-Trichosanthin、细胞毒蛋白Trichosanthin-ZG以及具有胰蛋白酶抑制活性的多肽等。
栝楼根中含有糖类化合物即天花粉多糖，有明显的免疫调节作用，能增强免疫活性，具有显著的抗肿瘤和细胞毒活性。
多糖主要由葡萄糖、半乳糖、果糖、甘露糖、木糖和少量蛋白质组成。
从栝楼根水提取物中分离出5个具有降血糖活性的栝楼根聚糖(Trichosan)A、B、C、D、E。
栝楼根中含多种酶，其中β-半乳糖甙酶活性最强，α-甘露糖甙酶活性次之。
栝楼根中亦含多种氨基酸，如二水合瓜氨酸(L-citrullinedihydrate)、α-羟甲基丝胺酸(α-Hy-droxymethylserine)、瓜氨酸(Citrulline)以及丙氨酸、缬氨酸、酪氨酸、赖氨酸和γ-氨基丁酸等。
此外，栝楼根中尚含棕榈酸(Palmiticacid)、α-菠菜甾醇(α-Spinasterol)、皂甙和多量淀粉。
药理作用：1.致流产和抗早孕作用给孕期小鼠、兔、狗及猕猴皮下或肌内注射天花粉蛋白，可使小鼠、兔的大部分胎仔死亡，胎狗和胎猴死亡并娩出。
天花粉蛋白对A549细胞增殖的影响
天花粉蛋白对A549细胞增殖的影响龚权;丁克清;李侃【摘要】目的:观察天花粉蛋白对人肺腺癌细胞株A549生长增殖的影响。
方法:应用MTT法检测天花粉蛋白对A549细胞生长增殖的影响。
结果:经天花粉蛋白处理后A549细胞生长明显受抑,并呈一定的剂量时效依赖性。
结论:天花粉蛋白在体外能抑制A549肺腺癌细胞的生长繁殖。
【期刊名称】《长江大学学报：医学卷》【年(卷),期】2006(000)012【总页数】4页(P)【关键词】天花粉蛋白;A549细胞株;体外诱导【作者】龚权;丁克清;李侃【作者单位】长江大学医学院;长江大学医学院;湖北荆州;湖北荆州【正文语种】中文【中图分类】R285.5天花粉蛋白(trichosanthin，TCS)是一种从中药栝楼中提取的有效成分，主要有引发中期流产，抑制HIV增殖，调节人体免疫功能等作用[1]。
它能够水解真核细胞核糖体60S大亚基特定位点的腺苷酸，抑制细胞蛋白质的合成。
研究表明天花粉蛋白对于宫颈癌、胃癌、肝癌等细胞的生长具有抑制作用，并能诱导以上细胞凋亡[2]。
而其对于肺癌A549细胞的生长抑制作用却少见研究，现将实验结果报道如下。
1 材料与方法1.1 材料TCS(上海金山制药厂，1.2 mg/mL)，RPMI-1640培养基(GIBCO公司)，胎牛血清(FBS，杭州四季青公司)，胰蛋白酶(Biotech公司)，噻唑蓝(MTT，Biotech公司)，二甲基亚砜(DMSO，Fluka公司)，酶标仪(ST-360，上海智华医学仪器有限公司)。
1.2 方法1)细胞培养人肺腺癌细胞株A549由中山大学肿瘤研究所惠赠，于含10%热灭活(55℃，30 min)胎牛血清的RPMI-1640(含体积分数为10%FBS，1×105U·L-1青霉素，100 mg·L-1链霉素)，37℃ 5% CO2及饱和湿度下培养，每3～4 d消化传代1次。
2)细胞形态学观察将处于对数生长期的A549细胞以不同浓度的TCS处理，倒置显微镜下观察其形态改变，4%甲醇固定，并作Giemsa染色，观察细胞膜，胞浆及细胞核的改变。
天花粉蛋白抗肿瘤
天花粉蛋白抗肿瘤【关键词】天花粉蛋白；抗肿瘤；抗病毒；免疫调节天花粉蛋白（Trichosanthin，TCS）是从葫芦科科植物栝蒌的块根中分离纯化得到的一种碱性蛋白，属于Ⅰ型核糖体失活蛋白（RibosomeInactivatingProteins,RIPs）。
TCS成熟肽是由247个氨基酸残基组成，分子量约24000，pⅠ=9.4，为不含糖的单链核糖体失活蛋白。
天花粉蛋白一直以来多用于引产临床治疗妇科疾病，如宫外孕，葡萄胎，绒癌等。
另外，因其具有N2糖苷酶活性,能水解真核细胞核糖体的28SrRNA的4324位上的腺苷酸的N-C糖苷键,使核糖体不可逆失活,从而抑制蛋白质的合成,使得其应用范围已涉及抗肿瘤、抗病毒,免疫调节等方面。
鉴于其越来越重要的研究地位，本文将对其作用机制展开综述，为天花粉蛋白的进一步研究和临床应用提供理论依据。
1治疗妇科疾病天花粉自古在民间用来堕胎和治疗胞衣不下，其有效成分TCS不但能够用于引产，还能治疗葡萄胎，宫外孕，死胎，过期流产等妇科疾病。
其原理是TCS可迅速引起胎盘的滋养层细胞变性坏死，坏死细胞的崩解碎片充斥在绒毛间隙，导致了血循环障碍，然后加速了绒毛组织退化坏死，造成胎儿死亡；同时，TCS引起的滋养叶细胞坏死,导致HCG和甾体激素迅速降低,绒毛及蜕膜组织变性及进一步坏死,激发内源性前列腺素的合成与释放,继而触发宫缩、诱发流产［1］。
2抗肿瘤肿瘤是全世界范围内死亡率最高的疾病之一，当前的各种治疗手段，效果不甚令人满意。
在世界范围内，中草药在抗肿瘤的研究中越来越受注重。
近年来通过对天花粉蛋白结构和功能的深入研究，发现其对肿瘤也具有抑制作用,现就天花粉蛋白抗肿瘤的作用机制综述如下。
2.1抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡凋亡是细胞在正常发展过程中或做出应激反应时表现出的生理性死亡过程。
Caspase-3是这个死亡程序的关键环节之一。
研究人员发现天花粉蛋白能够通过抑制PKC和激活Caspase途径诱导细胞凋亡。
天花粉蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖和细胞调亡的影响
天花粉蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖和细胞调亡的影响黄益玲;黄利鸣;石新兰;张兆祥;邢学森【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2005(21)2【摘要】天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)是从葫芦科植物栝蒌的块根中提取出来的一种单链核糖体失活蛋白(ribosome-in-activating protein，RIP)，主要有引发中期流产，抑制爱滋病病毒(HIV)增殖，调节人体免疫功能等多方面的作用。
研究表明，许多抗癌药物是通过最终引发肿瘤细胞凋亡而达到治疗的目的。
本实验旨在研究天花粉蛋白在体外对HeLa细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡效应，以促进天花粉蛋白在肿瘤治疗上的应用。
【总页数】2页(P253-254)【作者】黄益玲;黄利鸣;石新兰;张兆祥;邢学森【作者单位】三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R329.25;R737.330.53;R977.6【相关文献】1.天花粉蛋白对人宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响及其机制研究 [J], 王凡;邓心燕;姚铭辉;田甜;刘影;王慧;王佳;董小耘2.桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响 [J], 左亚奇; 高志红; 庞策; 刘赛娜; 张晓丽; 孙转友; 甄攀3.沉默ENO1对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 [J], 蔡鑫;熊蓉;范佳杨;汤亚兰;刘康;刘先平;岳秋菊;梁婷;罗岳西4.人脐带间充质干细胞对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制 [J], 王琛;田君;程海玲5.重组天花粉蛋白的原核表达、纯化及其对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响 [J], 尤程程;黄利鸣;王艳林;韩钰;李雪梅;曹春雨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用实验研究
【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用实验研究
作者：张艳琼，黄利鸣，吴江锋
【摘要】目的通过建立荷U14小鼠宫颈癌模型，从个体水平初步探索天花粉蛋白(TCS)对荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性。
方法建立荷U14小鼠宫颈癌模型，TCS治疗，检测抑瘤率、脾指数、流式细胞术分析T细胞亚群。
结果TCS治疗组，脾指数明显高于阴性对照组，C较阴性对照组、CTX组明显减少(P 0.05);与正常组比较无显著性差异。
TCS组的C/C较阴性对照组、正常组明显增大(P 0.05);与CTX组比较无显著性差异。
结论在体内，当TCS的剂量为0.2 mg/kg时，具有一定的免疫调节和增强体液免疫功能作用。
1。
天花粉蛋白的临床应用新进展
天花粉蛋白的临床应用新进展
李家荣;杨玉福
【期刊名称】《基层中药杂志》
【年(卷),期】1996(010)003
【摘要】对天花粉制剂用于终止妊娠、胎物残留、异位妊娠、滋养叶细胞肿瘤及艾滋病等的临床运用概况作了综述。
【总页数】2页(P53-54)
【作者】李家荣;杨玉福
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R285.6
【相关文献】
1.天花粉蛋白在妇产科临床应用进展 [J], 姚红丽;仝进毅
2.天花粉蛋白治疗异位妊娠的临床应用及不良反应分析 [J], 戴良图;张华;王晨曦;黄玲;李扬;朱梅娟
3.天花粉蛋白临床应用简介 [J], 徐莉莉;陈瑜
4.天花粉蛋白在妇产科临床应用中的护理体会 [J], 朱爱新
5.天花粉蛋白研究新进展 [J], 林国庆;邵靖宇
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天花粉蛋白抗肿瘤作用及机制的研究进展
天花粉蛋白抗肿瘤作用及机制的研究进展周海祥;卜平;董小耘;高云飞;孟杰依;邓心燕【摘要】Trichosanthin(TCS)is a kind of alkaline plant protein with many pharmacological activities separated and purified from root tuber of Fructus Trichosanthis,belonging to type-Ⅰ ribosome inactivating protein. TCS has RNA N- glyco-sidase activity,can hydrolyze the eukaryotic 28S ribosomal rRNA specific adenosine,and inhibit cellular protein synthesis. At first TCS was used for labor induction,hydatidiform mole,ectopic pregnancy and other gynecological diseases,t hen it′s found TCS has good antiviral,immunomodulatory and antitumor effects. Most of the scholars found that TCS has a significant anti-tumor effect,and in vivo and in vitro studies show that TCS has a multi-system antitumor effect,with significant effect. Although there are many reports about the anti-tumor mechanism of TCS,it has not been clearly defined.%天花粉蛋白(TCS)是一种分离提纯于中药瓜蒌块根中的碱性植物蛋白,属于Ⅰ型核糖体失活蛋白,具有RNA N-糖苷酶活性,能够水解真核细胞核糖体28S rRNA特定位点的腺苷酸,从而抑制细胞蛋白质的合成,因此TCS具有多种药理学活性.TCS起先用于引产,治疗葡萄胎、宫外孕等妇科疾病,伴随研究深入,发现TCS在抗病毒、调节免疫和抗肿瘤等方面亦具有良好作用.多数学者对于TCS的抗肿瘤作用尤为重视,体内外研究发现TCS具有多系统抗肿瘤作用,效果明显.虽然对于TCS的抗肿瘤机制研究报道很多,但尚未有明确统一阐述.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)016【总页数】5页(P3197-3201)【关键词】天花粉蛋白;抗肿瘤作用;细胞增殖;细胞凋亡【作者】周海祥;卜平;董小耘;高云飞;孟杰依;邓心燕【作者单位】扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州 225001;扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州 225001;扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州 225001;扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州 225001;扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州225001;扬州大学医学院,江苏扬州 225001;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室,江苏扬州 225001【正文语种】中文【中图分类】R273天花粉为葫芦科植物瓜蒌或双边瓜蒌的干燥根，具有清热泻火，生津止渴，消肿排脓之效，主治热病烦渴，肺热燥咳，疮疡肿毒等疾病。
天花粉蛋白对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究
天花粉蛋白对胃癌细胞株ＳＧＣ－7901凋亡影响的体外研究目的: 探讨天花粉蛋白（TCS）抗肿瘤的机制,为TCS在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。
方法:采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。
结果：50、100、200 μmol/L TCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。
结论：TCS能诱导胃癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。
标签：天花粉蛋白；胃癌；细胞凋亡天花粉蛋白（TCS）是一种从中药恬楼块根内分离提纯的单链核糖体失活蛋白，具有抗炎、解热、抗氧化、抗过敏等作用[1]。
天花粉蛋白具有抗早孕[2]、抗HIV[3]、免疫调节[4]及抗肿瘤等多种生物活性，对抗早孕、抗HIV、免疫调节等机制已进行了大量研究，但有关其抗肿瘤机制研究较少。
笔者采用从中药天花粉中提取的天花粉蛋白作用于胃癌细胞株SGC -7901,从细胞凋亡的角度，探讨天花粉蛋白诱导胃癌细胞凋亡的作用机制，为中药天花粉蛋白在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。
1 实验材料与方法1.1 仪器流式细胞仪(Fluorescence activated cell sortor，FACS)，Annexin V-PE，Apoptosis Kit I，Cycle TES TTM PLUS DNAReagent Kit(均为BectonDickinson公司试剂）。
TCS，江苏天晴制药总厂产品，RPMI 1640培养基(Sigma)，1.2 细胞培养胃癌细胞株SGC-7901用含10%的小牛血清、青霉素(100 μmol/L)、链霉素(1 mg/ml)的RPMI 1640培养基，置37℃,5%CO2孵箱内静置培养。
1.3 早期细胞凋亡的检测按AnnexinV-PE，Apoptosis Kit I操作手册进行检测。
天花粉蛋白诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的分子机制研究
天花粉蛋白诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的分子机制研究黄益玲;胡火军;黄利鸣;李红军【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2007(23)1【摘要】目的利用基因芯片技术研究天花粉蛋白对人宫颈癌HeLa细胞基因表达谱的影响,以深入探讨其作用的分子机制.方法提取药物处理前后HeLa细胞总RNA并逆转录成cDNA,在获得的cDNA上分别标记CY3和CY5两种荧光物质,然后与BiostarH-Ⅰ表达谱芯片杂交,扫描后对获得的数据用GenePix Pro 3.0软件分析.结果两组间存在差异性表达基因78条,其中与细胞凋亡密切相关的NOP56、TNFSF10、CASP9、DFFB等62条基因表达上调,与细胞黏附及细胞间相互作用相关的COL9A3、MGST3、LGALS3BP等16条基因表达下调.结论天花粉蛋白可以引起HeLa细胞中多个基因的表达改变,基因芯片技术进一步揭示了其诱导HeLa细胞凋亡的作用机制.【总页数】3页(P99-101)【作者】黄益玲;胡火军;黄利鸣;李红军【作者单位】三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学第一临床医学院外科,湖北,宜昌,443003;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002;三峡大学医学院形态学部,湖北,宜昌,443002【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R329.24;R329.25;R394-33;R394.2【相关文献】1.透骨草提取物诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其相关机制研究 [J], 于秀艳;曾常茜;高松;王文龙;高海燕;刘晓峰2.中草药诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及其分子机制 [J], 赵令武;万福生3.大戟苷诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究 [J], 张德莉;李晓强;白银亮;何荣霞;吕银凤;文惠方;魏丽4.As_4S_4诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关分子机制研究 [J], 尹伶;濮德敏5.天花粉蛋白诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及APC基因去甲基化 [J], 陈勇;郑蓉;刘永珍;陈冬丽;陈双郧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响(医药类)
不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响（医药类）目的探讨天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用及其量效关系方法对体外培养的人宫颈癌Caski细胞株应用不同浓度的中药。
吖啶橙荧光染色和荧光显微镜观察中药对Caski细胞的生长抑制作用。
透射电镜和原位末端标记法观察卡斯基细胞凋亡及中药与卡斯基细胞凋亡的量效关系。
结果中药可明显抑制Caski细胞的生长。
透射电镜和原位末端标记法证实这种抑制是通过诱导细胞凋亡实现的。
在一定的浓度范围内，细胞凋亡数与三羧酸浓度之间存在剂量依赖性。
结论中药复方能诱导体外培养的卡西基细胞凋亡，最佳浓度为60 μg/ml[关键词]天花粉蛋白；Caski细胞；细胞凋亡摘要:目的研究不同剂量曲古三嗪(tcs)对Caski细胞的抑制作用。
方法用荧光显微镜观察不同剂量中药对Caski细胞的抗增殖作用。
采用原位末端标记法和电镜技术检测不同剂量中药对小鼠骨髓细胞凋亡的影响。
结果不同剂量的中药对Caski细胞的凋亡具有抑制增殖的作用。
在一定范围内，细胞凋亡的数量与中药剂量有关。
结论细胞经中药处理后会发生凋亡，中药的最佳剂量为60μg/ml。
关键词:天花粉蛋白；卡西基细胞；细胞凋亡宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，严重威胁女性健康天花粉蛋白(TCS)是从葫芦科栝楼块根中提取的单链核糖体失活蛋白(RIP)。
迄今为止，研究发现中药具有抗恶性肿瘤的作用，如绒毛膜上皮癌、胃肠肿瘤、白血病和宫颈腺癌[1，2]本实验旨在研究中药对人宫颈癌细胞的作用，并探讨其量效关系，为中药在抗宫颈癌中的临床应用提供实验依据。
1材料与仪器中药购自上海金山制药厂(1.2毫克/毫升)；RPMI-1640介质是从吉布科尔公司购买的。
10%的新生牛血清购自杭州四季青公司。
吖啶橙购自西格玛公司。
德纳西是从上海博雅生物技术有限公司购买的；Triton X-100是从华美生物工程公司购买的。
DAB试剂盒购自北京中山生物技术有限公司；TUNEL试剂盒购自罗氏公司。
天花粉蛋白的纯化技术进展及其药理概况
进行了比较 ,发现栝楼块根中天花粉蛋白的绝对含量大约是
愈伤组织的 2. 66倍 [23] 。邱德有等以栝楼叶片为材料 ,利用
发根农杆菌诱导栝楼发根 ,建立了栝楼发根的离体培养系
统。通过检测发现诱导根中有天花粉蛋白 ,叶中没有 ,但诱
导根的天花粉蛋白含量仅是栝楼块根的 1 /8[24] 。利用离体
培养栝楼愈伤组织和细菌转化诱导栝楼毛状根的方法虽能
天花粉蛋白 ( Tichosanthin, TCS)是从葫芦科 ( Cucurbita2 ceae)栝楼属植物栝楼 ( Trichosanthes kirilow ii)的块根中提取 出的一组单链核糖体失活蛋白 [1] ,能水解真核细胞核糖体的 28S rRNA的 4 324位上的腺苷酸的 N2C糖苷键 ,使核糖体不 可逆失活 ,从而抑制蛋白质的合成 [2] 。从 20 世纪 60 年代 起 ,国内外的许多科学家对天花粉蛋白进行了纯化、结构分 析及基因表达等一系列研究 。已知的天花粉蛋白均是单一 多肽链的碱性蛋白 ,能够抑制细胞蛋白质的生物合成 ,属于 Ⅰ 型核糖体失活蛋白 ,具有引产抗孕、免疫调节、抑制人艾滋病 病毒 (H IV)的复制和繁殖等生理功能。 1 天花粉蛋白的生理功能和特性 1. 1 引产抗孕功能 天花粉蛋白具有直接损伤胎盘并最终 达到引产的相对专一性的作用 。它的引产作用不属于机体 对异源蛋白的过敏反应 ,而在于其对敏感细胞的损伤作 用 [3] 。刘国武等报道 , 30年来用天花粉蛋白终止妊娠的达 50万人次之多 [4] 。关于天花粉蛋白致流产机理 ,多数学者认 为 ,天花粉蛋白对绒毛滋养层细胞有选择作用 ,能使绒毛广 泛变性坏死 ,纤维素沉着 ,绒毛间隙闭塞及阻断血循环。血 循环的被阻断又加速绒毛的变性坏死 ,促使前列腺素释放而 流产 [5] 。闻明进行了天花粉蛋白肌肉注射治疗未破裂型异 位妊娠的临床研究 [6] 。研究发现 , 39例患者中 , 36例经 1次 肌肉注射天花粉蛋白即可治愈 ,治愈率达 92. 3 % ;另 3例患 者经 2次肌肉注射后也可治愈。郑大伟等对结晶天花粉蛋 白注射液治疗产后胎盘残留的临床疗效进行了观察 [7] 。发 现 3例胎盘残留患者的治愈率达 97. 7% ,未见不良反应。 1. 2 抑制肿瘤功能 天花粉蛋白可诱导人绒毛膜癌细胞、 宫颈癌 HeLa细胞、小鼠黑色素瘤细胞、胃腺癌 SGC27901细 胞、MKN245细胞、H22肝癌细胞、人类白血病细胞株 HL260、 NB4和白血病细胞 K56等多种肿瘤细胞凋亡 [8] 。黄益玲等 将天花粉蛋白处理人宫颈癌 HaLa细胞后 , HaLa细胞的生长 受到明显抑制 ,出现凋亡的特征性改变 [9] 。天花粉蛋白对绒
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第几次修改 2
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二、注意查重
三、增加文献标注
四、部分段落调整
五、增加图片结果描述与分析。
六、增加图录和缩略词表。
七、论文写作逻辑清晰，各部分文字描述简单明了，如试验结果中不要写试验方法。
客户意见：
一、论文结构调整，目录参考下图：
二、摘要部分：第二段中纯化的方法，目的要写清楚；TCS-HBP抑制肿瘤生长能力此结论如何得出，有何数据依据，抑制哪些细胞需写清楚；Western Blot 结果如何需写明白，以得出TCS-HBP诱导Hela细胞凋亡的结论
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