中药色谱指纹图谱鉴别的概念_属性_技术与应用

工艺条件,辅料品种、品质要求、用法、用量等内容。

3.5.4 饮片性状 含饮片形状、大小、色泽、质地、臭味、口感及其它物理性质等。

注意生、熟饮片差异的表述。

3.5.5 鉴别 含经验鉴别、组织显微鉴别、理化反应及紫外、薄层和荧光等鉴别特征。

3.5.6 检查 含杂质异物、水分、总灰分、酸不溶灰分、铅(Pb)、砷(As)、汞(Hg)等重金属、有机农药残留量及微生物等方面的纯度要求。

3.5.7 浸出物测定 对药效成分、有效部位或指标成分尚无可靠测定方法或所测成分含量低于千分之一的饮片品种,可选择水溶性浸出物或醇溶性浸出物作为饮片质量控制指标。

3.5.8 含量测定 含主要药效成分、有效部位或指标成分的含测方法及含量下限范围。

有毒中药饮片应有毒性成分的限量指标。

条件成熟的中药饮片亦可制定指纹图谱评价饮片质量的方法。

3.5.9 性味归经 采用中医理论概括表述饮片的药性。

毒性中药饮片应采用法定的三级分级方法表述毒性大小。

3.5.10 功能主治 采用中医辨证论治理论表述饮片的功能和适应症。

3.5.11 用法用量 用量一般均指水煎内服成人1日常用量。

外用药应说明外用方法和剂量。

根据中药的特点,饮片用量应有上限和下限的常用量范围,但可变幅度不宜过大,尤其有毒中药,以保证用药安全。

3.5.12 注意事项 含禁忌症、配伍禁忌、妊娠禁忌、服药禁忌、毒副反应、特殊药物煎煮过程中的先煎、后下、冲服、烊化等相关内容的说明。

3.5.13 保质期 中药饮片原则上应新鲜使用,不宜长期储存,久备不用。

但是,中药饮片作为1种特殊商品,有一定的市场流通环节,应该有1年时间的保质期承诺。

故需要进行一定包装条件及室温下12个月的稳定性考察。

3.5.14 包装和储存条件 含包装材料、包装规格和储存条件(如低温、干燥、密闭、避光)等说明。

4 中药饮片质量标准起草说明制定中药饮片质量标准是一项十分严肃认真的工作,对保证中药饮片质量,提高中药饮片质量的可控性及管理水平,使中药饮片的质量管理逐步与国际接轨,并取得国际市场的认可均具有重要意义。

因此, 起草说明 应对质量标准的14项内容逐一交代其相关的文献根据和实验根据,使中药饮片质量标准的各项要求不仅具有重现性和可操作性,且对中药饮片生产具有实际指导意义。

起草说明 既是中药饮片质量标准不可缺少的技术资料,又不同于一般的研究论文。

它是在大量的科研工作基础上,将科研结果转变为管理规定的技术说明。

因此,应有理有据,文字不宜冗长。

中药饮片炮制规范化研究起步较晚,缺乏经验。

实行批准文号制度尚未开始,相关的技术要求亦未颁布。

为适应当前开展这项工作的要求,笔者结合多年从事炮制研究的体会和教训,提出以上不成熟的建议,希望广大中药科技工作者共同探讨,使之完善,以利这项工作的开展。

[责任编辑 刘 ]中药色谱指纹图谱鉴别的概念、属性、技术与应用谢培山(广州市药品检验所,广州广东 510160)[中图分类号]R282.5 [文献标识码]A [文章编号]1001-5302(2001)10-0653-03中药产业现代化的瓶颈是质量不可控、安全不可靠。

后者是指重金属、农药、微生物、化学物质的污染;前者虽然有 中国药典 的质量标准模式和指标,但与国外的植物药药典一样,均是模仿化学药品的质量控制模式,选定1,2个有效成分、活性成分或指标成分进行鉴别和含量测定。

然而这种以单一化学成分分析的观点,导致人们力求把中药(天然药物)这一综合的复杂的 整体 分解成便于观察和研究的简单 单元 或 分子 ,以便于清楚明确的研究。

分析工作者沿着这条思路力求运用各种分析检测手段测定某种有效成分[收稿日期] 2000-11-15或某一活性成分含量的多少来判断某种药材的质量,对复方制剂也以同样的观点和方法制订其质量标准。

实际上对于中医理论指导下的中药,尤其是复方制剂,任何一种活性成分均不能反映中医用药所体现的整体疗效,这是中药与化学合成药品质量标准的根本区别。

所以宏观地综合分析成为必然的发展趋势,事实上这也是在人类进入系统科学时代以后,人们的科学认识观念更新,综合分析与整体分析成为分析化学发展的必然的反映。

在寻求综合评价中药质量的过程中,值得注意的趋势是色谱指纹图(chro-matographic fing er print)的应用。

近来此类研究和文章日益增多,因为它提供的有关质量的综合信息比单一成分的含量653要丰富和有用的多[1]。

1 指纹分析与色谱指纹图谱(图像)分析的概念中药是依靠其所含的多种化学成分发挥综合的医疗作用,这是与化学合成药最根本的区别,现在已逐渐得到人们的认同。

因此凭借某一种化学成分定性和定量的传统中药质量评价方法的有效性和专属性渐渐受到质疑。

因为任何单一的活性成分或指标成分都难以有效地评价中药的真伪优劣。

尤其如果所检测的指标成分(活性成分)是多种中药的共性成份如熊果酸、齐墩果酸、大黄酸、槲皮素等,则更降低了鉴别的准确和专属。

随着客观需要和现代认识论的影响,分析工作者逐渐考虑利用现代先进分析技术分析不同药材的整体特征以提高鉴别的准确性,近年来重新受到关注的色谱指纹图谱分析(chromatographic fingerpr int analysis)的概念即植根于此。

人的 指纹(fingerpr int) 鉴定是开始于19世纪末20世纪初的犯罪学(criminolog y)和法医学。

人的指纹有拱形、环形和螺纹形3种基本模式,这是共性,但每一个人的指纹在细微处却绝对不同,从而形成了指纹的 绝对唯一性(absolute uniqueness) 。

由于基因学的发展,近代将指纹分析的概念结合生物技术延伸到DN A指纹图谱分析,而且应用范围从犯罪学扩大到医学和生命科学的领域。

生物样品的DN A指纹图谱分析根据目的不同既强调个体的 唯一性 ,也可侧重于整个物种的 唯一性 ,忽略个体之间的差异。

而利用色谱技术进行指纹图谱分析的中药材鉴别所依据的化学成分是后天的代谢产物,它对生长环境的依赖性很强,即对抗拒或适应环境的变化远比先天性遗传特征要脆弱的多。

因而同种植物药材所含代谢产物的组成因生长年限、生长环境的变化而可能产生个体间的较为明显的差异,但是生物的代谢既然也具有遗传性,个体之间就必然有群体共有的相似性(sim-i lar ity)。

这种具有物种唯一性和个体相似性的色谱(图像)具有指纹意义。

它借用了法医学的指纹鉴定的概念,但不是概念的重复;色谱指纹图谱(图像)不强调个体的绝对唯一性,而强调同一药材群体的相似性,即物种群体内的唯一性。

相似性是通过色谱的整体性和模糊性来体现,这是中药色谱指纹图谱(图像)分析的最基本的属性。

分析色谱指纹图谱强调的是 准确的辨认(accurate recognition) 而不是 精密的计算(pr ecise calculation) ;比较图谱强调的是相似(sim-i lar ity)而不是 相同(identical) 。

在不可能将中药复杂成分都搞清楚的情况下,指纹图谱的作用主要是反映复杂成分的中药及其制剂内在质量的均一性和稳定性。

2 色谱指纹图谱(图像)分析是中药鉴别技术的循序发展和延伸中国药典 1985年版(一部)中药及中成药的鉴别除理化鉴别外,薄层色谱鉴别的使用频率很高。

当时的薄层色谱鉴别全部是以化学对照品做对照,要求供试品色谱中应有与对照品一致的斑点。

使用的器材比较简单,操作比较粗糙,只要供试品的色谱中出现与对照品一致的斑点即可。

但由于可以得到的化学对照品品种有限,没有化学对照品无法鉴别;而只靠1种化学对照品,往往专属性不够,尤其多种药材共有的成分。

因此 中国药典 1990年版修订时,尝试增加了对照药材的薄层色谱鉴别。

经过实践,证明可以解决化学对照品不足,以及单靠1种化学对照品难以准确鉴别等急待解决的问题。

而且对照药材的色谱给出的信息远比单一化学对照品要多得多。

譬如只靠人参皂苷Rb1,Re或Rg1不能区别人参、西洋参、三七以及它们的根或茎叶;小檗碱解决不了黄连、黄柏和三颗针之间的区别。

但是各自的对照药材给出的薄层色谱图却各有特征,依此对照,足资鉴别真伪,甚至可以从完整的色谱图像中区分某些药材的种间差异,如 中国药典 收载的黄连3个品种、黄柏2个品种,它们的色谱图像既有共同的特征说明它们的近缘关系,又各有自己的特点,尤其在复方制剂中可以判断原料药材投料的情况。

同时,在检验复方制剂时,对照药材的取样要求与实际样品中该药材的处方量相当,从完整的色谱还可以得到投料药材的量化信息。

现在已在新药研制中被广泛应用。

这种做法实际上已经有了色谱指纹图谱的雏形,只是由于供试品、试验器材、试验操作还欠规范,所以还不能称之为指纹图谱。

早在70年代日本和我国部分学者尝试用薄层扫描仪得到的复方成药扫描图谱做为色谱指纹图应用于中成药分析,做了大量工作,只是当时主客观条件限制和时机不成熟,没有得到广泛的认同,但他们的思路是有前瞻性的。

自1990年版 中国药典 薄层色谱鉴别设置对照药材以来10年广泛实践的基础上,现在提高一步,规范药材、工艺、检测,提出色谱指纹图的概念,应该是循序渐进的发展,是现行中药鉴别的延伸。

而且通过色谱指纹图的研究可以较全面的提升中药种植、采收、加工、生产、分析检验质量的整体水平[2],再上一个台阶。

当前色谱技术的多样化和检测水平的不断提高也为色谱指纹图谱(图像)研究和应用提供了良好的工作平台。

3 国外植物药色谱指纹图谱的应用美国FDA允许草药保健品申报资料可以提供色谱指纹图鉴别资料[3],已为大家熟知,此外,WHO在1996年草药评价指导原则[4]中也有规定,如在 Plant preparations 及 Fin-ished product 的章节中都提到 如果不可能鉴别有效成分,则鉴别1种或几种特征成分(如色谱指纹图谱)以保证制剂和产品质量的一致 [4]。

欧共体在草药质量指南的注释[5]中提到 草药的质量稳定性单靠测定已知的有效成分是不够的,因为草药及其制剂是以其整体作为有效物质。

因此,应该通过色谱指纹图谱显示其所含的各种成分在草药及其制剂中是稳定的,其含量比例能保持恒定。

例如欧山楂(花叶)的薄层色谱指纹图谱所显示的结果 。

国外关于植物药色谱指纹图的研究论文也日渐增多,他654们也认识到草药不可能用1种成分说明某草药的疗效,有些活性成分不明,鉴别很困难,所以提出了色谱指纹图鉴别,基本上都是将色谱色谱指纹图的研究和应用限定在鉴别范畴,目的是用以解决成分复杂、有效成分不明的草药如何监测和证明产品批间质量的稳定。

如果成分比较简单,如银杏叶的萜类内酯主要只有4个,而且都是已知的,都有化学对照品,完全可以实现4种内酯的含量测定,所以内酯部分的色谱指纹图就没有必要了,他们的企业标准也是只做黄酮醇苷的色谱指纹图。