试验一植物根系活力的测定
测定植物根系活力的方法
测定植物根系活力的方法
植物根系活力是指植物根系吸收、传导和利用水分、营养物质以及对
土壤环境进行适应的能力。根系活力的测定可以帮助我们了解植物生长发
育和适应能力的情况,同时指导我们合理地进行植被管理和栽培。以下是
测定植物根系活力的几种方法:
1. 简易Auslander土柱法。
如其名,Auslander土柱法是一种方法简单、不需高级设备的测定植
物根系活力的方法。该方法主要是通过植物根系对土壤环境的响应,来判
断根系活力的强弱。具体操作方法为:将要测定的植株的根系在浇透水的
土壤内生长2-4天,之后将其整株拔起,然后根据根系的发育程度、数量、长度等来评估根系活力的强弱。该方法简单易行,操作简便,但其缺点在
可能存在误判的可能性。
2.根系形态分析法。
根系形态分析法是通过对植物根系形态结构的观察,来判断其根系活
力的强弱。该方法适合于观测植物在不同环境下的根系结构变化,比如不
同土壤类型、水分营养等而导致的根系形态上的适应性变化。具体测定内
容为:利用根系分叉角度、根毛数量、根长、分散程度等指标来评估根系
活力的强弱。该方法操作简便,可以直观地观察植物根系的形态变化。
3. 马琦森氏(Markson)芽生长理论测定法。
马琦森氏芽生长理论测定法是一种直接测定植物根系活力的方法,与
前面两种方法略有不同。该方法的基本理论是当植物叶和根的生长速度趋
于相等时,表明根系的活力非常强。为测量生长速度,该方法首先需要在
芽顶茎部投射一个小光斑,之后再测量芽生长长度的变化。与前面两种方
法相比,马琦森氏芽生长理论测定法操作难度较大,但它可以直接反映出植物根系的生长速度。
根系活力的测定实验报告
根系活力的测定实验报告
《根系活力的测定实验报告》
根系是植物的重要器官之一,它承担着吸收水分和养分的功能,同时也是植物生长的重要支撑。因此,了解根系活力对于研究植物生长发育具有重要意义。为了深入了解根系活力的测定方法,我们进行了一项实验。
实验方法:
1. 实验材料:本实验选取了小麦种子作为实验材料。
2. 实验步骤:
a. 将一定数量的小麦种子放入含有适量水的培养皿中,让其在恒温恒湿的条件下进行发芽。
b. 在小麦种子发芽后,选取相同大小的小麦幼苗,将其根系放入适量的生理盐水中浸泡一段时间。
c. 将浸泡后的小麦根系取出,用酒精进行漂白处理,然后将其放入含有适量三氧化二砷的溶液中浸泡。
d. 观察小麦根系的活力情况,并记录下根系的长度、数量和形态等数据。实验结果:
经过实验测定,我们得到了小麦根系的活力数据。通过对比实验前后小麦根系的长度、数量和形态等数据,我们可以清晰地了解到小麦根系的生长情况。在实验中,我们发现浸泡后的小麦根系长度有所增加,数量也有所增加,形态也更加健康。
实验结论:
通过本次实验,我们成功测定了小麦根系的活力情况。根据实验结果,我们可
以得出结论:浸泡处理可以促进小麦根系的生长,增强其活力。这为我们进一步研究植物生长发育提供了重要的参考依据。
总结:
根系活力的测定是研究植物生长发育的重要手段之一,通过实验测定,我们可以了解根系的生长情况,为进一步研究提供重要数据支持。希望本次实验结果能够对相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
7、根系活力的测定TTC法
华南农业大学实验报告
专业班次11农学1班组别201130010110 题目根系活力的测定姓名梁志雄日期2012—11—21
一、实验原理
氯化三苯基四氮唑(TTC )是标准氧化电位为80 mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲( TTF )生成的三苯甲(TTF )比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC 被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶会引起的TTC 还原。所以TTC 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。根系的活力越高,产生的NAD(P)H+H+等还原物质越多,则生成红色的TTF越多.TTF溶于乙酸乙酯,并在波长485nm处有最高吸收峰,因此,可用分光光度法定量测定。
二、实验材料与实验器材
蒜根、分光光度计、分析天平、恒温水浴锅、研钵、漏斗个、移液管、比色管、10ml容量瓶、50ml烧杯
三、实验试剂
乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸钠粉末、1%TTC、1/15mol/LpH7。0磷酸缓冲液、1mol/L硫酸
四、实验步骤
1、称取根尖样品0.5 g ,放入小烧杯中,加入0。4 % TTC 溶液和磷酸缓冲液(pH7。0 )
各 5 mL ,使根充分浸没在溶液内,在37 ℃下暗保温1 h ,此后立即加入1 mol/L 硫酸 2 mL ,以停止反应.(与此同时做一空白实验,先加硫酸,再加根样品,37 ℃下
暗保温后不加硫酸,其溶液浓度、操作步骤同上)
2、把根取出,用滤纸吸干水分,放入研钵中,加乙酸乙酯3 ~ 4 mL ,充分研磨,以提出
TTF 。把红色提取液移入刻度试管,并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤2 ~3 次,皆移入刻度试管,最后加乙酸乙酯使总量为10 mL ,用分光光度计在波长485 nm 下比色,以空白试验作参比测出吸光度,查标准曲线,即可求出TTC 还原量。
名词解释根系活力的测定
名词解释根系活力的测定
标题:名词解释:根系活力的测定
导语:
根系活力是植物生长的关键指标之一,它反映了植物根部的生命力和适应环境的能力。本文将探讨如何测定根系活力,并分析其重要性。
一、根系活力的概念与重要性
根系活力指的是植物根系的生物学活力程度,既包括根长、侧根数量等形态指标,也包括吸水、吸收养分、抗逆性等功能指标。根系活力的测定对于解析植物的营养吸收能力、适应环境能力以及预测植物的生长状况具有重要意义。
二、根系活力的测定方法
1. 根长测定法:此方法适用于观察植物根系的生长状况。首先,选取具有代表性的试验对象,将其根系取出并轻轻清洗。然后,使用根尖沙盘或扫描仪等设备对根系进行测量与记录。最后,根据测量结果计算得到根长指数等数据,以反映根系活力。
2. 根系求和测定法:此方法适用于评估植物根系的总体生物学活力。通过取样调查,将所得的根系数量与长度之和作为根系活力的测定指标。这种方法虽然操作简便,但在抵抗病虫害等因素时存在较大的不确定性。
3. 根系吸水性测定法:此方法重点关注植物根系的吸水能力。通过给根系提供含有不同浓度的水溶液,测定吸收水分的速度,从而评估根系的吸水性能。这种方法可以为灌溉和肥料施用提供依据,但过程较为复杂,需要充分的实验设计和仪器设备。
三、根系活力测定的意义和应用
1. 营养管理与调控:根系活力的测定可以帮助农民和园艺爱好者了解植物对营养元素和肥料的吸收利用情况,进而优化肥料施用方案,提高养分利用效率。
2. 抗逆性评估:根系活力测定可以反映植物对环境逆境(如缺水、高温、盐碱等)的耐受能力。通过对不同品种或不同处理下植物根系活力的比较,可以评估植物的抗逆性,为育种和遗传改良提供重要参考。
ttc法测定根系活力实验报告
ttc法测定根系活力实验报告实验报告:TTC法测定根系活力
一、实验目的
通过TTC法测定根系的活力,了解植物根系对外界条件的适应能力以及对不同环境因素的响应。
二、实验原理
TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)法可用于测定细胞线粒体等颗粒物质的活力。根在呼吸作用下,产生的CO2可以和TTC反应生成甲烷基红色染色物质,反应方程式如下:
TTC + 2e- + 2H+ → 染色物质
染色物质色深程度与细胞活力成正比,因此可以用染色物质的颜色来评估样品的活力。
三、实验步骤
1. 准备材料:TTC试剂、木瓢、淀粉液、滴定管、97%乙醇、植物根系样品。
2. 切取根系样品,在温水中清洗后,将样品放置于淀粉液中进行苏木素染色。清洗样品的目的是除去外表的污垢和细胞内的胶质物,以避免影响反应的准确性。在样品染色前,淀粉液要先煮沸,以破坏淀粉酶。
3. 若样品过大,可以在放入淀粉液前用刀片切成较小片段。
4. 取出染色后的样品,用纸巾吸干淀粉液。避免在植物根系上留下过多的染料,以免干扰实验结果。
5. 将植物根系样品放入烟花瓶内,并加入0.1%TTC试剂,再加入适量的滴定水保持水位2cm左右。盖住烟花瓶口,避免空气进入。
6. 放置到37℃恒温实验箱中培养30分钟后,加入5~10mL的1N HCl,使混合液呈现明显的色泽变化。
7. 用滴定管加入97%乙醇混合液,振荡均匀。
8. 在另一试管中取相同量的HCl和TTC,作为对照。
9. 用比色计或分光光度计测定样品和对照试管的吸光度值,计算出样品的活力。
四、实验结果
本次实验得出了样品的活力,数据如下表所示(数据为典型数据,仅供参考):
ttc法测定根系活力实验报告
ttc法测定根系活力实验报告
实验目的:
本实验旨在通过使用TTC法测定根系活力,探究不同处理对植物根系活力的影响,从而了解植物根系的生理状态和适应能力。
实验材料和方法:
材料:
1. 小麦种子
2. TTC(三唑化合物)
3. 无菌蒸馏水
4. 无菌培养皿
5. 无菌培养基
方法:
1. 将小麦种子用无菌蒸馏水浸泡一夜,使其吸水膨胀。
2. 将无菌培养皿分为两组,每组放置10颗小麦种子。
3. 在一组培养皿中加入无菌蒸馏水作为对照组,另一组培养皿中加入含有TTC 的无菌培养基。
4. 将培养皿放置在恒温箱中,温度设定为适宜小麦生长的温度。
5. 观察培养皿中小麦种子的发芽情况,并记录下发芽数。
6. 在培养结束后,取出小麦种子,用无菌蒸馏水洗净表面的TTC。
7. 将小麦种子放入95%乙醇中煮沸5分钟,使其脱色。
8. 取出小麦种子,用无菌蒸馏水冲洗干净,然后用滤纸吸干水分。
9. 将小麦种子放入无菌培养皿中,加入无菌蒸馏水,使其吸水膨胀。
10. 用显微镜观察小麦种子根系的颜色变化,并记录下来。
实验结果:
通过实验观察,发现加入TTC的培养皿中的小麦种子发芽数量明显较少,而对照组的发芽数量较多。在观察小麦种子根系颜色时,发现加入TTC的培养皿中的小麦种子根系呈现红色,而对照组的小麦种子根系呈现白色。
实验分析:
TTC法通过检测细胞内的还原酶活性来间接反映细胞的活力。在本实验中,加入TTC的培养皿中的小麦种子根系发芽数量较少,根系呈现红色,说明这些小麦种子的根系活力较低。而对照组中的小麦种子根系发芽数量较多,根系呈现白色,说明这些小麦种子的根系活力较高。
根系活力测定实验报告
根系活力测定实验报告
根系活力测定实验报告
引言:
植物是地球上最为重要的生物之一,其根系是植物生长发育的基础。根系的健
康与否直接影响着植物的生长和产量。因此,了解根系的活力对于研究植物生
长机理和提高农作物产量具有重要意义。本实验旨在通过测定根系活力的方法,探究不同因素对根系活力的影响。
实验材料与方法:
实验材料:小麦种子、滤纸、无水乙醇、甲醇、硝酸钠等。
实验步骤:
1. 将小麦种子清洗干净,用无水乙醇浸泡15分钟,以去除种子表面的杂质。
2. 取一张滤纸,用无菌针将其刺破,然后将种子均匀地分布在滤纸上。
3. 将滤纸卷起,放入已加入甲醇和硝酸钠的试管中,加热至沸腾。
4. 取出滤纸,用去离子水冲洗干净,然后用无菌针将其刺破。
5. 将滤纸放入含有无菌培养基的培养皿中,放入恒温培养箱中,以28℃恒温培养。
6. 观察根系的生长情况,并记录。
实验结果与讨论:
经过一段时间的培养,我们观察到小麦种子的根系开始生长。根系的生长情况
与根系活力密切相关。在本实验中,我们采用了甲醇和硝酸钠的处理方式,这
是因为甲醇和硝酸钠可以提供植物生长所需的营养物质,并刺激根系的生长。
实验结果显示,经过甲醇和硝酸钠处理的小麦种子的根系生长速度较快,根系
活力较高。
根系活力的测定方法有很多种,除了本实验中采用的方法外,还有其他的测定方法。例如,可以通过测定根系的呼吸速率来评估根系的活力。根系的呼吸速率是指根系在单位时间内消耗的氧气量或释放的二氧化碳量。根系的呼吸速率越高,说明根系的活力越强。
此外,根系的形态特征也可以反映根系的活力。例如,根系的长度、分支数、根毛的密度等都可以用来评估根系的活力。根系越发达、分支越多、根毛越密集,说明根系的活力越高。
根系活力测定方法
根系活力测定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1
根系活力的测定[TTC法]
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
二、材料、设备仪器及试剂
(一)材料:水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量);3. 电子顶载天平(感量);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶50ml;7. 漏斗;8. 量筒100ml;9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
摘要:
根系活力是评估植物健康状况和生长能力的重要指标之一。本实验综述报告将介绍一种常用的根系活力测定方法——三苯基氯化四唑(TTC)法,并重点介绍了该方法的原理、步骤和应用。通过对多个实验研究的概述,我们可以了解到TTC法在根系活力测定中的优势和不足,并展望了未来在该领域的发展方向。 1. 引言
根系活力是植物根系生理功能的重要指标之一。通过测定根系活力,可以评估植物吸收和利用养分的能力,以及应对环境胁迫和病原体的能力。因此,测定根系活力对于研究植物生长发育、抗逆性和资源利用效率等具有重要意义。
2. TTC法的原理和步骤
TTC法是一种常用的根系活力测定方法,它利用三苯基氯化四
唑颜料的还原作用来反映根系活力。其原理是,根系组织通过代谢产物还原三苯基氯化四唑,使其从无色变为红色。实施TTC法的步骤主要包括:准备TTC溶液、处理根系样本、添加TTC溶液、孵育和测定根系活力。
3. TTC法的应用
TTC法广泛应用于不同植物根系的活力测定中。它可以用于各
种实验条件下的根系活力研究,包括光照、温度、生长激素、缺水和盐胁迫等。通过TTC法,我们可以了解不同处理对根系生理代谢的影响,评估植物在不同环境条件下的生长适应性。 4. TTC法的优势和不足
TTC法作为根系活力测定的常用方法,具有一些优势。首先,
它操作简单、成本低廉、效果可靠。其次,可以通过可视化的红色形成判断根系活力,评估根系的发育状况。然而,TTC法也存在一些不足之处,如容易受到环境条件的干扰,结果的可视化程度受到主观因素的影响等。
根系活力测定方法
根系活力测定方法
根系活力的测定[TTC法]
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的
生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中
成为无色溶液,但还原后即生成
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的
生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无
色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被
空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起
的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
二、材料、设备仪器及试剂
(一)材料:水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量0.1mg);3. 电子顶载天平(感量0.1g);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶50ml;7. 漏斗;8. 量筒100ml;9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
(三)试剂:1. 乙酸乙酯(分析纯)。2. 次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。3.1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中。定容到100ml。用时稀释至各需要的浓度。4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。5. 1mol/L硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸
根系活力的测定(ttc法)实验综述报告
根系活力的测定(ttc法)实验综述报
告
TTC法是一种用来衡量根系活力的有效实验方法,在许多现有的测量植物生长
与发育状况中已被广泛应用。它是对植物源区域生长活力和发育状况的直接反映,主要通过检测植物根系中是否存在勃起层来量化测量根系的活力。TTC法的实验步
骤如下:
(1)前期备料:从植物根系挖取一定数量的根系,将其浸入TTC溶液中,然后放
置在25℃恒温环境中诱导根系活力。
(2)TTC测试:以半芯径0.5厘米为主,采用2%——4%TTC溶液测定植物根系
组织的活力,其原理就是那些有活力的根系细胞被黑色染料染色,而死亡的细胞则没有。
(3)固定检测:根据TTC测试结果,将TTC活力分为正活力、弱活力、失活力等
几种,进而检测植物的生长发育状况。
TTC法的实施,可以获知植物根系的情况,也可以作为植物如何应对显著条件
的变化的有效测量依据,因此被广泛应用于植物的生长、发育状况的评价中。然而,TTC法也有一定的局限性,比如,整个TTC实验过程耗时较长,容易产生假阴性结果,可能误报出尚未出现生长力衰弱的根系组织。
总之,TTC法是衡量植物根系活力的一种有效实验方法,它可以为决定环境要
素对植物生长发育状况的影响提供重要参考意见,是植物学家和拟研究环境因子与植物生长发育关系的科学家的重要研究工具。但TTC法也具备一定的局限性,在实验步骤的实施中,需要注意控制各项参数,以准确获取植物根系活力的信息。
测定植物根系活力的方法
测定植物根系活力的方法
植物根系活力的测定方法是评估植物根系对环境中水、养分吸收、物
质转运和生长发育的能力。根系活力的好坏直接影响植物的生长和发育,
因此了解植物根系活力的方法对于植物科学研究和农业生产具有重要意义。以下将介绍几种常用的植物根系活力的测定方法。
1.根系生物学特性测定法:通过观察和记录植物根系的形态特征和生
物学特性来评估根系活力。这包括根长、根径、根重等指标的测定,以及
根系分布类型的形态观察。利用这些指标可以判断植物根系的生长速度、
形态健康程度和养分吸收能力。
2.根系解剖学测定法:通过对植物根系进行解剖学观察,以评估根系
的发育状态和组织结构。常用的方法包括石蜡切片和酶解法。石蜡切片可
以观察根系的细胞构造、组织分化和结构特点,进而了解根系的生长发育
情况。酶解法则可以通过酶解组织中的细胞壁来观察和测定各种细胞器官
的数量和形态特征,进一步了解根系细胞的内部结构和生物化学成分。
3.根系生理生化测定法:通过测定植物根系生理和生化指标来评估根
系的活力。例如,可以测定根系中的ATP含量、蛋白质含量、酶活性等。
这些指标可以反映根系的能量代谢和生化途径的活跃程度,从而评估根系
对环境应激的响应和适应能力。
4.根际土壤生态学测定法:通过分析和评估植物根系周围土壤的物理、化学和生物学性质来间接评估根系活力。例如,可以测定土壤pH值、有
机质含量、水分含量、微生物数量和多样性等指标。这些指标可以反映根
际土壤的生态环境和根系与土壤相互作用的程度,进而评估根系的活力和
土壤肥力。
5.根系功能测定法:通过测定植物根系的吸收能力和生理功能来评估根系活力。例如,可以测定根系对不同养分元素的吸收速率和效率,以及对重金属、盐分、毒物和逆境胁迫的耐受能力。这些指标可以评估植物根系对环境因子的适应和响应能力,从而判断根系的活力和适应性。
植物根系活力的测定方法
实验 5 植物根系活力的测定( TTC 法)
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理
氯化三苯基四氮唑( TTC )是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲( TTF ),
生成的三苯甲( TTF )比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。
二、实验材料、试剂与仪器设备
(一)实验材料
水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)试剂
1. 乙酸乙酯(分析纯)。
2. 次硫酸钠( Na 2 S 2 O 4 ,分析纯),粉末。
3. 1 % TTC 溶液:准确称取 TTC g ,溶于少量水中,定容到 100 mL 。用时稀释至需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液( 1/15 mol/L ,)。
5. 1 mol/L 硫酸:用量筒取比重的浓硫酸 55 mL ,边搅拌边加入盛有 500 mL 蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至 1000 mL 。
6. 0.4 mol/L 琥珀酸:称取琥珀酸 g ,溶于水中,定容至 100 mL 即成。
(三)仪器设备
小烧杯 3 个,研钵 1 个,移液管: mL 1 支、 10 mL 1 支、 5 mL 3 支,刻度试管6 支,分光光度计,分析天平(感量 mg ),电子顶载天平(感量 g ),温箱,试管架,药勺,石英砂适量,滤纸。
根系活力的测定
根系活力的测定(TTC法)
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
二、材料、设备仪器及试剂
(一)材料:水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量0.1mg);3. 电子顶载天平(感量0.1g);4. 温箱;
5. 研钵;
6. 三角瓶50ml;
7. 漏斗;
8. 量筒100ml;
9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
(三)试剂:1. 乙酸乙酯(分析纯)。2. 次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。3.1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中。定容到100ml。用时稀释至各需要的浓度。4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。5. 1mol/L 硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。6. 0.4mol/L 琥珀酸称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml即成。
根系活力测定方法
根系活力的测定[TTC法]
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
二、材料、设备仪器及试剂
(一)材料:水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量0.1mg);3. 电子顶载天平(感量0.1g);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶50ml;7. 漏斗;8. 量筒100ml;9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
(三)试剂:1. 乙酸乙酯(分析纯)。2. 次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。3.1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中。定容到100ml。用时稀释至各需要的浓度。4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。5. 1mol/L硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。6. 0.4mol/L琥珀酸称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml 即成。
植物根系活力的测定——TTC法
植物根系活力的测定——TTC法
TTC即氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-Tripheyl Tetrazolium Chloride),又可称为红四氮唑,是一种氧化还原物质。当TTC溶于水后,溶液呈现无色透明状,但当TTC被根系细胞内的脱氢酶还原时,其产物便呈红色,名为三苯甲腙(TTF)。TTF比较稳定,不溶于水且不易被空气中存在的氧气氧化。利用氯化三苯基四氮唑(TTC) 的还原能力,在一定程度上能够反映出植物根系活力的强弱如何。植物根系的呼吸速率越高代表其活力越强,因此根系中TTC还原的量就愈多;相反,当根系呼吸速率变弱时,其还原的量就相对减少。
一、实验器材
分光光度计;恒温箱;容量瓶;刻度试管;研钵。
二、试剂配制
1. 连二亚硫酸钠(Na2S2O4),俗称保险粉;
2. 乙酸乙酯(分析纯);
3. 石英砂(适量);
4. 0.4mol·L-1琥珀酸:使用电子天平称取4.72g的琥珀酸,使其溶解在盛有约90mL的蒸馏水中,然后定容至100mL(不需配制);
5. 4g·L-1 (0.4%) TTC:使用电子天平准确称取TTC试剂1.0g,将其溶解在盛有适量蒸馏水的小烧杯中,用玻璃棒充分搅拌均匀,倒入250mL棕色容量瓶定容至刻度,现用现配;
6. pH=
7.0 66mM磷酸缓冲液:由A液和B液混合而成,A液:使用电子天平准确称取1.1876g Na2HPO4·2H2O(分子量177.99 g·moL-1) 或2.3896g Na2HPO4·12H2O(分子量35
8.14 g·moL-1),将其溶解在蒸馏水中,定容至100mL。B液:在电子天平上准确称取0.9078g的KH2PO4,使其溶解在蒸馏水中,定容至100mL。实验用pH=7.0 66mM磷酸缓冲液可取A液60mL再加入B液40mL混合;
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植物生理学实验指导书
指导老师马红亮
福建师范大学地理科学学院生态系
实验一植物根系活力的测定(α-萘胺氧化法)
植物根系的作用,主要有(1)对地上部的支持和固定;(2)物质的贮藏;(3)对水分和盐类的吸收;(4)合成氨基酸、激素等物质。因此根系的活力是植物生长的重要生理指标之一。
一、实验目的
通过实验,掌握用α-萘胺法测定植物根系活力的原理和技术。
二、实验原理
植物的根系能氧化吸附在根表面的α─萘胺,生成红色的α—羟基—1—萘胺,沉淀于有氧化力的根表面,使这部分根染成红色,其反应如下:
根对α-萘胺的氧化能力与其呼吸强度有密切关系。日本人相见、松中等认为α-萘胺氧化的本质就是过氧化物酶的催化作用,该酶的活力愈强,对α—萘胺的氧化力也愈强,染色也愈深。所以,可根据染色深浅定性地判断根的活力;也可测定溶液中未被氧化的α-萘胺量,计算已被氧化的α-萘胺量确定根系活力的大小。
在酸性环境中对氨基苯磺酸与亚硝酸盐先反应,再和α-萘胺作用生成红色的偶氮染料,可在510nm比色测定α-萘胺含量。其反应如上。
三、实验仪器药品
分光光度计,分析天平,烘箱,三角烧瓶,量筒,移液管,刻度试管
Α-萘胺溶液:称10mg α-萘胺,先用2ml左右的95%酒精溶解,然后加水到200ml,成50μg/ml的溶液。
0.1mol/L磷酸缓冲液,pH7.0(见附表2)
A液:0.2mol/L磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O 27. 8g配成1000ml)。
B液:0.2mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O53.65g或Na2HPO4·12H2O71.7g 配成1000ml)。
用时取A液39ml,B液61ml混合,稀释至200ml即成。
1%对氨基苯磺酸:将1g对氨基苯磺酸溶解于100ml 30%的醋酸溶液中。
亚硝酸钠溶液:称10mg亚硝酸钠溶于100ml水中。
四、实验操作步骤
定量测定
(1) 挖出水稻植株,并用水洗净根系上的泥土,剪下它的根系,再用水洗,待洗净后用滤纸吸去根表面的水分,称根
称2g根放在100ml三角烧瓶中。然后加50μg/ml的α—萘胺溶液与磷酸缓冲液(pH7.0)等量混合液50ml,轻轻振荡,并用玻璃棒将根全部浸入溶液中,静置10分钟。吸取2ml溶液,测定α—萘胺含量[测定方法见下面(2)],用为试验开始时的数值。再将三角烧瓶加塞,放在25℃恒温箱中,经一定时间后,再进行测定。另外,还要用一只三角烧瓶置同样数量的溶液,但不放根,作为α—萘胺自动氧化的空白,也同样测定,求它自动氧化量的数值。
(2) α-萘胺含量的测定
吸取2ml溶液,加入约10ml蒸馏水,再在其中加入1%对氨基苯磺酸溶液1ml和亚硝酸钠溶液1ml,在室温中放置5分钟,待混合液变成红色,再用蒸馏水定容到20ml。在20─60分钟内进行比色。选用波长510nm,读取吸光度,查对标准曲线得相应的α─萘胺浓度。
从试验开始(10分钟)时的数值减去自动氧化的数值,即为溶液中所有的α-萘胺量,再减去试验结束时α-萘胺含量,即得试验其间为根系所氧化的α-萘胺量。被氧化α-的萘胺量以μg/(单位根干重·小时)表示之。因此,还应将根系烘干称其干重。
(3) 绘制α-萘胺标准曲线
分取浓度为50μg/ml的α-萘胺溶液0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0ml于试管中配制系列溶液,加蒸馏水10ml,1%对氨基苯磺酸溶液1ml,和亚硝酸钠溶液1ml,在室温中放置5分钟,混合液即变成红色,再加蒸馏水定容到25ml,在20─60分钟内进行比色,波长为510nm,读取吸光度(A),然后以A为纵坐标,α-萘胺浓度为横坐标,绘制标准曲线。
五、实验数据分析
根据第一次和第二次样液所测得的吸光度值,从标准曲线查出α-萘胺含量,按下公式计算α-萘胺氧化值。
[M1-M2] ×48
α-萘胺氧化总量(μg)= —————————————————
测定时提取液用量(ml)
M1:第一次取液测定值(μg);M 2: 第二次取液测定值(μg)
[C1-C2]×48
α-萘胺自发氧化总量(μg)= ————————————————
测定时提取液用量(ml)
C1: 第一次空白测定值(μg);C2: 第二次空白测定值(μg)
公式中:48—测定时提取液总量(ml)
α-萘胺氧化总量(μg)-α-萘胺自发氧化量(μg)α-萘胺生物氧化强度=——————————————————————(α-萘胺μg·g-1根·h–1)反应时间(h)×根鲜重(g)
实验二叶绿体色素的提取分离和理化性质
一、实验目的
了解叶绿素提取分离的院里以及它们的光学特性在光合作用中的意思。二、实验原理
叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。根据它们在有机溶剂中的溶解特性,可用丙酮将它们从叶片中提取出来。并可根据它们在有机溶剂中的溶解度不同,以及在吸附剂上的吸附能力不同,将它们彼此分离开。
叶绿素是一种双羧酸的酯,可与碱发生皂化作用,产生的盐能溶于水,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。叶绿素与类胡萝卜素都有光学活性,表现出一定的吸收光谱,可用分光镜检查或用分光光度计精确测定。叶绿素在光照下可产生暗红色的荧光;叶绿素的化学性质很不稳定,容易受强光的破坏,特别是叶绿素与蛋白质分离后,破坏更快;叶绿素中的镁可被H+取代而生成褐色的去镁叶绿素;加入铜盐作用,后者则成为绿色的铜代叶绿素,铜代叶绿素很稳定,在光下不易破坏,故常用此法制作绿色植物的浸渍标本。
三、实验仪器药品
离心机,研钵,漏斗,大试管(120ml,大约直径2.5cm,长23cm左右,36个),软木塞(36个),毛细滴管,刻度试管,分液漏斗,滤纸一张约10m2丙酮,碳酸钙,甲醇,醋酸酮,盐酸,氢氧化钾,石英砂,无水硫酸钠,四氯化碳,乙醚。
四、实验操作步骤
1.叶绿体色素的提取
(1)取菠菜或其他植物新鲜叶片4~5片(2g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。
(2)研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉,加5ml丙酮,研磨至糊状,再加10ml 丙酮,提取3~5min,丙酮提取液倒入离心管离心,离心后上清液转入刻度试管,剩余的残渣用约5ml 丙酮反复多次研磨、冲洗,再次转入离心管后离心,上清夜一并转入试管,定容至30ml。