第二批

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第二批
菌种:21 99 4 90 32 53 56 19 31 29
15 58 52 91 51 95 93 25 28 42
82 76 38 10 43 54 46 12 44 46
90 56 因意外重做(第三批)
菌种不纯:82 43 77 76 46 28 51 42 54
实验一、芽孢染色
有芽孢、菌体呈杆状:10 82 43 19 32 53 99 38 29 31 21 4 15 91 93 58 95 25 76 52 12
有芽孢、菌体呈球状:无
无芽孢、菌体呈杆状:44 90 52
无芽孢、菌体呈球状:无
实验二、氧关系实验(针对有芽孢、菌体呈杆状和无芽孢的革兰氏阳性菌和阴性菌)实验三、木质素利用(针对好氧和兼性厌氧的芽孢杆菌)
实验结果
菌种编号氧关系木质素的利用
10 + +
29 +(—)—/+
21 +(—)+
31 +(—)+
15 +(—)—
91 + +
93 +(—)+
58 +(—)+
95 + —
25 +(—)—/+
76 + +
12 + +
注:+:好氧—:厌氧+/—:兼性厌氧;+:利用木质素—:不利用木质素—/+:不确定实验四、革兰氏染色(针对无芽孢菌株)
G+杆菌:44 90
G—杆菌:52
待做实验:
一、菌种纯化82 43 77 76 46 28 51 42 54
二、氧化酶和接触酶实验10 21 31 91 93 58 76 12
三、木质素分解实验29 25
四、>10%NaCl生长实验15 95
五、氧关系实验(无芽孢菌株) 44 90 52
附:
接触酶实验
(1)原理:触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。

(2)方法:取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3%H2O2 1滴,立即观察结果。

(3)结果:若立即出现大量气泡为阳性。

无气泡为阴性。

(4)应用:大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性,故常用此试验来鉴定。

此外,金氏杆菌属的细菌也为阴性。

分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验,结核分枝杆菌为阴性,戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。

注意事项:①3%H2O2溶液要新鲜配制。

②不宜用血琼脂平板上生长的菌落,因红细胞含有触酶,可致假阳性反应。

③取对数生长期的细菌。

氧化酶实验
氧化酶试验 (oxidasetest)氧化酶又名细胞色素氧化酶、细胞色素氧化酶C或呼吸酶。

试验用于检测细菌/是否有该酶存在。

原理是氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时,可氧化四甲基对苯撑二胺出现紫色反应。

假单胞菌属、气单胞菌属等阳性,肠杆菌科阴性,可区别。

试剂
1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存。

1%α-萘酚-乙醇溶液。

氧化酶或称细胞色素氧化酶,是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。

作氧化酶试验时,此酶首先使细胞色素C氧化,然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。

本实验肠杆菌科阴性,弧菌科,非发酵菌阳性(个别除外),奈瑟菌属均阳性。

试验方法
取白色洁净滤纸沾取菌落。

加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。

阴性于两分钟内不变色。

以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同。

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