浙科版生物选修一生物技术实践模块
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选修1《生物技术实践》知识点归纳实验1 大肠杆菌的培养和分离 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。
细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA分子(拟核)。
以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。
用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。
大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。
2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。
是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少,。
划线最后,可使细菌间的距离加大。
将接种后的固体培养基培养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。
在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。
用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取0.1mL不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养基里有20个以内的单菌落为最合适。
优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂。
在培养微生物时,必须进行无菌操作。
其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。
高中生物浙科版选修一知识点归纳
高中生物浙科版选修一知识点归纳选修一生物技术实践知识点总结第一部分微生物的利用一、微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌：P20-21，灭菌前，试管加棉花塞或塑料盖、三角瓶用封口膜或6层纱布封口……最后各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，用高压蒸汽灭菌法（121C，1kg/cm2压力）灭菌15min。
值得注意的是，实验中所需的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。
灭菌后，通常将实验用具放入60～80℃的烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分。
在进行实验操作前，将需要使用的用具从烘箱中取出，放到超净台上。
在超净台工作之前，应先打开超净台的紫外灯和过滤风，工作时关闭紫外灯。
塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。
2、培养基的配制：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
①培养基种类尺度培养基类型固体培养基液体培养基合成培养基天然培养基鉴别培养基配制特点加入琼脂不加入琼脂由已知成分配制而成由天然身分派制而成添加某种唆使剂或化学药剂主要应用菌种分离,鉴定,计数、保存菌种的扩大培养菌种的鉴别菌种的分离按物理性质分按化学组身分按用途分②微生物培养的培养基：LB培养基。
配制培养基时需考虑营养物质的配比外，还需要考虑微生物生长对pH、氧气、渗透压等的要求。
“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用卵白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
此外．细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。
选择培养基添加（或短少）某种化学身分3、培养基的灭菌：通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
但假如培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm压力（90C以上）灭菌30min。
有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
浙科版高中生物选修1：生物技术实践第二部分 酶的应用 复习课件
四、制备果胶酶并观察其作用
1.酶活力的高低会受温度、pH、激活剂等多种因素的影响。酶的提取一 般选择在低温和适合的 pH 下进行，有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。 例如，从植物材料中提取或保存果胶酶就是在低温、偏酸性的提取液和 NaCl 用作激活剂的条件下进行的。
2.果胶在植物的细胞或组织间起黏合作用，新鲜苹果汁由于含果胶而浑 浊。如果用果胶酶将其中的果胶分解，会引起细胞之间的离散，苹果汁就 会变得澄清。
答案：B
方法点拨：低温与高温对酶活力都有影响，低温导致酶活力降低，但
酶分子结构不发生改变，随温度升高酶可以恢复活力；而高温导致酶分子结 构发生改变，酶活力永久丧失。
探究温度和 pH 对果胶酶活力的影响及果胶酶的最适用量
●问题导引●
陈明的果汁加工厂生产的果汁在夏季产量高，澄清度好，但到了冬 季出汁率低，果汁浑浊、易发生沉淀。陈明想请你帮助分析解决这个难 题，你认为引起上述问题的关键在哪儿？
【例题 1】下图表示酶活力与温度的关系。下列叙述正确的是（ ）
A.当反应温度由 t2 调到最适温度时，酶活力下降 B.当反应温度由 t1 调到最适温度时，酶活力上升 C.酶活力在 t2 时比 t1 时高，故 t2 时更适合酶的保存 D.酶活力在 t1 时比 t2 时低，表明 t1 时酶的空间结构破坏更严重 解析：在最适温度时，酶的活力最高。温度偏高或偏低，酶活力都会明 显降低，而高温破坏了酶的空间结构，即使恢复到最适温度时，其活力也不 能恢复。当反应温度由 t2 调到最适温度时，酶活力不变，故 A 错误；当反 应温度由 t1 调到最适温度时，酶活力上升，故 B 正确；温度过高，会使酶的 空间结构遭到破坏，使酶永久失活，0℃左右的低温虽然使酶的活力明显降 低，但能使酶的空间结构保持稳定，在最适温度下酶的活力还可以恢复，故 酶适于在低温下保存，故 C、D 错误。
浙科版选修1学案
选修1 《生物技术实践》实验1 大肠杆菌的培养和分离1、细菌:细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核。
有一大型环状DNA分子（拟核）和多个小型环状DNA(质粒)，以分裂（二分裂）的方式繁殖。
大肠杆菌是: 革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌，代谢类型: 异养兼性厌氧型。
( 菌体:指细菌细胞单菌落:单个细菌细胞在固体培养基形成的细胞群。
芽孢:细菌细胞休眠体) 2、培养基（1)培养基的基本成分：水、碳源(提供碳元素)、氮源(提供氮元素)、无机盐。
（2）培养基的类型(按物理形态):①LB液体培养基(用于菌种的扩大培养) ②LB固体培养基（用于分离菌种和保存菌种）（3）培养条件: 适宜的PH、温度、溶氧量、渗透压等（4）培养基的配置:“细菌喜荤，霉菌喜素”①细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定的氯化钠，以维持一定的渗透压，PH为中性偏碱；②霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可，PH为中性偏酸。
(5)培养条件:适宜的PH、温度、溶氧量、渗透压等3、无菌操作(1)目的要求:防止所利用的微生物被其他微生物(杂菌)污染(2) 无菌操作过程:①各种器皿和培养基必须是无菌的，用高压蒸气锅灭菌[121 0C，1kg/cm2，15min] 灭菌；接种环也必须无菌,可以灼烧灭菌②转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无杂菌污染，在超净台（打开紫外灯和过滤风，灭菌30min）上酒精灯火焰旁操作。
转移时培养基不能沾在皿壁和瓶口上。
③棉花塞的制作标准:棉塞周围没有皱褶和缝隙，容易拔出，但手提棉塞时，三角瓶或试管不能落下来。
其中棉花用非脱脂棉（为什么?）。
④实验中使用过的器皿、培养基都需经过灭菌后才能清洗。
4、细菌的分离方法有两种：划线分离法和涂布分离法。
这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
(1) 划线分离用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上连续划线，在划线的过程中菌液逐渐减少，细菌也逐渐减少，划线到最后，可使细菌间的距离加大。
高中生物选修一《生物技术实践》
高中生物选修一《生物技术实践》一、传统发酵技术1.果酒制作：1）原理：酵母菌的无氧呼吸反应式：C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量。
2）菌种来源：附着在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培养的酵母菌。
3）条件：18-25℃，密封，每隔一段时间放气（CO2）4）检测：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。
2、果醋制作：1）原理：醋酸菌的有氧呼吸。
O2，糖源充足时，将糖分解成醋酸O2充足，缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O2）条件：30-35℃，适时通入无菌空气。
3、腐乳制作：1）菌种：青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（都是真菌）。
2）原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和aa ；脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
3）条件：15-18℃，保持一定的湿度。
4）菌种来源：空气中的毛霉孢子或优良毛霉菌种直接接种。
5）加盐腌制时要逐层加盐，随层数加高而增加盐量，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
4、泡菜制作：1）原理：乳酸菌的无氧呼吸，反应式：C6H12O62C3H6O3+能量2）制作过程：①将清水与盐按质量比4：1配制成盐水，将盐水煮沸冷却。
煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
②将新鲜蔬菜放入盐水中后，盖好坛盖。
向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证乳酸菌发酵的无氧环境。
3）亚硝酸盐含量的测定：①方法：比色法；②原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
二、微生物的培养与应用1、培养基的种类：按物理性质分为固体培养基和液体培养基，按化学成分分为合成培养基和天然培养基，按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
2、培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源、无机盐P143、微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
4、培养基还需满足微生物对PH、特殊营养物质以及O2的要求。
浙科版高中生物选修1：生物技术实践全套PPT课件
2. 涂布分离法的操作方法
倒 平 板 操 作
分离以尿素为氮源的微生物
实验目的：
• 1. 使用专一的培养基（含尿素）分离专一 的细菌（有脲酶的细菌）。
• 2.使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所 催化的反应。
实验原理：
脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一
些细菌含有脲酶可以分解尿素，利用尿素 作为其生长的氮源。
3.细菌的繁殖 细菌主要是以二分裂的方 式进行增殖（如右图）
4.细菌的菌落
⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态 结构的子细胞群体，叫做菌落。
⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、 透明度等。
⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落， 可以作为菌种鉴定的重要依据。
实验材料：
(1)25mlLB固体培养基：蛋白胨0.25g、酵母提取物0.12g、NaCl 0.25g、琼脂0.5g、加水25ml。
(2) 25ml尿素固体培养基：0.025g葡萄糖、NaCl 0.12g、 K602℃HP时O加40.入12经g、G酚6玻红璃0.漏25斗mg过、滤琼（脂使0.其5g无、菌加）水的15尿ml素。。灭菌冷却到
实验讨论
实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？
• 实验完成后，所有接触过细菌的器皿都必须 先高压灭菌后再洗涤，特别是培养基，有可 能被有害菌体污染，在培养繁殖后，大量有 害菌体影响人畜健康，也污染环境，因此必 须高压灭菌。使用后的废弃物也要高压灭菌 后再抛弃。对于取样器的取样头，通常是灭 菌后在超声波清洗器中加洗衣粉洗涤纶30 min ,再用清水洗净，仍可再用。封口膜也可 再用。
角烧瓶的液体培养基中，三角烧瓶在37℃摇床振荡培养 12h。 • (4) 划线分离：将摇床上培养12h的菌液在固体培养基的 平板上连续划线，然后将盖好的培养皿倒置，放在37℃ 恒温培养箱中进行培养。 • (5)单菌落接种培养：在无菌操作下将单菌落用接种环取 出，再用划线法接种在空白斜面上，在37℃下培养24h, 4℃冰箱保存。
浙科版生物选修一《生物技术实践 》《加酶洗衣粉的使用条件和效果》教案-新版
实验5 加酶洗衣粉的使用条件和效果【学习目标】1.说出加酶洗衣粉的洗涤原理。
2.探讨不同温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响。
3.运用所学知识解释说明如何使用不同种类的加酶洗衣粉，根据不同的外在条件（如温度）清洗不同衣物等日常生活问题。
【教学重点】探讨不同温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响【教学难点】实验过程中各种变量的控制【基础知识】1．家用洗衣粉的成分及作用家用洗衣粉和其他各种家用洗涤剂的成分基本相同，主要含有表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白剂和香精等成分。
（1）表面活性剂：是洗衣粉的主要成分。
表面活性剂有阴离子、阳离子、非离子和两性离子等四大类，但用于洗涤的表面活性剂则以阴离子和非离子为主。
最普通、最传统的阴离子表面活性剂就是人类使用了几百年的肥皂（高级脂肪酸钠）。
合成洗涤工业问世之后，使用最普遍的是十二烷基苯磺酸钠。
（2）水软化剂：水软化剂可防止水中的钙、镁离子造成的阴离子表面活性剂失活，提高表面活性剂利用率。
三聚磷酸钠是最为常用的一种水软化剂，它具有软化水质、分散污垢、缓冲碱剂及抗结块性能等特点，三聚磷酸钠曾广泛应用于各种洗衣粉中，但目前使用的无磷洗衣粉中不含有三聚磷酸钠。
（3）增白剂：丝、棉、毛类等天然纤维的浅色衣物容易变黄，加入增白剂后，它能够留存在衣物上，吸收阳光中的紫外线，反射出与黄光互补的蓝色光线，从而掩盖了衣物上的黄色。
（4）香精和色素：改善洗衣粉的气味和外观，给人清新愉悦的感受，并掩盖某些化学成分的异味。
2．加酶洗衣粉加酶洗衣粉就是在合成洗衣粉中，加入0.2％～0.5％的酶制剂制成的。
加每洗衣粉中一般添加了蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、半纤维素酶和纤维素酶等。
酶是一种专一性的生物催化剂，蛋白酶可以催化水解肉、蛋和奶渍，淀粉酶可以催化水解酱、粥等污渍，脂肪酶可以催化水解各类动植物油脂和人体皮脂腺分泌物及化妆品污垢，纤维素酶可使织物增艳（新）、去除颗粒性污垢，但过量使用，也能损伤棉、麻等天然纤维织物。
浙科版生物选修一《生物技术实践 》《乳酸脱氢酶同工酶的分离》讲授课件-新版
不连续电泳的四个不连续性
凝胶浓度的不连续性； 缓冲液离子成分的不连续性； 缓冲液PH梯度的不连续性； 电位梯度的不连续性。
（3）蛋白质在净电荷聚丙烯酰胺凝胶电泳中的
分离因素：
电荷因素：蛋白质分子性状和大小相同，所带电 荷性质和数量不同 分子大小：蛋白质分子性状和所带电荷和数量相
根据五种同工酶分子结构以及理化性质的不同 PI 各
不相同，在同一 SDS-PAGE 中，在电场中移动速度不
同，可用电泳法将其分离。
（3）生理及临床意义：
a.在代谢调节上起着重要的作用。 b.用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征。 c.同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断。 d.同工酶可以作为遗传标志，用于遗传分析研究。
C.肽链的多少
D.分子形状的差异
3.电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所 带电荷（ B ）的电极移动。 A.相同 B.相反 C.相对 D.相向
4.缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界
的影响来维持（ B ）基本不变。 A.温度
退 出
B.pH
C.渗透压
D.氧气浓度
（1）原理：
是由单体丙烯酰胺（ Acr ）和交联剂 N ， N ， - 亚甲基 丙烯酰胺（Bis）在催化剂过硫酸铵（AP）和加速剂
N ， N ， ， N， - 四甲基乙二胺（ TEMED ）作用下聚合交
联而成的三维网状结构的凝胶。 TEMED 催化 AP 生成硫酸自由基：以 AP 为催化剂，以 TEMED为加速剂。
硫酸自由基的氧原子激活Acr单体并形成单体长链：
Bis将单体长链间连成网状结构：
（2）聚丙烯酰胺凝胶类型：
1.连续系统：是指电泳系统采用相同孔径的凝胶 缓冲系统等条件下进行区带电泳，是利用蛋白质 分子的电荷效应进行分离，凝胶的分子筛效应不 明显，一般只用于分离一些比较简单的样品，缺 点是分辨力不高。
选修1生物技术实践模块学生复习版市公开课获奖课件省名师示范课获奖课件
考点3 植物组织培养与酶旳研究
植物旳组织培养技术
（一）植物组织培养旳基本过程
（二）影响植物组织培养旳原因
• 不同旳植物组织、同一植物旳不同材料 • 营养、环境条件、植物激素
• （2）具有验证简朴生 物学事实旳能力，并对 试验现象和成果进行解 释、分析和处理。
• （3）具有对某些生物
注意选修试验与必修内容旳联络
选修内容
必修内容
选修三 基因工程
• DNA旳粗提取与鉴定
• 选修一 微生物旳利用
• （1）微生物旳分离和 培养
• （2）某种微生物数量 旳测定
• （3）培养基对微生物 旳选择作用
涂布平板操作讨论
涂布平板旳全部操作都应在火焰附近进行。结合平板划线 与系列稀释旳无菌操作要求，想一想，第2步应怎样进行无菌 操作？
应从操作旳各个细节确保“无菌”。例如，酒精灯与培养 皿旳距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒 精灯火焰周围；等等。
将接种后和未接种（作为对照组）旳培养基均放到370C旳 恒温箱中，培养12～24h后进行观察并统计成果。
（08广东，8）取 少许酵母菌液放入 血球计数板直接计 数，测得旳数目是 A、活细胞数 B、死细胞数 C、菌落数 D、细胞总数
考点2 老式发酵技术旳应用
（一）果酒制作旳原理
知识要点 1.酵母菌旳兼性厌氧生活方式
2.发酵需要旳合适条件
3.老式发酵技术所使用旳酵母菌旳起源
酵母菌旳代谢类型
酵母菌是种兼性厌氧型微生物，在 有氧时进行有氧呼吸，迅速繁殖。
无菌操作泛指在培养微生物旳操作中，全 部预防杂菌污染旳措施技术。
取得纯净培养物旳关键是预防外来杂菌旳入侵， 无菌技术就是预防杂菌污染旳操作技术。
浙科版生物选修一《生物技术实践 》《植物的组织培养》导学案-新版
实验11植物的组织培养【学习目标】1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花的组织培养，尝试植物激素的应用。
【教学重点】1.植物组织培养的相关概念和过程2.影响植物组织培养的因素3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
【教学难点】1.影响植物组织培养的因素。
2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
【诱学导思】一、植物组织培养的相关概念和基本过程1.植物组织培养的相关概念（1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。
细胞分化是基因__________的结果。
（2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。
细胞全能性是组织培养的基本原理。
（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。
（4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。
（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。
（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。
二、影响植物组织培养的因素1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。
同种植物材料，__________，__________等也会影响实验结果。
菊花的组织培养，一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。
2.外部因素：（1）营养条件常用的是__________培养基，其主要成分包括：__________，如_____________________________；__________，如___________；__________等。
生物浙科版选修一生物技术实践(课件)
培养学生设计实验、动手操作、收集证据等 科学探究的能力，增进学生对生物技术应用 的了解。
本模块适于继续学习理工类专业或对实验操 作感兴趣的学生学习。
教材内容： 微生物的利用、酶的应用、生物 技术在食品加工中的应用、浅尝现代生物技 术。 四个部分之间相对独立，没有严格的顺序关 系。每个部分下设3-4个实验，大体上也相对 独立，以利于师生选择性完成本模块的学习。
超净工作台的使用）
5 实验８果酒及果醋的制作
实验１的结果反馈
始业教育
• 实验室守则：安全；安全使用生物；其他 注意事项。
• 不携带食物和饮料进实验室 • 建议携带相机等器材辅助记录实验
加酶洗衣粉的使用条件和效果
• 加酶洗衣粉 奥妙加酶洗衣粉（注明加酶，但未注明加 了哪种酶）
• 无酶洗衣粉 雕牌洗衣粉（未注明加酶，但在洗衣粉的使 用注意上有“不适合洗涤毛、丝织品”）
（50min）（水浴锅的使用）布置实验10:泡菜…… 的预习，让学生隔天中午来做（10min）
2 完成实验4果汁中的……（移液枪的使用）实验10：
泡菜的亚硝酸的测定（未完成）
3 实验６α-淀粉酶……（40min）
ＬＢ培养基的制备，灭菌尝试及高压灭菌锅的使用
4 实验１大肠杆菌的培养与分离（无菌操作；摇床、
（汰渍洗衣粉） 哪里去买无酶洗衣粉？买不到自己处理一 下？
• 实验材料：鸡血纱布 （缺点：样品的均一度低）
实验10:泡菜的腌制与亚硝酸的测定
• 盐、糖、酒这些配料教材上没有规定用量 • 盐我们规定了最少用量 • 糖、酒让学生自己确定用量并记录清楚
• 最后在测亚硝酸盐的时候看差异
• 实验最后没有完成 １、显色剂“Ｎ-1-萘基乙二胺”“对氨基 苯磺酸” ２、比色计
浙科版生物选修一生物技术实践模块
4.发酵 发酵瓶放在25~30℃条件下2~3天,当停止出现气泡, 表示发酵完毕.若温度偏低,则时间相对延长;若温 度高于30度,需要降温,否则口味不佳 5.过滤保存 用两层纱布滤去葡萄皮和籽，将获得的滤液分装到 1~2L的细口瓶中，加盖密封，静置。待沉淀后，上 清夜即为葡萄酒。（可保存1~2年）
用果汁制作的果酒含糖量高，酒精含量较高。 设备、步骤：自学
1.葡萄或其他果实上常有天然的野生酵母存在,为什么 上述两个实验都要接种酵母?
◦ 本实验为了加速反应，使观察更直接，需要加蔗糖，所以加 酵母是为了使酵母酒精发酵占有优势，避免许多霉菌生长， 出现异味。
2.为什么发酵瓶中的液体不能装满?
甲瓶：放800mL酒水混合物 乙瓶：发酵瓶(醋酸发酵)
◦ 200mL酒水混合物+适量醋杆菌 ◦ 两进一出 ◦ 进原料进空气、出果醋
丙瓶：收集果醋
4.酒精发酵和醋酸发酵的区别和联系： 区别 酒精发酵 醋酸发酵 酵母菌 醋酸菌 微生物 有氧 无氧 氧气 酒精 。 联系 酒精发酵为醋酸发酵提供_____ 5.实验现象 发酵 酒精发酵 醋酸发酵 气味和味道 酒味 酸味 气泡和泡沫 有气泡和泡沫 无气泡和泡沫 发酵液颜色 混浊 混浊，液面形成白色菌膜
◦ 发酵过程中有气体产生，留有空间可暂时储气，否则产生的 CO2会液体外溢，损失发酵液，且易引起霉菌污染。
3.装水的弯曲玻璃管起什么作用?
◦ 既可排出二氧化碳，又可防止氧气进入，同时还能防止杂菌 污染。
又名醋酸杆菌，是一类能使糖类和酒精氧化成醋酸等产物 的短杆菌。醋酸杆菌没有芽孢，不能运动，好氧，在液体 培养基的表面容易形成菌膜，常存在于醋和醋的食品中。 工业上可以利用醋酸杆菌酿醋、制做醋酸和葡萄糖酸等。
浙科版高中生物选修1《生物技术实践》期末考点透析
《生物技术时间》期末重难点突破(时间：90分钟满分：100分)一、选择题(本大题共15小题，每小题2分，共30分，在每小题给出的四个选项中，只有一个是符合题目要求的。
不选、多选、错选均不得分)1．下列有关微生物的培养与应用的叙述，正确的是（）A．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基上的细菌含量B．纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有划线分离法和涂布分离法C．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌D．培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌解析：在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基灭菌是否成功。
在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有一种细菌。
培养微生物的培养基先灭菌再分装到培养皿。
答案：B2．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是（）A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次解析：培养微生物过程中应先灭菌再倒平板；每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌；接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养，光照会影响温度等条件；培养过程中观察间隔的时间一般不超过24 h。
答案：B3．如图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为1、2、3、4、5。
下列叙述正确的是（）A．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上C．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数解析：在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线操作时，左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖；注意接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的；第1区和第5区的划线不能相连。
浙科版生物选修一《生物技术实践 》《大肠杆菌的培养和分离》教学课件2-新版
微生物是结构简单、形体微小，若想得 到纯净的微生物，就必须对其进行培养和分 离。 今天我们就以大肠杆菌为例学习微生物 的培养与分离。
03
新知探究
（一）基础知识
（二）实验流程
（一）基础知识
1
微生物 培养基
无菌操作
2
3
1
微生物
1、概念：指结构简单,形体微小的单细胞、 多细胞或无细胞结构的低等生物。
4、常用的消毒与灭菌的方法：
（1）常用消毒法： A、煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min B、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃下
煮15min（牛奶）
C、化学药剂消毒法：用70%酒精进行皮肤消毒;
氯气消毒水源
D、紫外线消毒：（空气）
（2）常用灭菌法：
a.灼烧灭菌
b.干热灭菌： 160-170℃ 下加热1-2h。
3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养
基上划线。
① ②
④
③
分离后，一个菌体 便会形成一个菌落 ，这是消除污染杂 菌的通用方法，也
是用于筛选菌株的
最简便方法之一。
04
随堂练习
编号 成分 含量
右表是某微生 物培养基成分， 请据此回答下列
①
② ③
问题：
④ ⑤ ⑥ ⑦
粉状硫 （NH4） 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
菌种扩增 •摇床震荡培养12h（于LB液体培养基中）
（二）实验流程
配制培养基 灭菌 倒平板 接种、划线 培养
包器材
菌种扩增
观察记录
倒平板
灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿 中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使 培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。
生物学科教学指导意见-选修1(浙科版必修2009版)(适用2013届毕业生)
选修Ⅰ生物技术实践该模块是实验课，要求学生在自学有关知识的基础上，在教师的指导下自己设计并进行实验，然后收集和整理资料，写出报告，进行口头交流，相互讨论，有助于学生较深入地认识微生物的利用、酶的应用、生物技术在食品加工中的应用和在其他方面的应用；培养学生的动手能力与实践能力，领悟观察、实验、比较、分析和综合等科学方法及其在科学研究过程中的应用。
第一部分微生物的利用一、课标内容进行微生物的分离和培养。
二、教学要求本部分“实验 3 观察土壤中能水解纤维素的微生物”不作要求，只要求学生做2个实验，即“实验1 大肠杆菌的培养和分离”与“实验 2 分离以尿素为氮源的微生物”。
实验1 大肠杆菌的培养和分离基本要求1．进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2．进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
发展要求说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
说明实验2 分离以尿素为氮源的微生物基本要求1．进行微生物分离，使用含有尿素的培养基分离有脲酶的细菌。
2．使用酚红指示剂检测以尿素为氮源的细菌的存在。
发展要求1．说明分离以尿素为氮源的细菌的实验原理。
2．举例说明本实验分离出来的细菌不一定都是以尿素为氮源的细菌。
说明三、教学建议1．课时建议（共计12课时）实验室守则的学习1课时生物技术概述3课时大肠杆菌的培养和分离2课时分离以尿素为氮源的微生物3课时复习与检测3课时2．实验建议选修Ⅰ内容主要由各种实验组成，强调对学生动手能力的培养与实验操作过程的体验，与必修内容的知识性学习有明显的不同。
学生刚接触时，教师应通过生物技术概述内容的讲解，先让学生对生物技术有一初步的了解，在思想上有充分的准备，使学生形成勤动手、勤实验的意识与习惯，促进学生对本模块的学习与体验。
（1）在“大肠杆菌的培养和分离”的实验中，要特别强调无菌操作，这是进行微生物实验中必备的操作要求，也是本模块多数实验的基本要求，应该让学生形成无菌操作的行为习惯。
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实验11
植物的组织培养
写一写：植物组织培养的形成新植株的流程图
离体植
物组织
脱分化?
愈伤组织
再分化?
根、芽
新植株
摇床震荡液体悬浮培养
单细胞（胚性细胞)
胚状体
说一说：组织培养的条件
无菌环境
一定的温度
一定的光照
防止外植体带菌、保 证培养基及接种器具 彻底灭菌、严格遵守 无菌操作规程
70%的酒精擦超净台，酒精灯旁，将外植体插入培养 基中，不要倒插，每瓶接种2-3段幼茎切断。
培养条件
温度：18-25度
光照：大于14.5h
生茎培养(丛状苗)
生根培养
总结：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧）
4）逐渐减小 先增加后下降、不能；（5）降低
染色体畸变 细胞核变异 遗传物质的改变 非整倍体的产生 激素平衡被打破 对外源生长物质的敏感性发生改变 生长 其他原因 发育
条件 的改 变
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技 术可以保持品种的 遗传性 ，繁殖种苗的速 度 快 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最 终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全 部 遗传信息 。 (2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台 上进行，其原因是避免 微生物 的污染。 （3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱 导试管苗 ，而与细胞分裂素 配比适宜时可促进芽 的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生 长，需尊使用的生长调节剂是 (脱落酸、2， 4-D)。
4、超净台中操作
应用1：某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找 污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外共他均相同。下列 各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是什么？
污染主要不是培养基灭菌时间短造成的； 污染主要来源于组织培养所用的离体组织； 调节培养基pH不能解决污染问题； 调节培养温度不能解决污染问题。
4）将某植物试管苗培养在 含不同浓度蔗糖的培养基 上一段时间后，单株鲜重 和光合作用强度的变化如图。 据图分析，随着培养基中蔗 糖浓度的增加，光合作用强度 的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势 是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管 苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满 足自身最佳生长的需要。 (5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其 光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中 蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
①按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验 结果。
使用顺序 先使用生长素，后使 用细胞分裂素 实验结果
有利于细胞分裂， 但细胞不分化
细胞既分裂又分化
先使用细胞分裂素， 后使用生长素
同时使用Hale Waihona Puke 分化率提高使用比例
实验结果
生长素/细胞分裂素高
生长素/细胞分裂素低 生长素/细胞分裂素相当
有利于诱导根的形成 有利于诱导芽的形成 愈伤组织生长不分化
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的 不同？ 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物 包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？
组织的脱分化及愈伤组织的再分化。
植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素的配比。
含有全部营养成分的培养基
适合的PH 植物激素比例合适
MS培养基
适宜的外植体
细胞分裂素 和生长素
任务：阅读课文写出菊花组织培养操作流程
培养基的配制？
外植体的获取和消毒？
接种
场所与注意事项？
培养（丛状苗的培养和生根培养）生芽和生根培养皿移栽 移栽 （草炭土或蛭石中） 炼苗 定植
大量元素 微量元素 有机成分
萘乙酸NAA 苄基腺嘌呤BA
2.生芽培养基 3.生根培养基
配制母液 配制培养液 熔化琼脂 调pH 高压蒸汽灭菌
若从自然种群中获取的外植体该如何处置?
5%次氯酸钠5min 5%次氯酸钠5min
70%乙醇浸泡10min
超净台中无菌水清洗
课本实验用的是无菌菊花苗 因此不用外值体消毒 ★注意要无菌操作