实验十 卵磷脂的提取及其组成鉴定
卵磷脂的提取及其乳化特性实验
卵磷脂的提取及其乳化特性实验一、实验目的学习卵磷脂的提取方法。
了解卵磷脂的乳化特性性质。
二、实验原理在卵黄中约含有10%的卵磷脂。
纯卵磷脂是白色块状物,不溶于水,易溶于乙醇、氯仿、乙醚和二硫化碳中,不溶于丙酮,利用这一性质可以与中性脂肪分离。
卵磷脂的胆碱基是亲脂基团,具有能使互不相溶的两相(油相和水相)中的一相分散在另一相中的作用,使之成稳定的乳浊液,因此,卵磷脂是一种天然的乳化剂。
冰淇淋是一种常见的W/O型乳液,要使其形成,必须得表面活性剂的存在,卵磷脂作为一种天然乳化剂,可以用在冰淇淋制作中促进乳液的生成。
三、实验材料与仪器鸡蛋6个,白砂糖,淡奶油250mL、高纯度白酒60mL、食用油、平底锅或电饭煲,碗四、实验步骤(1)卵磷脂的提取选新鲜鸡蛋一个,轻轻在鸡蛋小头击破一个小孔,让蛋清从小孔中流出,取出蛋黄置白瓷碗中,搅碎。
在搅拌下加入50°C白酒60mL,保温提取3-5min,冷却过滤,将滤液置于铁盆中,水浴蒸干,残留物为卵磷脂。
对提取的卵磷脂进行感官评价,记录色泽、气味并拍照保存。
(2)乳化试验取两个小玻璃杯,分别加入约10毫升水,一杯中加入卵磷脂,并使之均匀分散在水中,再加入5滴食用油;另一杯中仅滴入5滴食用油,强烈摇动两个玻璃杯,静置后观察比较两玻璃杯内容物的乳化状态,记录结果。
(3)蛋黄冰淇淋的制作取白砂糖50g、淡奶油250毫升、鸡蛋黄5个。
首先白砂糖磨碎变细砂糖,和鸡蛋黄-起搅拌均匀小火加热至白砂糖融化(不粘锅),鸡蛋黄变发。
倒出,不断沿同一方向搅拌,直至打发。
淡奶油打发,将打发好的鸡蛋黄慢慢加入打发好的淡奶油中,边加边搅拌,最后倒入容器中装好,冰箱中冷冻5小时。
对制作好的蛋黄冰淇淋进行感官评价并记录。
五、实验结果记录与分析(1)卵磷脂的提取(2)乳化实验附上照片刚开始加入少量乳化的卵磷脂时,四周会产生一些小小的气泡,慢慢变得浑浊;随着加入乳化的卵磷脂的量增加变得更加浑浊(3)蛋黄冰淇淋制作。
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器,如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能,如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂,通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤,得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂:无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取(1)称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄,加入30mL温热的95%乙醇,边加边搅拌均匀。
(2)将混合液冷却至室温,用漏斗过滤,收集滤液。
(3)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化(1)将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚,溶解后过滤。
(2)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定(1)三甲胺的检验:取少量卵磷脂,加入2~5mL氢氧化钠溶液,水浴加热15min,观察红色石蕊试纸是否变蓝,并嗅其气味。
(2)不饱和性检验:取少量卵磷脂,加入3%溴的四氯化碳溶液,振摇观察是否褪色。
(3)磷酸的检验:取少量卵磷脂,加入5~10滴95%乙醇溶液和5~10滴钼酸铵试剂,水浴加热5~10min,观察是否产生蓝色沉淀。
(4)甘油的检验:取少量卵磷脂,加入0.2g硫酸氢钾,小火加热,观察是否有水蒸气放出,嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验,成功从蛋黄中提取出卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀,得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验,验证了提取的卵磷脂纯度较高。
卵磷脂的提取和纯化
剂中,在密闭的层析缸中展层。
由于各种物质的结构和性质的不同,其在吸附 剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸
附,而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被
吸附剂吸附,而易被展层剂携带至较远的距离。这
样,各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被
吸附与解吸附,就表现出不同的迁移率而得以分离, 并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。
7、显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶
液,热风吹干至色斑显现。
五、实验结果
1、卵磷脂收率 卵磷脂收率 = 卵磷脂粗品重量 / 蛋黄重量×100% 2、计算各组分的Rf 值 3、判断卵磷脂粗提物的组分 四种磷脂标准品的Rf值分别为:溶血卵磷脂0.18;神 经鞘磷脂0.33;卵磷脂0.65;磷脂酰乙醇胺0.96
胆
碱
HO
二、实验原理
(一)卵磷脂的提取和纯化
磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,极难溶于丙酮; 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂,但不溶于 丙酮; 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
因此,本实验用乙醇、乙醚为溶剂,丙酮为沉淀剂,干燥后
获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为 白色蜡状物 ,与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈 黄褐色 。卵磷脂中的胆碱,
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1,2, 3,4列, 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来, 就得到 上表的 试验安 排。
(二)薄层层析
薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄 层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是 点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层
表1
抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
掌握卵磷脂的组成鉴定
•
• • •
卵磷脂的提取及其组成鉴定
一、实验目的
1. 掌握卵磷脂的提取方法。 2. 掌握卵磷脂的组成鉴定。 3. 掌握蒸馏、抽滤等基本操作。
1
二、实验原理
• 卵磷脂具有乳化分解油脂的作用,可增进血液的循环,清除过氧化物,使血 液中的胆固醇及中性脂肪含量降低,可预防和治疗动脉硬化。同时,卵磷脂 还具有改善记忆,健脑作用,在肝脏保护、心脏健康、婴儿神经发育和糖尿 病治疗等方面也具有积极的作用。 卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中卵磷脂的含量较高,约8%。可 根据它溶于乙醇、二氯甲烷而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。 卵磷脂可在碱性溶液中加热水解,水解后的产物为甘油、高级脂肪酸、磷酸 和胆碱,可从水解液中检出这些组分。 卵磷脂的结构、实验步骤
卵磷脂的提取
取熟鸡蛋蛋黄一个,于研钵中研细。将20mL95%乙醇分两次加 入研钵中研磨。减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移 入研钵中。再加10mL 95%乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并两次 滤液。如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入圆底烧瓶中。 搭建蒸馏装置,将上述提取液蒸馏除去乙醇,当圆底烧瓶内出现 泡沫时,移去火焰,稍冷后,残余物加入5mL无水乙醇,振摇后继续 蒸馏,当圆底烧瓶内再次出现泡沫时,停止蒸馏,得到黄色油状物。 冷却后,加入5mL二氯甲烷,搅拌使油状物完全溶解。在搅拌下慢慢 加入15mL丙酮,即有卵磷脂析出,搅拌使其析出完全(溶液倒入回 收瓶内)。
四、实验装置
蒸馏装置
卵磷脂组成鉴定
• (1)水解:在上述圆底烧瓶内加入5mL20%NaOH,摇匀后放入沸水浴中加热 10分钟,并用玻璃棒加以搅拌,促使卵磷脂水解。冷却后,在漏斗中用棉花 过滤,滤液供下面鉴定用。 (2)脂肪酸的鉴定:取棉花上沉淀少许,加1滴20%NaOH与5mL蒸馏水,用 玻璃棒搅拌使其溶解。在漏斗中用棉花过滤,得澄清液。以浓HNO3酸化后, 加入10%乙酸铅2滴,观察溶液的变化. (3)甘油的鉴定:取试管一支,加入1mL 1%CuSO4、2滴20%NaOH,振摇, 有Cu(OH)2沉淀生成。加入1mL水解液振摇,观察现象。 (4)胆碱的鉴定:取水解液1mL,滴加浓H2SO4使其酸化(以石蕊试纸检验) ,再加入1滴碘化铋钾溶液,观察现象。 (5)磷酸的鉴定:取试管一支,加10滴水解液,滴加浓H2SO4使其酸化后, 再加5滴5%钼酸铵试剂,20滴氨基萘酚磺酸溶液,振摇后加热,观察颜色的 变化。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于动植物细胞膜中,对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂,了解其提取方法和鉴定技术,为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先,我们需要准备卵黄,将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂,使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后,通过离心将上清液和沉淀分离,将上清液转移到锥形瓶中,加入等体积的0.9%氯化钠溶液,摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后,将沉淀离心,得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构,我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先,将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中,然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品,放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射,我们可以观察到卵磷脂的斑点,并计算Rf值来确定其纯度。
另外,质谱技术也是一种常用的鉴定方法,通过质谱仪的分析,我们可以得到卵磷脂分子的质谱图,进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定,我们成功得到了卵磷脂,并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射,我们观察到了卵磷脂的斑点,并计算出了其Rf值,证明了其纯度。
同时,质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰,进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中,我们也发现了一些问题,比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰,导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此,在今后的实验中,我们需要进一步优化提取方法,提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验,我们成功提取和鉴定了卵磷脂,了解了其提取方法和鉴定技术。
同时,我们也发现了一些问题,为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力,能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
提取卵磷脂实验报告
一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。
2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。
3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。
它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。
本实验采用乙醇作为溶剂,通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂,并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器:离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 取鸡蛋,去壳取蛋黄,用玻璃棒搅拌成糊状。
2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇,搅拌均匀。
3. 将混合液倒入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使卵磷脂充分溶解。
4. 将烧杯置于冰箱中,低温处理2小时,使卵磷脂沉淀。
5. 取出烧杯,用漏斗和滤纸过滤沉淀物,得到卵磷脂粗提液。
6. 将粗提液倒入离心管中,离心分离,取下层卵磷脂沉淀。
7. 将沉淀物用乙醚洗涤,去除杂质,得到纯净的卵磷脂。
8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中,晾干至恒重。
五、实验结果与分析1. 提取结果:通过实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 鉴定结果:a. 硫酸铜试验:取少量卵磷脂,加入硫酸铜溶液,振荡,若出现蓝色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有磷酸基团。
b. 氯化钠试验:取少量卵磷脂,加入氯化钠溶液,振荡,若出现白色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有胆碱。
六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂,能够有效提取蛋黄中的卵磷脂,提取率较高。
2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀,提高提取纯度。
3. 通过硫酸铜和氯化钠试验,对提取的卵磷脂进行了鉴定,验证了其纯度。
七、实验结论通过本实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,并对其进行了鉴定。
实验结果表明,本实验方法可行,提取的卵磷脂纯度较高,为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。
八、实验注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染。
卵磷脂的提取、鉴定和应用
卵磷脂的提取、鉴定和应用卵磷脂的提取、鉴定和应用一、引言卵磷脂是甘油磷脂的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱组成。
卵磷脂广泛存在于动植物中,在植物种子和动物的脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多;其中蛋黄中含量最丰富,高达8—10%,因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离心进行分离,下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡准状物,遇空气可氧化成为黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲胺,三甲胺有特殊的鱼腥味,可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂,抗氧化剂,营养添加剂。
二、实验材料和仪器鸡蛋、花生油。
乙醚、10%NaOH。
磁搅拌器,离心机。
三、实验步骤1.卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄,于150毫升三角锥瓶中加入40毫升乙醚,放入磁搅拌器,室温下搅拌提取15分钟。
然后静置30分钟,上层液用带棉花塞的漏斗过滤,往残渣中再加入15毫升乙醚,搅拌提取5分钟。
第二次提取液通过过滤后,与第一次提取液合并,于60度热水浴中蒸去乙醚,将残留物质倒入烧杯中,放如真空干燥器中减压干燥30分钟以初尽乙醚,约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心,十分钟后,下层为卵磷脂,约得2.5-2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物/2.卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g,于试管内加入10%NaOH溶液2毫升,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼醒味,以确定是否卵磷脂。
3.乳化作用两支试管中各加入3-5毫升水,一只加卵磷脂少许,溶解后滴加5滴花生油。
另一只也滴入5滴花生油,加塞极力振荡试管,使花生油分散。
观察比较两只试管内的乳化状态。
卵磷脂的提取实验报告
卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言:卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物,存在于生物体细胞膜中,具有重要的生理功能。
本实验旨在通过提取卵磷脂,了解其提取方法和应用。
实验材料与方法:材料:鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器:搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤:1. 取适量鸡蛋,将蛋黄与蛋清分离。
2. 将蛋黄放入搅拌器中,加入适量乙醇,搅拌均匀。
3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心,离心后分为两层,上层为乙醇层,下层为沉淀层。
4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
5. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。
6. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。
7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
8. 加入适量水,摇匀后放置静置。
9. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。
10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
11. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。
12. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。
13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
14. 加入适量水,摇匀后放置静置。
15. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。
结果与讨论:经过多次提取,我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。
实验过程中,通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用,能够有效地分离出卵磷脂。
乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂,而氯化钠则用于调节溶液的渗透压,帮助分离。
氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂,能够与卵磷脂形成复合物,从而实现分离。
卵磷脂作为一种重要的生物大分子,具有多种生理功能。
首先,卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一,能够维持细胞膜的完整性和稳定性。
其次,卵磷脂还参与细胞信号传导,调节细胞功能。
此外,卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能,常被用作食品添加剂和药物载体。
在实际应用中,卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。
例如,可以根据不同来源的卵磷脂进行提取,以获得特定的卵磷脂种类。
实验九卵磷脂的提取和鉴定
实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的:熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。
实验原理:卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子,其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。
卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能,在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。
卵磷脂的提取方法:材料:鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。
1.取足够多的鸡蛋黄,用纯净水洗净后晾干备用。
2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出,剥去蛋壳并取出蛋黄,用刀将其压成泥状。
3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中,加入适量的乙醇,不断搅拌,使其混合均匀。
4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后,将其倒入滤布中,将滤液与滤涤液分离开来。
5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷,用250ml分液漏斗进行振荡后,取出下层酒精分离液。
6.将酒精中的卵磷脂析出,将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解,即可得到卵磷脂。
卵磷脂的鉴定:1.磷钼酸法:将标本加入一定量的磷钼酸试剂,加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解,此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。
其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应,生成黄色的磷钼酸沉淀。
2.碱水解法:将标本与氢氧化钠混合,使卵磷脂水解产生酰基胆碱。
然后加入硫酸和琼脂,沉淀下来的物质即为卵磷脂。
3.利用质谱法进行鉴定:该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征,通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定,进行卵磷脂的鉴定。
实验步骤:1.取少量卵磷脂样品溶于水中。
2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁,然后加入磷钼酸试剂。
3.待磷钼酸在样品中完全溶解后,使用分光光度计测定溶液中吸收光谱,从而得出样品中卵磷脂的质量。
实验结论:通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法,我们可以成功地得到卵磷脂,并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。
这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。
卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的
卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的卵磷脂的提取与鉴定一实验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法。
二实验原理卵磷脂在脑神经细胞中含量很高,蛋黄中含有特别高。
根据卵磷脂溶于乙醇、乙醚等有机溶剂进行提取。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物,与空气接触后被氧化为黄褐色。
利用卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺(特殊的鱼腥臭味)进行鉴别。
三实验器材与试剂鸡蛋黄、乙醇(95,)、10,NaOH、烧杯、量筒等。
四实验步骤1 提取卵磷脂取2g蛋黄于15mL(95,)乙醇,过滤、蒸气浴蒸干,残留物为卵磷脂。
2 鉴别取少量的卵磷脂于试管中,加10,NaOH溶液2mL,水浴加热是否产生鱼腥臭味。
五注意事项滤液要清。
六作业完成实验报告,写出实验小结。
1粗脂肪的提取和定量测定——索氏提取法一实验目的1 学习和掌握用索氏提取器提取脂肪的原理和方法2 学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。
二实验原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性,在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的的脂类物质进行提取。
因提取的物质是脂类物质的混合物,故称其为粗脂肪。
三实验器材1索氏提取器 2 分析天平 3 烧杯 4 恒温水浴锅 5 脱脂棉和脱脂滤纸 6 镊子7 干燥器四实验试剂与材料1 样品2 石油醚五实验步骤1称量索氏提取瓶将索氏提取瓶洗净烘干至恒重,记录重量。
2提取样品粗脂肪将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积1/2—2/3。
将样品包放入提取管内。
连接索氏提取器各个部分。
用70度,80度恒温水浴加热提取瓶,抽提进行2―3小时,直至提取管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止,表示提取完全。
3 计算样品中粗脂肪的含量提取完毕,取出滤纸包,再回馏一次,倒出石油醚。
取下提取瓶,洗净瓶的外壁,烘干至恒重。
记录重量。
2按照下式计算样品中粗脂肪的百分含量。
粗脂肪(,),(提取后提取瓶的重量,提取前提取瓶的重量)/样品重量*100% 六作业计算样品中粗脂肪的含量,完成实验报告。
食品化学综合的设计性实验汇报[1]卵磷脂的提取鉴定与应用
食品化学综合的设计性实验汇报[1]-卵磷脂的提取,鉴定与应用食品化学综合的设计性实验汇报——卵磷脂的提取,鉴定与应用一、引言卵磷脂是一种天然存在于动植物体内的物质,具有多种生理功能,如改善记忆、降低胆固醇等。
近年来,卵磷脂在食品工业中的应用越来越广泛,被用作添加剂、乳化剂、营养补充剂等。
本实验旨在探究卵磷脂的提取、鉴定方法及其在食品中的应用,以期为卵磷脂的开发利用提供理论支持。
二、实验材料与方法1.实验材料(1)原料:鸡蛋、大豆油(2)试剂:乙醇、硫酸、正己烷、甲醇、氯化钠、磷酸、酚酞指示剂、碘化钾淀粉试纸(3)设备:分液漏斗、旋转蒸发仪、真空干燥箱、电子天平、色谱柱2.实验方法(1)卵磷脂的提取将鸡蛋黄或大豆油用乙醇溶解后,加入正己烷进行萃取。
通过旋转蒸发仪将萃取液浓缩至半,得到卵磷脂粗品。
将粗品置于真空干燥箱中干燥,得到卵磷脂产品。
(2)卵磷脂的鉴定① 颜色反应:取少量卵磷脂产品,分别加入甲醇和酚酞指示剂,观察颜色变化。
② 红外光谱分析:将卵磷脂产品进行红外光谱扫描,与标准谱图对比。
③ 薄层色谱法:将卵磷脂产品点样于硅胶G板上,以石油醚-乙酸乙酯为展开剂进行展开。
观察斑点位置与颜色。
(3)卵磷脂的应用实验① 乳化性实验:将卵磷脂产品加入大豆油中,搅拌均匀。
取一滴混合液滴于水面,观察乳化现象。
② 抗氧化性实验:将卵磷脂产品加入到油脂中,测定油脂的氧化稳定性。
三、实验结果与讨论1.实验结果(1)卵磷脂的提取结果如下表:(2)卵磷脂的鉴定结果如下:① 颜色反应:卵磷脂产品在甲醇中溶解后呈红色,在酚酞指示剂中呈蓝色。
② 红外光谱分析:卵磷脂产品的红外光谱图与标准谱图基本一致,证实其为卵磷脂。
③ 薄层色谱法:斑点位置与颜色均与标准品一致,说明卵磷脂产品的纯度较高。
(3)卵磷脂的应用实验结果如下:① 乳化性实验:混合液滴于水面后,形成一层稳定的乳化层,说明卵磷脂具有较好的乳化性能。
② 抗氧化性实验:在油脂中添加卵磷脂后,油脂的氧化稳定性明显提高。
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定
卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
,
汇报人:
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
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卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取及鉴定作者:未知来源:郑州轻工业学院时间:2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。
2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。
试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中,加入5mL 浓氨水,另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后再用。
6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加边搅拌均匀,冷却后过滤。
如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管,加入少许卵磷脂,再加入5mL 乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3~5mL,观察实验现象。
(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验。
实训 卵磷脂的提取及其组成鉴定
实训卵磷脂的提取及其组成鉴定一、实验目的1、加深了解磷脂类物质的结构和性质2、学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法2、掌握卵磷脂的组成鉴定的原理和方法二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
卵磷脂分离提取的流程如下:三、仪器和试剂仪器研钵、布氏漏斗、蒸发皿、水浴锅(沸水)、玻璃漏斗、玻棒、小烧杯、试管、纱布、酒精灯。
试剂1、熟鸡蛋黄2、红色石蕊试纸3、95%乙醇4、20%氢氧化钠溶液5、钼酸铵试剂:将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中,加入5mL浓氨水,另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后使用。
6、丙酮7、氯仿8、10%溴的四氯化碳溶液9、硝酸10、1%硫酸铜溶液11、10%醋酸铅溶液四、操作步骤(一)卵磷脂的提取1、取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入10ml 95%乙醇研磨,再加入20ml 95%乙醇充分研磨,减压过滤(应盖满漏斗),滤干后,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发皿内。
2、将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。
3、冷却后,加入5ml氯仿,搅拌使油状物完全溶解。
4、在搅拌下慢慢加入15ml丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出,将氯仿丙酮溶液倒掉,取沉淀。
(二)卵磷脂的组成鉴定1、水解及三甲胺的检验取一支干燥大试管,加入提取的卵磷脂,并加入5ml 20%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热10分钟,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
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8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素,特别是在肠道内,当这些毒素含量 过高时,便会随着血液循环沉积在皮肤上,从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂,它能分解体内过多的 毒素,并经肝脏和肾脏的处理排出体外,当体内的毒素降低到 一定的浓度时,脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性,并有增加血红素的功能,如果每天服用一 定量的卵磷脂,就能为皮肤提供充分的水分和氧气,使皮肤变 得光滑柔润。
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10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈,人们长期处在紧张的环境和种种压力下, 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症,即植物神经紊 乱,通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂,可使大脑神经 及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳, 激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
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9、预防老年痴呆症的发生
• 人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质(乙酰胆碱)减少 是引起老年痴呆的主要原因,乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分, 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”,从而成为大脑提供充分的信息 传导物质,大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱,并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。
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以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内,水浴 锅中蒸干,所得干物即为卵 磷脂粗品。
卵磷脂的制备及鉴定
卵磷脂的制备及鉴定卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。
2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。
二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。
三、实验原理将卵黄中加乙醇,卵磷脂溶于乙醇溶液中,分离提取,蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。
但由于乙醇抽提时,其他脂质也一起被抽提,如甘油三酯、甾醇等。
利用卵磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂,能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。
无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀,因此,可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来,由此除去蛋白质、脂肪等杂质,再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。
四、实验仪器、试剂与材料1、仪器:离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。
溶液:取氯化锌10g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀,2、试液:l0%的ZnCl2即得。
3、试剂与材料:氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。
五、操作步骤1、粗提:取鸡蛋卵黄适量,用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取,离心分离(300Or/min,5min),将沉淀物重复提取3次,回收上清液。
然后减压蒸馏(45℃)至近干,用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。
加入丙酮溶解,抽滤,分离出沉淀,真空干燥(40℃,3Omin),得到淡黄色的粗卵磷脂,称重。
2、精制:取一定量的卵磷脂粗品,加无水乙醇溶解,得到约10%的乙醇粗提溶液,室温搅拌0.5h。
分离沉淀物,液。
加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮(4℃)洗涤,搅拌lh,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无色止,得到白色蜡状的精制卵磷脂;干燥;称重。
3、鉴定:(1)薄层色谱分析:取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液,用GF254硅胶板以氯仿:甲醇:水(65:25:4)为展开剂,展开,取出,干燥,碘蒸气显色。
(2)紫外吸收光谱测定:将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液,照紫外分光光法在190~40Onm处测定,卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。
卵磷脂的提取和鉴定
卵磷脂的提取和鉴定卵磷脂是一种重要的生物活性分子,具有许多生理功能和医学应用价值。
在研究和应用中,正确而高效地提取和鉴定卵磷脂是至关重要的。
本文将介绍卵磷脂的提取和鉴定方法,为相关研究和应用提供指导。
首先,介绍卵磷脂的提取方法。
常见的提取方法包括有机溶剂提取法、酶解法和超声波辅助提取法。
有机溶剂提取法是最常用的方法之一。
首先将样品加入有机溶剂(如甲醇、乙醇),进行浸泡提取,再通过离心分离,得到含有卵磷脂的上清液。
酶解法则是利用酶(如磷脂酶)进行水解,将卵磷脂释放出来。
超声波辅助提取法利用超声波的机械振动和热效应,加速卵磷脂的释放。
其次,介绍卵磷脂的鉴定方法。
常用的鉴定方法包括色谱法、质谱法和核磁共振法。
色谱法主要包括薄层色谱和高效液相色谱。
通过与标准品对照,根据卵磷脂的保留时间或峰面积来确定卵磷脂的含量和种类。
质谱法通过质谱仪的分析,利用质量/电荷比(m/z)来鉴定卵磷脂的分子结构和种类。
核磁共振法则通过核磁共振仪的分析,利用核磁共振信号来得到卵磷脂的结构信息。
在提取和鉴定卵磷脂时,需要注意以下几点。
首先,样品的选择要具有代表性和可重复性,确保提取和鉴定结果的准确性。
其次,选择合适的提取方法和鉴定方法,根据研究目的和实际情况进行选择,以提高效率和准确性。
再次,要使用纯度高的试剂和标准品,避免杂质的干扰。
最后,严格控制实验条件和操作技术,确保实验的精确性和可重复性。
总之,卵磷脂的提取和鉴定是研究和应用中的重要环节,本文介绍了常用的提取和鉴定方法,并提供了一些注意事项。
希望本文能够为相关研究和应用提供指导,促进卵磷脂的深入研究和广泛应用,推动医学和生命科学的进步。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的:了解卵磷脂的提取方法,并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。
实验原理:卵磷脂是一种磷脂类物质,具有重要的生物学功能。
卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。
具体步骤如下:1. 取鸡蛋黄1个,加入乙醇5ml,充分混匀。
2. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
3. 将混合液过滤,得到固体物质。
4. 将固体物质溶解在氯仿中,得到卵磷脂样品。
通过卵磷脂的紫外吸收光谱,可以鉴定卵磷脂的纯度。
卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
卵磷脂的纯度越高,吸收峰越尖锐,吸收强度越大。
实验仪器和试剂:乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。
实验步骤:1. 取鸡蛋黄1个,放置室温下1小时。
2. 用清水清洗后风干。
3. 取鸡蛋黄5g,磨碎成细末。
4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml,充分混匀。
5. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
6. 将混合液倒入漏斗中,过滤掉固体物质。
7. 将固体物质溶解在氯仿中,摇匀,得到卵磷脂样品。
8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。
实验结果:卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
经过检测,本次实验制备的卵磷脂纯度较高,吸收峰尖锐,吸收强度较大。
实验结论:本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法,并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。
实验结果表明,利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂,并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。
卵磷脂的提取与TLC检测
实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测
实验原料:鲜鸡蛋、纯化卵磷脂
实验试剂:
实验仪器:旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵
辅助器材:毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml量筒、50ml量筒、烧杯,圆底烧瓶等
操作步骤: 操作说明及结果纪录:
取10.0g 鸡蛋黄
蛋黄用30ml 丙酮(
pH8)搅拌1h
过滤
后,滤渣用丙酮洗2-3次 用30ml 乙醇-石油醚(3:1)混合试剂搅拌浸 提1h 抽滤 旋转蒸发(40℃) 收集产品,进行检测 TLC 检测 制板 称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用 45mL 1- 1mol ·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。
点样
用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。
展开
将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。
显色
将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现。
卵磷脂的提纯的实验报告
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法;2. 学习卵磷脂的提纯技术;3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。
其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。
卵磷脂具有多种生物活性,如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。
本实验采用乙醇提取卵磷脂,利用乙醚进行提纯。
实验过程中,通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤,使卵磷脂与其他杂质分离,提高卵磷脂的纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。
2. 实验仪器:离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。
四、实验步骤1. 提取卵磷脂(1)取一定量的蛋黄,加入适量的95%乙醇,充分搅拌,使蛋黄溶解;(2)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的氯化钠,充分搅拌,使蛋白质沉淀;(3)将溶液静置一段时间,待蛋白质沉淀后,取上层清液;(4)将上层清液转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(5)将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(6)将溶液过滤,收集滤液。
2. 卵磷脂的提纯(1)将收集到的滤液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(2)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(3)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的石油醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(4)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(5)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(6)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(7)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(8)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(9)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(10)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(11)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(12)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(13)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(14)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(15)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(16)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(17)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(18)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(19)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(20)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(21)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(22)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(23)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(24)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(25)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(26)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(27)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(28)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(29)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(30)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(31)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(32)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(33)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(34)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(35)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(36)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(37)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(38)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(39)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(40)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(41)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(42)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(43)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(44)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(45)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(46)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(47)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(48)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(49)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(50)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(51)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(52)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(53)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(54)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(55)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(56)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(57)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(58)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(59)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(60)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(61)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(62)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(63)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(64)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(65)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(66)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(67)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(68)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(69)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(70)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(71)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(72)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(73)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(74)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(75)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(76)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(77)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(78)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(79)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(80)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(81)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(82)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(83)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(84)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(85)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(86)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(87)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(88)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(89)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(90)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(91)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(92)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(93)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(94)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(95)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(96)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(97)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(98)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(99)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(100)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(101)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(102)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(103)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(104)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(105)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(106)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(107)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(108)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(109)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(110)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(111)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(112)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(113)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(114)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(115)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(116)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(117)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(118)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(119)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(120)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(121)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(122)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(123)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(124)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(125)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(126)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(127)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(128)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(129)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(130)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(131)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(132)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(133)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(134)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(135)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(136)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(137)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(138)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(139)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(140)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(141)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(142)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(143)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(144)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(145)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(146)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(147)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(148)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(149)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(150)。
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• 一、实验目的 • 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。 • 巩固抽滤等基本操作。
二、基本原理
• 卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋 黄中含量较高,约8%。可根据它溶于乙醇、 氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离 得到。卵磷脂可在碱性溶液中加热水解, 得到甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱,可从水 解液中检查出这些组分。其分离提取的流 程如下:
2.卵磷脂的水解及其组成鉴定
• (1)水解:取一支干燥大试管,加入提取的一半量的卵磷脂,并加 入5ml 20%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热10分钟,并用玻棒加以 搅拌,使卵磷脂水解,冷却后,在玻璃漏斗中用棉花过滤。滤液供下 面检查用。 • (2)检查 • 脂肪酸的检查:取棉花上沉淀少许,加1滴20%氢氧化钠溶液与5ml水, 用玻棒搅拌使其溶解,在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄明液,以硝酸酸 化后加入10%醋酸铅2滴,观察溶液的变化。 • 甘油的检查:取试管一支,加入1%硫酸铜溶液1ml,2滴20%氢氧化 钠溶液,振摇,有氢氧化铜沉淀生成,加入1ml水解液振摇,观察所 得结果。 • 胆碱的检查:取水解液1ml,滴加硫酸使其酸化(以石蕊试纸试之) 加入1滴克劳特试剂(碘化铋钾溶液),有砖红色沉淀生成。 • 磷酸的检查:取试管一支,加10滴水解液,加硫酸酸化,再加5滴钼 酸铵试剂,20滴氨基萘酚磺酸溶液,振摇后,水浴加热,观察颜色的 变化。
思考题:
• • • • 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理? 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作何 解释? 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么? 4.为什么实验中要进行减压过滤?操作 时应注意哪些地方?
三、仪器和药品
• 仪器:研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 • 药品:20%NaOH溶液 10%Pb(AC)2 1% CaSO4溶液 硫酸95%乙醇 氯仿 熟鸡蛋 黄 丙酮 碘化铋钾溶液 钼酸铵试剂 氨基 取 (1)取熟鸡蛋蛋黄2只,于研钵中研细,先加入20ml 95 %乙醇研磨,再加入20ml 95%乙醇充分研磨,减压过滤, 布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移入研钵中,再加 20ml 95%乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并二次滤液, 如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发皿内。 • (2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油 状物。 • (3)冷却后,加入8ml氯仿,搅拌使油状物完全溶解。 • (4)在搅拌下慢慢加入30ml丙酮,即有卵磷脂析出,搅 动使其尽量析出(溶液倒入回收瓶内)。
[注释]
• 1. 第一次减压过滤,因刚析出的醇中不溶物很细以及有少许水份,滤 出物浑浊,放置后继续有沉淀析出,需合并滤液后,以原布氏漏斗 (不换滤纸)反复滤清。 • 2. 蒸去乙醇时,可能最后有少许水份,需搅动加速蒸发,务使蒸干。 • 3. 黄色油状物干后,蒸发皿壁上沾的油状物一定要使其溶于氯仿中, 否则会带入杂质。 • 4. 搅动时,析出的卵磷脂可粘附于玻棒上,成团状。 • 5. 加热时,会促使胆碱分解,产生三甲胺的臭味。 • 6. 加硝酸酸化,脂肪酸析出,溶液变浑浊,加醋酸铅有脂肪酸铅盐生 成,浑浊进一步增强。 • 7. 生成的氢氧化铜沉淀.因水解液中的甘油与之反应,生成甘油铜, 沉淀逐步溶解。 • 8. 克劳特试剂为含有KI-BiI3复盐的有色溶液,与含氮碱性化合物如 胆碱生成砖红色的沉淀。 • 9. 钼酸铵经硫酸酸化为钼酸,它与磷酸结合为磷钼酸,磷钼酸再与还 原剂氨基萘酚磺酸作用,生成蓝色钼的氧化物。