小鼠肾素(Renin)酶联免疫检测
酶联免疫吸附法(ELISA)检测猪肉中盐酸克伦特罗
酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗作者：薛金英来源：《中国动物保健》2014年第10期盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精）为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5～10倍时，其有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中，用以改善胴体的品质，同时也造成食品中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA法，在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原，样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体，盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合，洗涤后，用TMB底物系统显色，微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法（稀释倍数为4倍）称取1.0 g（±0.05 g）均质样品于50 mL聚苯乙烯离心管中，加入1 mL 0.1 M盐酸，再加入2 mL提取工作液，充分振荡混匀5 min，4 000 rpm（20～25℃）离心10 min。
取1 mL上清液加入约25 μL 1 M 氢氧化钠调节pH至6.5～7.5之间，充分振荡混匀，取50 μL用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层，取样时应避开。
试剂准备：将10×浓缩洗涤液和蒸馏水（或去离子水）按1∶9充分混匀，即为1×洗涤液。
编号：将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号，建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
加样：加入标准溶液或样品50 μL，然后每孔分别加入盐酸克伦特罗酶标二抗50 μL和盐酸克伦特罗抗体溶液50 μL。
肾素(Renin)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求深圳泰乐德
肾素（Renin）测定试剂盒
（化学发光法）
2. 性能指标
2.1外观
2.1.1试剂盒中各组分应齐全、完整、无泄漏，试剂盒（瓶）上包装标签应清晰、无磨损。
2.1.2试剂条中的磁微粒试剂摇匀后，应为均匀悬浊液，无明显凝集；其他液体试剂溶液组分应澄清，无悬浮物、无沉淀物、无絮状物。
2.1.3校准品、质控品为冻干品，呈块状固体，不起泡、不塌陷，复溶后应为清澈透明液体，无沉淀，无悬浮物，无絮状物。
2.2准确度
相对偏差应在±10%范围内。
2.3空白限
应不大于2pg/mL。
2.4重复性
批内变异系数CV应不大于10%。
2.5线性范围
试剂盒线性范围（2-500）pg/mL，在此线性范围内，相关系数r应≥0.9900。
2.6批间差
批间变异系数CV应不大于15%。
2.7校准品、质控品均一性
瓶内均一性≤8%，瓶间均一性≤5%。
2.8校准品赋值准确性
相对偏差应在±10%范围内。
2.9质控品赋值准确性
质控品测值在参考范围内。
人(Human)肾素(Renin)中文说明书
中文说明书UNIONHONEST酶标板吸附测试Enzyme linked lmmnnosorbenl Assay _____________________________________________________________________________________ 人（Human）肾素（Renin）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：RENIN试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知RENIN浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将RENIN和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中RENIN的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制：试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）塑料膜板盖1块半块标准品：1000mU/ml1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素标记的抗RENIN抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）亲和链酶素-HRP 1瓶（12ml）1瓶（5ml）洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）自备材料：1. 蒸馏水。
2. 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
4.样品收集、处理及保存方法：1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
肾素-血管紧张素系统及其抑制剂renin-angiotensinsystem(
信号 转导
激活蛋白磷酸酶（Typ和Ser/ThyPTP）， 导致各种激酶（如MAPKs）水解失活； 延迟整流钾通道开放；T型钙通道关闭； 激活激肽/NO/cGMP途径
调控
上调：糖皮质激素、 cAMP 、细胞因 上调：胰岛素、胰岛素样生长因子、 子、心脏肥厚、心肌梗死 IL-1β、重构心脏的间质区 下调：心衰时心肌 下调：糖皮质激素、phorbol ester、NE
二、作用机理
⒈通过减少AngⅡ的生成。
⒉通过保存BK的作用。
三、 ACEI的药理作用
⒈血流动力学作用： ⑴舒张血管，降低血压。 ⑵对心脑肾血流动力学的影响。 ⒉抗心血管病理性重构的作用。 ⒊保护血管内皮细胞与抗动脉粥样硬化作用。 ⒋抗心肌缺血与心肌保护作用. ⒌对胰岛素敏感性的影响.
㈤血管紧张素受体（angiotensin receptor） • AngⅡ • AngⅢ • Ang（1-7） • AngⅣ ？ ？ AT1 AT2 AT3 AT4
AT1和AT2受体的主要特征
受体 类型 选择性 激动剂 分布 AT1 AngⅡ＞ AngⅢ＞＞ AngⅠ 血管、肾、肾上腺、肝、肺、脑、甲 状腺、子宫、卵巢 AT2 AngⅡ≈ AngⅢ＞AngⅠ 胚胎组织、成年肾上腺髓质、脑、生殖 系统
阿利吉仑150mg 阿利吉仑300mg
, Weir MR, et al. 2007 (Pooled analysis), White WB, et al. 2007 (Pooled analysis),Taylor AA, et al. 2007 (Pooled analysis Dahlöf B, et al. 2007 (Pooled analysis), Prescott MF, et al. 2007 (Pooled analysis)
醛固酮和肾素测量方法
醛固酮和肾素测量方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：醛固酮和肾素是两种重要的激素，对人体的生理调节起着重要作用。
醛固酮主要由肾上腺皮质分泌，控制体内水盐平衡和血压调节；而肾素主要由肾脏分泌，参与调节血压和钠盐平衡。
准确测量这两种激素的水平对于了解患者的健康状况具有重要意义。
醛固酮的测量方法主要有以下几种：1. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种常用的醛固酮测量方法，通过分离样品中的醛固酮并通过检测器检测其浓度。
这种方法准确度高，灵敏度较好，但操作复杂，需要专业的技术和设备。
2. 酶联免疫吸附法（ELISA）：这是一种常用的免疫学测定方法，通过特异性抗体和酶标记的结合来测定醛固酮的浓度。
这种方法操作简单，结果稳定，但准确度和灵敏度略低。
在实际临床应用中，常常需要同时测量醛固酮和肾素的水平，以帮助医生判断患者的健康状况并制定相应的治疗方案。
选择合适的测量方法对于提高诊断准确度和治疗效果具有重要意义。
醛固酮和肾素的测量方法多种多样，各有优缺点，医生在选择适合的方法时需要考虑患者的具体情况和实际需求。
通过准确测量这两种激素的水平，可以更好地了解患者的生理状况，为临床诊断和治疗提供有效的参考依据。
【本文共XXX字】第二篇示例：醛固酮和肾素是两种重要的激素，在人体内起着调节血压和体液平衡的重要作用。
醛固酮是一种由肾上皮细胞分泌的甾体类激素，主要作用是促进钠的重吸收和钾的排泄，从而维持体液和电解质的平衡。
而肾素则是一种由肾脏分泌的酶，在肾素-血管紧张素-醛固酮系统中起着重要作用，通过调节血容量和血压来维持身体的稳态。
由于醛固酮和肾素的浓度与血压和体液平衡密切相关，因此对其进行定量检测具有重要的临床意义。
本文将重点介绍关于醛固酮和肾素的测量方法，旨在帮助读者更好地了解这两种激素的检测原理和临床应用。
一、醛固酮的测量方法1. 血清醛固酮浓度的测定血清醛固酮浓度的测定是评估醛固酮水平的常用方法。
目前主流的测定方法是液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）技术。
er-kin解读
er-kin解读随着科技的发展，人们越来越注重对身体各项指标的监测和解读。
在这个过程中，ER-kin作为一种新兴的生物标志物，逐渐引起了广泛关注。
本文将介绍ER-kin的背景、解读方法、实际应用优势以及在日常生活中的应用，帮助你更好地理解和利用这一重要指标。
一、了解ER-kin的背景和意义ER-kin，全称为Endothelial Receptor Kinase，是一种血管内皮细胞受体激酶。
它主要存在于血管内皮细胞中，对血管生长、通透性及炎症反应等方面具有重要的调控作用。
近年来研究发现，ER-kin与多种疾病的发生和发展密切相关，如心血管疾病、糖尿病、肿瘤等。
因此，对ER-kin的检测和解读具有重要的临床意义。
二、ER-kin的解读方法1.实验室检测：目前，ER-kin的检测方法主要为酶联免疫吸附法（ELISA）和化学发光法。
通过对血液样本进行分析，可以得到ER-kin的水平。
2.生物信息学分析：针对ER-kin的基因序列，可以进行生物信息学分析，预测其结构、功能及表达调控等方面的信息。
3.临床评估：结合患者的病史、症状、体征及其他检测结果，对ER-kin水平进行综合评估，以指导诊断、治疗和预后判断。
三、ER-kin在实际应用中的优势1.早期发现疾病风险：ER-kin水平的变化可在疾病早期出现，有助于发现潜在的风险因素，提前进行干预和预防。
2.病情监测：ER-kin水平的变化可反映病情的严重程度和治疗效果，有利于监测病情进展和调整治疗方案。
3.个性化治疗：ER-kin的表达差异可用于指导个体化治疗，提高治疗效果和降低副作用。
四、如何在日常生活中使用ER-kin解读1.注重体检：定期进行血液检测，关注ER-kin水平的变化，及时发现潜在的健康问题。
2.结合其他指标：将ER-kin与其他生物标志物、影像学等检查相结合，进行全面的健康评估。
3.听从专业建议：在医生的指导下，根据ER-kin检测结果，制定合理的治疗和预防方案。
肾素-血管紧张素-醛固酮系统的检验的原理及方法
肾素-血管紧张素-醛固酮系统的检验的原理及方法肾素-血管紧张素-醛固酮系统传统的检测方法是放射免疫法，近年出现的ELISA法有效地避免了实验室的放射性污染。
一、肾素RIA法是通过测定是血管紧张素Ⅰ的产生速率反映肾素（renin）的活性。
ELISA法测定的是肾素本身的质量浓度。
（一）RIA法测定血浆肾素活性1.原理由于肾素可特异性水解底物——血管紧张素原并产生血管紧张素Ⅰ（angiotensinⅠ，AngⅠ），因此测定血浆肾素活性（plasma renin activity，PRA）实际上是测AngⅠ的产生速率。
以双份血浆，一份直接测定其AngⅠ浓度，为对照管；另一份在37℃温育一定时间后，再测定其AngⅠ浓度，为测定管。
根据测定管和对照管的AngⅠ浓度，计算出AngⅠ的产生速率，即为PRA。
AngⅠ含量测定采用放射免疫技术，其原理与普通放免原理一致。
2.主要试剂商品化试剂盒一般包括抗AngⅠ抗体、125I标记AngⅠ、AngⅠ标准品、缓冲液、分离剂等。
有些试剂盒还包括特殊的抗凝剂。
3.操作步骤采用均相竞争法直接测定血浆中的AngⅠ，严格按照试剂盒说明书操作，注意放射性污染。
经γ计数后，绘制标准曲线，求出各管AngⅠ的结果。
根据对应测定管和对照管的AngⅠ浓度差值，计算PRA，一般采用37℃孵育1小时所生成的AngⅠ来表示PRA。
公式如下：4.参考区间普通饮食：卧位：0.5～0.79μg/L•h；立位：1.5～3.9μg/L•h。
建议各实验室建立本实验室的参考区间。
5.评价（1）肾素活性是以AngⅠ产生速率来表示的。
为阻止转换酶催化AngⅠ生成血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ），标本采集时应加抑制剂阻断转换酶的活性，从而达到准确测定的目的。
标本采集的抗凝剂和酶抑制剂包括：EDTA、8-羟基喹啉和二巯基丙醇，详见试剂盒说明。
低温离心分离血浆后，可于-20℃保存2个月。
（2）β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂、甾体激素、甘草等均影响体内肾素水平，测定PRA一般要在停药两周后；若用利血平等代谢缓慢的药物，则应在停药2～3周后。
妊娠期高血压疾病肾素-血管紧张素系统相关基因研究进展
妊娠期高血压疾病肾素-血管紧张素系统相关基因研究进展标签：肾素基因血管紧张素原基因血管紧张素转换酶基因血管紧张素Ⅱ受体基因妊娠期高血压疾病（Hypertensive Disorder Complicating Pregnancy，HDCP）是妊娠期特有的疾病，我国发病率为94%，国外报道7%~12%。
该病严重影响母婴健康，是孕产妇和围生儿发病及死亡的主要原因之一。
但其发病机制至今尚未完全阐明，国内外研究表明HDCP是一种多基因疾病，本文主要对循环系统中的肾素-血管紧张素系统(RAS)基因研究进展做一综述。
1肾素-血管紧张素系统（renin- angiotension system，RAS）肾素（renin）是肾小球入球小动脉壁的近球细胞合成和分泌的一种蛋白酶。
肾素可使血浆中的血管紧张素原（angiotensinogen，AGT）水解而生成一个十肽，称为血管紧张素I （angiotension I）。
血管紧张素I经过肺循环时，可在血管紧张素转换酶（angiotension converting enzyme，ACE）的作用下转变成一种八肽，即血管紧张素Ⅱ（angiotension Ⅱ，ANG Ⅱ）。
血管紧张素Ⅱ在氨基肽酶的作用下再脱去一个氨基酸残基，成为一种七肽，即血管紧张素III（angiotension III,ANG III）。
这一整个系统称为肾素-血管紧张素系统（renin- angiotension system，RAS），在心血管活动中占有重要地位。
2肾素-血管紧张素系统基因21肾素（Renin，REN）基因人类肾素基因位于1q 213～323，全长约12 5 kb，有10个外显子和9个内含子。
Falcao S等［1］发现：过度表达人类AGT基因和人类REN基因的小鼠，妊娠后在慢性高血压疾病的基础上可逐渐发展成为子痫前期，他们通过实验证实了这个模型的可行性。
因而可以推测肾素基因可能是HDCP的一个易感基因。
肾素-血管紧张素系统在骨生物学活性中的研究进展
对来源于新生大鼠颅盖骨的成骨细胞研究发 现，ＡｎｇＩＩ下调成骨细胞骨钙素ｍＲＮＡ水平，并抑制 碱性磷酸酶的活性，ｖｏｎ Ｋｏｓｓａ染色结果表明，Ａｎｇｌｌ （１×１０’７ Ｍ）显著减少矿化结节数及矿化总面积， 降低细胞内及间质层的钙含量，说明Ａｎｇ ＩＩ抑制成 骨细胞的分化以及矿化能力旧１。然而，Ａｎｇ ｌＩ对成
１ ＲＡＳ系统各组分及其体内分布
在循环系统中，主要的ＲＡＳ组分包括肾素 （ｒｅｎｉｎ）、血管紧张素原（ＡＧＴ）、血管紧张素Ｉ（ＡｎｇＩ）
作者单位：２０００９３ 上海．上海理工大学系统生物医学工程重 点实验室
通讯作者：张岩，Ｅｍａｉｌ：ｍｅｄｉｃｉｎｅｙａｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
万方数据
和血管紧张素Ⅱ（Ａｎ９１Ｉ）。ＡＧＴ不断地由肝脏释放 人血，肾素由肾小球入球动脉的球旁细胞分泌，分解 ＡＧＴ生成１０肽物质ＡｎｇＩ。位于血管和肺部的内皮 细胞上的血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）分解ＡｎｇＩ的Ｃ 末端两个氨基酸，生成含８肽的ＡｎｇＩＩ。Ａｎｇｌｌ进而 通过与其Ｉ型受体（ＡＴｌ）和Ⅱ型受体（ＡＴ２）结合发 挥其体内生物活性…。除了以上经典的ＲＡＳ途径 外，各组织中都能局部生成ＡＧＴ和ｒｅｎｉｎ，或者从血 循环中摄取。大部分的组织细胞中都表达ＡＣＥ和 肾素前体受体（ＰＲＲ），ＰＲＲ与肾素前体（ＰＲ）结合， 能够诱导ＡｎｇＩＩ的局部生成¨。，而Ａｎｇ ＩＩ是ＲＡＳ中 主要的活性物质。总的来看，胞外ＡｎｇⅡ的合成主 要是ＡＣＥ依赖性和ＰＲ依赖性。
主垦量亟堕塑盘查垫！！笙！旦蔓！！鲞筮！塑竺！垫』堕！！望！翌！：！苎璺！！翌垫！！：！堂！！：盟！：！ —Ｐ——ｕ——ｂ———ｌｉ—ｓｈｅｄ——ｏｎ——ｌ—ｉｎｅ ｗｗｗ．ｗａｎｆａａｇｄａｔｅ，ｃｏｍ．ｃｎ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－７１０８．２０１０．０１．０１８
肾素检测--检测技术
肾素检测
肾素（Renin），又称为血管紧张素原酶，是肾小球旁器（也称球旁复合体）的
球旁颗粒细胞释放的一种蛋白水解酶，是肾素-血管紧张素系统的组成部分。
肾素通过剪切肝脏合成的血管紧张素原产生血管紧张素I，血管紧张素I进一步
被血管紧张素转化酶（ACE）剪切成血管紧张素II。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)法，可高效、精准的检测肾素的含量
变化。
对于常见雌性激素或以上雌性激素的同类物质，可配合标准物质进行检测，对于稀有的雌性激素，如提供标准样品，迪信泰检测平台可提供定制检测。
此外，我们还提供其他激素检测服务，以满足您的不同需求。
样品制备
1）取100 mL样品；
2）盐酸调解pH值为2-3；
3）样品通过10 mL甲醇和10 mL去离子水活化的SPE柱进行萃取；
4）真空泵抽去SPE柱残留的水分；
5） 10 mL二氯甲烷-甲醇(V/V=80/20)洗脱；
6）氮气吹干洗脱液；
7）甲醇溶解定容至1 mL；
8）用HPLC分析。
HPLC测定肾素样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 肾素含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
HPLC激素测定项目样本报告，点击查看>。
肾素(原)受体(P)RR基因及其抑制剂的应用[发明专利]
![肾素(原)受体(P)RR基因及其抑制剂的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/5938c13984254b35effd341b.png)
专利名称：肾素(原)受体(P)RR基因及其抑制剂的应用专利类型：发明专利
发明人：卢玺峰,何永成,谭仑波,孙源,任丽伟,王娜,林惠申请号：CN201711331014.1
申请日：20171213
公开号：CN108004310A
公开日：
20180508
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开肾素(原)受体[(pro)renin receptor,(P)RR]抑制剂在非酒精性脂肪肝和肥胖疾病中的功能和应用。
以C57小鼠背景下的，(P)RR受体肝脏特异性敲除/敲降小鼠为实验对象，通过高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型，结果表明肝脏(P)RR受体敲除小鼠体型明显较瘦，且体内脂肪组织显著减少，而且在给予高脂饮食后，该种小鼠的体重增加幅度不大，不发生肥胖，血糖不高，油红染色及肝脏脂质测定等结果均说明肝脏肾素(原)受体敲除小鼠肝功能显著优于对照肥胖小鼠，小鼠脂肪肝病变明显改善，脂质蓄积显著减少，血糖降低。
因此，(P)RR可作为筛选治疗II型糖尿病、非酒精性脂肪肝和肥胖的药物靶标，其抑制剂可用于制备治疗II型糖尿病、非酒精性脂肪肝和肥胖的药物。
申请人：深圳大学
地址：518060 广东省深圳市南山区南海大道3688号
国籍：CN
代理机构：北京华睿卓成知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：唐莉
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肾素浓度的免疫学测定方法
肾素浓度的免疫学测定方法肾素是维持血压、水平衡和水电解质平衡的一种重要激素，其主要由肾脏分泌到血液中。
正常的血液浓度约为125–200pmol/L。
血清肾素水平测定是诊断肾脏疾病的重要指标之一。
随着免疫学技术的发展，肾素浓度免疫学测定方法已经广泛应用于临床诊断。
肾素浓度免疫学测定是一种利用特异抗体和免疫联合反应原理对血清、血浆中肾素浓度进行测量的方法。
它主要由抗原洗涤、抗体制备、样品准备、标准曲线调整、实验室反应和收集结果等环节组成。
抗原洗涤乃至抗体制备，是肾素浓度免疫学测定的重要环节，也是测定结果的准确性的最重要的因素。
肾素浓度的免疫学测定过程应包括抗原洗涤、抗体制备、样品准备、标准曲线调整、实验室反应、收集结果几个步骤。
抗原洗涤：首先使用抗原来洗涤杂质，有助于增加实验效率，确保测定结果的准确性。
抗体制备：根据经验，使用特异的抗体可以确保测定的精准度。
样品准备：样哮乃至血浆均需要使用抗蛋白酶处理，以确保样品中肾素的稳定性，同时也可以减少其他可能干扰测定结果的大分子物质和抗原。
标准曲线调整：经过抗原洗涤和抗体制备，以及样品准备时，根据经验构建一个特异性midpoint曲线，然后利用范围型曲线斜率处理这个midpoint曲线，以确定试剂设置的测量范围。
实验室反应：根据实验需要，选择始于半反应液的各种实验反应模式，完成样品的测定。
收集结果：采用一定的规律进行测定后，根据标准曲线给出的反应曲线，从而获得血清肾素的浓度及其误差范围。
肾素浓度的免疫学测定是一种参考价值较大的分析方法，具有低成本、易操作、准确可靠等特点，可以有效提高临床诊断和治疗肾脏疾病的效率。
肾素、醛固酮化学发光免疫法检测的性能验证及筛查原发性醛固酮增多症的价值
四川大学学报（医学版）2021, 52 ( 3 ) : 472 - 476J Sichuan Univ ( Med Sci) doi: 10.12182/20210560505•新技术新方法•肾素、醛固酮化学发光免疫法检测的性能验证及筛查原发性醛固酮增多症的价值*刘稚1，张玫1，任艳2,陈涛2,高洪蛟3,何詠\阿衣李桂1，刘英'安振梅2A1.四川大学华西医院实验医学科（成都610041);2.四川大学华西医院内分泌代谢科（成都610041);3.遵义医科大学第三附属医院内分泌科（遵义563000)【摘要】目的验证化学发光免疫法(CLIA)检测肾素、醛固酮的性能及筛查原发性醛固酮增多症(原醛症）的价值。
方法根据美国临床实验室标准化协会相关文件验证CLIA检测肾素、醛固酮的精密度、线性范围和携带污染率。
纳入 91例疑似原醛症的患者，分别采用CLIA、放射免疫法(RIA)检测肾素和醛固酮，比较两种方法的相关性和对原醛症的筛查 价值。
结果CLIA法检测肾素、醛固酮的精密度、线性范围和携带污染率均符合要求。
在疑似原醛症患者中，CLIA法和 RIA法检测出的肾素、醛固酮和醛固酮/肾素(ARR)水平的相关系数分别为0.901、0.861、0.847(P均<0.001)。
患者立位状 态下，ARR 为5.636 (ng/dL)/(ng/L)时，CLIA 法筛查原醛症灵敏度为79.1%，特异度为93.7%; ARR 为 14.084 (ng.dL K ng^m L'hr1〕时，RIA法筛查原醛症灵敏度为93.0%，特异度为83.3%。
卧位状态下，ARR为5.640 (ng/dL)/(ng/L)时，CLIA法筛查原醛症灵 敏度为97.7%，特异度为81.2%; ARR为33.494 (喂(1厂1)/〔喂(1111^广1〕时，111八法筛查原醛症灵敏度为95.3%，特异度为70.8%。
结论CLIA法检测肾素、醛固酮的性能均满足临床要求，立位ARR初筛原醛症的特异性相比卧位ARR更高，敏感性较低。
抗rrnp抗体指标
抗rrnp抗体指标1. 什么是rrnp抗体？rrnp抗体全称为Ribonucleoprotein 抗体，是一种自身免疫性疾病相关的抗体。
它主要靶向细胞内的核小体（nucleolar）中的核糖核蛋白（ribonucleoprotein），因此被称为rrnp抗体。
核小体是细胞核中的一个亚结构，参与到多种基因表达和RNA加工过程中。
rrnp抗体的存在可以与多种自身免疫性疾病关联，如系统性红斑狼疮（SLE）、混合性结缔组织病等。
2. rrnp抗体检测方法2.1 免疫荧光法免疫荧光法是最常用于检测rrnp抗体的方法之一。
该方法利用特异性荧光标记的二抗与患者血清中的rrnp抗体结合，通过显微镜观察荧光信号来判断是否存在rrnp抗体。
该方法具有灵敏度高、特异性强等优点，常用于初筛和诊断。
2.2 酶联免疫吸附测定法酶联免疫吸附测定法（ELISA）是另一种常用的rrnp抗体检测方法。
该方法利用特异性抗体与rrnp抗体结合，再加入酶标记的二抗，通过底物的反应来检测rrnp抗体的存在。
ELISA方法具有操作简单、高通量等特点，常用于大规模筛查和定量分析。
2.3 其他方法除了免疫荧光法和ELISA，还有一些其他的方法可以用于rrnp抗体的检测，如免疫印迹法（Western blotting）、间接免疫荧光法等。
不同的方法在灵敏度、特异性和操作便捷性等方面有所差异，医生会根据具体情况选择合适的方法进行检测。
3. rrnp抗体与疾病关联3.1 系统性红斑狼疮（SLE）系统性红斑狼疮是一种以多系统损害为特征的自身免疫性疾病。
多数SLE患者血清中可检测到rrnp抗体，并且其阳性率与SLE活动程度密切相关。
rrnp抗体阳性的SLE患者常伴有关节痛、皮疹、肾脏损害等症状。
因此，rrnp抗体可以作为SLE的一个重要指标，有助于诊断和评估疾病活动性。
3.2 混合性结缔组织病混合性结缔组织病是一种少见的自身免疫性结缔组织疾病，其特征是多种自身抗体的存在。
大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠肾素（Renin）ELISA试剂盒使用说明书南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒首选森贝伽。
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中大鼠肾素（Renin）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肾素（Renin）水平。
用纯化的大鼠肾素（Renin）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肾素（Renin）再与HRP标记的肾素（Renin）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的大鼠肾素（Renin）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠肾素（Renin）浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
2024肾素的检测及临床意义
2024肾素的检测及临床意义肾素(renin)又称为血管紧张肽原酶,在血容量或血清NaCI浓度降低时，会诱导前列腺素的快速释放，继而刺激肾小球旁细胞分泌肾素。
虽然它具有激素样作用，但它主要生物学功能是剪切循环中的蛋白质前体而非作用于靶细胞。
肾素在血液循环中以两种方式存在：肾素原和活性肾素。
肾素原是非活性的酶原，在肾素的生物合成中充当前体物质。
在肾小球旁细胞分泌颗粒中，肾素原经硫蛋白酶作用下剪切掉氨基端前肽(42个氨基酸)暴露出肾素的活性位点，转变为活性肾素。
肾素可激活血液循环中肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem,RAS),将血管紧张肽原酶转换为无活性的血管紧张素I,在血管紧张素转换酶(angiotensinconvertingenzyme,ACE)作用下进一步转化为血管紧张素II 发挥生物学功能。
肾素测定主要采用CLlA法。
参考区间站位:7~40ng∕L;卧位7-19ng∕L o此参考区间引自商品化试剂说明书。
注意事项1、标本类型及稳定性推荐使用血清样本，避免使用乳糜血、高蛋白血或溶血样本。
样本测定前应离心去除微型颗粒。
样本2~8℃放置可保存一周;-20℃放置可保存6个月,避免反复冻融，复溶后的样本应平衡至室温。
2、操作要求试剂应平衡至室温（18~25。
并轻轻混匀后再使用。
严格控制每步反应的时间和温度，避免将不同批号的试剂混合使用。
在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与反应孔或手指接触，以防底物受到污染而导致本底升高。
如用洗板机洗板时，每孔注液量不应少于300μl,洗板次数不少于4次,浸泡时间不短于10秒，并注意检查加液头是否堵塞。
洗板后在干净的吸水纸上拍干。
临床意义1、原发性和继发性醛固酮增多症或减少症的诊断和鉴别：醛固酮和血肾素活性的测定对于醛固酮生成紊乱的鉴别具有指导意义。
2、肾动脉狭窄及其导致的高血压或肾血管性高血压的诊断和治疗：双肾静脉样本中肾素测定可协助诊断肾动脉狭窄。
肾素血管紧张素比值计算
肾素血管紧张素比值计算肾素血管紧张素比值（Renin-angiotensin ratio, RAR）是指体内肾素和血管紧张素的比值。
肾素是一种由肾脏分泌的酶，它参与调节血压和水盐平衡的过程。
血管紧张素是一种由肾脏产生的激素，它能够收缩血管，增加血压。
肾素血管紧张素比值的计算方法是将血浆中肾素的浓度除以血浆中血管紧张素的浓度。
这个比值可以反映肾脏的肾素-血管紧张素系统的活动程度，进而对高血压、肾脏疾病等疾病的诊断和治疗起到一定的指导作用。
肾素血管紧张素比值的正常范围是0.5-2.5。
如果肾素血管紧张素比值高于正常范围，说明肾素的分泌过多或血管紧张素的产生不足，可能与肾脏疾病、肾血管病变等有关。
如果肾素血管紧张素比值低于正常范围，说明肾素的分泌不足或血管紧张素的产生过多，可能与低血压、肾功能不全等疾病有关。
肾素血管紧张素比值的测定方法主要有放射免疫法、酶联免疫吸附法等。
这些方法可以通过血液样本来测定肾素和血管紧张素的浓度，进而计算出肾素血管紧张素比值。
在临床实践中，医生可以根据患者的肾素血管紧张素比值来判断其肾脏功能、血压调节等方面的情况，并制定相应的治疗方案。
肾素血管紧张素比值在高血压的诊断和治疗中具有重要的价值。
高血压是一种常见的心血管疾病，如果能够准确评估肾素血管紧张素系统的活动程度，有助于指导药物的选择和调整。
对于肾脏疾病的诊断和治疗，肾素血管紧张素比值也提供了一种辅助手段。
除了肾脏疾病和高血压，肾素血管紧张素比值还与其他一些疾病有关。
例如，某些肿瘤患者的肾素血管紧张素比值可能升高，可能与肿瘤产生的激素有关。
此外，一些遗传性疾病也可能导致肾素血管紧张素比值的异常，例如肾上腺增生性疾病。
肾素血管紧张素比值是评估肾脏功能和血压调节的重要指标之一。
通过测定肾素和血管紧张素的浓度，可以计算出肾素血管紧张素比值，进而对一些疾病的诊断和治疗提供一定的参考依据。
对于高血压和肾脏疾病等患者来说，了解自己的肾素血管紧张素比值有助于更好地管理疾病，提高生活质量。
ru 结合响应值的测定方法
ru 结合响应值的测定方法RU (Response Unit) 是一种用于衡量细胞对某种外部刺激产生反应的测定方法。
在本文中，我们将详细介绍RU 结合响应值的测定方法。
通过理解RU 的原理和应用，可以帮助科研人员更好地评估细胞的反应，并且对于药物开发和生物学研究有着重要的意义。
RU (Response Unit) 是指细胞对外界刺激产生的测定值，它可以用来衡量细胞对于化学物质、药物或其他刺激的反应程度。
RU 的测定方法可以通过多种技术实现，其中包括酶联免疫吸附检测、流式细胞术、实时细胞分析等。
在进行RU 结合响应值的测定之前，首先需要确定待测物质与细胞之间的相互作用方式。
常见的相互作用方式包括细胞膜上的受体与配体的结合、细胞内信号通路的激活等。
根据相互作用方式的不同，可选择合适的实验方法进行测定。
酶联免疫吸附检测 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 是一种常用的测定RU 结合响应值的方法。
该方法通过将待测物质与固定在微孔板上的抗体或配体结合，然后使用第二抗体进行检测。
通过测定第二抗体与待测物质之间的结合，可以间接地评估细胞对于待测物质的反应程度。
ELISA 方法具有灵敏、高通量等优点，适用于大规模的实验。
流式细胞术 (Flow Cytometry) 是另一种常用的测定RU 结合响应值的方法。
该方法通过将细胞与标记有荧光标记物的待测物质共同悬浮，然后使用流式细胞仪进行测定。
通过测定荧光信号的强度，可以评估细胞对待测物质的响应程度。
流式细胞术具有高灵敏度、多参数检测等优势，适用于多种类型的细胞。
实时细胞分析 (Real-time Cell Analysis, RTCA) 是一种全新的测定RU 结合响应值的方法。
该方法基于电极芯片对细胞的电阻变化进行实时监测，以评估细胞对待测物质的反应程度。
实时细胞分析具有实时性、无需标记物等优势，可用于评估细胞对待测物质的动态变化。
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上海万安生物科技有限公司—————————————————————————————植物活性氧(ROS)定量检测试剂盒（ELISA）
使用说明书
仅供科研使用，不得用于医学诊断。
使用前仔细阅读本说明书。
用途：用于定量检测植物血清、血浆及相关液体样本中活性氧(ROS)的含量。
工作原理
本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定样品中植物活性氧(ROS)的水平。
向预先包被植物活性氧(ROS)抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的活性氧(ROS)抗体，经过温育和洗涤，去除未结合的组分，然后再加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中植物活性氧(ROS)的浓度呈正相关。
试剂盒组成
需要而未提供的试剂和器材
1． 37℃恒温箱。
2．标准规格酶标仪。
3．精密移液器及一次性吸头
4．蒸馏水，
5．一次性试管
6．吸水纸
注意事项
1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差
3．建议所有标准品、样本都做双份检测。
4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。
根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作程序
1．分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl；在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
轻轻晃动混匀，37℃温育60分钟。
2．弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
如此重复5次，拍干。
3．每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
4．取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
5．测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
6．根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD 值在回归方程上计算出对应的样品浓度。
也可以使用各种应用软件来计算。
应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
操作程序总结：
检测范围：12.5IU/ml→400IU/ml。
规格：96T/盒
保存：2-8℃
有效期：6个月（2-8℃）。