细胞染色方法

DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole)的配制

贮存液：70%酒精溶解，浓度100 μg/ml，配好后用锡纸包起来，避光，可在4摄氏度下长期保存。

使用浓度：贮存液用1xPBS稀释1000倍，最终浓度100 ng/ml。

10x PBS的配制

80 g NaCl

2 g KCl

g

无水Na2HPO4

2 g

无水KH2PO4

加水到1000ml

贮存液可根据需要用蒸馏水稀释

荧光封片液

mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合，

染色与观察：

制好的玻片上滴加几滴DAPI染液，染色10分钟，流水冲去染液，滤纸吸除多余水分，加一滴荧光封片液，置于荧光显微镜下观察，激发波长360-400nm.

注意事项：

DAPI可能具有致癌性，全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。

上：正常绍鸭成纤维细胞核，下：凋亡核

Lyso-Tracker Red是一种溶酶体(lysosome)红色荧光探针，可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。

Lyso-Tracker Red为采用Molecular Probes公司的DND 99进行了荧光标记的带有弱碱性的荧光探针，可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。中性红(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以对溶酶体进行荧光染色，但中性红和吖啶橙的染色缺乏特异性。

Lyso-Tracker Red呈红色荧光，检测时的最大激发波长为577nm，最大发射波长为590nm。

按照1:20000的比例稀释，可以配制1000ml Lyso-Tracker Red工作液。

可用于家蚕脂肪体细胞autophage监测。见李胜文章。