食用菌生产技术 实验二 孢子分离育种

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实验二 孢子分离杂交育种(二) 孢子分离杂交育种(
一、目的
掌握多孢分离及单孢分离育种技术
二、主要步骤: 主要步骤: 孢子分离及萌发培养
(一)多孢分离法: 多孢分离法: 多孢分离法
将多个孢子接种于同一培养基上让其萌 发,经过核染色或观察锁状联合鉴定双 核菌丝,并挑取双核菌丝,制备菌种. 核菌丝,并挑取双核菌丝,制备菌种.
(二)单孢分离法: 单孢分离法: 单孢分离法
1、孢子悬液的配制 、 将收集的孢子用无菌水配成孢子悬液, 将收集的孢子用无菌水配成孢子悬液,收取 加到9 无菌水中配成 倍稀释液, 无菌水中配成10倍稀释液 1ml加到9ml无菌水中配成 倍稀释液, 加到 依次稀释成10 依次稀释成 -1、10-2、10-3……用显微镜 用显微镜 观察,使每个视野中含 使每个视野中含2—3个孢子 以此作为 个孢子,以此作为 观察 使每个视野中含 个孢子 接种液。 接种液。
2、孢子萌发及单孢挑取
吸取0.5ml加到平板培养基上并涂布均 加到平板培养基上并涂布均 吸取 将平皿倒置培养.调节适宜温度培养 匀,将平皿倒置培养 调节适宜温度培养 将平皿倒置培养 2—3天,待孢子刚萌发尚未分枝时,在倒 待孢子刚萌发尚未分枝时, 天 待孢子刚萌发尚未分枝时 置显微镜下挑取单孢子, 置显微镜下挑取单孢子,并接种于试管 斜面上,每管接1个孢子 个孢子, 斜面上,每管接 个孢子,培养形成单核 菌丝,标记贴标签. 菌丝,标记贴标签.
思考题: 思考题
1、多孢分离与单孢分离有何不同? 、多孢分离与单孢分离有何不同? 2、单孢分离的关键操作是什么? 、单孢分离的关键操作是什么?
(答:①稀释孢子悬液的制备②及时挑取单 孢子) Nhomakorabea•
再 见!
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