分子生物学实验药品
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分子生物学实验常用药品(共21种)
1M NaOH 100ml
1M HCl 100ml 浓HCl (11.6M)
5 mol/L KAc 400ml (将196.4g 醋酸钾溶解于200 ml 无离子水中,定容至400ml ,高压灭菌后,室温保存。
)
1M Tris-Cl (pH8.0) 1000ml (Tris 三羟甲基氨基甲烷)
1. 称量121.1 g Tris 置于1 L 烧杯中。
2. 加入约800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH 值。
pH 值 浓HCL
pH7.4 70ml
pH7.6 60ml
pH8.0 42ml
4. 将溶液定容至1 L 。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH 值,因为Tris 溶液的pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH 值大约降低0.03个单位。
0.5 M EDTA ·Na 2 (pH8.0) 乙二胺四乙酸二钠 1000ml
0.5 M EDTA 1 L 配制
1. 称取186.1 g Na 2EDTA ·2H 2O ,置于1 L 烧杯中。
2. 加入约800 ml 的去离子水,充分搅拌(在磁力搅拌器上剧烈搅拌溶液)。
3. 用NaOH 调节pH 值至8.0(约20 g NaOH)。
注意:pH 值至8.0时,EDTA 才能完全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L 。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
植物细胞提取液: 500ml
100mM Tris-Cl (pH8.0)
50 mM EDTA (pH8.0)
500mM NaCl
1.25%SDS
1mol/L β-巯基乙醇(0.1%)?(《分子生物学实验指导》P.114β-巯基乙醇为1 ml )?
动物提取液(0.14mol/L NaCl,0.1 mol/L EDTA)1000ml
3 mol/L NaAc (pH5.2) 200ml
用HAC调pH.(称取NaAc溶于130 ml无离子水中,先加入40 ml冰醋酸,然后
再缓慢的调pH.至5.2,最后定容至200 ml)
TE 缓冲液(pH8.0): 10mM Tris-Cl (pH8.0) 1 mM EDTA (pH8.0) 1000ml 1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。
1M Tris-Cl (pH8.0) 10ml
0.5M EDTA (pH8.0) 2ml
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
酚/氯仿/异戊醇=25:24:1 500ml x 2(配2瓶)
LB培养基配制及分装(每升用量) 1600ml 分成6瓶150ml,2瓶200ml。
胰蛋白胨(Bacto-tryptone) 10g
酵母提取物(Bacto-yeast extract) 5g
NaCl 10g
pH 7.0-7.5
121℃,20min 高压灭菌
溶液Ⅰ200ml
50mmol/L 葡萄糖 1.98g
25mmol/L Tris-Cl(pH 8.0) 5ml 1M
10mmol/L EDTA(pH 8.0) 4ml 0.5M
溶液Ⅱ各100ml
0.4mol/L NaOH
2%SDS
临用前1:1混合贮存液即为II液.
溶液Ⅲ200ml
5mol/L 醋酸钾120ml
冰醋酸23ml
水57ml (最终pH4.8)
50%甘油100ml 121℃,20min 高压灭菌
0.1 mol/L CaCl 2溶液100ml
5mol/L NaCl 300ml
70%乙醇500ml
10X载样缓冲液: 0.25%溴酚蓝,40%蔗糖水溶液(30%甘油水溶液) 20ml
25%SDS(十二烷基硫酸钠)100ml
50×TAE 200ml
配制1L溶液各成分的用量如下:
2mol/L Tris碱: 242g
1mol/L 乙酸: 57.1 ml的冰乙酸(17.4mol/L)
100 mmol/L EDTA: 200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
水补足1L
1×TAE(50×TAE 稀释50倍)1000 ml。