PEG诱导的细胞融合实验

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实验5诱导细胞融合——聚乙二醇法

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四、实验步骤
1.鸡血红细胞悬液的制备：
用注射器吸入 1mL Alsver液后从鸡翼下静脉取鸡血 2mL，注入刻度离心管内，按照3：1(V/V)加入 6mL Alsver液混匀，放入4℃冰箱内可保存3~4天。
2.取细胞悬液1mL，移人7mL离心管，加入4mL 0.85％生理盐水混匀；2000r/min离心5 min。
PEG有毒，请操作过程中勿沾到皮肤上。
普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用从而使细胞发生融合
实验五诱导细胞融合——聚乙二醇法
一、实验目的了解细胞融合的原理，初步掌握用PEG诱导
细胞融合的方法。二、实验原理聚乙二醇（PEG）结构为： CH2(OH)-(CH20CH2)n-CH2OH；相对分子质量在2000-6000均可用作细胞融合剂。
检；或加入台盼蓝溶液1滴，染色3分钟盖上盖玻片，显微镜下观察细胞融合现象。
10.进行多个视野的测定，统计细胞平均融合率。
五、结果与分析
1、绘制观察到的融合细胞图，计算观察到的细胞融合率；
2、简述聚乙二醇法诱导细胞融合的原理及影响融合的关键因素。
六、注意事项
如抗凝血要保存在冰箱，抗凝剂预先要进行灭菌，采血在无菌条件下进行。

peg诱导细胞融合原理

PEG诱导细胞融合原理。

细胞融合是指两个或两个以上的细胞融合成一个细胞的现象，

它在生物学研究中具有重要的意义。PEG（聚乙二醇）是一种常用的

细胞融合剂，通过PEG诱导细胞融合可以实现不同细胞的融合，从

而产生新的细胞群体。本文将介绍PEG诱导细胞融合的原理及其在

细胞生物学研究中的应用。

首先，PEG诱导细胞融合的原理是利用PEG的高渗透性和毒性，使细胞膜受到破坏，从而促使细胞融合。在实验中，将两种不同类

型的细胞分别与PEG混合，PEG能够破坏细胞膜，使得两种细胞的

质膜融合在一起，形成一个新的细胞。这种方法可以用于融合不同

细胞系，或者将外源基因导入目的细胞中。

其次，PEG诱导细胞融合在细胞生物学研究中有着广泛的应用。通过细胞融合技术，可以将两种不同类型的细胞融合在一起，从而

研究它们的互补性和相互作用。例如，将癌细胞与正常细胞融合，

可以研究癌细胞的恶性特性和调控机制；将干细胞与成熟细胞融合，可以研究干细胞的分化能力和再生潜力。此外，PEG诱导细胞融合

还可以用于细胞杂交技术，将两种不同细胞的染色体融合在一起，

研究染色体的配对和重组。

此外，PEG诱导细胞融合还可以用于细胞治疗和再生医学研究。通过将患者的细胞与健康捐赠者的细胞融合，可以修复患者受损的

组织和器官。例如，将患者的干细胞与健康捐赠者的成熟细胞融合，可以使干细胞具有更强的分化能力，从而用于治疗各种疾病和损伤。此外，PEG诱导细胞融合还可以用于再生医学研究，研究干细胞的

再生潜力和分化机制，为再生医学的发展提供重要的实验基础。

PEG诱导的细胞融合实验

2、《细胞生物学实验》第二版，杨汉民编，高等教育出版社。
5、终止PEG作用并离心除去：向试管中缓慢滴加 9ml Hanks液轻轻吹打混匀，在37ºC水浴中静置 5min；1500rpm离心5min，弃上清；
【实验操作】
6、培养：向细胞沉淀中加入2ml 1640完全培养液轻轻混匀，37℃水浴中培养30min。
7、染色、观察：在EP管中将0.2ml已进行融合处理的细胞悬液及对照细胞悬液分别与等体积次甲基蓝染液混合，染色5min；制片观察融合现象（有无融合、多核融合、双核融合、同种融合、异种融合）；计数200个细胞，计算异细胞融合率（融合细胞核数占细胞核总数的百分率）
用细胞融合方法培育的薯番茄
细胞融合抗盐碱耐干旱葡萄新品种
细胞融合生产单克隆抗体
细胞融合的诱导
1、病毒诱导：如仙台病毒（Sendaivirus），主要用于动
物细胞融合。
2、电融合：用电融合仪诱导融合，主要用于植物细胞。
3、聚乙二醇（polythyleneglycol，PEG）诱导：分子量200－6000都可用，以1000较好。用于诱导植物原生质体融合和多种动物细胞融合。优点：材料易得、操作方法简单、效果稳定。
计数200个细胞计算异细胞融合率融合细胞核数占细胞核总数的百分率融合细胞核数100融合细胞核数未融合的细胞核数peg处理时间不宜过长否则会造成细胞破坏或有多个细胞彼此融合形成巨大的合经peg处理后加液混匀时应轻轻吹打以免刚刚融合的细胞分开

PEG诱导细胞融合

实验十一 PEG诱导细胞融合

一、实验目的

1．了解聚乙二醇诱导细胞融合的原理与技术。

2．学会鉴别融合细胞。

二、实验原理

细胞融合又称细胞杂交，是指两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的现象。细胞融合技术是细胞工程骨干技术，除了用于一些基础性研究外，在植物方面主要用于合成新种；动物方面主要用于生产单克隆抗体。

细胞融合的诱导因素主要有以下三种：

1、生物融合因子：如病毒。

2、物理因素：如电融合仪,主要用于植物细胞。

3、化学因素：如聚乙二醇（PEG），分子量200－6000都可用，以1000较好。聚乙二醇最早用于诱导植物原生质体的融合，现已普遍用于多种细胞。其优点是:材料易得、操作方法简单、效果稳定。

病毒介导的细胞融合常用灭活的仙台病毒，主要用于动物细胞融合。其优点是融合率高，对各种动物细胞都适宜；缺点是不稳定，在保存过程中融合活性降低，并且制备过程繁琐。

细胞融合，即在自然条件下或利用人工法 (生物的、物理的、化学的)，使两个或两个以上的细胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程。人工诱导细胞融合始于20世纪50年代，并迅速成为一门新兴技术。由于不仅同种细胞可以融合，种间远缘细胞也能融合，甚至于动植细胞也能合二为一，因此细胞融合技术目前较广泛应用于细胞生物学、遗传学和医学研究等各个领域，并且取得显著的成绩。

聚乙二醇(PEG)结构为：HOH2C(CH20CH2)nCH2OH，相对分子质量在200-6000均可用作细胞融合剂。普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合：细胞融合率是指在显微镜的一个视野内，已发生融合的细胞核总数与该视野内所有细胞(包括已融合的细胞)的细胞核总数之比，通常以百分比表示。该方法的优点是：用法简单，容易获得融合体，融合效果好。

peg诱导细胞融合原理

PEG诱导细胞融合原理

PEG是聚乙二醇的缩写，是一种具有高分子量的线性聚合物。PEG在

生物学研究中被广泛应用，其中最常见的应用之一就是诱导细胞融合。

细胞融合是指将两个或多个细胞融合成一个单独的细胞。这种技术被

广泛应用于生物学研究中，例如制备杂交瘤细胞、制备单克隆抗体和

产生转基因动物等。

PEG诱导细胞融合的原理是利用PEG分子与细胞膜相互作用，使得两个或多个不同类型的细胞在PEG存在下发生融合。具体来说，PEG通过以下机制促进了细胞融合：

1. 破坏细胞膜结构

PEG分子可以与水形成氢键，并且可以与亲水性区域结合。当PEG溶液与细胞接触时，它会插入到细胞表面，并破坏部分磷脂双层结构，

从而使得两个或多个不同类型的细胞暴露出其内部的细胞质。

2. 促进细胞膜的接触

PEG分子可以通过两种方式促进细胞膜的接触。首先，PEG可以降低水的表面张力，使得两个或多个细胞之间的距离缩小。其次，PEG可以与细胞膜表面的亲水性区域结合，从而增加了两个或多个细胞之间的吸引力。

3. 促进细胞融合

当两个或多个不同类型的细胞表面接触时，PEG会形成一个临时性的孔道，使得两个或多个细胞质混合在一起。这些孔道很快就会关闭，并且新形成的单一细胞会拥有所有原始细胞中所包含的遗传物质和生物学特性。

总之，PEG诱导细胞融合是一种简单、有效、广泛应用于生物学研究中的技术。它利用PEG分子与细胞膜相互作用来促进不同类型细胞之间发生融合，并且可以产生许多重要的研究工具和应用。

PEG诱导细胞融合

PEG的最适使用条件
• 细胞的融合效果与PEG的相对分子质量及其体积分数成正比，但PEG的相对分子质量越大、体积分数越高，对细胞的毒性也就越大。实验时常选用PEG相对分子质量为4000-6000，体积分数为 50%时，细胞破碎较少，融合率较高。
其他影响细胞融合的因素
• 钙离子可以使带微弱负电荷的PEG与细胞膜外表分子相互作用，引起细胞膜外表电子分布的改变，从而使接触处的质膜形成局部融合，出现凹陷，构成原生质桥，成为细胞间通道并逐渐扩大，直到两个细胞全部融合。当钙离子浓度为50mmol/ml 时，融合效果最好。
细胞融合技术的应用及开展前景
• 从细胞融合技术开展的历程可以看到, 伴随着细胞融合技术的每一次革新和改进, 都会迅速在各个领域得到充分的应用, 然后在实际应用中又不断发现新的问题,在解决实际问题中又促使细胞融合技术跃上一个又一个新的台阶, 使其日臻完善。动物细胞融合、植物细胞融合、微生物细胞融合以及三者之间的细胞融合不断应用于基础理论研究和人类生产实际。如创造新物种、培育动物新品种、植物育种、种质保存、无性系的快速繁殖、获得优良的微生物菌种以及药物单克隆抗体和疫苗等有用物质的生产。并且细胞融合技术和基因工程的集合, 使生物工程进入了崭新的开展阶段。
PEG诱Hale Waihona Puke Baidu细胞融合
PEG作用机制

实验二聚乙二醇(PEG)介导的细胞融合

【实验用品】 1．材料鸡红细胞 2．器材和仪器：显微镜、离心机、水浴箱、刻度离心管、试管、载玻璃片、盖玻片 3．试剂 Alsver液(pH7.4)、0.85％生理盐水、GKN液、50％PEG（MW 4000）

【方法步骤】 1．采血及鸡红细胞悬液的制备（同教材57页）。 2．（共2组）取鸡红细胞悬液1mL，移人10mL离心管，加入4mL 0.85％生理盐水混匀。1000r／min离心5 min。 3．弃上清液(用吸管吸去)，加0.85％生理盐水5mL，用指弹法（或吸管轻吹）将细胞团块弹散，混匀后1000r ／min离心5min；重复上述条件，再离心洗涤1次。 4．收集最后1次离心沉淀的血细胞，加入适量（5－ 8mL）的GKN液，轻吹散，混匀。 5．（每4人）取悬液1mL到1个试管中，加入0.5 mL预热的50％PEG混匀，置于30℃水浴中温浴3－5min；取未融合和融合的血细胞悬液各1滴分别滴于载玻片上的两侧，盖上盖玻片。 6．利用光学显微镜 (高倍) 以未融合细胞为对照观察2个靠近细胞形成融合的过程。
【结果观察】在高倍镜下可以看到有两个或两个以上的鸡红细胞膜融合在一起，形成一个同核体细胞。要注意辨别融合细胞与重叠的鸡红细胞。
ຫໍສະໝຸດ Baidu
【结果观察】在高倍镜下可以看到有两个或两个以上的鸡红细胞膜融合在一起，形成一个同核体细胞。要注意辨别融合细胞与重叠的鸡红细胞。

peg介导细胞融合的原理

细胞融合是指将两个或更多的细胞融合成一个细胞，使它们的细胞膜和细胞质合并。细胞融合在生物学研究和生物医学应用中起着重要的作用。PEG（聚乙二醇）作为一种常用的介导剂，可以促进细胞融合。

PEG介导细胞融合的原理是利用PEG的特殊化学性质和细胞膜的特性。PEG是一种高分子化合物，具有良好的生物相容性和溶解性。当PEG溶液与细胞接触时，PEG分子会与细胞膜上的脂质双层相互作用。

PEG分子通过疏水作用与细胞膜上的疏水基团结合，形成一个覆盖在细胞膜上的PEG层。这个PEG层可以降低细胞膜的表面能，使细胞膜变得柔软和易变形。同时，PEG层还可以增加细胞膜之间的相互吸引力，促进细胞的接近。

当两个带有PEG层的细胞接触到一起时，PEG层会相互交叉和扩展，形成一个连续的PEG层。这个连续的PEG层将两个细胞包裹在内，使细胞膜之间的距离缩短，进而促使细胞融合。

细胞融合发生后，细胞膜和细胞质会合并成一个整体。融合后的细胞将具有两个或更多细胞的特性和功能。这种细胞融合可以用于研究细胞的功能、信号传递和细胞重编程等领域。

除了PEG，还有其他一些物质也可以用作细胞融合的介导剂，如电脉冲、病毒和细胞融合素等。不同的介导剂具有不同的融合效率和细胞存活率。PEG介导细胞融合的优势在于操作简单、成本低、融合效率高以及对细胞的毒性较小。

然而，PEG介导细胞融合也存在一些限制。首先，PEG介导的细胞融合需要细胞表面具有一定的疏水性，否则PEG与细胞膜的相互作用较弱，融合效果较差。其次，PEG介导的细胞融合对细胞的膜完整性要求较高，如果细胞膜受损或破裂，将影响细胞融合的效果。

PEG法诱导细胞融合

PEG法诱导细胞融合是一种常用的细胞生物学实验技术，通过聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，促进两个或多个细胞之间的融合。这种方法常用于制备单克隆抗体、诱导染色体加倍、诱导基因转移等研究领域。以下是PEG法诱导细胞融合的详细步骤和注意事项。

一、实验准备

1.细胞株：选择需要进行融合的细胞株，可以是两种或多种不同种类的细胞。

2.培养基：选择适合细胞生长和繁殖的培养基，一般采用含10%胎牛血清的

DMEM或RPMI-1640培养基。

3.聚乙二醇（PEG）：选择合适浓度的PEG，根据实验需求选择PEG分子量。

常用的PEG分子量有4000、6000、8000等。

4.抗体：选择适当的抗体进行融合后检测，如抗细胞表面抗原的单克隆抗体、

抗细胞内抗原的单克隆抗体等。

5.仪器设备：细胞融合仪、显微镜、离心机、培养箱等。

二、实验步骤

1.细胞传代：将待融合的细胞株按照常规方法进行传代，使细胞生长到对数生

长期。

2.细胞洗涤：将传代后的细胞洗涤两次，去除培养基中的杂质和未贴壁的细

胞。

3.细胞融合：将两种或多种细胞按照一定的比例混合在一起，加入适量的

PEG，充分摇匀，使细胞充分融合。

4.细胞洗涤：将融合后的细胞洗涤两次，去除未融合的细胞和PEG残留。

5.细胞培养：将融合后的细胞接种到培养基中，加入适量的抗生素和生长因

子，置入培养箱中培养。

6.检测和观察：在融合后的不同时间点进行细胞形态学观察和免疫学检测，如

荧光染色、ELISA等方法，以评估融合效果。

三、注意事项

1.细胞株的选择：PEG法诱导细胞融合适用于大多数动物细胞，但不同种类的

PEG介导的细胞融合

实验七 PEG介导的细胞融合

一、实验目的

1、理解PEG介导细胞融合的原理，掌握实验方法与技能。

2、了解影响细胞PEG介导融合的因素。

二、实验原理

2个或以上的细胞合并为1个细胞的现象，称为细胞融合。

细胞融合的主要方法有病毒法、聚乙二醇（PEG）法和电融合方法。

PEG是乙二醇的多聚化合物，一般常用分子质量为MW 4000—6000的50%PEG溶液，首先引起细胞的集聚与粘连，然后改变各类细胞膜的结构，使两细胞接触点处脂分子双层发生疏松和重排，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲合以及彼此的表面张力作用，使细胞发生融合，胞质流通，最后形成融合细胞。

细胞融合频率和活力与所用PEG的分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。

三、实验器材

1、材料：新鲜鸡血红细胞

2、器具：

光学显微镜，离心机，恒温培养箱或恒温水浴锅，电磁炉、离心管、烧杯、容量瓶、木夹子、载玻片，盖玻片等。

3、试剂与配制：

1．0.85 % NaCl 溶液

2．GKN液：

8.0g NaCl，0.4g KCl，3.56 g Na

2HPO

·12H

O，0.78 g NaH

·2H

O，2.0g

葡萄糖，0.01g酚红，溶于1000ml重蒸水中。

3．33%（W/V）PEG溶液

1. 取10g PEG（分子质量=4000）放入50ml 瓶中，在电磁炉水浴锅中加热熔

化后，再边搅拌继续加热6min。

2. 让PEG冷却至50℃，勿让其凝固。

3. 边搅拌边加入15ml预热至50℃的GKN液，再充分混匀，置37℃水浴锅中

待用。

4．肝素钠：

peg诱导细胞融合原理

PEG诱导细胞融合原理

细胞融合是指两个或多个细胞融合在一起形成一个细胞的过程。细胞融合技术在生物医学领域有着广泛的应用，尤其在细胞治疗和生物医学研究中发挥着重要作用。PEG（聚乙二醇）诱导细胞融合是一种常用的细胞融合方法，其原理是利用PEG的特殊性质将细胞膜融合在一起，促使细胞融合。

PEG是一种聚合物，具有疏水性和亲水性双重特性。在细胞融合实验中，PEG可以渗透细胞膜，打破细胞膜的完整性，从而促使细胞融合。具体来说，当两个细胞暴露在含有PEG的溶液中时，PEG会与细胞膜上的脂质分子相互作用，降低了细胞膜的表面张力，使细胞膜之间更容易发生融合。

在实际操作中，研究人员首先将待融合的细胞分别悬浮在含有PEG 的溶液中，然后通过离心等方法将两种细胞混合在一起。接着，将混合后的细胞放回培养皿中进行培养，待细胞融合完成后，可以观察到形成了融合细胞。

PEG诱导细胞融合的优点在于操作简单、效率高、适用于多种类型的细胞。然而，也存在一些局限性，比如融合后的细胞可能存在细胞周期不同、染色体数目不同等问题，需要在实验设计和数据解读时进行考虑。

除了在生物医学研究中的应用，PEG诱导细胞融合还被广泛应用于融合细胞疫苗的制备、融合抗体的生产等领域。通过探究PEG诱导细胞融合的原理，可以更好地理解细胞融合的机制，为相关领域的研究和应用提供理论支持。

总的来说，PEG诱导细胞融合是一种重要的细胞融合方法，通过利用PEG的特殊性质促使细胞融合，为细胞治疗、生物医学研究等领域提供了重要的技术手段。随着科学技术的不断发展，相信PEG诱导细胞融合技术将在未来发挥更加重要的作用。

peg诱导细胞融合原理

PEG（Polyethylene glycol）是一种聚合物化合物，由重复的乙二醇单元组成。在生物学中，PEG常被用作诱导细胞融合的工具。细胞融合是指将两个或多个细胞融合在一起形成一个细胞，使其合并为一个细胞体。PEG诱导细胞融合的原理是通过PEG的特殊性质，促进细胞膜的融合，使细胞内的物质互相交流和共享。

了解细胞融合的背景是很重要的。细胞融合在生物学研究中有着广泛的应用，可以用于细胞的混合和杂交，从而产生新的细胞型态，用于研究细胞的功能和特性。细胞融合还可以用于生物医学领域，例如将癌细胞与正常细胞融合，以研究癌细胞的特性和机制。此外，细胞融合还可以用于克隆动物和干细胞研究等领域。

在细胞融合实验中，PEG起到了至关重要的作用。PEG具有一种特殊的性质，即可以在细胞膜上形成孔道，促进细胞膜的融合。这是因为PEG在水中具有很强的溶解性，可以与细胞膜上的脂质相互作用，改变膜的结构，使细胞膜之间的距离缩短，从而促进融合。

具体而言，PEG诱导细胞融合的过程可以分为以下几个步骤。首先，将需要融合的细胞分别收集，并用培养基或缓冲液洗涤干净，以去除细胞外的杂质。然后，将细胞悬浮于含有PEG的溶液中，使PEG 与细胞膜相互作用。PEG通过与细胞膜上的脂质相互作用，改变细胞膜的结构，使细胞膜之间的距离缩短。此时，细胞膜上会形成孔

道，细胞膜之间的融合就可以发生。最后，将处理后的细胞培养在适当的培养基中，以促进融合细胞的生长和分裂。

PEG诱导细胞融合的原理并不复杂，但它在细胞融合实验中起到了至关重要的作用。通过PEG的作用，细胞膜之间的距离缩短，细胞膜上形成孔道，从而促进细胞融合。细胞融合的应用领域广泛，可以用于研究细胞的功能和特性，以及生物医学领域的应用。同时，PEG诱导细胞融合的实验过程相对简单，只需要将细胞与含有PEG 的溶液接触即可。因此，PEG诱导细胞融合成为了一种常用的实验方法。

PEG法诱导细胞融合

实验十

PEG法诱导细胞融合

一、实验目的

1.了解聚乙二醇（PEG）诱导体外细胞融合的基本原理。

2.通过PEG诱导鸡血细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合的基本方法。

二、实验原理

细胞融合（cell fusion）又称体细胞杂交，是指用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞，随后，异核体同步进入有丝分裂，核膜崩溃，来自两个亲本细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞（hybrid cell）。细胞融合技术是研究细胞遗传、基因定位、细胞免疫、病毒和肿瘤的重要手段。依据

融合过程采用的助融剂的不同，细胞融合可分为：

①病毒诱导的细胞融合，如仙台病毒(hemagglutinating virus of Japan,HVJ);

②化学因子诱导的细胞融合，如聚乙二醇

（polyethyleneglycol ,PEG）;

③电场诱导的细胞融合；

④激光诱导的细胞融合。

PEG是乙二醇的多聚化合物，存在一系列不同分子量的多聚体。PEG可改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处脂类分子发生疏散和重组，引起细胞融合。该方法应用相对分子质量为400~6000的PEG溶液引起细胞的聚集和粘连，产生高频率的细胞融合。融合的频率和活力与所用PEG分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。

三、实验仪器、材料和试剂

（１）仪器、用具：注射器、刻度离心管、离心机、血细胞记数板、水浴锅、滴管、显微镜、烧杯、容量瓶、凹面载玻片、盖玻片、酒精灯等。

（２）材料：成年家鸡。

（３）试剂

1）0.85%NaCl溶液。

2）GKN液：8.0gNaCl，0.4g KCl,1.77 g Na2HPO4·2H2O，0.69 g NaH2PO4·H2O,2.0g葡萄糖,0.01g酚红,溶于1000ml重蒸水中。

实验3 PEG介导的动物细胞融合技术

PEG介导的动物细胞融合技术是一种常用的体外融合细胞的方法，主要应用于融合一些生长速度缓慢或难以进行杂交的细胞。该技术利用聚乙二醇（PEG）使两种不同细胞融合成一个细胞，从而产生一些杂合细胞，可以获得有趣的遗传组合。

技术原理

PEG确保了细胞融合的前提是细胞外膜的破裂。PEG受到细胞表面膜过渡物质的吸引，然后与细胞表面膜结合，形成一个PEG-膜复合物。虽然聚乙二醇是一种高分子，但由于其化学性质与细胞膜相似，在一定程度上可以渗透到细胞膜中，从而使细胞表面膜发生缺陷和破裂，从而产生细胞融合。

实验步骤

1.将需要融合的两种细胞分别进行繁殖和培育，并将其分离。

2.将细胞置于无血清的生长培养基中，进行24-48小时的饥饿处理，使细胞停止生长。

3.制备PEG溶液，将细胞加入到PEG中，进行处理。

4.将PEG处理后的细胞转移到培养基中，定期更换培养基供给其营养并观察其生长情况。

实验注意事项

1.选择渗透性强，尺寸相似的细胞，以利于融合。

2.通过显微镜观察细胞的形态和数量，确保细胞膜在PEG处理后的破裂和细胞融合情况。

3.注意PEG用量，一般为2-4 g/L，过多的PEG处理可能会导致不必要的副作用。

4.注意细胞的状态和健康程度，以保证实验的稳定性和可靠性。

实验应用

PEG介导的细胞融合技术被广泛应用于细胞融合和制备杂交瘤，可以产生一些具有较好生长特性和生物学功能的新型细胞。此外，该技术也应用于基因转移、卵母细胞和体细胞融合技术，以及其他相关研究领域中。

PEG介导的细胞融合

摘要：细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的现象，也称细胞杂交，可通过自发或人工诱导实现。本实验中主要是以小鼠的脾脏淋巴细胞为融合实验材料，通过化学方法（聚乙二醇PEG）来最终使细胞达融合，主要目的是为了探究不同浓度的PEG与细胞融合率的关系。将小鼠脾脏取出制成脾脏淋巴细胞悬液后，分别取1毫升分装到A、B、C、D、E五根离心管中，离心后加入不同浓度的融合剂各0.5毫升，实验中设置了20%、35%、50%、65%、80%五个PEG浓度梯度，经处理之后制成玻片在高倍显微镜下观察，对视野中细胞总数和融合细胞对数进行计数，就算融合率，最终得出结果。结果表明：在一定浓度范围内（20%-70%），细胞的融合率与PEG的浓度成正比关系；当浓度过大时，细胞融合率反而会有降低。

关键词：细胞融合；PEG；融合率；不同浓度

前言：人工诱导的细胞融合，在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合，也能产生种间细胞的融合，因此细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生物学和医学研究的各个领域。基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体；来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体。细胞融合不仅可用于基础研究，而且还有重要的应用价值，在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体，单克隆抗体可以用作诊断试剂，治疗疾病和运载药物，具有准确，高效，简易，快速等优点。因此，融合细胞的研究为生物学无论在基础理论上或生产实践上开辟了一条新的道路。这一技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。

peg诱导细胞融合原理

- 引言

在生物学和医学领域，细胞融合是一项重要的技术，其应用广泛，包括胚胎学研究、克隆技术、组织重建和干细胞研究等。近年来，一种名为PEG诱导细胞融合的方法受到了广泛关注和应用。本文将深入探讨PEG诱导细胞融合原理的多个方面，从基本概念到应用领域，以期帮助读者更好地理解这一重要技术。

1. PEG诱导细胞融合的基本原理

PEG，全称聚乙二醇（Polyethylene glycol），是一种无机化合物，在细胞融合中被用作诱导剂。PEG能够在一定条件下促使细胞膜的融合，从而使细胞融合成为可能。

2. PEG诱导细胞融合的条件

在进行PEG诱导细胞融合时，需要考虑一些关键条件。细胞必须处于活跃状态，以确保融合的成功性。PEG的浓度和温度也是非常重要的参数，过高或过低的浓度和温度都会影响融合效果。融合细胞的类型和比例也对融合结果有一定影响。

3. PEG诱导细胞融合的作用机制

PEG诱导细胞融合的作用机制尚不完全清楚，但目前的研究认为其主

要是通过对细胞膜的作用来促使细胞融合。PEG可以改变细胞膜的性质，增加膜的可塑性，从而使细胞融合点的形成成为可能。PEG还可

能通过改变膜蛋白的构象和作用，进一步促进细胞融合。

4. PEG诱导细胞融合的应用领域

PEG诱导细胞融合在多个领域具有广泛的应用。在胚胎学研究中，利

用PEG诱导的细胞融合可以用于制造嵌合胚胎，以研究胚胎发育过程和基因调控机制。在克隆技术中，PEG诱导的细胞融合可以用于制造

嵌合胚胎，进一步获得胚胎干细胞。PEG诱导细胞融合还可以应用于