霍乱弧菌实验室检测
霍乱弧菌检测
可作为检材。
A
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（2）送检 剧烈腹泻病人的水样便含有大 量病菌，直接分离培养不难检出阳性。不
能立即检查的，要接种于培养基内，尽快 送往检验室。送检标本可放入（PH8.6-9.0） 碱性蛋白胨水，也可放入文—腊二氏保存 液或插入Cary-Blair二氏半固体保存培养基 中。
菌体尾端有鞭毛，运动极为活泼，在暗视野 显微镜下呈流星样运动，培养温度以37℃为 最适宜，在碱性（PH8.8～9.0）肉汤或蛋白 胨培养基上易于生长。
A
3
霍乱弧菌染色图片
革
鞭兰毛染 Nhomakorabea染
色
色
A
4
分群和分型：
根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个 血清群。
根据是否与O1抗血清凝集分两大群， O1群霍乱弧菌：凡能与O1群抗血清发生凝集 非O1群霍乱弧菌：凡不被O1群抗血清凝集的。
的编码。 ▪ O139菌可以产生荚膜 ▪ 与O1群霍乱无交叉免疫力 ▪ 环境适应能力强 ▪ 耐药性强
A
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标本采集和送检
1、粪便采集
（1）采样 应在发病早期，服用抗菌药物之 前完成，并尽快送到检验室。粪便标本采 集方法如下：用棉拭子采取自然排出的新 鲜大便，也可用直肠棉拭或采便管由肛门 插入直肠内3cm-5cm处采取，水样便采取 1ml-3ml，成型便采取指甲大小的粪便量。
A
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鉴定
TCBS上出现黄色菌落，4号琼脂或庆大霉素 平板上出现灰褐色中心的菌落，均为可疑 菌落，应使用O1群和O139群霍乱弧菌的多 价和单价抗血清进行玻片凝集试验，结合 菌落特征和菌体形态，作出初步报告。
A
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疑似菌落鉴定基本要求：
霍乱弧菌实验室检测ppt课件
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• 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力 ，进行6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入 35℃孵箱中培养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取 消之前的审核，在原报告单上进行审核（1505970005） 。
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0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。
三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群 菌不产生肠毒素，因此无致病性
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霍乱病原学特点
• 形态与染色
– 弧状或逗点状 – 革兰染色阴性 – 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
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霍乱实验室检测
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检验科
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霍乱病原菌发现
• 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 • 1 9 0 5 年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱
弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度 腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到 ElTor弧菌致病性 • 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌
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疑似菌落初步鉴定：
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察， 如动力阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
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• 注意：
• 1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 • 2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动试验并
霍乱医学观察病例诊断标准
霍乱医学观察病例诊断标准
霍乱（Cholera）是一种由霍乱弧菌（Vibrio cholerae）引起的严重肠道传染病。
以下是根据世界卫生组织（WHO）的指南提供的霍乱病例的诊断标准：
1.临床表现：
●急性腹泻：持续阵发性或水样稀便，导致水和电解质丧失。
●脱水：主要表现为进行性的、迅速发展的脱水，可伴有血压
下降、皮肤弹性减弱、心跳加快等。
2.流行病学特征：
●病例接触史：患者是否有接触疫区、流行病区的水源或患者
的历史。
●流行病地区：病例是否来自或近期在霍乱流行病区。
3.实验室检测：
●从病例的粪便样本、血清或组织中分离出霍乱弧菌。
●通过PCR等分子生物学方法检测霍乱弧菌的DNA。
诊断霍乱的关键是临床表现和实验室确认。
如果临床症状和流行病学特征符合，同时从患者的样本中分离出霍乱弧菌或通过分子生物学方法检测到霍乱弧菌的DNA，那么诊断可被确认。
霍乱弧菌检测
霍乱弧菌古典生物型和 El-Tor生物型的区别
特征
古典生物型
羊红细胞溶血
-
鸡红细胞凝集
-
VP 试验
-
CAMP 试验
-
多粘菌素 B 敏感试验
+
Ⅳ组噬菌体裂解
+
Ⅴ组噬菌体裂解
-
El-Tor 生物型 D + + + +
O1群霍乱弧菌的血清分型
型别
别名
O抗原成份
原型
稻叶型（Inaba）
霍乱弧菌染色图片
革
鞭
兰
毛
染
染
色
色
分群和分型：
根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成 139个血清群。
根据是否与O1抗血清凝集分两大群， O1群霍乱弧菌：凡能与O1群抗血清发生凝
集 非O1群霍乱弧菌：凡不被O1群抗血清凝集
的。
O1群霍乱弧菌的生物型
1、古典生物型（前六次大流行） 2、E1 Tor 生物型（第7次 1961年来）。 两个生物型具有相同的血清型。我国流
A、C
异型 中间型
小川型（Ogawa）
彦岛型 （Hikojima）
A、B A、B、C
非O1群霍乱弧菌
• O139群霍乱弧菌
• 1992年，在印度印度马德拉斯、泰米 尔纳德发生的霍乱疫情，分离到的菌株 不与O1群霍乱血清凝集，但是引起O1 群霍乱的典型症状。引起WHO重视， 定为O139群霍乱弧菌，被认为下一次 霍乱大流行主角。
鉴定
• TCBS上出现黄色菌落，4号琼脂或庆 大霉素平板上出现灰褐色中心的菌落， 均为可疑菌落，应使用O1群和O139群 霍乱弧菌的多价和单价抗血清进行玻片 凝集试验，结合菌落特征和菌体形态， 作出初步报告。
霍乱弧菌国标标准方法
霍乱弧菌国标标准方法
霍乱弧菌是一种引起霍乱的弧菌属细菌。
为了有效防控霍乱疫情，国家制定了
相关的标准方法来监测和检测霍乱弧菌的存在和潜在威胁。
以下是关于霍乱弧菌国标标准方法的介绍。
霍乱弧菌国标标准方法主要包括样品采集、实验室分析和结果解读三个方面。
1. 样品采集：根据国家标准方法，样品的采集需要遵循严格的卫生规范。
一般
来说，水样、食物样品和环境表面样品是常见的采集对象。
采集时需要使用无菌容器，避免样品污染。
同时，应根据实际情况选择合适的采集方法和采样点，确保能够准确反映被测对象的情况。
2. 实验室分析：实验室分析是判定霍乱弧菌是否存在的重要环节。
通常采用培
养法进行分析，包括选择适当的培养基、温度和时间等。
在培养过程中，需要注意避免其他细菌的污染，保证结果的准确性。
此外，也可以使用分子生物学技术如PCR检测方法进行快速和准确的分析。
3. 结果解读：根据国家标准方法，对于从采集到的样品中检出霍乱弧菌的，应
根据相应的标准或参考值来进行解读。
结果解读需要根据实验室分析的结果，结合相关的卫生标准来判断是否存在风险，以及是否需要采取相应的控制和预防措施。
综上所述，霍乱弧菌国标标准方法是一种用于监测和检测霍乱疫情的重要手段。
准确采集样品、实验室分析和结果解读是该方法的关键步骤。
通过执行国家标准方法，我们能够及时发现和控制霍乱弧菌的传播，从而保障公众的健康和安全。
霍乱的实验室检查
霍乱的实验室检查(一)血液检查红细胞和血红蛋白增高，白细胞计数（10~20）×109/L或更高，中性粒细胞及单核细胞增多。
血清钾、钠、氯化物和碳酸盐降低，血pH下降，尿素氮增加。
治疗前由于细胞内钾离子外移，血清钾可在正常范围内，当酸中毒纠正后，钾离子移入细胞内而出现低钾血症。
(二)尿检查少数病人尿中可有蛋白质、红白细胞及管型。
(三)病原菌检查1.常规检查(1)粪便镜检可见黏液和少许红、白细胞。
取粪便或早期培养物涂片作革兰染色镜检，可见革兰阴性稍弯曲的弧菌，无芽孢，无荚膜。
O139群弧菌除了可产生荚膜外，其余与O1群弧菌同。
(2)悬滴检查将新鲜粪便作悬滴或暗视野显微镜检，可见运动活泼呈穿梭状的弧菌。
2.培养(1)增菌培养所有疑为霍乱病人的粪便，除作显微镜检外，均应作增菌培养。
粪便留取应在使用抗菌药物之前，且应尽快送到实验室作培养。
增菌培养基一般用pH8.4的碱性蛋白胨水，36~37℃培养6～8小时后表面能形成菌膜。
应进一步作分离培养、动力观察和制动试验。
(2)分离培养常用庆大霉素琼脂平皿或碱性琼脂平板。
前者为强选择性培养基，36~37℃培养8~10小时霍乱弧菌即可长成小菌落。
采用后者则需培养10~20小时。
选择可疑或典型菌落，用霍乱弧菌“O”抗血清作玻片凝集试验，若阳性即可出报告。
近年来国外亦有应用霍乱毒素基因的DNA探针作菌落杂交，可迅速鉴定出产毒素O1群霍乱弧菌。
3.免疫学试验制动试验取急性期病人的水样粪便或碱性胨水增菌培养6小时左右的表层生长物，先作暗视野显微镜检，观察动力。
如有穿梭样运动物时，则加入O1群多价血清一滴，若是O1群霍乱弧菌，由于抗原抗体作用，则凝集成块，弧菌运动停止。
如加O1群血清后，不能制止运动，应再用O139血清重复试验。
4.分子生物学检查PCR方法:近年来应用PCR技术来快速诊断霍乱。
检测基因亚单位CtxA、Zot和毒素协同菌毛基因(TcpA)。
根据TcpA 基因的不同DNA序列又可区别古典生物型和埃尔托生物型霍乱弧菌。
霍乱弧菌检测
该方法适用于早期诊断和快速筛 查，尤其在爆发期间对于大量样
本的检测具有优势。
其他检测方法
01
其他检测方法包括免疫层析试纸 条、免疫荧光抗体染色、电子显 微镜观察等。
02
这些方法在某些情况下可能具有 一定的应用价值，但敏感性和特 异性相对较低，且操作较为繁琐 。
03
霍乱弧菌检测的临床意义
这种方法通常用于回顾性调查和 流行病学研究，因为抗体产生需 要一定时间，且在感染后数月仍
可能保持阳性。
血清学检测不能用于早期诊断， 但对于评估疫苗接种效果和群体
免疫水平具有一定的价值。
分子生物学检测
分子生物学检测利用核酸探针或 PCR技术检测霍乱弧菌的遗传物
质。
分子生物学检测具有高敏感性和 特异性，能够快速地检测出极低
02
霍乱弧菌检测方法
粪便培养检测
粪便培养是检测霍乱弧菌的传统方法 ，通过将粪便样本接种在选择性培养 基上，观察是否有霍乱弧菌生长。
粪便培养通常用于确诊霍乱病例，以 及在爆发期间对疑似病例进行筛查。
粪便培养具有较高的特异性，但敏感 性较低，且需要较长时间才能得到结 果。
血清学检测
血清学检测通过检测患者血清中 的抗霍乱弧菌抗体来诊断霍乱。
加强国际合作与交流，共享先进的检 测技术、试剂和仪器资源，提高全球 霍乱弧菌检测能力。
培训与能力建设
通过国际培训和能力建设项目，提高 各国实验室检测人员的技能和水平， 促进检测技术的普及和应用。
05
案例分析
某地区霍乱弧菌检测案例
01
02
03
背景
某地区出现霍乱疫情，需 要对当地水源、食品和人 群进行霍乱弧菌检测。
特异性
霍乱常用的实验室检查
霍乱常用的实验室检查
霍乱常用的实验室检查有：
(1)直接镜检：
①直接涂片染色：将标本涂片，固定后用1∶10稀释石炭酸复红染色和革兰氏染色，镜检有无典型弧菌。
典型霍乱弧菌互相连接平行排列，有如“鱼群”。
②悬滴标本：将标本制成悬滴，镜检细菌动力，最好用暗视野显微镜。
霍乱弧菌运动活泼，呈小鱼穿梭状。
(2)分离培养：将吐泻物直接或先经碱性胨水增菌后，接种于庆大霉素琼脂等培养基，容易检出霍乱弧菌。
应用荧光抗体检测粪便中霍乱弧菌，可于1～2小时内获得结果。
(3)血清学检查：可作血清凝集试验。
在发病第1～3日及第10～15日各取1份血清，若第2份血清的抗体效价比第1份增高4倍或4倍以上，有诊断参考价值。
(4)制动试验——快速诊断：在急性病人的水样便中含有大量弧菌，如悬滴检查阳性，再滴加不含防腐剂的霍乱多价血清(使用浓度为1∶64)，几分钟内细菌运动停止，凝集成块即为阳性。
若具备下列条件之一者，可确诊为霍乱：
①凡有腹泻、呕吐等症状，大便培养霍乱弧菌阳性者；
②霍乱流行期间，在疫区有典型霍乱症状，大便培养阴性，而无其他原因可查者；
③有吐泻症状，霍乱弧菌培养阴性，作血清凝集试验第2份血清抗体
效价呈4倍以上增高者。
在非疫区，凡有典型泻吐症状，在病原学检查未确定时，或在霍乱流行期间，曾接触过霍乱患者，有腹泻症状而无其他原因可查者，均应高度怀疑为霍乱，在给予积极处理的同时，应作大便培养，隔日1次，连续3次阴性者，才可以否定诊断，并作出疫情更正报告。
现在已经有霍乱的快速检测试剂盒了，检测就不用这么麻烦了。
霍乱暴发疫情调查
霍乱暴发疫情调查一、背景介绍霍乱是一种由霍乱弧菌引起的肠道传染病，主要通过污染的食物和水传播。
它通常导致急性腹泻和呕吐，严重时可引起脱水和死亡。
近期，某地发生了霍乱暴发疫情，为了及时控制疫情蔓延，我们需要进行一次全面的调查，以了解疫情的来源、传播途径和感染人群，为制定有效的防控措施提供科学依据。
二、调查目的1. 确定霍乱疫情的爆发范围和趋势。
2. 掌握疫情的传播途径，分析可能的污染源。
3. 了解感染人群的特征和分布情况。
4. 提供科学依据，制定针对性的防控措施。
三、调查方法1. 数据采集：采集相关的疫情报告、医院就诊数据、患者病例记录等。
2. 现场调查：赴疫情发生地进行实地考察，了解当地卫生状况、饮水和食物供应情况等。
3. 随机抽样：对疫情爆发地区的居民进行抽样调查，了解他们的生活习惯、饮食情况等。
4. 实验室检测：对患者的粪便样本、饮水和食物样本进行实验室检测，确认霍乱弧菌的存在和分布情况。
四、调查内容1. 疫情爆发地点：确定疫情的爆发地点，并绘制疫情地图，标注疫情的扩散范围。
2. 潜在污染源：调查当地的饮水供应情况，包括自来水管网、水源地和水处理设施等，以确定是否存在水源污染。
3. 食品供应链：调查当地的食品供应链，包括供应商、生产加工环节和销售渠道等，分析可能的食物污染途径。
4. 患者特征：调查已确诊和疑似病例的年龄、性别、职业等特征，分析感染人群的分布情况。
5. 接触史调查：对病例进行问卷调查，了解他们的饮食习惯、接触史和旅行史等，以确定可能的传播途径和风险因素。
五、调查结果分析1. 疫情分析：根据采集的疫情数据和调查结果，分析疫情的爆发趋势和扩散规律。
2. 污染源分析：结合现场调查和实验室检测结果，分析可能的污染源和传播途径。
3. 人群特征分析：对感染人群的特征进行统计和分析，了解感染的高风险群体。
4. 防控措施建议：根据调查结果，提出相应的防控措施建议，包括加强卫生监管、提高饮水和食品安全、加强健康教育等。
霍乱弧菌实验室检验技术
抗原构造
O139群霍乱弧菌不被已知的O1-O138群霍乱弧 菌诊断血清所汇集。表明本菌的抗原性与O1群 和其它非O1群霍乱弧菌有明显区别。 革兰氏阴性菌的抗原性都是由细胞壁的脂多 糖（LPS）所决定。通过对O139群霍乱弧菌的 LPS进行化学分析和血清学分析后发现O139群 霍乱弧菌缺少O1群霍乱弧菌LPS中的特异性成 分。 通过两者进行提取其LPS然后进行被动溶血试 验与被动溶血抑制试验检测，结果显示两者抗 原性有显著不同。O139群霍乱弧菌有荚膜而 O1群霍乱弧菌无荚膜。
2012-5-4
两者不同点：
群所致病中有44 O139群所致病中有 44.3% 可发生腹部痉 139 群所致病中有 44. 也有引起严重粘液性腹泻的， 挛 ， 也有引起严重粘液性腹泻的 ， 进入 外周血液可引起发热， 外周血液可引起发热 ， 出现菌血症或败 血症。 印度出现20 例病人中有17 例发热、 20例病人中有 17例发热 血症 。 印度出现 20 例病人中有 17 例发热 、 白细胞增多。 白细胞增多 。 而 O1 群引起的病人未曾见 过。 鉴别两者， 必须通过血清学诊断 来区分。 血清学诊断来区分 鉴别两者 ， 必须通过 血清学诊断 来区分 。 22群与 139群血清有交叉汇集反应 群与O 群血清有交叉汇集反应， O22群与O139群血清有交叉汇集反应，必 须用O22群弧菌吸收 群弧菌吸收， 须用O22群弧菌吸收，去除交叉汇集现象。
病，发病急、传播速度快、波及范 围广、危害严重的甲类传染病。 ♦ 是国内交通检疫传染病之一。 ♦ 也是当今三种国际检疫传染病中最 严重的一种。
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霍乱病原菌发现
♦ 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 ♦ 1905年埃及埃儿托检疫站首次分离到
霍乱弧菌实验室检测
▪ 深入分型判定(省CDC进行)
注：快速检测并不能替换常规检测进行，只是 作为辅助检测一个伎俩
霍乱弧菌实验室检测
第18页
霍乱弧菌胶体金免疫层析检测
霍乱弧菌实验室检测
第19页
荧光PCR检测霍乱弧菌
病例标本检测 环境和食品调查初筛方法
霍乱弧菌实验室检测
O1群、 O139群双色荧光检测试剂盒 深圳生科源生物技术有限企业
第20页
O1群和O139群霍乱弧菌检验程序
▪ 培养特征：
营养要求不高，兼性厌氧，37℃生长，怕酸嗜碱， pH:7.4-9.6快速生 长
▪ 检验依据：
WS 289- 《霍乱诊疗标准》
霍乱防治手册（1999年第五版）
霍乱弧菌实验室检测
第4页
霍乱试验室检测
样品采集和运输 不一样品病原分离流程及技术关键点
➢粪便 ➢水体 ➢水产品，食品等
平板分离及可疑菌落挑取
+
+
O139 —
+
—
—
霍乱弧菌实验室检测
第14页
▪ 国内商品化霍乱检测血清
▪ 国外血清：日本生研，泰国S&A血清等
霍乱弧菌实验室检测
第15页
深入试验
氧化酶试验 1％盐酸对氨基二甲基苯胺或盐酸 二甲基对苯二胺水溶液
霍乱弧菌实验室检测
粘丝试验 0.5％去氧胆酸钠水 溶液
霍乱监测方案实验室流程
霍乱监测方案实验室流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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霍乱检测操作规程
霍乱检测操作规程霍乱是一种由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病，其症状包括剧烈腹泻、呕吐和腹痛。
霍乱具有高度传染性，因此在进行霍乱检测时需要遵循一定的操作规程，以确保实验室工作人员和社会公众的安全。
下面是一份霍乱检测的操作规程，以供参考。
1. 实验室准备：- 确保实验室设备和试剂的完好和有效性。
- 准备好所需的培养基、试剂和仪器。
- 提前准备好相关实验记录和报告模板。
2. 实验室设备清洁和消毒：- 定期对实验室设备进行清洁和消毒，特别是接触到样本的仪器和工具。
- 使用合适的消毒剂对实验台面、试剂架和实验室周边进行消毒。
3. 样本采集和处理：- 使用适当的个人防护装备，包括手套、口罩和护目镜。
- 选择合适的采样方法，如直肠拭子、粪便样本或病人的呕吐物。
- 将采样好的样本放入严密密封的容器中，避免样本泄漏和污染其他样本。
- 将样本尽快送往实验室进行处理，以确保有效的检测结果。
4. 霍乱检测方法：- 使用合适的实验方法和试剂进行霍乱的检测，如PCR、免疫学检测或培养方法。
- 按照试剂和仪器的说明书进行实验操作，确保准确和可靠的结果。
- 对实验过程中的废液和废物进行正确处理，以防止污染和传播。
5. 结果判读和报告：- 对检测结果进行仔细的观察和判断，根据标准判定结果的阴阳性。
- 将结果记录在实验记录中，并及时生成报告。
- 如有需要，将结果报告给相应的卫生部门和相关人员。
6. 实验室安全和废物处理：- 在实验室操作过程中，严格遵守实验室安全规定，确保操作人员的安全。
- 对实验室产生的废液和废物进行正确的处置和处理，以降低污染和传播的风险。
- 使用合适的方法和设备对操作台面和工具进行清洁和消毒。
7. 实验室记录和质量控制：- 对实验室操作进行详细的记录，包括样本信息、实验步骤和结果等。
- 定期进行质量控制实验，以确保实验的准确性和可靠性。
- 定期进行实验室内部和外部的质量评估，及时发现和纠正实验中的问题。
总结：霍乱检测的操作规程至关重要，它能确保实验室工作人员和社会公众的安全。
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检验科
霍乱病原菌发现
• 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 • 1905年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱
弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度 腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到 ElTor弧菌致病性 • 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌
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一、霍乱概述
• 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的
急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危 害严重的甲类传染病。 • 是国内交通检疫传染病之一。
• 也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。
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二、霍乱病原学
• 霍乱的病原学分类 • 霍乱的病原学特征
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• 注意：
• 1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 • 2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动试验并
在LIS上记录和审核试验结果。 • 3.当动力和血清制动试验同为阳性时，为疑似霍
乱弧菌感染，要立即通知开单科室和医务处，对 病人采取相应的隔离治疗等必要措施。
0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。
三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群 菌不产生肠毒素，因此无致病性
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霍乱病原学特点
• 形态与染色
– 弧状或逗点状 – 革兰染色阴性 – 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
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1. 左键单击微生物检验，进入微生物检验窗口。
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2.单击标本号（左键、右键均可），会出现下拉框。单击“其它”
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3.该标本会由lis自动生成编号，如1505970005。
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4.编号由lis自动生成后，根据病人实际信息，先选择“患者类别”，然 后输入患者编号（门诊号或住院号），项目类别自动显示为大便力霍乱
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霍乱弧菌抗原结构及分类
• 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热 的鞭毛（H）抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗 原有群特异性和型特异性两种抗原，是霍乱弧菌分群 和分型的基础。
• WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde） 和埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的 特异抗原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A 抗原与其他B与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC （稻叶，Inaba）、异型——AB（小川，Ogawa）和中间 型——ABC（彦岛，Hikojima）。
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• 血清制动试验包括4瓶血清。第1瓶为O1群多价，第2、3 瓶为小川、稻叶型单价。第4瓶为O139群抗血清。当观察 到动力阳性，首先进行O1群多价的制动试验。如为阴性， 接着做O139群的制动试验。两者均阴性，可初步排除霍 乱弧菌病感染。如O1多价制动试验阳性，则进一步进行 第2、3瓶的制动试验，即进行小川、稻叶型单价血清的制 动试验
• 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力， 进行6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入 35℃孵箱中培养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取 消之前的审核，在原报告单上进行审核（1505970005）。
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疑似菌落初步鉴定：
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察， 如动力阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
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霍乱弧菌检验流程图
2020/2/292Fra bibliotek20/2/29
•谢谢！！
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注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将 转种好的胨水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步 骤由微生物室来完成：门诊在上午11：00以后收到的标本， 需将转种好的胨水和患者化验单一起放置门诊35°C的培 养箱中培养，门诊拖班人员需跟当晚住院部夜班人员交班， 夜班人员需在转种胨水6-8h后看动力和转种庆大平板，记 录并审核结果，第二天由师傅将平板和化验单转运至微生 物室，后续步骤由微生物室来完成。
3mL，亦可用棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm 处采取。急性期病人取水样便标本在增菌培养的同时 可取其粘液絮片或用棉拭子直接接种于碱性琼脂、 TCBS琼脂培养基。不能立即检查的粪便标本，要放入 碱性蛋白胨水中。
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检验流程
• 接收到大便动力弧菌培养标本，请先建单。方法如下
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革兰染色
电镜负染色—鞭毛
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• 霍乱弧菌动力视频链接 /v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
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三、霍乱弧菌常规检验
样本采集、送检和保存 标本的检验流程
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样本采集、送检和保存
• 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～
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二、非01群霍乱弧菌：本群弧菌鞭毛抗原与01群相同，而菌体 （0）抗原则不同，不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集，依O 抗原之异，本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散 发的胃肠炎性腹泻，一般此类弧菌感染不作霍乱处理，但 1992年在印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行，后证实流行 菌不被01群和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为
弧培养。最后一步，点“建单”。
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建单完成后，如下图
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• 5.取粪便标本在高倍镜暗视野下看动力，看完动力后，在 “初步动力”栏录入结果（阴性或阳性），并审核打印报 告。同时粪便标本转种到碱性胨水中并放入35℃孵箱中培 养,在化验单上记录转种时间。
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