细菌内毒素验证

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细菌内毒素试验（鲎试验）的全面解析

一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素(Exotoxin)；它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。

另一类为内毒素(Endotoxin)，是革兰氏阴性菌的细胞壁的产物。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。

和热原的关系

热原(pyrogen)系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。

热原是否就是内毒素？细菌内毒素是热原的一种，即细菌性热原。细菌内毒素被认为是热原的本质，此事在学术上仍有争议，热原不仅是细菌内毒素。

但在药检的范畴，细菌内毒素是主要的热原物质，可以说无内毒素就无热原，控制内毒素就是控制热原。

热原反应：含有热原的注射剂注入人体可引起发热反应，使人体产生发冷、寒战、体温升高、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至40℃，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及生命。

来源和控制方法

1、细菌内毒素的特性

2、去除细菌内毒素的方法

(1)吸附法

此法是利用活性炭对热原的吸附作用达到去除作用的方法。常用的吸附剂中，活性炭对热原的吸附作用最强，一般用量为总容量的0.1%-0.5% ，将溶液加热到70℃左右保温一定时间效果更好。

使用的活性炭应符合药典规定要求。

(2)蒸馏法

此法是利用热原具有不挥发性而达到去除目的。因此，凡适于蒸馏的药品均可用蒸馏法除去热原。

8、细菌内毒素检查的验证

范围内。
定量法：标准曲线的可靠性试验。相关系数 |γ |≥0.980，但回归方式必须是直接
回归，不能使用平均回归。
2、试剂验证
2.1 目的：验证实验所使用的每一批号试剂（TAL、 CSE、BET水）是否满足BET实验的要求。 2.2 验证项目及标准凝胶法：鲎试剂标示灵敏度的复核实验，复核结果应在标示灵敏度的50~200%范围内。

明该去热原工艺能使内毒素至少下降3个对数单位。

4.3方法（见内毒素指示剂使用方法）
5、定量检测设备的验证
• GMP要求用于检验的设备要定期进行校验； • 定量检测设备的验证主要包括安装确认、运行确认和性能确认。
– 1、安装确认（IQ）
包括计算机、软件、打印机等的安装确认，使用手册、软件版本、设备序列号等的确认。
细菌内毒素检查的验证
细菌内毒素检查的验证
1.
2.
ห้องสมุดไป่ตู้
3.
4. 5.
实验室的验证试剂验证供试品验证干热除热原验证定量检测设备的验证
1、实验室验证
1.1 目的：验证实验室的条件以及实验员的实验技能是否满足BET实验的要求。 1.2 验证项目及标准凝胶法：鲎试剂标示灵敏度的复核试验。复核结果应在标示灵敏度50~200%
– 2、运行确认（OQ）
包括软件运行密码的安全性确认，设备与软件的连接通信、稳定性确认等； – 3、性能确认（PQ）包括光学性能、温控性能、检测均一性能的确

细菌内毒素检测要求

检测原理

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁的组成部分，具有很高的免疫原性。在细菌生长过程中，内毒素产量达到一定水平后，可引起人类和动物发热、休克、DIC（弥散性血管内凝血）等多种病症。因此，对细菌内毒素进行准确检测至关重要。

细菌内毒素检测的基本原理是：基于内毒素与抗内毒素抗体特异性结合的特性，通过检测样品中内毒素引发的凝集反应，从而确定内毒素的存在。目前，常用的细菌内毒素检测方法为鲎试验法，其灵敏度高、操作简便、结果判断客观。

样品采集

采集细菌内毒素样品时，需遵循无菌操作原则，确保采集过程不受污染。样品主要包括：水样、食品、药品等。采集前需充分了解样品来源，以便对样品进行合理处理。此外，采集到的样品应尽快送至实验室进行处理，以防内毒素分解或样品变质。

样品处理

样品处理是细菌内毒素检测的重要环节。首先，应去除样品中的无关物质，如：杂质、蛋白质等。这一步骤可采用离心、过滤等方法。其次，需将样品中的内毒素提取出来，常用的提取方法有：热处理法、酸碱处理法等。最后，样品

处理过程中需严格控制温度、湿度、时间等条件，以确保样品中内毒素的稳定性。

试剂和器材

进行细菌内毒素检测实验时，需要使用以下试剂和器材：试剂：

鲎血：用于制备鲎试验试剂

细菌内毒素标准品：用于制作标准曲线

氯化钙溶液：用于中和鲎血试剂

磷酸盐缓冲液（PBS）：用于稀释样品和鲎血试剂器材：

无菌试管：用于样品处理和实验操作

移液器：用于准确移取样品和鲎血试剂

涡旋振荡器：用于混匀样品和鲎血试剂

水浴锅：用于控制实验温度

酶标仪：用于读取实验结果

细菌内毒素检查

1、实验原理

2、实验试剂

3、试验器具

4、检查方法概述

5、供试品溶液的制备

6、内毒素限值的确定

7、最大有效稀释倍数（MVD）的确定

8、鲎试剂灵敏度复核

9、干扰试验

10、供试品的细菌内毒素检查

1、实验原理：利用鲎试剂与微量内毒素产生凝聚反应的现象，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。

2、实验试剂：

①鲎试剂：从海洋无脊椎动物“鲎”的蓝色血液中提取的变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥精制的生物制剂。

鲎试剂的生物活性以其能检出细菌内毒素的最低有效浓度表示，即鲎试剂的灵敏度，单位为EU/ml。当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。

②细菌内毒素国家标准品：系自大肠埃希菌提取精制得到的内毒素，用于标定细菌内毒素工作标准品和标定，仲裁鲎试剂灵敏度。

③细菌内毒素工作标准品：系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。

④细菌内毒素检查用水：指内毒素含量少于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005 EU/ml （用于光度测定法），且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水。

3、实验器具：刻度吸管、凝聚管（10×75mm）、三角瓶、小试

管（10×100mm）、试管架、洗耳球、封口膜或金属试管帽、时钟、脱脂棉、吸水纸、剪刀砂轮。

耐热器皿常用干热灭菌法（250℃，30分钟以上）去除，塑料用具应选用无内毒素并且对试验无干扰的器械（目前多为无热源的一次性用品）。

细菌内毒素检验方法验证方案

一、背景介绍

细菌内毒素是一种由细菌产生的有毒分子，它可以引起中毒反应并对人类健康造成危害。因此，准确检测和验证细菌内毒素的方法非常重要。本方案旨在验证细菌内毒素检验方法的准确性和可靠性。

二、实验目的

本实验旨在验证细菌内毒素检验方法，确保其能够准确地检测细菌内毒素的含量。

三、实验材料和设备

1. 细菌内毒素检验试剂盒

2. 细菌培养基

3. 细菌菌种

4. 培养皿

5. 恒温培养箱

6. 试管

7. 离心机

8. 显微镜

9. 无菌培养室

四、实验步骤

1. 准备工作

a. 清洁实验桌面和实验器材，防止污染。

b. 准备所需要的材料和设备，并确保其干净和无菌。

2. 细菌培养

a. 随机取一支细菌菌种采样放入培养基中并均匀涂抹于培养皿上。

b. 将培养皿置于恒温培养箱中，以适当的温度和时间培养细菌。

3. 细菌内毒素检验

a. 取一份细菌内毒素检验试剂盒，根据说明书的指导进行试剂的

调配和处理。

b. 等待试剂反应完成后，根据试剂盒的说明书进行结果的解读。

4. 结果分析

a. 观察试剂盒结果，根据颜色变化和强度判断细菌内毒素的含量。

b. 结果符合预期的样本被认为是阳性，否则为阴性。

五、质量控制

1. 测量前需进行必要的质量控制，包括试剂的稳定性和标准品的准

确性。

六、风险控制

1. 实验过程中需佩戴个人防护装备，如实验手套和口罩，以减少潜

在的健康风险。

七、数据处理与结果

1. 将实验所得数据进行整理和统计，并进行数据分析和结果的解读。

八、讨论与结论

1. 讨论实验结果与预期结果之间的差异，分析可能的原因，并提出

细菌内毒素检查验证方案

起草人：

审核人：

批准人：

批准日期：年月日

1 概述 (1)

2 验证目的及范围 (1)

3 验证小组人员组成及职责 (1)

4 验证依据 (2)

5 验证前准备 (2)

6 验证的实施 (2)

7 偏差处理 (5)

8 验证数据及评估 (5)

9 验证报告及评审 (5)

10 再验证及周期 (5)

11 验证文件及归档 (5)

12 附件 (5)

细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或者量化由格兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素检查报告两种发放，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法，供试品检测时，可使用其中任何一种方法发展实验。公司自行制备的注射用水需发展细菌内毒素的检查，本方案将采用凝胶法发展试验。

本验证方案合用于注射用水的细菌内毒素的检查，通过对鲎试剂灵敏度复核试验、

干扰试验及凝胶限度试验，建立该产品的细菌内毒素检查方法，并对其有效性发展评价，确保检测方法的专属性、灵敏度，保证检测结果可符合质量标准要求。

3.1 验证小组由以下部门人员组成：质量部、 QC 、生产部。

3.2 验证小组组成及职责列表

"中华人民共和国药典"2022 版 1143 细菌内毒素检查法

职责

1. 负责起草验证方案的起草

2. 负责本方案的培训

3. 仪器仪表校验确认

4. 负责验证的实施

5. 负责数据的采集和整理

6. 负责数据分析

7. 负责完成验证报告

1. 负责验证方案、验证报告的审核与批准

2. 负责验证现场的监视审查 1. 负责保障设备、器具的完好 2. 负责动力系统的保障

中国药典2021年版《细菌内毒素检查法》

中国药典2021年版《细菌内毒素检查法》――凝胶法

凝胶法

凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理去检测或半定量内毒素的方法。

鲎试剂灵敏度复核试验在本检查法规定的条件下，使鲎试剂产生凝集的内毒素的最低浓度即为鲎试剂的标示灵敏度，用eu/ml表示。当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。

根据鲎试剂灵敏度的标注值（λ），将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水熔化，在旋涡混合器上搅匀15分钟，然后做成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每吸收一步均应当在旋涡混合器上搅匀30秒钟。抢分装有0.1ml鲎试剂溶液的10mm×75mm试管或复水溶性后的0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿18两支，其中16管分别重新加入0.1ml相同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行搞4管；另外2管重新加入0.1ml细菌内毒素检查用水做为阴性对照。将试管中溶液轻轻搅匀后，半封闭管口，横向放进37℃±1℃恒温器中，保温60分钟±2分钟。

将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性。保温和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果。

当最小浓度2λ管均为阳性，最高浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管为阴性，试验方为有效率。按下式排序反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测量值(λc).

λc=1g-1(∑x/4)

细菌内毒素检验方法验证方案

1 概述:为了符合2010版GMP的要求，为了确保生产检验出符合预定用途和注册要求的产品，确保产品质量合格。保证用药安全。确认检查方法的科学持续稳定可靠适用性理想。本方案对注射用水细菌内毒素检查方法进行验证。

2 验证目的:为确保注射用水细菌内毒素检测方法的专属性、灵敏度在本实验室条件下的适用性保证检测结果科学准确可靠，特制定此方案对注射用水细菌内毒素检查方法进行验证。

3 验证方式:结合实验室实际情况，按照2010版药典附录细菌内毒素检查方法检查。由合格的检验人员对同一批供试品进行检查同一操作方法同一批供试品检查重复检查3次记录检查结果对比，看检查结果是否符合要求，重复性稳定性是否符合要求。

4 验证范围:适用于注射用水细菌内毒素检查方法验证，按照2010版药典附录细菌内毒素检查方法检查项下要求逐一进行。

5 验证结果的评价:根据药典合格标准来验证确认，确认检查方法检查结果的重现性稳定性是否符合要求。适用性是否理想。

6 验证机构组成

6.1验证委员会根据验证工作需要，常设验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织，负责审批验证方案和验证报告、发放验证证书。验证委员会针对每一个具体验证项目成立专门的验证小组，负责该验证项目的验证方案起草，实施、组织与协调，负责验证结果记录与评定，负责完成验证报告。 6.2验证委员会组成: 姓名部门及职务验证委员会中职务验证工作中职责

6.4职责:

6.4.1 验证委员会:

6.4.1.1 负责验证方案的审批。

6.4.1.2 负责验证的总协调工作，以保证本验证方案顺利实施。 6.4.1.3 负责验证数据及结果的审核。

细菌内毒素检验方法验证方案

1 概述：为了符合2010版GMP的要求，为了确保生产检验出符合预定用途和注册要求的产品，确保产品质量合格。保证用药安全。确认检查方法的科学持续稳定可靠适用性理想。本方案对注射用水细菌内毒素检查方法进行验证。

2 验证目的：为确保注射用水细菌内毒素检测方法的专属性、灵敏度在本实验室条件下的适用性保证检测结果科学准确可靠，特制定此方案对注射用水细菌内毒素检查方法进行验证。

3 验证方式：结合实验室实际情况，按照2010版药典附录细菌内毒素检查方法检查。由合格的检验人员对同一批供试品进行检查同一操作方法同一批供试品检查重复检查3次记录检查结果对比，看检查结果是否符合要求，重复性稳定性是否符合要求。

4 验证范围：适用于注射用水细菌内毒素检查方法验证，按照2010版药典附录细菌内毒素检查方法检查项下要求逐一进行。

5 验证结果的评价：根据药典合格标准来验证确认，确认检查方法检查结果的重现性稳定性是否符合要求。适用性是否理想。

6 验证机构组成

6.1验证委员会根据验证工作需要，常设验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织，负责审批验证方案和验证报告、发放验证证书。验证委员会针对每一个具体验证项目成立专门的验证小组，负责该验证项目的验证方案起草，实施、组织与协调，负责验证结果记录与评定，负责完成验证报告。

6.2验证委员会组成：姓名部门及职务验证委员会中职务验证工作中职责

6.4职责：

6.4.1 验证委员会：

6.4.1.1 负责验证方案的审批。

6.4.1.2 负责验证的总协调工作，以保证本验证方案顺利实施。

细菌内毒素检查验证方案

一、引言

细菌内毒素是一类具有强毒性的生物毒素，可以由细菌产生并释放到环境中。其存在对于人类和动物的健康具有潜在的危害。因此，建立一种可靠有效的细菌内毒素检查验证方案至关重要。本文将介绍一种基于实验室技术的细菌内毒素检查验证方案。

二、实验目的

本实验的目的是开发一种验证细菌内毒素检测的方法，以确保检测结果的准确性和可靠性。具体目标包括：

1. 确定合适的细菌内毒素检测方法；

2. 确定验证方案的实施步骤；

3. 评估验证方案的可行性和有效性。

三、实验设计

1. 材料准备

- 细菌内毒素检测试剂盒（根据实验需求选择合适的试剂盒）

- 多个细菌培养菌株

- 培养基和培养用具

- 杂质过滤器

- 试管和离心管等实验室常用器具

2. 实验步骤

1) 培养细菌菌株：选择多个细菌菌株进行培养，确保含有多种不同

类型的内毒素。

2) 提取内毒素：将培养的细菌离心，取上清液，通过杂质过滤器去

除细菌细胞残留和固体杂质。得到的上清液即为细菌内毒素提取物。

3) 验证检测方法：使用细菌内毒素检测试剂盒对提取物进行检测，

按照试剂盒说明书进行操作。根据试剂盒结果，评估其准确性和可靠性。

4) 重复实验：根据上述步骤，重复多次实验以确保实验结果的稳定

性和可重复性。

5) 数据分析：收集实验结果并进行统计分析，评估所选择的细菌内

毒素检测方法的可行性和有效性。

四、实验注意事项

1. 实验过程中要严格遵守实验室操作规范，注意安全。

2. 选择合适的细菌内毒素检测试剂盒，确保其适用于所需检测的内

毒素类型。

3. 在提取内毒素时，要注意避免细菌细胞的污染。

细菌内毒素检验操作程序

目的：规范细菌内毒素检验操作程序。范围：适用于细菌内毒素检查操作。

责任：品质部组织制定，中心化验室负责实施。内容 1准备工作实验设备及用具

1.1.1刻度吸管、称量瓶、镊子、安瓿瓶（2ml 、5ml ）、药匙、250℃烘烤1小时。 1.1.2干燥箱、恒温水浴锅、漩涡混合器、精密天平。

1.1.3剪刀、砂轮片、医用胶布、洗耳球、试管架、脱脂棉球、水银温度计、试管内毒素标准品与实验试剂

1.2.1鲎试剂：在使用前应进行灵敏度测定，原则上购进一个批号测定一次。 1.2.2细菌内毒素检查用水（内毒素含量＜mL

灭菌注射用水）。 1.2.3细菌内毒素国家标准品和工作标准品。 75%乙醇、铬酸洗液。

实验用具的消毒处理：凡是参与实验样品或试剂接触的器具，在实验前必须经除细菌内毒素处理，将洗净的器具经纯化水冲洗后，在250℃干热灭菌至少60分钟。恒温水浴箱内水浴温度调节到37±1℃。 2鲎试剂灵敏度复核

根据鲎试剂灵敏度的标示值（如：λ= EU/ml ），细菌内毒素工作标准品加入1ml 细菌内毒素检查用水溶解，在漩涡混合器上混匀15分钟。

将工作标准品制备成2λ、λ、λ、λ四个浓度（ EU/ml 、 EU/ml 、 EU/ml 、 EU/ml ）例：工作标准品为160 EU/ml 时

注意：每稀释一步均应在混合器上混匀30秒。

取18支 EU/ml鲎试剂，每支中加入水，然后分别加入中制备好的4个浓度的标准液,按浓度从高到低依次加入，每个浓度加4支，；最后2支加入水作阴性对照。

将上述试管用医用胶布封口，垂直放入37℃±1℃水浴锅中，保温60±2分钟。放入水浴前把水搅动几下，以使水温均匀。再次检查温度是否在所要求的范围，注意保温和取放过程应避免受到振动造成的假阴性结果。

细菌内毒素检测方法

细菌内毒素是一种由细菌产生的毒素，它们可以对人体和动物造成严重的危害。因此，检测细菌内毒素的方法显得尤为重要。在本文中，我们将介绍几种常见的细菌内毒素检测方法，以帮助读者更好地了解和掌握这一领域的知识。

首先，常见的细菌内毒素检测方法之一是生物学检测法。这种方法利用动物或细胞对内毒素的敏感性，通过观察它们的生理反应来判断样品中是否存在内毒素。这种方法的优点是灵敏度高，能够检测到极小浓度的内毒素，但缺点是需要较长的检测时间，并且对实验动物的使用可能存在伦理和法律上的问题。

其次，化学检测法是另一种常用的细菌内毒素检测方法。这种方法利用化学试剂与内毒素之间的特定反应来进行检测。例如，内毒素在存在特定试剂时会发生颜色变化，通过观察颜色的变化来判断样品中是否存在内毒素。化学检测法的优点是操作简单、快速，但缺点是对内毒素的种类和浓度有一定的限制。

另外，生物传感器技术也被广泛应用于细菌内毒素的检测。生物传感器是一种能够将生物学识别元素与传感器技术相结合的新型

检测技术，它能够实时、快速地检测样品中的内毒素，并且具有较

高的灵敏度和特异性。生物传感器技术的发展为细菌内毒素的检测

提供了新的思路和方法。

此外，分子生物学方法也在细菌内毒素的检测中发挥着重要作用。例如，聚合酶链式反应（PCR）技术可以通过扩增内毒素相关基

因的方法来进行检测，而基因芯片技术则可以同时检测多种内毒素。这些分子生物学方法具有高度的特异性和灵敏度，能够准确地检测

样品中的内毒素，但需要较为复杂的实验操作和专业的设备。

综上所述，细菌内毒素的检测方法多种多样，每种方法都有其

4.细菌内毒素检测的相关验证

实验室、人员、试剂、用具

的验证

湛江安度斯生物有限公司

产品验证（干扰试验）

凝胶法

产品验证（干扰试验）

光度法

无干扰

50%200%

小结：干扰的判断方法，看回收率=？

产品的日常检查

小结与方法对比

细菌内毒素检查法(凝胶法)

精品课件
1、试验准备：试剂、仪器及用具
仪器与器具电热恒温水浴锅、定时钟、去热源枪
头和小玻璃瓶、移液枪、试管架、剪刀、锡箔纸。试剂
细菌内毒素工作标准品、细菌内毒素检查用水、鲎试剂。
精品课件
2、内毒素限值的确定
❖ L=K/M
❖ 式中L为供试品的细菌内毒素限值，一般以 EU/ml、EU/mg或EU/U表示；K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以 EU/（kg·h）表示；M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml/（kg·h）、 mg/（kg·h）或U/（kg·h）表示。一般由供试品提供者直接提供内毒素限值如1000EU。
确、清洗操作方便。 2、用于内毒素检测的稀释试管最好用玻璃试
管；塑料用具只能为一次性且保证无内毒素。实验环境：最好在洁净室或洁净工作台内进行，
保证环境温度、湿度及通风稳定。实验人员：戴干净手套和口罩。
精品课件
❖ 实验过程：
1、内毒素工作标准品应严格按要求低温保存；工作标准品开封后尽快使用且应一次性用完，不再保存。
鲎试剂标准品供试品
B 200ul
C 100ul 100ul
精品课件
A 100ul
100ul
A 100ul
100ul
6、结果判定
❖ 将制备好的试剂用锡箔纸包裹好后放入电热恒温水浴锅中， 37℃恒温水浴60min后观察结果（保证玻璃瓶中溶液处于水面以下，并防止水进入瓶中）。若阴性对照溶液B为阴性，阳性对照溶液C为阳性，试验有效。

细菌内毒素验证

100单位/ml→20单位/ml→10 单位/ml→5 单位/ml→2.5 单位/ml→1.25 单位 /ml→0.625 单位/ml→0.3125 单位/ml→0.156ml /ml→0.078 单位/ml→0.039 单位/ml
分别用4λ的内毒素标准品与各梯度的供试品等量稀释，得到相应的供试品阳性对照。
假阳性，更换另一批供试品进行测试结果四
供试品浓度供试品溶液供试品阳性对照
MVC0.25 ---
MVC0.125 ---
MVC0.06 ---
MVC0.03 ---
BET水 -++
假阴性，消除干扰后再测试
6
正式干扰试验
• 根据最大不干扰浓度选用相应灵敏度的鲎试剂作正式干扰试验。
编号内毒素浓度/被加入内毒素的溶液无/供试品溶液稀释用液稀释倍数所含内毒素的浓度平行管
阴性对照 -
+ + + +
+ + + +
- - -
- - -
+
+
-
-
-
3、重复做3批，计算结果
9
正式干扰试验接受标准当阴性对照4管为阴性，两组最大浓度2λ均为阳性，最低浓度0.25λ均为阴性时，试验结果有效。Et/Es值在0.5～2 （包括0.5、2）之间为无干扰，反之为有干扰

细菌内毒素检测方法验证方案说明

细菌内毒素检测方法验证方案

起草人

起草日期

审核人

审核日期

批准人

批准日期

西安力邦制药有限公司

目的-------------------------------------------------------------------------范围-------------------------------------------------------------------------责任人----------------------------------------------------------------------内容-------------------------------------------------------------------------

1.实验材料及用具-------------------------------------------------------

2 实验准备----------------------------------------------------------------

3.具体验证步骤----------------------------------------------------------3.1. 鲎试剂灵敏度复核------------------------------------------------3.2..干扰实验--------------------------------------------------------------