巨噬细胞吞噬作用的观察 细胞学实验报告

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生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日
题目:巨噬细胞吞噬作用的观察
一.实验目的
1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬
细胞在非特异性免疫中的功能。

2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

二.实验原理
1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量
巨噬细胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养”。

连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细
胞。

2.台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。

活细胞的细胞质膜
对台盼蓝有不透过性。

巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤
后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼
蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。

是一种溶酶体染色的方法。

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会
被小鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程
三.实验材料及设备
1.实验材料:
a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只
b)鸡红细胞悬液
c)生理盐水
2.实验设备:
a)普通光学显微镜
b)载玻片、盖玻片若干
c)注射器
d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日四.实验方法及步骤
1.小鼠处理与巨噬细胞采集
a)连续2-3天(每天一次)向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀
粉肉汤。

b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。

c)一人控制住小鼠,露出腹部,另一人用注射器向小鼠腹腔
中注射1ml鸡红细胞悬液。

按摩小鼠腹部。

d)20-30分钟后,再注射1-1.5ml生理盐水(0.9%NaCl)按
摩小鼠腹部。

e)3分钟后,引颈法处死小鼠
f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口(注意要剪开腹部的肌肉
层),用无针头的注射器吸取腹腔液。

g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液,加上盖玻片,在显微镜下观
察。

2.观察
在不同倍数下观察样本,找到正在消化或者吞噬鸡红细胞
的巨噬细胞。

注意避免玻片液体干涸。

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