巨噬细胞吞噬作用的观察 细胞学实验报告

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日

题目：巨噬细胞吞噬作用的观察

一．实验目的

1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬

细胞在非特异性免疫中的功能。

2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

二．实验原理

1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量

巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细

胞。

2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。活细胞的细胞质膜

对台盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤

后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼

蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会

被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程

三．实验材料及设备

1.实验材料：

a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只

b)鸡红细胞悬液

c)生理盐水

2.实验设备：

a)普通光学显微镜

b)载玻片、盖玻片若干

c)注射器

d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日四．实验方法及步骤

1.小鼠处理与巨噬细胞采集

a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀

粉肉汤。

b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。

c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔

中注射1ml鸡红细胞悬液。按摩小鼠腹部。

d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按

摩小鼠腹部。

e)3分钟后，引颈法处死小鼠

f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉

层），用无针头的注射器吸取腹腔液。

g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观

察。

2.观察

在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞

的巨噬细胞。注意避免玻片液体干涸。