地中海贫血及新生儿筛查检测项目介绍

夫妻双方血常规结果MCV小于82fl
免费地贫基因检测
临床应用
联合广东省梅州妇幼保健院建立全面的地贫防控体系
地贫防控网络体系是一套电子信息管理系统软件，这套软件是利 用电子系统平台，对筛查、召回、诊断、治疗、遗传咨询和产前 诊断服务的一系列工作进行登记和随访，做到随时跟进患者情况 ，以及把收集的资源和信息进行共享。在此防控网络体系基础上 ，可以在全国的任何一个地区查到患者自己的情况，也便于医生 对患者情况的跟踪、访问。医院可以通过这套系统软件的电子平 台来整理本院的数据，同时可以通过这个平台来申请查阅共享其 他成员单位的数据。地贫防控体系系统的数据对临床有一定的指 导意义，对了解各地区地贫状况提供参考。
地中海贫血及新生儿筛查检测项 目介绍
王冰冰 博士
广东凯普生物科技股份有限公司
地中海贫血检测技术介绍
来自百度文库
地中海贫血
地中海贫血（ Thalassemia ），简称地贫，世界上发 病率最高、危害性最大的单基因遗传性疾病，主要分为 α-地贫和β-地贫。 我国以长江以南各省发病率高，多见于广东、广西、海 南、福建、云南、贵州、四川 等地区。
福建
湖南 四川 重庆
4.1
2.2 1.9 1.0
1.5
2.0 2.2 2.3
5.6
4.2 4.1 3.3
J Clin Pathol, 2004; Clin Genet, 2010; 中华医学遗传学杂志, 2012.
地中海贫血
基因类型
αα/αα
临床类型
正常人
症状
-α/αα或αTα/αα
--/αα、-α/αTα或 ααT/ααT或-α/-α --/-α或--/ααT --/--
新生儿筛查检测项目
正常样本
95M 杂合子
95M 纯合子
392M 杂合子
392M 纯合子
1388M 杂合子
新生儿筛查检测项目
耳聋是一种严重影响人类生活质量的常见先天性疾病，它可以由单一基因突变或 不同基因的复合突变引起，也可由环境因素（如医疗因素，环境暴露，创伤，药物 等）或基因和环境两者共同作用而致。在中国，先天耳聋的发病率约占中国聋人的 50%，而遗传聋约占先天聋的85%，其大多数为常染色体隐性遗传。 我国遗传性耳聋患者所涉及的主要是线粒体DNA（mtDNA）、SLC26A4、 GJB2和GJB3四种基因的突变。其中，mtDNA基因突变主要包括1494M、 1555M、7445M和12201M；SLC26A4基因突变主要包括IVS-M、1229M、 2168M；GJB2基因突变主要包括35M、155M、176M、235M和299M；GJB3 突变主要以538M为主。 本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的4个耳聋相关基因（GJB2, GJB3, SLC26A4和12S rRNA）的13个突变热点。每个样品需做A组和B组、两 个多重PCR反应。可用于耳聋患者的病因诊断、遗传咨询、产前诊断和新生儿听力 筛查，还可以帮助和提醒医生慎重使用特定种类的抗生素以避免造成携带基因突变 的儿童致聋。
临床应用
联合海南省人民医院开展海南黎族地贫流行病学调 查及基因分析课题
该课题主要针对地贫的高发民族黎族开展，进行约1万人 份的流行病学调查，分析其基因型别
新生儿筛查检测技术介绍
新生儿筛查检测项目
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因检测试剂盒 （PCR+导流杂交法）
耳聋易感基因检测试剂盒（PCR+导流杂交法）
、CD71/72(+A)、IVS-I-1(G-T, G-A)、 IVS-I-5(G-C)、Cap(AAAC)、Int（T-G）、CD31(-C)】。
样本采集
EDTA或枸橼酸钠抗凝全血样本 羊水样本
滤纸血斑（采集卡）样本
绒毛膜样本
操作流程
结果分析
41-42N
41-42M 43M NP
本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的13个G6PD基因突 变位点。可以对G6PD缺陷相关疾病进行辅助诊断，指导临床药物使用， 指导饮食生活习惯，预防溶血的发生。为优生优育提供疾病的遗传特性分 析，预测胎儿患病风险；可用于新生儿G6PD筛查和辅助诊断，预防新生 儿黄疸。
新生儿筛查检测项目
95N 392N 493N 592N 871N
正常样本
1494M纯合子
1555M纯合子
良心品质 科学管理
产品优势
首次实现α缺失型地贫的基因芯片检测（不需电泳）
导流杂交快速简便，杂交时间仅需30min
临床应用
广东省计生地贫免费基因检测工作模式
广东省各地区计生站搜集血样，经MCV、MCH初筛，夫妻双方MCV都小于 82fl则送样至省计生科研所，两周以内出报告； 血斑样本采集卡的应用，解决了物流问题； 采用最新的筛查流程。 人群筛查 项目去年8月启动，11月开始送样，迄 今为止，已经有近3500对夫妇接受了免 费的地贫基因检测，其中38%的家庭需 要进行遗传咨询以及产前检测跟踪。 发现了稀有的HK型α地贫以及稀有型别 的β地贫， 数据还在进一步整理中。
17N
17M 14-15M CSN
654N
654M IVSI-1M QSN
71-72N
71-72M IVSI-5M α3.7
-28N
-28M -29M WSM
βeN
βeM CapM IntM
SEA
CSM
QSM
α4.2
31M
27-28M
注：NP指染色体上α基因的正常对照；-28M、-29M均以28N为正常对照；
RNA加工突变
CapM (-AAAC)
β+
CD26/βeM (G-A) 起始密码突变 无义突变 IntM (T-G) CD17 (A-T) CD43 (G-T) CDs14/15 (+C) CDs27/28 (+C) CDs31 (-C) CDs41/42 (-TCTT) CDs71/72 (+A)
95M
1004N
392M
1024N
493M
1311N
592M
1360N
871M
1376/1381N
1004M 1381M
1024M 1387/1388N
1311M 1387M
1360M 1388M
1376M ----
注：上表中95N, 392N, 493N, 592N, 871N, 1004N, 1024N, 1311N, 1360N分别为相应位点95M, 392M, 493M, 592M, 871M, 1004M, 1024M, 1311M, 1360M的正常对照。 1376/1381N为1376M， 1381M的正常对照， 1387/1388N为1387M和1388M的正常对照。
地中海贫血
重型α地贫导致孕妇新生儿死亡率增加； 重型β地贫胎儿出生时与正常胎儿无异，到3-6个月时就会逐渐出现严重贫 血，如果不治疗，一般5岁左右死亡； 中间型地贫患儿需长期输血，长大基本丧失劳动力，生存质量明显下降。
地贫难治但可防！ 地贫基因携带率不是防控 目标，减少了多少中重度 地贫的出生才是关键！
14-15M、17M以17N为正常对照；41-42M、43M以41-42N为正常对
照；QSM、 WSM以QSN为正常对照； βEM,654M,71-72M, CSM 分 别以βEN, 654N, 71-72N，CSN为正常对照；IVSⅠ-1M, IVS1-5M、
31M、CapM、IntM、 27-28M未设正常对照。
静止型
轻型 （标准型） 血红蛋白H病 Hb Bart’s胎儿水 肿综合征
无症状
轻度贫血
溶血性贫血 胎儿水肿
- a3.7< - a4.2 <a2Ta1< - -
地中海贫血
基因类型
β+/βA、β0/βA β+/ δβ+ 变异型纯合子 β+/β+、β0/β0、 β+/β0
基因产物
能合成适量的β链 β链部分合成 β链几乎不能合成 γ链合成相对增加 Hb F和Hb A2增加
结果分析
--SEA/αα
βN /βN
--SEA/-α4.2 βN/βN
αα/ ααQS βN /βN
--SEA / ααQS βN/βN
αα/αα β41-42/βN
αα/αα β41-42/β41-42
αα /αα β41-42/ β654
--SEA/αα
β41-42 /βN
产品优势
一张芯片同步检测α-地贫缺失、突变，β-地贫突变
临床类型
静止性及轻型β 地贫 中间型β地贫 重型β地贫
临床表现
贫血不明显或轻 度贫血 介于重型和轻型 之间（不需输血） 地中海贫血面容 溶血性贫血（需 输血）
β+ < β0
地中海贫血
β地中海贫血的常见突变类型
突变种类 转录突变 发生区域 致病原理 起始位点上游 使转录效率降低，mRNA生成量 启动子TATA框 减少而产生的β+地贫 非编码区 影响mRNA剪切等加工过程不能 IVS-1和IVS-2 准确进行形成异常的mRNA，导 致β0或β+地贫 由于异常的RNA加帽部位突变， RNA裂解部位 影响RNA转录后不能准确裂解， （加帽部位） 产生不稳定的mRNA，使正常β 链生成减少引起β+地贫 外显子突变引起相邻裂解信号被 编码区 激活，影响IVS正常位点的剪接， 生成异常mRNA，产生Hb E 突变类型 -28 (A -G) -29 (A-G) IVS-1 nt 1 (G-T) IVS-1 nt 5 (G-C) IVS-2 nt 654 (C-T) 表型 β+ β+ β0 β+ β+
把住“三关” --婚检、孕检和产检
地中海贫血
中国南方α和β地贫的人群携带率
地区 α地贫 广西 云南 17.6 9.8 携带率（%） β地贫 6.4 7.3 合计 24.0 17.1
海南
广东 贵州 江西（南部）
12.7
8.5 4.2 3.5
2.7
2.5 5.1 2.9
15.4
11.0 9.3 6.4
新生儿筛查检测项目
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏 病,俗称蚕豆病。我国是本病的高发区之一，主要分布在长江以南各省， 以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。G6PD缺乏症发病原 因是由于G6PD基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤 而遭受破坏，引起溶血性贫血。临床表现为慢性非球形细胞溶血性贫血、 蚕豆病、药物性溶血、新生儿黄疸及某些感染性溶血。
新生儿筛查检测项目
新生儿筛查检测项目
Biotin — 1494N 1494M S1229N 35N 35M 1555N 1555M S1229M 155N 155M 7445N 7445M S12201N 176N 176M G3538N G3538M S12201M 235N 235M IVS7N IVS7M — 299N 299M S2168N S2168M —
Hb E β0 β0 β0 β0 β0 β0 β0 β0
翻译突变
编码区
导致生成的mRNA稳定性降低， 或形成无功能的mRNA，从而不 能合成正常的β珠蛋白链，多数 为β0地贫
移码突变
凯普地中海贫血核酸检测技术
自主研发的导流杂交技术平台， 两项美国专利
主要性能
本试剂盒用于可以快速准确同步诊断中国人常见的3种缺失型α-地中
海贫血（--SEA、-α3.7 和 -α4.2）和3种突变型（CS、QS、WS）及β地中海贫血15个突变位点（16种突变类型）, 分别为：【IVS-II654(C-T)、-28(A-G)、-29(A-G)、CD14/15（+G）、CD17(A-T)
、CD27/28（+C）、βE(G-A) 、CD41/42 (-TTCT)、CD43(G-T)