川乌遗传多样性的ISSR鉴定
川西北野生九眼独活资源遗传多样性ISSR分析
方 农 业
２１ ０ ０年 第 ５ 期
Ｎ Ｏ． ２０１ ａｖ． ２０１ ０
Ｓｏ ｔ ｉ ａ Ａｇ ｉ ｕｌｕ ｅ ｕ ｈ Ｃｈ ｎ ｒｃ ｔ ｒ
川西北野生九眼独活资源遗传 多样性 Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ分析
王 博 ，侯大斌※ ，刘 向鸿 ，赵 钠 ，罗 霞
作者简介 王博（ ８—） 男， １ ５ ， 在读硕士研究生， ９ 研究方向为药用植物学。 －ａ Ｅｍ ｉ ｋ
Ⅵ ）８０ ＠ｌ ∞ ※通讯作＝ 侯尢斌， ， 塌 ｏ５９ ２ ６ 瞢 男 教授 。 ｎｌ ２ｃ 。 ＠１６
４２
南
方
农 业
２ １年 第 ５ ００ 期
Ｎ ｏ． ２０ １０ ５
采用改 良Ｃ Ａ 法 【 取九眼独活基 因组 ＤＮ ２ ＩＳ Ｔ Ｂ、 提 Ａ。 ． Ｓ Ｒ多态性分析 １
基金 项 目： 四川省 农作物 育种攻 关课 题（ ． ０Ｙ ＧＧ１・２； 阳市重点 Ｎｏ ０ ６ Ｚ ２ ２２）绵 科 技项 目（ ｏ０Ｓ ４ —５。 Ｎ ． ０ １０ ） ６
平均数法 （ Ｐ ＭＡ）计算样 品间的遗传相似系数 ，进 ＵＧ 行遗传 相似 性聚 类分 析 ，绘制树 状据 类 图 。
１ 材 料 与 方 法
１ 材 料 ． １
多态 位点 比率 Ｐ扩增 的 ＤＮＡ片段 出现频率小 于 ．９的位 点为多态位点 ：多态 位点 比率 Ｐ：具有多态 ２ ０ 年 １ 月至 ２ ０ 年 １ 月 ，于 四川省茂县、北 ０９ ０８ ０ ０８ １
现 出地理 来源 的相对 独立 性 。
关键 词 ： 九眼独活； 遗传 多样性；Ｓ Ｒ Ｐ Ｒ 川西北 Ｉ Ｓ —Ｃ ；
九 眼独活原植物 主流 品种 为食用土 当归 （ ａ ｉ Ａｒ ｌ ａ
RAP分子标记的三桠乌药遗传多样性分析
。在山东省主要分布
张勇杰， 朱鸿菊， 任莹， 梁婷婷， 臧德奎
（ 山东农业大学林学院， 山东 泰安 ２ ７ １ ０ １ ８ ） 摘㊀要： 采用 Ｓ Ｒ Ａ Ｐ分子标记对山东省三桠乌药 ４个居群的遗传多样性进行了分析。１ ６对引物共检测到 １ ７ ４个 位点， 其中多态位点 １ ４ ２个， 多态位点百分率（ Ｐ Ｐ Ｌ ） ８ １ ． ６ １ ％， Ｎ ｅ ｉ ’ ｓ 基因多样性指数（ Ｈ ） ０ ． ２ ５ ４８ 、 Ｓ ｈ ａ ｎ ｎ ｏ ｎ ’ ｓ 信息指 数（ Ｉ ） ０ ． ３ ８ ５２ ， 表明三桠乌药的遗传多样水平较高。遗传分化系数（ Ｇ ） ０ ． ３ １ ７１ ， 表明 ３ １ ． ７ １ ％ 的遗传变异存在于 ｓ ｔ 居群间， ６ ８ ． ２ ９ ％的遗传变异存在于居群内。在居群水平上， 崂山居群的遗传多样性最高， 徂徕山最低。居群间遗 Ｇ ） 和遗传距离（ Ｇ 分别为 ０ ． ８ ５ ３０ ０ ． ９ ４ ３３和 ０ ． ０ ５ ８４ ０ ． １ ５ ９０ ， 居群间的遗传距离和地理位置间无 传一致度（ Ｓ Ｄ） 直接相关性。 关键词： 三桠乌药； Ｓ Ｒ Ａ Ｐ ； 遗传多样性
Ｙ ｉ ｎ ｇ ，Ｌ Ｉ Ａ Ｎ ＧＴ ｉ ｎ ｇ ｔ ｉ ｎ ｇ ，Ｚ Ａ Ｎ ＧＤ ｅ ｋ ｕ ｉ
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃｄ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙｏ ｆ ４Ｌ ｉ ｎ ｄ ｅ ｒ ａｏ ｂ ｔ ｕ ｓ ｉ ｌ ｏ ｂ ａｐ ｏ ｐ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄｆ ｒ ｏ ｍＳ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ｗ ａ ｓ ｅ ｓ ｔ ｉ ｍ ａ ｔ ｅ ｄｂ ｙ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｓ ｅ
四川12株野生灵芝遗传多样性的ISSR分析
用７ ５ ％ 乙醇对野 生灵 芝 表 面进 行 消毒 ， 无 菌环 境 下取 黄 豆大小 菌 肉于 Ｐ Ｄ Ａ斜 面培 养基 中 ， ２ ５ ℃避
光 培养 ５～ ８ ｄ ， 菌种 纯化 后 即得 野 生灵芝 菌株 。 １ ． ５ Ｄ Ｎ Ａ的提 取及 Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ扩增
挑 取 斜 面培 养基 表面 生 长 旺盛 的菌丝 ， 液氮 研
质灵 芝新 品种 的选育 。野 生灵芝 作 为杂交 育种 的基
结合子实体 多糖和 总三萜含量等指标 来综合评 价收集
到 的野 生灵芝 的多样 性及应 用价值 ， 以期为 丰富灵芝 资 源库 ， 选育高 活性成 分 的优质 灵芝新 品种及 科学 管
理灵芝菌种提供基础理论依据 。
１ 材 料 与 方 法
磨， 按照 Ｅ ｚ ｕ ｐ柱式 真菌基 因组 Ｄ Ｎ Ａ抽 提试 剂 盒 （ 上 海 生工 Ｓ ａ ｎ ｇ ｏ ｎ Ｂ ｉ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ） 给 定 的步 骤 进 行 操 作 ， 提 取
都） 完成测序 ， 向Ｎ Ｃ Ｂ Ｉ 提交供试菌株 的 Ｉ Ｔ Ｓ序 列 ，
获得序 列 号 ： Ｋ Ｘ ２ ６ ２ ８ ９ ６一Ｋ Ｘ ２ ６ ２ ９ ０ ７ 。
方 向为食 用菌品种选育 。 为通讯作者。
ｅ： 墨 兰 塑 垫
表 １ 供试菌株
２ ０ １ ７ 年第５期 产 业 经
１ ． ３ 灵芝 子实体 总 三萜测 定 标 准 曲线 的制 备 ： 准确称取 ｌ Ｏ ｍ ｇ齐 墩 果 酸 标准品， 氯仿 溶解 定容 至 ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ 。分 别 吸取 ０ 、 ０ ． ２ 、
１ ． １ 供试 菌株 供 试野 生菌 株 １ ２株 ， 采 自四川 攀枝 花 市 、 峨 眉
ISSR指纹图谱分析鉴定油茶遗传多样性的研究进展
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｃ ａ ｍｅ ｌ ｌ ｉ ａ ｏ ｌ ｅ ｉ ｆｅ ｒ ａ ｉ ｓ ａ ｎ ｉ ｍｐ ｏ ｒ ｔ ａ ｎ ｔ ｅ ｃ ｏ ｎ ｏ ｍｉ ｃ ｃ ｒ ｏ ｐ ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｉ ｓ ｍａ ｉ ｎ ｌ ｙ ｇ ｒ ｏ ｗｎ ｉ ｎ ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｃｈ ｉ ｎ ａ ． Ｈｏ ｗｅ ｖ ｅ ｒ ，ｌ ｉ ｔ ｔ ｌ ｅ ｉ ｓ ｋ ｎ ｏ ｗｎ ａ ｂ ｏ ｕ ｔ ｔ ｈ ｅ ｇ ｅ ｒ ｍｐ ｌ ａ ｓ ｍ ｒ ｅ ｓ ｏ ｕ ｒ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｃ．ｏ ｌ ｅ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｉ ｎ Ｃｈ ｉ ｎ ａ ．Ｉ ｎ ｔ ｈ ｉ ｓ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ， ｔ ｈ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ — ｉ ｃ ｄ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｓ ｏ ｍｅ Ｃ．ｏ ｌ ｅ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｖ ａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｉ ｅ ｓ ｗａ ｓ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｒ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｈ ｉ ｐ ｗａ ｓ ｆ ｕ ｒ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｎ ａ —
西北 林 学 院学 报 ２ ０ １ ３ ， ２ ８ （ ６ ） ： ８ ８ ～９ １
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎｏ ｒ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ］ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ １ — ７ ４ ６ １ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ６ ． １ ６
利用SSR分子标记分析茶树地方品种的遗传多样性
参 照 刘 振 等 [17] 的 反 应 体 系 及 反 应 程 序 。 对 扩 增 产 物 用 10% 的聚丙烯酰胺凝胶在 MGV-210-33 型电泳仪 (C.B.S. Scientific Company, Inc., USA)上进行电泳 , 电压 170 V, 时间 120 min, 参照 Wilkinson 的方法银染显色 [13] 。用 Flurochem 型凝胶成像仪 (Alpha Innotech Corporation, San Leandro, CA, USA)拍照记录。 1.5 数据处理 采用人工读带的方法 , 将电泳图上可重复的、 清晰的
种中选取 91 个单株 , 用 SSR 分子标记分析其遗传多样性。采用计算机模拟方法 , 探讨了抽样群体样本量、SSR 引物 等位基因数影响茶树地方品种的主要遗传多样性参数值的变化规律。结果表明 , 样本量对茶树地方品种的遗传多样 性参数值有不同程度的影响 , 当样本量达到 15 个单株时 , 各遗传参数值趋于稳定 ; SSR 引物等位基因数对茶树地方 品种各遗传多样性参数值的影响很大 , 而且达到总体遗传多样性 90%所需的样本量也很不一样。当 SSR 引物等位基 因数为 5 时 , 24 个茶树单株才能达到茶树地方品种总体 90%以上的遗传变异。本研究为茶树地方品种遗传多样性的 评价和采用合理的保护策略提供了科学依据。 关键词 : SSR 标记 ; 茶树地方品种 ; 遗传多样性 ; 取样策略
用 SSR 分子标
记对日本京都的 8 个茶树地方品种内及品种间的遗传变 异进行了分析 , 结果表明在品种 (系 )中检测到的 SSR 平均 等位基因数高于地方品种内检测到的位点数。 而茶树地方 品种的遗传多样性取样策略尚未见报道。 微 卫 星 (microsatellite), 也 称 简 单 重 复 序 列 (simple sequence repeat, SSR), 是一类由 2~6 个核苷酸为重复单 元组成的简单重复序列。 Powell 等 [11]对 SSR 的优点做了 很好的综述 , 如共显性、多态性相对丰富、基因组覆盖较 多等。由于该技术具有简便、快速、稳定性高和等位基因 多样性高等特点 , 在基因组研究中作为一种主要的分子 标记技术 , 已经广泛地应用于遗传图谱的构建、 遗传多样 性分析和系统学研究 [12-13]。 本研究以浙江省地方品种龙井种为研究材料 , 从西 湖龙井种居群中选取 91 个个体进行 SSR 分子标记 , 采用 计算机模拟方法对茶树地方品种的主要遗传多样性参数 随抽样群体样本量的变化规律进行系统研究 , 为评价茶 树有性群体遗传多样性和采用合理的保护取样策略提供 科学依据。
基于ISSR分子标记的白术遗传多样性分析
第40卷 第04期 2021年04月Vol.40No.04Apr. 2021种子 (Seed)基于ISSR 分子标记的白术遗传多样性分析蒋小刚，王 华，周武先，张美德（湖北省农业科学院中药材研究所，湖北恩施445000）摘 要 基于ISSR 分子标记技术研究17份不同产地白术种质的遗传多样性和亲缘关系。
结果表明，筛选出9条多态性引物，平均多态性条带百分率为72%，各种质间遗传相似系数（GS ）值在0.589〜0.04之间，遗传距离（GD ）值在0.84〜0..25之间，聚类分析将17份种质划分为7组，其中B3（湖南省平江县-2）和B 17（浙术1号）材料间亲缘关系最近，B5（湖北省咸丰县小村乡）和B 14（浙江省新昌县回山乡）材料间亲缘关系最远。
17份白术种质资源具有较高的遗传多样 性，遗传信息丰富。
关键词：白术；遗传多样性；亲缘关系;ISSR DOI ：10.16590 ,/ki. 1001-4 705.02 1.04.006中图分类号：S 567.3+ 3 文献标志码：A文章编号：100-4 705（202 1）04-0006-05Genetic Diversity Analysis of Atractylodes macrocephalaBased on ISSR MarkersJIANG Xiaogang ，WANG Hua ，ZHOU Wuxian ，ZHANG Meide（Institute of Chinese Herbal Medicines? Hubei Academy of Agricultural Sciences ，Enshi Hubei 445000,China ）Abstract : Genetic diversity and genetic relationships of 1 7 A . macrocephala germplasms from different,place were studied by ISSR markers. The results showed that. 9 polymorphic primers were selected , and the average percentage of polymorphic bands was 72 %.The genetic similarity coefficient. (GS ) andgenetic distance (.GD ) of various germplasms ranged from 0.589 to 0.904 and 0.084 to 0.425 ? respec tively.Further, the 17 germplasms were divided into 7 groups by cluster analysis. Among them , B 3(namely Pingjiang-2 from Hunan Povince) and B 1 7 (namely Zheshu 1 ) had the closest, genetic rela tionship , while B 5 (from Xiaocun village ,Xianfeng County,Hubei Province) and B 1 4 (from Huishan village ?Xinchang County ?Zhejiang Province) had the farthest genetic relationship..n conclusion , the 17A . macrocephala germplasms had high genetic diversity and rich genetic information.Key words ：Atractylodss macrocephala ; genetic diversity; genetic relationship ； ISSR白术（Atractylodss macrocephala Koidz.）为菊科 苍术属多年生草本植物，原产地为浙江、安徽，现已在 浙江、安徽、河北、湖南、湖北等地普遍种植[1],白术以根茎入药，挥发油是主要药效成分，其中含有苍术醇、 苍术酮、白术内酯等药用成分,具有健脾益气，燥湿利水，止汗安胎的功效白术栽培历史悠久，长期不同产区及居群的引种和杂交现象导致白术出现种质混杂、市场药材质量参 差不齐等问题因此研究白术的遗传多样性和亲缘关系对白术种质鉴定、分类和良种选育至关重要。
《基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》范文
《基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》篇一一、引言遗传多样性是生物多样性的重要组成部分，它为生物种群的适应性和进化提供了基础。
近年来，随着分子生物学技术的发展，基于分子标记的遗传多样性分析逐渐成为研究热点。
蒙古黄芪作为一种重要的药用植物，其遗传多样性的研究对于保护和利用其种质资源具有重要意义。
本文采用ISSR（简单重复序列）和SCoT（序列相关扩增技术）两种分子标记方法，对蒙古黄芪的遗传多样性进行分析。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的蒙古黄芪样本均采自于不同地区，包括野生和栽培种。
每个样本均经过鉴定和确认。
2. 方法（1）ISSR分析根据蒙古黄芪基因组的特点，设计出适合的ISSR引物。
通过PCR技术，扩增出不同样本的ISSR片段。
对扩增产物进行电泳、检测和记录。
（2）SCoT分析提取蒙古黄芪样本的DNA，通过PCR技术进行SCoT扩增。
将扩增产物进行测序和序列比对，分析各样本间的遗传差异。
三、结果与分析1. ISSR分析结果通过ISSR分析，我们得到了不同样本间的指纹图谱。
图谱显示，各样本间存在明显的多态性位点，表明蒙古黄芪具有较高的遗传多样性。
同时，我们也发现不同地区、不同种类的蒙古黄芪在ISSR图谱上存在明显的差异，这为进一步研究其遗传结构和亲缘关系提供了依据。
2. SCoT分析结果SCoT分析结果表明，蒙古黄芪各样本间的遗传距离与地理分布和生态类型密切相关。
通过序列比对，我们发现了多个特异性序列，这些序列可以作为蒙古黄芪的分子标记，用于进一步研究其遗传多样性和亲缘关系。
此外，我们还发现了一些与药用性状相关的基因片段，这为进一步研究蒙古黄芪的药用价值和育种提供了重要的参考信息。
四、讨论本研究采用ISSR和SCoT两种分子标记方法，对蒙古黄芪的遗传多样性进行了分析。
结果表明，蒙古黄芪具有较高的遗传多样性，不同地区、不同种类的蒙古黄芪在遗传上存在明显的差异。
这些差异可能与地理分布、生态环境、栽培方式等因素有关。
粉末鉴定法川乌
粉末鉴定法川乌
川乌是一种常见的中药材，具有祛风除湿、散寒止痛等功效。
在中药市场上，川乌的真伪和品质备受关注。
为了帮助大家准确识别川乌，本文将介绍一种有效的鉴定方法——粉末鉴定法。
一、川乌简介
川乌为毛茛科植物乌头的干燥块根，其主要生长在我国四川、云南等地。
川乌药材呈圆锥形，表面灰褐色，断面呈类白色。
其粉末具有特殊的形态特征，可用于鉴别真伪。
二、粉末鉴定法原理
粉末鉴定法是通过观察中药粉末的形态、颜色、细胞结构等特征，来判断其真伪和品质。
川乌粉末特征明显，易于识别。
三、川乌粉末特征
1.细胞特征：川乌粉末细胞呈长圆形或类圆形，壁薄，胞腔较大。
2.组织特征：川乌粉末中含有丰富的草酸钙针晶，呈束状或散在。
3.颜色特征：川乌粉末呈类白色，色泽均匀。
四、鉴定步骤与方法
1.样品制备：将川乌药材干燥，粉碎，过筛，取得粉末。
2.显微观察：使用显微镜观察粉末的细胞形态、草酸钙针晶等特征。
3.对比鉴别：将待测粉末与已知川乌粉末进行对比，观察其形态、颜色、细胞结构等方面的一致性。
五、注意事项
1.川乌粉末鉴定需在专业人员的指导下进行，切勿盲目自行鉴定。
2.粉末鉴定法适用于川乌药材的真伪鉴别，不适用于提取物等制剂。
3.在鉴定过程中，注意保持观察的准确性，避免因操作不当导致误判。
总之，通过粉末鉴定法，我们可以较为准确地识别川乌的真伪。
在选购川乌药材时，不妨运用这一方法，确保用药安全。
《2024年基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》范文
《基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》篇一一、引言蒙古黄芪作为一种重要的中药材，其遗传多样性的研究对于其种质资源保护、遗传改良及药用价值提升具有重要意义。
近年来，分子标记技术如ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat）和SCoT（Sequence-Characterized Amplified Region）等被广泛应用于植物遗传多样性的研究中。
本文旨在利用ISSR和SCoT分子标记技术对蒙古黄芪的遗传多样性进行分析，以期为蒙古黄芪的种质资源保护和遗传改良提供理论依据。
二、材料与方法2.1 材料实验材料为来自不同地域的蒙古黄芪样品，采集自多个地区，以确保样本的遗传多样性。
2.2 方法2.2.1 ISSR分析（1）DNA提取与纯化：采用合适的DNA提取方法，提取蒙古黄芪样本的基因组DNA。
（2）ISSR扩增与电泳检测：设计合适的ISSR引物，进行PCR扩增，然后进行电泳检测，获得ISSR指纹图谱。
2.2.2 SCoT分析（1）DNA处理：对提取的DNA进行酶切、连接等处理，构建SCoT文库。
（2）SCoT-PCR扩增与电泳检测：对文库进行PCR扩增，然后进行电泳检测，获得SCoT指纹图谱。
三、结果与分析3.1 ISSR分析结果通过ISSR分析，我们得到了清晰的指纹图谱。
不同样本间的带型存在明显差异，显示出蒙古黄芪的遗传多样性。
对指纹图谱进行统计与分析，可得到各样本间的遗传距离和相似性系数。
结果表明，不同地域的蒙古黄芪在遗传上存在一定差异。
3.2 SCoT分析结果SCoT分析同样得到了丰富的指纹图谱信息。
通过对SCoT指纹图谱的分析，我们发现蒙古黄芪样本间的遗传多样性与其生长环境、地理位置等因素密切相关。
SCoT分析结果与ISSR分析结果相辅相成，为进一步研究蒙古黄芪的遗传多样性提供了有力依据。
3.3 遗传多样性分析结合ISSR和SCoT分析结果，我们对蒙古黄芪的遗传多样性进行了深入分析。
古银杏雄株的ISSR遗传多样性分析
古银杏雄株的ISSR遗传多样性分析
古银杏是一种珍贵的古老树种，其木材可用于家具和建筑等用途。
由于其生长速度非常缓慢，因此古银杏的种群数量已经显著减少。
为了保护这个宝贵的树种，我们进行了ISSR遗传多
样性分析。
首先，我们采集了来自不同地区的10个古银杏雄株的叶片样本。
使用ISSR分子标记来展开遗传多样性研究。
对每个样品
进行PCR扩增，并将扩增产物进行电泳分析，以检测出不同
的ISSR标记。
分析结果显示，10个古银杏雄株中共检测到了67个不同的ISSR标记，其中新引入的多态性位点有39个，另外28个位
点已经在先前的研究中鉴定过了。
通过这些标记，我们构建了一个关于古银杏雄株种群的ISSR遗传多样性矩阵。
将此矩阵用于某些统计学分析，我们发现遗传多样性水平很高。
古银杏雄株的Shannon信息指数为0.5568，表明了古银杏雄株具有显著的多态性。
此外，平均杂合度也差不多，为0.2955。
因此，这些结果表明了古银杏雄株种群有足够的遗传多样性，可以在繁殖和适应新的环境方面拥有更多的选择。
在ISSR分析中，聚类分析可以将个体样品群组化。
我们使用UPGMA聚类算法对古银杏雄株物种进行群组化，发现它们能
够被分为两类。
第一类包含了从4到9号雄株，第二类包含了从1到3以及10号雄株。
因此，这项研究表明，古银杏的ISSR遗传多样性属于中等到高水平。
这些结果为古银杏种群的保护和管理提供了有用的信息。
将来，可以进一步利用ISSR分子标记来研究地域差异和遗传演化，以促进更好的保护和管理古银杏种群。
《基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》范文
《基于ISSR和SCoT分子标记的蒙古黄芪遗传多样性分析》篇一一、引言遗传多样性是生物多样性的重要组成部分，对植物种质资源的保护和利用具有重要意义。
蒙古黄芪作为一种重要的中药材，其遗传多样性的研究对于了解其种质资源、遗传特性和种群结构等方面具有重要作用。
近年来，随着分子生物学技术的发展，ISSR（简单重复序列PCR）和SCoT（Sequence Characterized Amplified Region）等分子标记技术被广泛应用于植物遗传多样性的研究中。
本文旨在利用ISSR和SCoT分子标记技术对蒙古黄芪的遗传多样性进行分析，为蒙古黄芪的种质资源保护和利用提供科学依据。
二、材料与方法1. 材料本研究所用材料为不同地区、不同种源的蒙古黄芪样品，共收集了XX个样地的XX个样品。
2. 方法（1）DNA提取采用CTAB法提取蒙古黄芪基因组DNA，并进行纯化和浓度检测。
（2）ISSR和SCoT扩增利用ISSR和SCoT引物对提取的DNA进行扩增，观察并记录扩增结果。
（3）数据分析对扩增结果进行统计和分析，计算遗传多样性指数、遗传相似性系数等指标，并绘制遗传聚类图。
三、结果与分析1. ISSR和SCoT扩增结果通过ISSR和SCoT扩增，得到了清晰、可重复的指纹图谱。
各样品间的多态性位点丰富，表明蒙古黄芪具有较高的遗传多样性。
2. 遗传多样性分析（1）遗传多样性指数根据扩增结果，计算了蒙古黄芪的遗传多样性指数。
结果显示，蒙古黄芪的遗传多样性较高，各样品间的遗传距离较大。
（2）遗传相似性系数通过计算遗传相似性系数，分析了各样品间的亲缘关系。
结果显示，不同地区、不同种源的蒙古黄芪样品间存在一定的遗传差异，但也有一定的遗传共性。
（3）遗传聚类图根据遗传相似性系数，绘制了遗传聚类图。
结果显示，蒙古黄芪的种质资源可以划分为几个不同的遗传群，反映了其种群结构和地理分布特点。
四、讨论本研究利用ISSR和SCoT分子标记技术对蒙古黄芪的遗传多样性进行了分析，得到了清晰、可靠的指纹图谱和遗传参数。
65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR 和 RAPD 标记分析
65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR 和 RAPD 标记分析考安都;王述贵;王艳芹;徐洲;周永红;丁春邦【摘要】利用 ISSR 和 RAPD 标记,对名邛台地野生油茶种质进行遗传多样性分析.从60条简单重复序列引物中筛选出16条引物,在65份样品中共扩增出213条带,其中多态位点为203个,多态位点百分率为95.31％；从30条寡居核苷酸引物中筛选出8条引物,共扩增出105条带,其中多态性位点94个,多态位点百分率为89．52％.结果表明：名邛台地野生油茶种质具有较丰富的遗传多样性,ISSR 和RAPD 标记可以应用于油茶种质遗传多样性分析.%The genetic diversity among 65 wild Camellia oleifera from Mingqiong platform were discussed.213 loci were identified with 16 simple sequence repeat primers screened from 60 primers,out of which 203 loci were poly-morphic and the percentage of polymorphic bands was 96.31%;105 loci were identified with 8 oligonucleotide primers screened from 30 primers,out of which 94 loci were polymorphic and the percentage of polymorphic bands was89.52%.The results showed that ISSR and RAPD markers could be used in genetic diversity analysis,C .oleifera had a high level of genetic diversity.【期刊名称】《广西植物》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】7页(P419-425)【关键词】油茶;遗传多样性;ISSR;RAPD;聚类分析【作者】考安都;王述贵;王艳芹;徐洲;周永红;丁春邦【作者单位】四川农业大学生命科学与理学院，四川雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院，四川雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院，四川雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院，四川雅安 625014;四川农业大学作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室，成都 611130;四川农业大学生命科学与理学院，四川雅安 625014【正文语种】中文【中图分类】Q949.93油茶(Camellia oleifera)属山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)常绿灌木或小乔木，是我国南方重要的木本油料树种，也是世界四大木本油料作物之一(庄瑞林，2008)。
武夷山及周边地区黄精植物ISSR分子标记鉴定及HPLC指纹图谱研究
取 PCR 扩增产物 25 μL，用 1%琼脂糖凝胶电泳。缓冲液是
1×TAE，进胶电压 120 V，电泳电压 85 V，电泳时间 2 h。取出凝胶， 在 Tannon GIS1000 凝胶电泳成像分析系统上分析[13]。
表 2 供试引物
Table 2 Test primer
2017,46(1): 25～29. Subtropical Plant Science
武夷山及周边地区黄精植物 ISSR 分子标记鉴定 及 HPLC 指纹图谱研究
杨 青 1，高华春 2，陈红丽 2，陈全成 2，徐鲜钧 1
(1.武夷山生物研究所，福建 武夷山 354300；2.厦门大学药学院，福建 厦门 361102)
1 2 345 M 12 34 5M 1 2 345 M
引物 1
引物 2
引物 3
1 2 345 M
1 2 3 4 5M
引物 4
引物 5
图 1 不同产地黄精的 ISSR 标记 Fig. 1 ISSR molecular markers of Polygonatum from different habitats
减压回收乙醇，得到棕色粘稠状乙醇提取物各约 300 mg。将乙醇提取物用水溶剂稀释后加载于 C18 反
相固相萃取柱中，用水洗至洗脱液无色，再用 80%乙腈溶液洗脱，浓缩后取干燥固体 5 mg，用色谱甲 醇配制成 5 mg·mL-1 溶液，0.2 μm 孔径滤膜过滤后备用。
色谱条件：Thermo DBS-HYPERSIL C18 色谱柱(250 mm ×4.6 mm, 5 μm), 以乙腈(A)和水(B)为流动
中国药典收载的黄精为百合科植物滇黄精 Polygonatum kingianum、黄精 P. sibiricum 或多花黄精 P. cyrtonema 的干燥根茎，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功效[1]。在我国民间，其他黄精植物如长 梗黄精 P. filipes、湖北黄精 P. zanlanscianense 等十几种也常被当作黄精使用[2]。黄精种质资源多样，依 靠形态特征的种质鉴别准确性不高，因此分子标记技术被应用于黄精属植物的亲缘关系研究[3—4]。
粉末鉴定法川乌
粉末鉴定法川乌
【原创版】
目录
1.粉末鉴定法简介
2.川乌的概述
3.粉末鉴定法在川乌鉴定中的应用
4.川乌粉末鉴定的具体方法
5.川乌粉末鉴定的注意事项
正文
【提纲】
1.粉末鉴定法简介
粉末鉴定法是一种通过观察和分析物质的粉末形态特征来鉴别其种类和质量的方法。
在药物鉴定领域，粉末鉴定法被广泛应用于中草药的真伪鉴别，以确保药物的质量和疗效。
2.川乌的概述
川乌，学名为 Aconitum carmichaeli Debx.，是毛茛科乌头属植物。
川乌的根茎呈圆锥形，表面棕褐色，有不规则的纵皱纹。
其主要成分为乌头碱、次乌头碱等生物碱类成分，具有祛风湿、温经止痛等功效，是中医药中的一种重要药材。
3.粉末鉴定法在川乌鉴定中的应用
由于川乌具有很高的药用价值，市场上常常出现假冒伪劣产品。
为了确保川乌的质量和真实性，采用粉末鉴定法进行检验是非常必要的。
通过观察川乌粉末的形态特征，可以有效地鉴别其真伪和品质。
4.川乌粉末鉴定的具体方法
川乌粉末的制备方法为取川乌根茎，研磨成粉末，过筛，取筛下粉末。
观察川乌粉末的形态特征，如颜色、粒度、形状等。
同时，可以采用显微镜观察其细胞结构和组织构造，以进一步确认其真实性。
5.川乌粉末鉴定的注意事项
在进行川乌粉末鉴定时，需要注意以下几点：首先，样品的制备要充分研磨，以保证粉末的细度；其次，观察时要仔细分辨粉末的形态特征，避免受到其他杂质的干扰；最后，对于疑似伪劣品，可以采用多种方法综合判断，以确保鉴定结果的准确性。
中药鉴定川乌教案
中药鉴定川乌教案教案标题：中药鉴定川乌教案教案目标：1. 了解川乌的基本信息，包括植物特征、药用部位、药材质量要求等。
2. 学习川乌的鉴别方法和质量评价标准。
3. 培养学生对中药鉴定的兴趣和能力。
教学准备：1. 川乌的实物标本或图片资料。
2. 川乌的鉴别图谱或鉴别方法资料。
3. 川乌的质量评价标准资料。
4. 鉴定工具，如显微镜、放大镜等。
教学过程：引入：1. 引导学生思考：你们对中药鉴定有了解吗？为什么中药鉴定很重要？2. 介绍本节课的主题：中药鉴定川乌。
知识讲解：1. 通过展示川乌的实物标本或图片，让学生了解川乌的植物特征，如外形、叶片形态等。
2. 介绍川乌的药用部位，如根茎、根状茎等，并解释其药用价值。
3. 分析川乌的药材质量要求，如外观、气味、含水量等。
鉴别方法：1. 展示川乌的鉴别图谱或鉴别方法资料，讲解川乌的鉴别方法，如外观鉴别、显微镜鉴别等。
2. 指导学生观察川乌实物标本或图片，通过比对鉴别图谱或方法，进行川乌的鉴别实践。
质量评价：1. 介绍川乌的质量评价标准，如含水量、挥发油含量等。
2. 引导学生思考，通过观察川乌的外观、气味等特征，判断其质量是否符合标准。
练习与讨论：1. 分发川乌的样本或图片给学生，让他们进行鉴别和质量评价。
2. 学生之间相互交流，讨论川乌的鉴别结果和质量评价，分享各自的观察和判断。
总结：1. 回顾本节课的内容，强调川乌的重要性和中药鉴定的意义。
2. 鼓励学生继续学习和探索中药鉴定的知识。
拓展活动：1. 鼓励学生自主选择其他中药材进行鉴定实践，并记录、汇报鉴定结果。
2. 组织学生参观中药材市场或中药鉴定实验室，了解实际应用和研究中药鉴定的情况。
教学评估：1. 课堂参与度：观察学生在课堂上的积极参与程度。
2. 鉴定结果：评估学生对川乌的鉴别和质量评价的准确性。
3. 拓展活动成果：评估学生在拓展活动中的表现和学习成果。
教学延伸：1. 继续深入研究其他中药材的鉴定方法和质量评价标准。
半夏变异类型的HPLC及ISSR指纹图谱分析的开题报告
半夏变异类型的HPLC及ISSR指纹图谱分析的开题报告一、研究背景及意义半夏是中药材中常用的一种，其根茎部分含有大量的有效成分，具有镇痛、止咳、止吐等功效，被广泛应用于中医临床和药理学研究中。
然而，由于半夏物种繁多且形态相似，部分植物学家误将具有半夏药用价值的物种与其近缘物种混淆，导致功效不佳或者产生不良反应。
因此，对半夏药材的鉴定和品质控制一直是中药学研究领域的热点问题。
随着分子生物学技术的不断发展，基于DNA分子标记的分析方法成为半夏鉴定和品质控制的重要手段之一，其中HPLC及ISSR分析技术已被广泛应用。
HPLC可以分离出半夏中的有效成分，并通过峰面积或峰高来评估半夏药材的品质和含量；ISSR则是一种核酸分子标记方法，可以对半夏不同品种和不同来源的遗传差异进行分析和比较，从而判定其真假和质量水平。
二、研究目的和内容本研究旨在利用HPLC及ISSR技术对半夏药材进行鉴定和品质评价，具体研究内容包括：1.优选半夏药材样品并进行HPLC分析；2.比较不同半夏药材样品的HPLC图谱，并评估其峰面积及峰高；3.选取部分具有代表性的半夏药材样品进行ISSR扩增并进行聚类分析；4.从ISSR指纹图谱中鉴别半夏药材样品，判断其真伪和品质水平。
三、研究方法和技术路线1.半夏药材样品的优选与HPLC分析选取一定数量的半夏药材样品，对其进行外观、气味等质量指标检测，并通过比对标准品进行HPLC分析及峰面积和峰高的计算。
2.ISSR扩增及指纹图谱分析选取一定数量的半夏药材样品，进行DNA提取、PCR扩增、电泳分离并制备ISSR指纹图谱。
然后，通过相似性分析、聚类分析和主成分分析等方法对ISSR指纹图谱进行分析和比较。
3.结果比对和真假鉴别将HPLC结果和ISSR结果进行比对和交叉验证，形成半夏药材的指纹图谱，并利用该指纹图谱进行半夏药材的真假鉴别和质量评价。
四、研究预期成果及创新点本研究将利用HPLC及ISSR技术对半夏药材进行鉴定和品质评价，预计可以获得以下成果:1.建立半夏药材的HPLC指纹图谱，评价其峰面积和峰高，并比对各半夏样品之间的变异情况；2.建立半夏药材的ISSR指纹图谱，比较不同半夏样品之间的遗传差异，聚类分析不同半夏药材样品的遗传关系；3.将HPLC结果和ISSR结果进行交叉验证，并建立半夏药材的指纹图谱，开发实用的品质评价和真假鉴别工具，为半夏药材的品质控制和鉴定提供科学依据。
粉末鉴定法川乌
粉末鉴定法川乌1. 简介粉末鉴定法是一种常用于药材鉴定的方法，通过对药材粉末的形态、组织结构、化学成分等进行观察和分析，可以确定药材的真伪和品质。
川乌，又称四川乌头，是一种常见的中药材，具有活血化瘀、祛风镇痛等功效。
本文将介绍粉末鉴定法在川乌鉴定中的应用。
2. 川乌的特征川乌是一种多年生草本植物，根茎呈圆柱形，表面黑褐色或暗紫褐色。
其主要特征包括：•根茎：粗壮、坚硬、有节，截面呈黄白色或暗黄色。
•叶片：大型叶片互生或对生，卵状心形至卵状披针形，边缘有不规则锯齿。
•花序：聚伞花序排列在长花梗上。
•花冠：紫红色或淡紫色。
•果实：蒴果，子房下位。
3. 粉末鉴定法的步骤3.1 样品制备首先，需要将川乌样品制成粉末。
一般可采用研钵研磨法将川乌样品研磨成细粉，然后通过筛网进行筛选，得到均匀的粉末样品。
3.2 形态特征观察取少量川乌粉末放在显微镜玻片上，加入一滴氯化铋溶液，并盖上盖片。
通过显微镜观察川乌粉末的形态特征，包括颗粒形状、颜色、大小等。
•颗粒形状：川乌粉末颗粒呈不规则碎片状或细长条形。
•颜色：川乌粉末呈暗褐色至黑褐色。
•大小：川乌粉末颗粒大小较为均匀，一般在10-100微米之间。
3.3 组织结构观察将剩余的川乌粉末放在显微镜玻片上，加入一滴碘酒溶液，并盖上盖片。
通过显微镜观察川乌粉末的组织结构，包括细胞形态、细胞壁、细胞质等。
•细胞形态：川乌粉末中可观察到多数为长方形或椭圆形的细胞。
•细胞壁：川乌粉末中的细胞壁较为厚实，呈现出明显的纹饰。
•细胞质：川乌粉末中的细胞质一般呈淡黄色或黄棕色。
3.4 化学成分检测将川乌粉末与一滴浓硫酸混合，在加热条件下进行观察。
通过化学反应来检测川乌粉末中的化学成分。
•硫酸反应：川乌粉末与浓硫酸混合后，在加热条件下，会出现紫黑色至棕黑色的反应产物。
4. 结论通过粉末鉴定法对川乌进行观察和分析，可以得出以下结论：•形态特征：川乌粉末颗粒呈不规则碎片状或细长条形，颜色为暗褐色至黑褐色，大小较为均匀。
中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展
中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展
程丽丽;许妍妍;张艳军
【期刊名称】《天津中医药大学学报》
【年(卷),期】2014(33)1
【摘要】川乌为毛莨科植物乌头（Aconitum carmichaelii Debx．）的干燥母根，有大毒，具有祛风除湿、温经止痛之功效，常用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛等疾病的治疗[1]。
川乌化学成分复杂，主要含有生物碱类成分，其中，二萜生物
碱是川乌的特征有效成分，具有抗炎、镇痛、镇静、心血管及中枢神经等方面的作用[2-7]。
近年来，对二萜生物碱的国内外研究报道较多，现主要从多种二萜生物
碱成分的同时检测、药动学研究进展等方面对其作一综述。
【总页数】5页(P56-60)
【关键词】川乌;多成分;质量控制;药动学
【作者】程丽丽;许妍妍;张艳军
【作者单位】天津中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法研究 [J], 朱佳军
2.基于药动学研究中药多成分相互作用概述 [J], 李庆;戴岳
3.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法 [J], 蒲显强
4.中药复方多成分多靶点协同增效药理药效评价体系 [J], 王勇;李春;仇琪;郭淑贞;韩静;吴晏;柴欣楼;赵慧辉;陈建新;王伟;
5.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法研究 [J], 朱佳军;
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・１５５６・中草菊ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨ；ｒｂａＩＤｒｕｇｓ第３７卷第１０期２００６年１０月
ｎ卅ｔ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ）（Ｈ＝∑Ｅｌ／∑ｑｉｊ］／ｎ）、Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数
ｌ＝１Ｊ＝１
（Ｓｈａｎｎｏｎｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ）（Ｊ２莩手训ｆ＝
表１ＩＳＳＲ引物及其碱基序列和多态性分析
ＴａｂｌｅｌＩＳＳＲＰｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅｓａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆＩＳＳＲ－ｇｅｎｅｒａｔｅｄｂａｎｄｉｎｇｐａｔｔｅｒｎｓ
，、摩∑ｚ；・；Ｅｙ；）；根据Ｎｅｉ７ｓ距离（ＧＤ）；用ＵＰＧ一引物碱基序列（５’～３’’ｖｔＩ＾ｉ
ＭＡ法进行系统聚类分析，构建分子进化系统树。
２结果与分析
２．１扩增产物的多态性：从６３条ＩＳＳＲ引物筛选
出８条ＩＳＳＲ引物用于ＰＣＲ扩增，扩增条带的相对
分子质量从２００１０００ｂｐ不等（图１）。
共扩增出
９８条带，其中具有多态性的条带数为６８条，多态性
位点百分率为６９．３９％（表１），并由ＰＯＰＧＥＮ３２软
件分析得出：观测等位基因数（Ｎａ）为１．６９３９，有效
等位其因数（ⅣＰ）为１．３７１５，Ｎｅｉ７Ｓ基因多样性指数
（Ｈ）为０．２３０８，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｊｒ）为０．３５３０。
图１引物８５５对１０个川乌居群的扩增特征图谱
Ｆｉｇ．１ＩＳＳＲＰｒｏｆｉｌｅｏｆｔｅｎＡ．ｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
ｇｅｎｅｒａｔｅｄｂｙＰｒｉｍｅｒ８５５扩增带多态性条多态性位数／条带／条点数／％
Ｒ一（Ａ，６）；Ｙ＝（Ｃ，１）
根据实验结果获得了１０个ＪｉＩ乌居群的遗传一
致度和遗传距离（表２）。
青川大坝和青ｊｉＩ陈家坝川Ｉ
乌居群间遗传一致度最大（Ｏ．９５９）；江油附子和都江
堰川乌居群问的遗传一致度次之（Ｏ．９０８），青川大坝
和峨眉太子坪、峨眉中锋寺、九龙县川乌居群问的遗
传一致度最小，均为０．６３３，平均遗传一致度为
０．７４４，平均遗传距离为０．３０２。
２．２ＩＳＳＲ特征图谱的建立：利用筛选得到的８条
ＩＳＳＲ引物分别对供试材料进行ＰＣＲ扩增，建立了
相应的ＤＮＡ指纹图谱，其中从８５５引物能够区分
川Ｉ乌的１０个供试居群（图１），该引物扩增的１０个
ＪｉＩ乌居群ＤＮＡ电泳图谱为鉴定品种的真实性及品
种间的差异提供了科学依据。
２．３川乌的ＩＳＳＲ聚类分析：为了进一步表明１０
个供试居群间的遗传关系，利用Ｎｅｉ７Ｓ遗传距离采用表２１０个川乌居群的一致度和遗传距离
Ｔａｂｌｅ２Ｎｅｉ’ＳＧｅｎｅｔｉｃｉｄｅｎｔｉｔｙａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅｆｏｒｔｅｎＡ．ｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
非加权算术平均法（ＵＰＧＭＡ）进行聚类（图２），所有居群明显划分为３组。
第１组含有６个居群，包括江油附子、都江堰、青川林场、平武、九龙县及瓦屋山等地的居群；第二组包括峨眉山太子坪和峨眉山中锋寺的居群；第三组包括青川大坝居群和青川陈家坝居群。
３讨论
３．１川乌居群的遗传多样性：从１０个居群的遗传一致度及聚类结果表明，川乌居群间遗传一致度从０．６３３～０．９０８，遗传一致度较高，与形态学分类结果一致，表明原产四川Ｉ的药材川乌在原位、迁移地或栽
培地不同生态型的分化较少。
．。