水稻种子的纯度鉴定
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题目:水稻种子纯度鉴定
指导教师:刘开庆、郭丽红
学院:昆明学院
专业班级:生科系07生科班
学号:S007084111
姓名:田洁
日期:2009年7月1日
[摘要]植物的生长发育,除需要充足的阳光和水分外,还需要矿质营养,否则植物就不能很好的生长发育甚至死亡。应用溶液培养技术,可以观察矿质元素对植物生活的必需性;用溶液培养做植物的营养实验,可以避免土壤里的各种复杂因素。
[关键词]微量元素;矿质元素;植物
引言
种子纯度是评定种子等级的主要依据,是种子检验工作的重点项目。近年来,电泳技术在种子纯度鉴定上开始应用。
用该项技术鉴定简便,快捷,准确且成本低。本实验正是运用酯酶同工酶技术进行鉴定。
正文
一.实验原理
同工酶是指植物体内肽链结构不同,分子大小不同,但活化部位相同,催化同一生化反应的酶谱带是指同一种酶的各种同工酶。在一定的电场作用下发生泳动,通过一定的化学染色而出现的图像。一个品种的遗传基础是一定的,其同工酶谱带应具有一定的特征。本实验的基本原理是不同的酯酶同工酶由于其分子量不同,分子结构不同和其所带的电荷数不同,在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下,呈现不同的泳动速度而相互分离,再根据酯酶同工酶催化反应和相同的特点,使用相同的特点,使用同一显色方法,获得供试样用品谱带,以供分析鉴别。
一.器材与试剂
1.试验仪器电泳仪,双垂直电泳槽及配套的平板玻璃,文具铁夹,冰箱,离心机,研钵,离心管,微量进样器,实验室常用器皿。
2.实验材料水稻种子
3实验试剂20%SDS ,30%Acr-Bis ,10%APS ,1.5mol/L Tris-HCl(ph=8.8) ,0.5mol/L Tris-HCl(ph=6.8 ,5*电极缓冲液,脱色液(200ml)*2 ,染色液(20 0ml),分离胶,浓缩胶分析天平,
三.实验步骤
1.样品提取
2.胶室的制作和凝胶的配制
3. 加样与电泳
4. 染色
四.实验结果
电泳谱带
五.讨论
通过这个实验可以对水稻种子的纯度进行鉴定,利用电泳实验,方便而准确。我组在实验中遇到很多困难,比如凝胶不能凝,浓缩胶凝地太快,在老师的帮助和同学的协助下都顺利地解决了,在脱色时,由于震荡过猛,电泳谱带断成三段,最后经过大家的努力拼接了起来。
5.致谢词
本次实验能成功,首先感谢我的指导老师:刘开庆和郭丽红,是他们给予我精心的指导和帮助,其次,还有我们组的成员:戴利利、赵本久、吴小磊、马卫琼,董丽娜,是他们的积极合作才得以使实验圆满成功。在此表示衷心的感谢!
参考文献:
Meider H . Class experiments in plant physiology . London: George Allen and Unwin Ltd., 1984.72-74
(华东师范大学张志良) Plant Physiology sixth edition (植物生理学第六版)
(高等教育出版社潘瑞炽)