氧氟沙星在乌骨鸡体内残留消除规律研究
DB13T1006-2009鸡肉中四种氟喹诺酮类药物残留
（１）
Ｃ＝望二生塑立丝Ｘ１０００ ＡＳ ｘ ｍ
式 中：
ｃ— 样品中氧氛沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星残留量，Ｗｇ／ｇ； Ａ — 样品溶 液中氧氟沙星 、诺氟沙星 、环 丙沙 星、恩诺沙星的峰面积 Ａｏ一一一空白实验被测物的色谱 峰面积或 峰高
Ａｓ — 标准工作溶翔液中氧氟沙 星、诺氟沙星、环丙 沙星 、恩诺沙星的峰面积 Ｃｓ
６ 色谱条件
６．１ 色谱柱：ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ－ＡＱ ４．６Ｘ２５０ ｍｍ， ５ ５ｍ或相当者。 ６．２ 流动相：０．０１ ｍｏｌ／Ｌ四Ｔ基澳化钱 （ｐＨ＝３．０）＋乙睛＝（９７．５＋２．５， ＶＮ）ｏ ６．３ 流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎｏ ６．４ 检测波长：激发波长２８０ ｎｍ，发射波长４５０ ｒａｎ， ６．５ 柱温：４０ｃＣ ６．６ 进样量：２０ ｐＬｏ
Ｄ Ｂ １ ３／ Ｔ １ ００ ６ － ２０ ０ ９
８．３ 空白试验与空白添加回收试验 每个试验批次的样品中至少必须 同 时 做 空白样品和空白添加样品 （实际加人值为已知）。空白鸡肉
添加样品的实际加人值水平可选在等于最大残留限量１０ ｇｇ／ｋｇ，或方法检测限２ ｐ ｇ／ｋｇ或略高的实际加 人值水平上操作 ；空 白样品和空 白添加样品的测定按步骤７操作。本试验用于计算试验的回收率Ｒｃ，试 验的回收率用于对阳性的残留结果进行残留量的校正。回收率Ｒ滋 公式 （１）计算。
７ 样 品 处理
７．１ 样品制备 取待检胸 肉 （或 腿 肉）样品，弃去筋 、皮 、骨和脂肪 ，切成小块后 ，用搅 肉机搅碎 。
７．２ 提 取
准确称 取 绞 碎 鸡肉样品５ｇ（精确至０．０１ ｇ）于５０ ｍＬ塑料离心管，加人１０ ｇ无水硫酸钠，加２５ ｍＬ 乙睛，用高速组织均质器于１５ ０００ ｒｐｍ高速均质０．８ ｍｉｎ＇ｖ １．５ ｍｉｎ后 ，３ ５００ ｒｐｍ离心１０ ｍｉｎ，移取上清 液转移到另一个５０ ｍＬ塑料离心管中，残渣用１５ ｍＬ乙睛重复提取一次 ，合并上清液。
优化高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留情况-食品安全论文-社会学论文
优化高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留情况-食品安全论文-社会学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——诺氟沙星(NOＲ)、恩诺沙星(ENＲ)、环丙沙星(CIP)、达氟沙星(DAN)和沙拉沙星(SAＲ)为常见的氟喹诺酮类抗菌剂，目前在畜禽生产中被广泛应用．此类药物使用不当导致的药物残留可能直接危害人体健康，也可能使致病菌产生耐药性，间接对人类健康造成影响．多个国家和地区均规定了氟喹诺酮类药物的最高残留限量．检测动物源食品中氟喹诺酮类药物残留的方法有微生物法、酶联免疫法(ELISA)、毛细管区带电泳法、电解分析法、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱－质谱联用法(HPLC-MS)等．目前，在鸡肉产品的检测中，常采用的方法是《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测－高效液相色谱法》(农业部1025 号公告14-2008)．本试验以此标准为基础，简化了试验前处理方法，优化了检测过程．经试验验证，该法非常适合大批量处理样品，大量节省了处理时间和所需耗材，较大幅度降低成本，方法的灵敏度和回收率均可满足我国现行兽药残留检测分析的要求．1 材料与方法1．1 药品和试剂恩诺沙星对照品、环丙沙星对照品、诺氟沙星对照品、达氟沙星对照品、沙拉沙星对照品，均为中国兽医药品监察所产品，磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺、氢氧化钠溶液(分析纯，广州试剂厂)，乙腈(色谱纯，Fisher 公司)．1．2 仪器和设备Agilent 高效液相色谱仪( 美国Agilent 公司) 配荧光检测器，高速匀质机及振荡器(德国IKA 公司)，高速台式冷冻离心机(美国Thermo 公司)．1．3 试液配制分别称取恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星对照品各10 mg，置于同一个10 mL 容量瓶中，用0.05 molL－1的氢氧化钠溶液溶解定容至刻度，制得质量浓度均为1 mgmL－1的混合储备溶液．准确称取达氟沙星对照品10 mg，0. 05 molL－1的氢氧化钠溶液溶解定容至10 mL，使其质量浓度为1 mgmL－1．准确称取沙拉沙星对照品10 mg，0. 05 molL－1的氢氧化钠溶液溶解定容至10 mL，使其质量浓度为1 mgmL－1．置2 ～8 ℃冰箱中保存备用，有效期1 个月．取上述恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星的混和储备液100 L，达氟沙星储备液20 L，沙拉沙星储备液200 L，置于同一个100 mL 容量瓶中，用流动相定容至刻度，配置成恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的质量浓度为1 gmL－1，达氟沙星质量浓度为0. 2 gmL－1，沙拉沙星质量浓度为2gmL－1的混合标准溶液．提取液:称取 2 g 三氯乙酸于容量瓶中，加水至100 mL，制得的三氯乙酸溶液与乙腈按体积比3 ℃ 1的比例混合，搅拌均匀，得到提取液．磷酸/三乙胺溶液:取磷酸3. 4 mL，用水稀释至1 000 mL，配成0. 02 molL－1的磷酸溶液，用三乙胺调pH 至2. 4．临用配制(易产生沉淀)．1．4 测定方法1．4．1 供试材料的制备将市售的鸡肉样品用高速匀浆机绞碎得到供试试料，将空白鸡肉样品绞碎得到空白试料，在空白试料中添加适宜浓度的标准溶液作为空白添加试料．1．4．2 提取与净化称取1 g 试料，置于匀浆杯中，加提取液4 mL，高速匀浆1 min．匀浆液转入15 mL聚丙烯离心管中，振荡30 min，16 000 r/min，离心8min，取上清液过0. 2 m 滤膜，装入进样瓶，待测．1．4． 3 色谱条件色谱柱:Agilent TC-C18250 mm 4. 6 mm(i．d)，粒径5m．流动相:V(0. 02 mol L－1磷酸/三乙胺溶液) ℃ V (乙腈) = 80 ℃ 20．流速:1mLmin－1．检测波长:激发波长280 nm ;发射波长450 nm．进样量:20 L．1．5 线性范围与检出限空白样品中加入混合标准液配制成的诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星系列标准溶液．高效液相色谱仪检测后，以峰面积为纵坐标，药物质量浓度为横坐标，进行线性回归分析．在空白样品中添加不同质量浓度混合标准溶液，按1. 4的方法进行处理，检测后取信噪比S/N = 3 对应的样品浓度为方法检出限(LOD)，信噪比S/N =10 对应的样品浓度为方法定量限(LOQ)．1．6 回收率和精密度向空白待测样品中分别添加3 个浓度水平的混合标准液，按1. 4的方法进行处理，每个浓度重复5 次，连续做3 个批次，计算回收率和变异系数．2 结果与分析2．1 色谱分析在试验选定的条件下，测得诺氟沙星的保留时间为6. 67 min，环丙沙星为7. 19 min，达氟沙星为8. 18 min，恩诺沙星为9. 07 min，沙拉沙星为12. 93min，峰形尖锐，分离完全，空白组织样品在上述保留时间无干扰峰出现(图1)．2．2 方法的检出限及标准曲线空白鸡肉样品中添加不同质量浓度的标准工作溶液，诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的残留定量限为10 g kg－1，达氟沙星的残留定量限为2gkg－1，沙拉沙星的残留定量限为20gkg－1．诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的线性范围为10 ～100 gkg －1，达氟沙星为 2 ～20gkg－1，沙拉沙星为20 ～200 gkg－1．对质量浓度不同的混合标准使用液进行色谱分析，工作曲线的线性范围、回归方程、相关系数见表1．可见，本方法灵敏度高、线性范围较宽，有一定的实用价值．【表1】2．3 方法的回收率与精密度对鸡肉样品分别进行4 个浓度的添加试验，测得的回收率为84.71% ～99.66%，批内变异系数为0．20% ～4. 42% ，批间变异系数为0. 33% ～2. 68% (表2)．2．4 抽样检测从市场上购买30 个鸡肉样品，每份样品2 个重复，按本方法进行制样和检测，结果发现一例鸡肉样品中诺氟沙星残留量为43.5 gkg－1，平行样品中诺氟沙星的质量浓度为41. 4 gkg－1，其余样品均未检出氟喹诺酮药物的残留．表明该方法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留量的重现性非常好，相对偏差保持在3%之内，数据可靠．3 讨论与结论3．1 样品前处理方法的优化动物源食品中基质干扰复杂，富含脂肪和蛋白质，选择并优化样品的前处理方法对结果的准确性尤为重要．本试验在农业部1025 号公告-14-2008 所采用方法的基础上，对样品的前处理过程进行了一定的优化．该标准检测方法采用磷酸盐缓冲液提取完后，离心取上清液，过固相萃取柱，从而除去样品中的杂质．本试验的提取液由乙腈与质量分数为2% 的三氯乙酸按体积比1℃ 3 混合而配得，蛋白质在酸性条件下变性，离心出沉淀除掉杂质，而提取液中加入乙腈也与流动相中乙腈比例吻合，出峰较好．比较其他相关研究，仲锋在鸡组织中检测氟喹诺酮类药物残留量的回收率为70% ～107%，变异系数小于10%;陈红等在鸡排泄物中检测氟喹诺酮类药物的回收率为75% 以上，批内变异系数在2. 2% ～10% 之间，批间变异系数在 6. 2% ～13. 0%之间;而本试验测得的回收率为84. 71% ～99. 66%，批内变异系数为0. 20% ～4. 42%，批间变异系数为0. 33% ～2. 68% ．相较而言，本试验的回收率有了明显稳定的提高，精密度和准确度也相应改善了，定量限能满足日常采集样品的检测范围，而且检测的效率增加，节省了柱子的成本，减少了处理的时间，非常适用于样本量较大时的残留检测．3．2 检测方法的稳定性将新鲜配制的混合标准工作液50 gkg－1于4℃ 冰箱中避光保存1、3、5、7 d 后上机检测，结果表明，被测药物保留时间基本不变，但浓度明显降低，可见标液在保存过程中不稳定，因此在测定过程中应该做到现用现配，处理完后的样品也应及时上机．3．3 结论本试验在农业部1025 号公告-14-2008 所采用方法的基础上，对样品的前处理过程进行了优化，使样品处理快捷便利，灵敏度高，重现性好，明显降低批量样品的检测成本，可有效应用于鸡肉食品品质的日常监控．参考文献:［1］李俊锁，邱月明，王超．兽药残留分析［M］．上海:上海科学技术出版社，2002: 365-390．［2］WINTEＲＲW，KELLY J X，SMILKSTEIN M J．Antima-larial quinolones: Synthesis，potency，and mechanisticstudies［J］．Exp Parasitol，2008，118(4) :487-497．［3］朱蓓蕾．动物性食品药物残留［M ］．上海: 上海科学技术出版社，1994: 115．。
鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进
鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进崔惠娟【摘要】对《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》进行改进,经试验验证,洗脱液改用含30％乙腈的流动相时,能提高方法的回收率.添加10μg/kg、100 μg/kg、200 μg/kg浓度水平时,测得的回收率为77.6％～95.2％,精密度＜10％,该方法检测环丙沙星的线性范围是5 ～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.7 μg/kg;达氟沙星的线性范围是1～40 μg/kg,检出限是0.11 μg/kg、定量限是3.4 μg/kg;恩诺沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.6 μg/kg;沙拉沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是16.7μg/kg.说明改进后的方法能够满足鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的检测.【期刊名称】《云南畜牧兽医》【年(卷),期】2017(000)002【总页数】3页(P17-19)【关键词】鸡肉;高效液相色谱法;氟喹诺酮类药物【作者】崔惠娟【作者单位】红河州动物疫病预防控制中心,云南蒙自 661199【正文语种】中文【中图分类】S859.84禽业科技氟喹诺酮类属化学合成抗菌药，因其抗菌谱广、抗菌活性高、毒副作用小、组织分布广等特点被广泛用于畜禽和水生动物疾病的防治[1]。
临床上常用的氟喹诺酮类药物主要有环丙沙星、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星等。
随着氟喹诺酮类药物的广泛应用，各类细菌对其产生的耐药率已达到60%～70%[2]。
目前，氟喹诺酮类药物的滥用及残留问题已经引起人们的广泛关注。
在动物性食品中，氟喹诺酮类药物残留检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)等[3]。
目前，用HPLC法检测鸡肉产品中的氟喹诺酮类药物残留，主要用到的国家标准方法是《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》(农业部1025号公告-14-2008)[4]。
实验九 荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留
实验九 荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留一、实验背景：诺氟沙星（Norfloxacin, NFLX ）又名氟哌酸，为第三代喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌活性强，毒副作用低和临床疗效高的特点，是临床应用最广泛的喹诺酮类药物之一。
诺氟沙星系化学合成药物，合成容易，价格低廉，故也是动物和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，然而由于滥用现象严重，导致药物残留，给食品安全带来严重的威胁。
该类药物的残留除其本身的毒副作用对人体造成直接危害外，更为严重的是人类长期食用含较低浓度药物的动物源性食品，容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而影响该类药物的临床疗效。
二、实验目的：使用荧光分析法方法简单、快速、灵敏、准确地测定肉类食品中诺氟沙星含量。
学习荧光分光光度计的使用方法和分析手段。
三、实验原理：Al 3+与诺氟沙星配位增强荧光强度，下图是诺氟沙星的分子结构式。
NO OH O FN HN图1 诺氟沙星的分子结构式四、实验药品和仪器1. 诺氟沙星（中国药品生物制品检定所，99.2%），标准溶液质量浓度为100 g/mL ，Al 3+标准溶液是用Al(NO 3)3（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）配成浓度为0.1 mol/L ，实验所需的各种肉类食品为市场上随意购买，其他所用试剂均为分析纯，水为去离子水。
2. Fluoromax-4荧光分光光度计（法国JY 公司）；超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；万分之一电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；离心机（上海手术器械厂），pHS-3C 酸度计（上海精密科学仪器公司）。
五、实验步骤1. 样品前处理方法取2g 经绞碎的各种肉类食品，每次加入10 mL pH = 4的盐酸溶液超声提取三次，每次10 min ，各离心10 min （3000r/min ），合并三次上清液，加入1mL 的Al 3+标准溶液，定容至50 mL ，待测．2. 测定方法于5 mL 的具塞刻度试管中配制NFLX-Al 3+的最佳体系溶液，使体系溶液中C Al3+ = 2.0mmol/L、pH=4，静置5 min，取试液置于1 cm×1 cm石英液池中，设置激发和发射单色仪狭缝宽度均为5 nm，利用荧光分析法测定。
恩诺沙星可溶性粉在白羽乌骨鸡组织中残留消除规律研究
只（空白对照组），采集胸部肌肉、鸡全肝、鸡全肾、
鸡皮脂，做好标记，于-20 ℃保存。
2 结果与分析
2.1 组织中药物残留及消除规律
不同时间点各组织中恩诺沙星和环丙沙星残留量见
表1，停药后恩诺沙星可溶性粉在皮脂和肌肉中残留浓
度较高，且消除缓慢，停药106 d后皮脂和肌肉中恩诺沙
星残留量降低至最大残留限量以下。
期分别是102.48、0、41.93、116.38 d。为保证消费者健康和食品安全，推荐恩诺沙星可溶性粉在乌骨鸡体内的休药期应大
于117 d。
关键词：恩诺沙星；乌骨鸡；残留；休药期
中图分类号：S831
文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2021.05.003
组别 猫
表5 犬组治疗中改善及预后情况
编号
呕吐0
开始 进食
腹泻 ≤1
正常 采食
预A2 第2天 第2天 第4天 第6天 康复
190172526，批号20181226，购于广东温氏大华农生物
科技有限公司。环丙沙星对照品：纯度91.2%，批号
G133594，购于德国Dr.E公司；恩诺沙星对照品：纯度
99.7%，购于Bepure公司；恩诺沙星-d5对照品：纯度
99.0%，批号160414，购于北京曼哈格生物科技有限公
司。甲醇、甲酸为色谱纯；柠檬水、磷酸氢二钠、氢氧
与文献报道的25～28 d差异明显。考虑主要是由于试验
对象品种差异导致恩诺沙星（或氧氟沙星）休药期结果
差异较大。
3.3 黑色素
与其他品种肉鸡相比，乌骨鸡的独特特征是在肌
肉、骨膜、气管、肠系膜、消化道、卵巢和睾丸等多 个器官中存在不同程度的黑色素[12]，有研究表明骨膜中
新疆地区鸡肉中兽药残留检测及风险分析
新疆地区鸡肉中兽药残留检测及风险分析作者：张飞郭慧静常恒瑞李红敏来源：《安徽农业科学》2022年第15期摘要针对新疆不同地区、不同品种、不同养殖方式的鸡肉进行现场取样，通过检测122个样品中17种兽药残留情况，评估新疆地区鸡肉市场产品的质量安全及相关风险分析和监测。
结果发现，恩诺沙星在鸡肉样品中检出数量最多（21个）、乌鸡中检出的残留量最高（180.00 μg/kg）;环丙沙星在3个乌鸡样品中检出，最高残留量为73.00 μg/kg;氧氟沙星在1个乌鸡样品中检出，残留量为8.60 μg/kg;金刚烷胺在3个乌鸡样品中检出，最高残留量为63.0 μg/kg;氟苯尼考在2个三黄鸡样品中检出，最高残留量为10.9 μg/kg;诺氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、沙拉沙星、氯霉素、甲砜霉素、氯羟吡啶、呋喃唑酮代谢物、呋喃妥因代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃它酮代谢物等均未在样品中检出。
A地区兽药检出样品量1个，B地区兽药检出样品量12个，C地区兽药检出样品量5个，D地区兽药检出样品量6个。
通过科学采样和检测，分析了新疆地区市售鸡肉中兽药残留并进行食品安全风险评估，提出相应的食品风险管理措施，为鸡肉健康安全生产提供相关建议和参考。
关键词鸡肉;兽药残留;风险分析;新疆中图分类号S859.84文献标识码A文章编号0517-6611（2022）15-0180-03doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.15.046开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Detection and Risk Analysis of Veterinary Drug Residues in Chicken in XinjiangZHANG Fei1， GUO Hui-jing2， CHANG Heng-rui1 et al（1.Quality Inspection Center of Xinjiang Academy of Agricultural Reclamation Sciences，Shihezi， Xinjiang 832000; 2. Institute of Agricultural Products Processing， Xinjiang Academy of Agricultural Reclamation Sciences， Shihezi， Xinjiang 832000）AbstractSpot sampling was carried out for chicken in different regions， varieties and breeding methods in Xinjiang. By detecting the residues of 17 veterinary drugs in 122 samples， the quality，safety and related risks of chicken market products in Xinjiang were evaluated， analyzed and monitored. The results showed that the number of enrofloxacin detected in chicken samples was the highest （21）， and the residue detected in black chicken was the highest （180.00 μg/kg）; Ciprofloxacin was detected in three black chicken samples，and the highest residue was 73.00 μg/kg; Ofloxacin was detected in one black chicken sample，and the residue was 8.60 μg/kg; Amantadi ne was detected in three black chicken samples，and the highest residue was 63.0 μg/kg; Florfenicol was detected in two Sanhuang chicken samples， and the highest residue was 10.9μg/kg.Norfloxacin， pefloxacin， lomefloxacin， darfloxacin， sarafloxacin， chloramphenicol，thiamphenicol， chloropyridine， furazolidone metabolites， furantoin metabolites， furacilinmetabolites， furanone metabolites， etc. were not detected in the samples. There were one veterinary drug sample in the A region， twelve veterinaries drug samples in the B region， five veterinaries drug samples in the C region and six veterinaries drug samples in the D region. Through scientific sampling and detection， the veterinary drug residues in chicken sold in Xinjiang were analyzed， the food safety risk was evaluated， and the corresponding food risk management measures were put forward to provide relevant suggestions and references for the health and safety production of chicken.Key wordsChicken;Veterinary drug residues;Risk analysis;Xinjiang新疆维吾尔自治区位于我国西北边陲，是我国5个少数民族自治区之一，也是我国陆地面积最大的省级行政区。
QuEChERS结合高效液相色谱法快速检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留
9月出版氟喹诺酮类药是一类化学合成抗菌药，对于多种革兰阴性菌具有明显的杀菌效果。
氟喹诺酮类药物是喹诺酮药物发展到第3代的产物，对组织细胞的穿透力加强，因而吸收好，抗菌谱和杀菌效果强，作用范围广，在畜禽养殖业中应用广泛。
氟喹诺酮类药主要包括恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星，恩诺沙星在动物体内代谢生成环丙沙星，在家禽体内残留形式以环丙沙星为主。
随着氟喹诺酮类药物的广泛使用，细菌耐药和不良反应也相继发生。
通过有效的分析技术，对动物性食品中的氟喹诺酮类药物残留进行检测，对于指导养殖业正确用药，确保动物性食品安全具有十分重要的意义。
药物残留的检测技术日益先进，常用的有高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS ）、液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法及免疫法等。
HPLC-MS 具有较高的灵敏度，但是由于仪器本身QuEChERS 结合高效液相色谱法快速检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留*Rapid detection of fluoroquinolone residues in chicken by QuEChERScombined with HIGH performance liquid chromatography *马春华**陈文文邢越（武夷学院茶与食品学院，福建武夷山354300）MA Chunhua **CHEN Wenwen XING Yue（Tea and food college,Wuyi university ，Fujian Wuyishan354300，China ）摘要建立了QuEChERS-高效液相色谱法测定鸡肉中3种氟喹诺酮类药物残留的检测方法。
鸡肉样品经酸化乙腈提取后，用无水MgSO 4、NaCl 干燥，用PSA 与C 18净化，将处理液用氮吹仪吹干，用初始流动相比例的溶剂复溶，用高效液相色谱进行检测。
试验结果表明，依诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星在1.0μg/kg~100μg/kg 浓度范围内线性关系良好，相关系数R 2>0.99，平均回收率在83.4%~112.0%之间，相对标准偏差（RSD ）为3.2%~6.7%。
鸡肉中氟喹诺酮残留液相色谱方法
鸡肉中氟喹诺酮残留液相色谱方法咱今儿个就来说说这鸡肉中氟喹诺酮残留液相色谱方法。
嘿，你可别小瞧了这玩意儿，这可是关系到咱吃进嘴里的鸡肉安不安全的大事情呢！你想想啊，咱平常吃鸡肉，要是那鸡肉里有一堆氟喹诺酮残留，那能放心吃吗？肯定不行啊！这氟喹诺酮残留要是超标了，那对咱身体的影响可不小呢！所以啊，就得靠这液相色谱方法来给鸡肉做做“体检”。
这液相色谱方法啊，就好像是一个超级侦探，能把鸡肉里那些隐藏的氟喹诺酮残留都给找出来。
它能把鸡肉里的各种成分分得清清楚楚，然后准确地检测出氟喹诺酮残留的量。
这就好比是在一堆沙子里找出特定的那几颗小石子，可不是个简单的事儿呢！要做这个检测啊，得先准备好各种仪器和试剂，就像战士上战场得带好自己的武器一样。
然后呢，把鸡肉样品处理好，让它乖乖地“配合”检测。
这过程可得仔细了，不能有一点儿马虎，不然检测结果可就不准确啦！那不是白忙活一场嘛。
检测的时候呢，就看着那些成分在仪器里跑来跑去，就像是一群小精灵在跳舞。
然后啊，咱就能从那些数据和图谱里看出有没有氟喹诺酮残留，有多少残留。
这多神奇啊！你说，要是没有这么个方法，咱怎么能知道吃的鸡肉是不是安全的呢？那不是跟蒙着眼睛走路一样嘛，心里多没底啊！有了它，咱就像是有了一双火眼金睛，能把鸡肉看得透透的。
咱老百姓过日子，不就图个吃得放心、过得安心嘛。
这鸡肉中氟喹诺酮残留液相色谱方法，就是咱的食品安全卫士啊！它能帮咱把好关，让那些有问题的鸡肉无处遁形。
所以啊，可别小看了这个液相色谱方法，它虽然听起来有点专业，有点复杂，但它可是在默默地守护着咱的健康呢！咱得感谢那些研究出这个方法的科学家们，是他们让咱的生活更有保障。
以后咱再买鸡肉的时候，就可以放心大胆地挑啦，因为有这个方法在背后给咱“撑腰”呢！咱就可以尽情享受美味的鸡肉，不用担心有啥问题啦！你说这是不是很棒呢？。
浅析乌鸡中氟喹诺酮类药物残留现状
44宁夏农林科技，Ningxia Journal of Agri. and Fores. Sci.&Tech. 2020，61(11 ):44-46浅析乌鸡中氟喹诺酮类药物残留现状李永琴\任杨2,陈娟\卜宁霞\马春芳11.宁夏回族自治区兽药饲料监察所，宁夏银川750011;2.宁夏永宁县畜牧水产技术推广服务中心，宁夏永宁750100摘要：为探究乌鸡中氟喹诺酮类药物残留现状，本研究采集宁夏地区农贸市场乌鸡产品42份，利用超高效液相色谱-串联质谱法对氟喹诺酮类药物残留情况进行监测。
结果显示，乌鸡产品中氟喹诺酮类残留检出率为40.5%，9.5%的乌鸡产品中氟喹诺酮类残留超过国家标准规定M R L值及定量限。
本研究通过对乌鸡中氟喹诺酮类药物残留量的监测，为国家修订乌鸡中药物残留限量提供有效技术数据；同时为了降低氟喹诺酮类药物残留对乌鸡质量安全的影响，从源头保障食品安全，建议修订乌鸡养殖过程中氟喹诺酮类药物使用剂量及休药期规定。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱；乌鸡；氟喹诺酮类；药物残留中图分类号：859.84 文献标识码:A文章编号：1002-204X(2020)11-0044-03doi:10.3969/j.issn.1002-204x.2020.11.014开放科学（资源服务)标识码(OSID):Status Quo of Fluoroquinolone Residuesin Black-bone ChickenLi Yongqin1, Ren Yang2, Chen Juan1, Bu Ningxia1, Ma Chunfang1(l.Ningixia Veterinary Drugs and Fodder Inspection Institute,Yinchuan,Ningxia 750011; 2.Service Center for IntroducingAnimal Husbandry and Aquatic Technology,Yongning,Ningxia 750100)Abstract In order to study the status quo of fluoroquinolone(FQ)residues in black-bone chicken, 42 black-bone chicken products were selected from farmer's markets in Ningxia.The ultra-high performance liquid chromatography (UPLC)-tandem mass spectrometry(MS/MS)was used to monitor fluoroquinolone residues.The results showed that the detection rate of FQ residues was 40.5%, and FQ residues in 9.5% black-bone chicken products exceeded the maximum residue limit (MRL)and limit of quantitation(LOQ).This study results could provide effective technical data for the national revision of drug residue limits in black-bone chickens.Besides,it was also proposed to revise the dose of FQ and withdrawal time during the black-bone chicken breeding process to reduce FQ residues'impacts on chicken quality and safety and ensure food safety from the source.Key words UPLC-MS/MS;Black-bone chicken;FQs;Drug residues乌鸡是我国特有的药用珍禽，其肉品中含有大量人体必 需的氨基酸和微量元素，其营养价值高于普通鸡，是一种非 常受消费者青睐的滋补珍品[1]。
基于同步荧光光谱的鸡肉中磺胺二甲基嘧啶和氧氟沙星残留的快速检测
引言 1
自 1929 年 Fleming［1］发 现 第 1 剂 抗 生 素（青 霉 素）以 来 ，抗 生 素 得 到 了 快 速 发 展 和 应 用 ，不 仅 用 于 治 疗 人 类 的 各 类 感 染 性 疾 病 ，而 且 也 用 于 解 决 家 禽 养 殖 中 存 在 的 疫 病 防 治 问 题 。 然 而 ，在 家 禽 养 殖 中 使 用 抗 生 素 是 一 把 双 刃 剑 ，因 为 抗 生 素 会 残 留 在 家 禽 中 ，人 类 食 用 这 种 家 禽 后 抗 生 素 会 导 致 各 种 副 作 用 ，例 如 破 坏 人 体 的 肠 道 菌 群 ，转 移耐药性细菌至人体和致癌等 。 ［2-4］
μL，an o-phthalaldehyde solution of 25 μL and a time of 44 min were the best combination of conditions
for detections. Finally，the prediction models were established by the peak height and peak area algorithms
预 测 模 型 。 实 验 结 果 表 明 ，与 基 于 峰 面 积 法 的 预 测 模 型 相 比 ，基 于 峰 高 法 的 预 测 模 型 的 综 合 评 价 更 好 。 基 于 峰 高 法 的
SM2 和 OFL 残 留 预 测 模 型 的 预 测 集 决 定 系 数（R2P）分 别 为 0. 897 3 和 0. 997 3，预 测 集 均 方 根 误 差（RMSEP）分 别 为 6. 060 5 mg/kg 和 0. 539 2 mg/kg，回 收 率 分 别 处 于 76. 1%~115. 2% 和 96. 7%~110. 1% 之 间 ，相 对 标 准 偏 差（RSD）分
鸡肉中多种喹诺酮类兽药残留量的高效液相色谱测定研究
鸡肉中多种喹诺酮类兽药残留量的高效液相色谱测定研究占春瑞;温志海;卜延刚;祝建新【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2005(026)010【摘要】建立了一种测定鸡肉中氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星兽药残留的高效液相色谱法.样品经乙腈提取,正己烷液-液分配去除蛋白和脂类物质,旋转蒸发除去乙腈,乙腈与水溶解残渣,过微孔滤膜,采用高效液相色谱荧光检测,外标法定量.氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星在0.05～1.2μg/ml浓度范围内线性良好,相关系数为0.9997～0.9999.在0.05～1.0mg/kg浓度范围内,平均加标回收率在78.3%～101.8%之间,相对标准偏差为3.89%～12.43%.方法的最低检出限氧氟沙星为0.0037mg/kg、诺氟沙星为0.0037mg/kg、环丙沙星为0.0035mg/kg、恩诺沙星为0.0022mg/kg.该方法简便、快速,可满足鸡肉中多种喹诺酮类兽药残留量的检测.【总页数】5页(P172-176)【作者】占春瑞;温志海;卜延刚;祝建新【作者单位】江西出入境检验检疫局,江南,南昌,330002;江西出入境检验检疫局,江南,南昌,330002;江西出入境检验检疫局,江南,南昌,330002;江西出入境检验检疫局,江南,南昌,330002【正文语种】中文【中图分类】S859.796【相关文献】1.高效液相色谱法测定鸡肉中几种兽药残留量 [J], 李德良2.鸡肉中多种磺胺兽药残留量测定的高效液相色谱-电化学检测法 [J], 王建华;林黎明;陈长法3.高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定鸡肉中残留的磺胺类和氟喹诺酮类兽药 [J], 刘芃岩;姜宁;王英峰;晏利芝4.高效液相色谱法同时测定水产品中多种氟喹诺酮类药物残留量 [J], 陈丽;杨长志;刘永;吴岩;程阳5.高效液相色谱-串联质谱法快速测定鸡肉中多种兽药残留 [J], 冯慧慧;杨亚琴;余明霞;曹秀;李圆圆;郝学飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三种氟喹诺酮类药物在鸡体内的组织残留
三种氟喹诺酮类药物在鸡体内的组织残留汪雪雁;祁克宗;朱良强【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2007(028)011【摘要】建立了鸡组织中环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星的高效液相色谱(HPLC)测定方法,并测定了鸡单次内服(10mg/kg·d)单种药物和混合药物后组织中的药物残留特征.组织样品用磷酸盐缓冲液提取,用100mg C18固相萃取柱净化,收集洗脱液作HPLC检测.色谱柱为Hypersil BDS-C18柱;荧光检测器,激发波长278nm,发射波长445nm;流动相为磷酸/三乙胺(pH2.5)-乙腈(86∶14)溶液,pH值为2.5.环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种药物标准溶液的最低检测限分别为20、25和25ng/ml(g);血浆样品回收率大于82%,组织样品回收率大于72%.【总页数】5页(P468-472)【作者】汪雪雁;祁克宗;朱良强【作者单位】安徽农业大学茶与食品科技学院,安徽,合肥,230036;安徽农业大学茶与食品科技学院,安徽,合肥,230036;安徽省兽医工作站,安徽,合肥,230022【正文语种】中文【中图分类】TS207.53【相关文献】1.土霉素在草鱼体内的组织残留研究 [J], 肖亮;王婧;王承明;吴谋成2.单剂量口灌呋喃唑酮在草鱼体内消除及组织残留研究 [J], 罗玉双;艾晓辉;夏维福;王文彬;文华;刘长征;周运涛3.甲苯咪唑在鳗鲡体内的药物代谢及组织残留 [J], 李忠琴;关瑞章;许小平4.盐酸沙拉沙星在锦鲤体内的组织残留研究 [J], 李彩云;隆雪明;扶亚祥;刘湘新5.异育银鲫体内阿维菌素血脑屏障渗透性及组织残留 [J], 阮记明;胡鲲;杨先乐;章海鑫;王祎;周爱玲;赵依妮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荷移光谱法测定鸡肉中左氧氟沙星残留
荷移光谱法测定鸡肉中左氧氟沙星残留庞艳玲;孟德素【摘要】采用荷移光谱法测定了鸡肉中左氧氟沙星残留量.左氧氟沙星与茜素在水与乙醇的混合溶液中发生反应,生成的荷移络合物的最大吸收波长为532 nm;表观摩尔吸光系数是6.47×103 L/mol·cm;药物浓度在1～50 mg/L内符合比耳定律;鸡肉中左氧氟沙星的加标回收率为92.0％～96.8％,相对标准偏差为5.2％,方法检出限为1.0 mg/kg(按S/N =3计).用红外光谱法探讨了反应机理.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2014(040)011【总页数】3页(P233-235)【关键词】左氧氟沙星;茜素;荷移反应;荷移分光光度法;鸡肉【作者】庞艳玲;孟德素【作者单位】菏泽学院化学化工系,山东菏泽,274015;菏泽学院化学化工系,山东菏泽,274015【正文语种】中文左氧氟沙星(LVFX)为化学合成的抗菌药，是第四代喹诺酮类药物，具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用安全等特点，是治疗泌尿、呼吸道、胃肠系统细菌感染性疾病的首选药物，目前测定分析方法主要是荧光法［1］、紫外分光光度法［2］、HPLC 法［3］、紫外吸收系数法［4］、紫外检测法［5］、毛细管电泳法［6］、高效液相色谱法［7～8］、一阶导数分光光度法［9］等。
几年来，部分养殖户存在不合理甚至“滥用”左氧氟沙星的现象，由此形成了畜禽产品左氧氟沙星残留超标的安全隐患。
荷移反应是基于电子给体和电子受体之间的电荷转移形成荷移复合物的一类反应，由于荷移络合物的形成，使吸收光谱发生较大幅度红移，从而避开药物制剂或体液中其他物质的干扰，使其选择性显著提高。
本文研究了左氧氟沙星与茜素的荷移反应，确定了最佳反应条件，并对反应机理进行了初步探讨。
1 仪器与试剂TU-1810型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限公司;红外光谱仪，傅里叶红外光谱仪-FTIR370;pHS-3型精密酸度计，上海雷磁仪器厂。
高效液相色谱-串联质谱测定鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的研究
高效液相色谱-串联质谱测定鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的研究陈晓红;姚浔平;李小平【期刊名称】《中国卫生检验杂志》【年(卷),期】2008(18)7【摘要】目的：建立鸡肉中培氟沙星、单诺沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、沙拉沙星、环丙沙星、恩诺沙星和司帕沙星等9种氟喹诺酮类药物残留的高效液相色谱-串联质谱检测方法。
方法：样品经磷酸盐缓冲液提取后，用Waters Oasis MAX小柱进行净化、提取，Cloversil-C18柱（150mm×4．6mm i．d．，5μm）分离；柱温：30℃；流动相：甲醇／乙腈／0．2％甲酸（15／15／70，v ／v／v）；通过电喷雾电离离子化在多离子监测（MRM）模式下测定。
结果：各氟喹诺酮在0．05～50．0μg／kg范围内均呈良好的线性关系，相关系数〉0．998，回收率在89．0％～110．0％之间，相对标准偏差（RSD）在2．8％～9．1％之间，检出限均为0．05μg／kg。
结论：所建方法简便、快速、干扰少、特异性强，是鸡肉中9种氟喹喏酮残留检测的理想方法。
【总页数】4页(P1239-1241)【关键词】鸡肉;氟喹诺酮;高效液相色谱-串联质谱【作者】陈晓红;姚浔平;李小平【作者单位】浙江省宁波市疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】O657.63【相关文献】1.超高效液相色谱-串联质谱测定淤泥4种氟喹诺酮类药物残留 [J], 符靖雯;吴育彬;刘惠茹;杨钦沾2.液相色谱串联质谱同时检测鸡肉中金刚烷胺、氟喹诺酮类和磺胺类药物的残留[J], 饶钦雄;郭黎明;周苏;罗爱琼;刘丹;赵志辉3.超高效液相色谱-串联质谱内标法快速测定水产品中9种氟喹诺酮类药物残留量[J], 周伟光;伍换;莫喜荣;林宗常;黎天勇4.聚多巴胺纳米纤维膜固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测淡水鱼中四环素类和氟喹诺酮类药物残留 [J], 梁思慧;戴海蓉;张铧尹;李建;张秋萍;许茜;王春民5.超高效液相色谱-串联质谱检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留 [J], 许燕平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡肉中11种喹诺酮类药物多残留的高效液相色谱检测
鸡肉中11种喹诺酮类药物多残留的高效液相色谱检测林保银【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2009(27)2【摘要】建立了用荧光检测器同时测定11种喹诺酮类药物(包括诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星、洛美沙星、二氟沙星、沙拉沙星、恶喹酸和氟甲喹)在鸡肉中的多残留的高效液相色谱检测方法.鸡肉样品用10%三氯乙酸-乙腈(体积比为7∶3)提取两次并稀释,随后用反相固相萃取柱净化.采用Hypersil BDS-C18色谱柱分离,以乙腈和水为流动相梯度洗脱,荧光检测器用程序编程检测波长检测.11种喹诺酮类药物标准曲线的线性范围为5～1200 μg/L,相关系数大于0.998.在高、中、低三个添加水平下的回收率为56% ～119% ,批内相对标准偏差为0.4% ～16.1% ,批间相对标准偏差为1.4% ～23.0% .检出限和定量限分别为1～23 μg/kg和4～40 μg/kg.该方法快速、灵敏,达到了兽药残留检测的要求.【总页数】5页(P206-210)【作者】林保银【作者单位】广州市农业标准与监测中心,广东,广州,510305【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.铽增敏高效液相色谱柱后衍生荧光检测法同时检测鸡肉中的三种氟喹诺酮类药物残留 [J], 祁克宗;朱良强;孙国仁;施祖灏;彭开松2.鸡肉组织中硝基咪唑类药物及代谢物多残留检测高效液相色谱法研究 [J], 胡海燕;徐倩;孙雷3.QuEChERS结合高效液相色谱法快速检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留 [J], 马春华;陈文文;邢越4.采用不同提取方法、利用超高效液相色谱-串联质谱检测鸡肉中喹诺酮类药物残留的影响 [J], 王磊;刘延平;王鲁霞;朱辉;陶相锦5.超高效液相色谱-串联质谱检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留 [J], 许燕平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法检测鸡肉中四种氟喹诺酮类药物残留的研究
高效液相色谱法检测鸡肉中四种氟喹诺酮类药物残留的研究刘俊华;石丽敏;鹿翠珍;李冬梅【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2008(42)4【摘要】建立了一种采用高效液相色谱同时测定鸡肉中氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星四种氟喹诺酮类药物残留的方法.鸡肉样品用pH 7.0的乙腈提取,正己烷去杂质,蒸发浓缩后,流动相定容,用激发波长是280 nm,发射波长是450 nm 的荧光检测器测定.氧氟沙星在0.003～0.6 μg/g范围内呈良好的线性关系,诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星在0.001～0.2 μg/g范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 8.样本的平均加标回收率在56%～105%之间,RSD＜15%(n=5).【总页数】4页(P19-22)【作者】刘俊华;石丽敏;鹿翠珍;李冬梅【作者单位】河北省秦皇岛正大有限公司,河北秦皇岛,066200;河北省秦皇岛正大有限公司,河北秦皇岛,066200;河北省秦皇岛正大有限公司,河北秦皇岛,066200;河北省秦皇岛正大有限公司,河北秦皇岛,066200【正文语种】中文【中图分类】S859.84【相关文献】1.高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留量前处理方法的优化 [J], 李维铖;姬长云;张静洁;程汉奎;邓超;钟佳莲;邓衔柏;沈祥广2.超高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留 [J], 杨卫军;李曼;曹秀梅;林艳青3.鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进 [J], 崔惠娟4.高效液相色谱法检测动物性产品中3种氟喹诺酮类药物残留的研究 [J], 方永卫; 师永华; 郭向阳5.QuEChERS结合高效液相色谱法快速检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留 [J], 马春华;陈文文;邢越因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
动物性食品中诺氟沙星残留的荧光免疫分析方法研究
动物性食品中诺氟沙星残留的荧光免疫分析方法研究
余宇燕;陈莉;卢玲;张红艳;滕海英
【期刊名称】《现代食品科技》
【年(卷),期】2012(028)007
【摘要】利用杂交瘤技术制备了诺氟沙星的单克隆抗体,建立了以抗诺氟沙星单克隆抗体为基础的荧光免疫分析方法,工作曲线表明在10～500 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I=31.92 log C-5.0083,相关系数r=0.9965,对诺氟沙星最低检出限达6.09 μg/L,抑制中浓度为52.88 μg/L,且对其它结构类似喹诺酮类药物均有特异性识别.本法可应用于检测动物性食品中残留的微量诺氟沙星.
【总页数】3页(P856-858)
【作者】余宇燕;陈莉;卢玲;张红艳;滕海英
【作者单位】福建中医药大学药学院福建福州350108;福建中医药大学药学院福建福州350108;包头师范学院生物学院内蒙古包头014030;福建中医药大学药学院福建福州350108;福建中医药大学药学院福建福州350108
【正文语种】中文
【相关文献】
1.β-兴奋剂在动物性食品中残留的免疫分析方法研究进展 [J], 刘硕;陶晓奇
2.荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留 [J], 蔡其洪;许桂芬;阮丽琴;李春来
3.动物性食品中四环素类药物残留量子点荧光免疫技术研究 [J], 李研东;韩雪;吴雨洋;熊雅婷;刘薇
4.免疫分析技术在动物性食品兽药残留检测中的应用 [J], 徐飞;任康;丁双阳
5.动物性食品中磺胺类药物残留免疫分析研究进展 [J], 崔艳华;马莺
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鸡粪便中氧氟沙星残留检测微生物法的建立
鸡粪便中氧氟沙星残留检测微生物法的建立
胡晓苗;张丹俊;赵瑞宏;潘孝成;程宝艳;詹凯
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2009(0)23
【摘要】以金黄色葡萄球菌为工作菌, 用杯碟法测定氧氟沙星（OFL）在畜禽粪便中的残留。
结果表明：鸡粪便中氧氟沙星的最低检测限为0.156μg/g,标准曲线的工作范围为0.156~5.00μg/g，工作曲线的日内变异系数在2.4%~3.3%、日间变异系数为3.7%~5.2%，回收率分别为79.49%~87.92%。
因此,建立的方法可以满足鸡粪尿混合物中氧氟沙星的残留检测要求。
【总页数】3页(P31-33)
【关键词】氧氟沙星;粪便;微生物法;残留;标准曲线
【作者】胡晓苗;张丹俊;赵瑞宏;潘孝成;程宝艳;詹凯
【作者单位】安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S811.6
【相关文献】
1.鸡组织中苯唑青霉素残留的检测方法--微生物法的研究 [J], 吴萍;李雪兰
2.鸡粪好氧堆肥腐熟度、重金属残留及微生物菌群分析 [J], 王秀红;史向远;张纪涛;王豫霞;李欣欣;周静;赵红叶
3.粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅰ.用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原
—抗体系统检测粪抗原方法的建立 [J], 焦伟;柴君杰;伊斯拉音.乌斯曼;付承;瞿群4.猪和鸡可食性组织中氨苄青霉素残留的微生物学检测法 [J], 张可煜;王大菊;袁宗辉*;范盛先
5.鸡肌肉组织中盐霉素残留的微生物法检测研究 [J], 李娜;孙洁;祁克宗;陈曦;朱良强;彭开松;涂健
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科研课题报告_畜禽产品中二氟沙星残留快速检测方法研究
畜禽产品中二氟沙星残留快速检测方法研究二氟沙星(Difloxacin, DFX)最初开发应用于人医临床，但因其毒性较大而逐渐淘汰应用在兽医临床上成为兽医专用的氟喹诺酮类抗菌药物。
近年来，对氟喹诺酮类药物在兽医和人医临床上应用时所产生的耐药性、残留毒性以及不良反应的报道越来越多。
目前，用于二氟沙星残留检测的方法有：微生物法、HPLC、LC—MS、SDF等。
生产上尚缺乏一种快速、准确、易于推广使用的检测手段以提供给广大生产企业和屠宰场等相关行业。
本研究以此为立足点，采用两种不同的方法合成了2种不同的二氟沙星人工抗原；利用杂交瘤技术建立了5株分泌抗二氟沙星单克隆抗体的细胞株。
同时对5株单克隆抗体进行纯化和鉴定；在此基础上进一步建立了畜禽产品中二氟沙星残留的快速ELISA检测方法——间接竞争ELISA（ci—ELISA）法。
首先采用碳二亚胺法（活性酯法）将二氟沙星与牛血清白蛋白（BSA）交联制备免疫用抗原DFX —BSA；采用活泼酸酐法将二氟沙星与卵清蛋白（OVA）交联制备包被用抗原DFX—OVA。
两种交联产物经FeCl3显色法、紫外扫描法和红外光谱法进行确认。
结果表明：透析后的交联产物与FeCl3反应呈红色且略显浑浊，透析外液与FeCl3则呈现浅黄色；DFX与载体蛋白BSA和OVA的吸收光谱呈现明显的叠加现象；且在交联复合物中有DFX的特征性光谱峰出现，证明两步交联均获得成功，为下一步构建分泌抗二氟沙星单克隆抗体的细胞株打下坚实基础。
细胞株的构建。
将免疫原DFX—BSA按100μL/只的剂量经腹腔免疫4~6W周龄的纯系BALB/c小鼠，免疫方案为0、3、5周龄各免疫一次，其中首次免疫采用弗氏完全佐剂乳化免疫原（体积比1：1），二免和三免乳化采用弗氏不完全佐剂，融合前3天用不加佐剂的完全抗原按同样剂量腹腔注射加强免疫BALB/c小鼠。
间接ELISA试验结果表明利用该免疫方案制备单抗取得成功。
采用显微克隆技术构建分泌单克隆抗体的细胞株，最终筛选出5株分泌特异性抗体的细胞株，分别为2c1、2c4、3d3、4a1和5a5并获取相关的腹水。
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２１３ 采样 ．． 实验 Ｉ组 ： 停 药 １ 在 ５天 （ １ 即 ６日
龄）２ ， ８天 （ ２ 即 ９日龄） ４ ，０天 （ ４ 即 １日龄） ７ ，８天 （ ７ 即 ９日龄 ） 分别宰 杀 ５只鸡 ，分 别采 取 胸部肌
２ ２日龄健康 肉仔鸡 中按 ５ ０ ｍ ／ ０ ｇ Ｌ氧氟沙星溶液 连 续饮用 ５ ｄ其推 荐的休药期 为 ２ ｜ 而农 业部 制 ， ５ｄ ］ ３ ；
４２ ５ｐ ｇ／ ｒ ｓ ｃｉ ｅ ｙ Ａ ｆｅ ａ ｆｗ ｉ ｄ ａ ａ，ｔ ｅ ｃ ｎｃ ｎ ａｉ ｎ ｏ ｆｏ ａ ｉ ｉ ｔ ｈｃ ｎｓｕ ｅ ｔ２ ５． ｋｇ ｅ ｐｅ ｔｖ ｌ ． ｔ ｒ７１ ｄ ｙｓｏ ｔ ｒ ｗ ｌ ｈ ｏ ｅ ｔ ｔｏ ｆｏ ｘ ｃｎ ｎ ｈｅ ｃ ｉｋｅ ｓ ｄ ａ ｈ ｒ ｌ
收 稿 日期 ： ０ ２ ０ —０ ２ １－ ６ ８
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３ 试 验 研 究 ４・
氧 氟沙星在 乌骨鸡 体 内残 留消除规律 研 究一林 海丹 ，等
用 。口服吸 收 良好 ， 使用 方便 ， 医 临床 上也 常用 兽 于治疗 乌骨 鸡 的呼吸道 、 道疾病 。然而 ， 同动 肠 不 物对 同一类药物 残 留消 除规律 不一样 ， 药期也差 休
（ ． ｕ ｎ ｄ ｎ ｓ ｔｔ ｆｒ ｅｅｉａｙ ｒ ｇａ ｄＦ ｅ ｓ ｆ ｏ ｔ ｌ Ｇ ａ ｚ ｏ １ ２ ０ Ｃ ｉａ ２ Ｄｅ ａｔ ｎ ｆ ｅｅｉａ １ Ｇ ａ ｇ ｏ ｇ ｎ ｔｕ ｅ ｏＶ ｔｒ ｒ ｕ ｎ ｅ ｄｔ ｓ ｎｒ ， ｕ ｎ ｈ ｕ５ ０ ３ ， ｈ ； ． ｐ ｒ Ｉ ｉ ｎ Ｄ ｕ Ｃ ｏ ｎ ｍｅ ｔ Ｖ ｔ ｎ ｒ ｏ ｒ ｙ
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别很大 。 文献报道 ， 据 氧氟沙星用于 吉富罗非鱼， 其 体 内的休药期 为 ８ ｄ ： ［ 用于鲤鱼休药 期为 ９ ｄ］在 ｒ ＿ 上 。
用， 每天 二次 ， 次饮用 ３ ｈ 连续给 药 ５ ｄ 实验 Ｉ 每 ， 。
组 在 ２日龄给 药 ， 实验 Ｉ组在 ２ Ｉ ８日龄给药 。
肉、肝脏和 肾脏 中分别检 出氧 氟沙星 １６ ８“ｇｋ 、２ ． ｇｋ 和 ４ ７ ４ ／ｇ ８日 ４． ／ｇ ０６ ／ｇ ． “ｇ ｋ ；２ 龄使 用组分别检 测 ３ 出 １ ３ ５ ｇ ｋ 、４ ． ｇ ｋ ． ／ｇ ５ ０ ／ ｇ和 ４ ５ ５ ｇｋ 。 ２日龄 使 用 组 休 药 ７ 天 时 （ ９ ２ ． ／ ｇ ８ 即停 药 ７ 天 ） １ ，肌 肉和肝 脏 中
Ｓ ｕ ｉ ｓ ｎｒ ｓｄ ｅ ｆ ｌｏ ａ ｉ ｌ ｃ － ｏ ｅｓｌ ｙｆ ｗｌ ｔ ｄ ｅ ｉ ｕ ｓｏ ｏ ｅ Ｏｆ ｘ ｃｎ ｉ ｂ ａ ｋ ｂ ｎ ｋ ｎ ｉ ｏ
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壅室 兰医科 技 ２１年（ ７ ） 期 ０ ２ 第３卷 第４
试验研究 ・３ ３・
氧 氟 沙 星 在 乌 骨鸡 体 内残 留 消 除规 律 研 究
林 海丹 ，方炳 虎 。 ，袁 照红 。 穗璋 ３ 刘小 艳 。 ，湛
（１广 东省 兽药与饲料监 察总所 ， 广 东 广 州 ５ ０３ ；２华 南农业大学 兽医学 院，广 东 广 州 ． １２０ ． ５ ０ ４ ；３广 东大华农 动物保健 品股份有 限公司 ，广 东 新兴 ５ ７ ０ １６２ ． ２ ４ ０）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ｐ Ｈ至 ２ ５ ． ）一乙腈 （２ １） 为流动相 ，流速 １ ０ ｍ ／ ｉ ，进样量 为 ２ Ｌ ８：８ ． Ｌ ｍ ｎ ０ 。氧 氟沙星在乌骨鸡肌 肉、肝 脏 、。 中的平均 回收率 分别 为 ８ ． ％ ８． ％ ２ ５ 。检 测 限为 １ ｇ ｇ 当组 织 中氧 氟沙星浓度 在 肾脏 ６ ３ 、 ２ 、８． ％ ３ ｎ／。 ０ １ ～２ ０ ／ ｇ范 围时，线 性关 系良好 。利用该方法对 氧 氟沙星在乌骨 鸡体 内的残 留消除规律 进行 了研 ０ ０ ｇｋ ０ ｕ 究 ，结果表 明，氧 氟沙星在 鸟骨鸡体 内的残 留消除速度极 为缓慢 。４ ０天休 药期后 ，２日龄 使用组 可在肌
ｏ ｏ ａｉ ｓａａ ｚｄｂ Ｌ （ ｐ ｒ ｌ ＤＳＣ１） ｎ ｅ ｃ ｄｂ Ｌ （ ｅ ｌ ｆ ｘ ｃ ｗａ ｎ ｌ ｅ ｙＨＰ Ｃ Ｈｙ ｅｓ ｎ ｙ ｉＢ ・ ａｄｄｔ ｔ ｙＦ Ｄ 人 ｘ：２ ０ｎ ＾ ｅ ４ ０ｎ ． ８ ｅｅ ８ ｍ， ｍ ５ ｍ） Ｔ ｅｍｏ ｉ ｈ ｓ ａ ｃｔｎｔｌ ｐ ｏｐ ｏ ｃ ｃ ／ｉｔ ｌ ｎ １ ８）Ｔ ｅｌ ｅｒａ ｇ ｓ０ ０ ｐ ｇ ｇ ｈ ｂｌ ｐ ａｅｗ ｓ ｅｏ ｉｉ —ｈ ｓｈ ｒ ｉ ｔｅ ｙａ ｅ（８： ２． ｈ ｎ ａ ｎ ｅ ｅ ａ ｒｅ ｉ ａ ｄ ｒ ｈ ｍｉ ｉ ｒ ｗａｌ ￣２Ｏ ０ ／ ｋ
还 能分别检 出氧 氟沙星 １． ｇ ｋ １ ２ ／ ｇ和 １ ． ｇ ｋ 。 实验表 明乌骨鸡使用氧 氟沙星仅 适用 于 １ ２ ０ ／ｇ ０日龄 以下
给 药并 休 药 ７ 以 上 ，或 不给 予该 类 药物 ０天
关键词：氧氟沙星；乌骨鸡；残留
中 图分 类 号 ：￥ ５ ． ９６ ８ ９ ７十 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ － ５ ７ ２ １ ） ４ ０ ３ － ４ ０ ５ ８ ６ （０２ ０ — ０ ３ ０
Ｋｅ ｙｗｏ ｄ ：Ｏｆ ｘ ｃｎ Ｂｌｃ － ｏ ｅ ｉ ｙｆ ｗｌ Ｒｅ ｉ ｕ ｓ ｒｓ ｌ ａ ｉ； ａ ｋ ｂ ｎ ｌ ｏ ； ｓｄ ｅ ｏ ｓｋ
乌 骨鸡 是 我 国特 有 药用 鸡种 ，是一 种 营养 丰 富、 滋补 强壮 的珍 品 。 乌骨 鸡 的养 殖在 我 国具有 较 长 的 历史 ， 年 来 兴起 的高 产 、 近 高效 的集 约化 、 规
肉、肝脏和 肾脏 共 ３种样 品 ，采集 后立 刻 做好 标 记、 包装 ， － ０ ℃冰 箱 中保 存待 测 。实 验 Ｉ组 ： 于 ２ Ｉ 在停药 ２ ８天 （ ６ 即 １日龄） ４ 、 ０天 （ ７ 即 ３日龄 ） 分
的兽药 种类 与使 用量 也 明显增 多 。为保 证其 食 品 安全， 有必要 开 展相关 的药物残 留研 究 。 氟沙星 氧 （ｆ ｏ ａ ｉ） 属 于氟喹 诺酮 类药 物 ， Ｏ ｌｘ ｃｎ ， 对葡 萄球 菌 、 链 球菌 、大肠 杆 菌 、螺旋 杆菌 等有 良好 的抗 菌作
模 化饲 养 方式 ， 该类鸡 的疾病 也 明显 增 多 ， 用 使 使
Ｌｄ Ｘｎ ｉｇ ２４ ０ Ｃ ｉａ ｔ， ｉｘｎ ７ ０ ； ｈ ） ５ ｎ
Ａｂ ｔ ｃ ： Ａ ｅ ｅ ｓ ｄ ｐ ａ ｅ ｈ ｇ ｅ ｆ ｒ ａ ｃ ｉ ｕ ｄ ｃ ｒ ｍａ ｏ ｒ ｐ ｉ ｔ ｏ ａ ｅ ｎ ｄ ｖ ｌ ｐ ｄ ｆ ｒｔ ｅ ｓｒ ｔ ａ ｒ ｖ ｒ ｅ — ｈ ｓ ｉｈ ｐ ｒｏ ｍ ｎ ｅ ｌ ｉ ｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｈ ｃ ｍｅｈ ｄ ｈ ｓ ｂ ｅ ｅ ｅｏ ｅ ｏ ｈ ｑ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｆｏ ａ ｉ ｅ ｉｕ ｓ ｉ ｌｃ — ｏ ｅ ｉ ｙ ｆ ｗ１ ｅｅ ｍｉ ａｉ ｆ ｏ ｘ ｃｎ ｒ ｓｄ ｅ ｎ ｂ ａ ｋ ｂ ｎ ｓｌ ｏ ｌ ｋ ｏ ．Ａｆ ｒ ｂ ｉ ｇ ｅ ｔａ ｔ ｄ ｗｉ ｈ ｓ ｈ ｔ ｕ ｅ ， ｔ ｅｎ ｘｒ ｃ ｅ ｔ ｐ ｏ ｐ ａ ｅ ｂ ｆ ｒ ｅ ｈ