葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)活性检测试剂盒说明书 微量法
葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明
葡萄糖-6-磷酸酶（G6P)试剂盒使用说明分光光度法货号：BC0930规格：50管/48样产品内容：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体47.5mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存；试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；试剂四：液体×1支，-20℃保存；产品说明：葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose6phosphatase，G6Pase，EC3.1.3.9）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖，变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NAD+还原生成NADH，在340nm下测定NADH生成速率，即可反映G6P活性。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的前处理：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
工作液的配制：临用前将试剂二、试剂三和试剂四转移到试剂一中混合待用；用不完的试剂4℃保存一周；2、将工作液置于37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）预热5分钟。
3、在1mL石英比色皿中加入50μL样本和950μL工作液，立即混匀，记录340nm处初始吸光值A1和2min后的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1。
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6-PGDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC2100规格:50T/48S产品内容：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存。
临用前配制，加入5mL试剂一，混匀。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前配制，加入5mL试剂一，混匀。
；产品说明：磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶6PGDH依次催化NADPH 合成，与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。
此外，6PGDH逆境生理中具有重要作用。
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm吸光度增加速率，计算6PGDH活性。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的处理称约0.1g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm4℃离心10min，取上清液，待测。
二、测定步骤1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于37℃水浴预热30min以上。
3.加样表：在比色皿中依次加入试剂名称（μL）测定管（μL）空白管（μL）样本100-蒸馏水-100试剂一700700试剂二100100试剂三100100于340nm处测定3min内吸光值变化，第0s吸光值记为A1，第180s吸光值记为A2。
记△A测定=A2测定-A1测定，△A空白=A2空白-A1空白。
三、6PGDH活性计算：1）按蛋白浓度计算活性单位定义：每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH的酶量为1U（U/mg pr）。
6PGDH酶活性(U/mg prot)=[(△A测定-△A空白)÷(ε×d)×106×V反总]÷(Cpr×V样)÷T=536×(△A测定-△A空白)÷Cpr（2）按样本鲜重计算活性单位定义：每克组织每分钟催化产生1nmol NADPH的酶量为1U（U/mg prot）。
葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)产品技术要求beiken
葡萄糖测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中葡萄糖(GLU)的浓度。
1.1包装规格1.2产品组成成分试剂盒为单一液体试剂，主要组成成分如下：2.1外观试剂为微红色溶液，透明、无沉淀及絮状悬浮物，外包装完整无破损。
2.2净含量用通用量具量取，体试剂的装量不少于标示量。
2.3试剂空白吸光度用蒸馏水测试试剂盒，在500nm波长、1.0cm光径下，试剂空白吸光度应不大于0.2。
2.4分析灵敏度测试0.0126mmol/L的葡萄糖引起的吸光度变化应大于0.0004。
2.5线性区间葡萄糖的测试范围[2.2，25]mmol/L，线性相关系数（r）应不小于0.990；当测试范围在[2.2，4.0）mmol/L区间内，绝对偏差不超过±0.4mmol/L；当测试范围在[4.0，25]mmol/L区间内，相对偏差不超过±10%。
2.6精密度2.6.1批内精密度分别用高、中、低三个水平的质控品测试试剂盒，所得结果的变异系数（CV）应不大于5.0%。
2.6.2批间精密度用同一质控品分别测试三个不同批号的试剂盒，其相对极差（R）应不大于10.0%。
2.7准确度测试标准物质（编号：GBW(E)090544、GBW(E)090545、GBW(E)090546、GBW09174），当浓度≤4.16mmol/L，实测值与标示值偏差应不超过±0.833mmol/L；当浓度＞4.16mmol/L时，实测值与标示值的偏差应不超过±20%。
2.8稳定性贮存在2℃～8℃条件下保存至有效期末，产品性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
葡萄糖-6-磷酸检测标准
葡萄糖-6-磷酸检测标准葡萄糖-6-磷酸（G6P）是一种重要的中间代谢产物，它在细胞内参与糖代谢通路以及核苷酸合成等重要生物学过程。
因此，对G6P的检测具有重要的生物学意义。
本文将就葡萄糖-6-磷酸的检测标准进行详细介绍，包括该检测的意义、常用的检测方法以及检测标准的制定原则和应用。
一、葡萄糖-6-磷酸的生物学意义葡萄糖-6-磷酸在细胞内起着重要的作用，它是糖原合成和分解的关键中间产物，也是核苷酸的合成和脱氧核糖核苷酸合成的重要物质。
在线粒体内，葡萄糖-6-磷酸经过糖酵解途径被氧化成为三磷酸甘油，从而产生三磷酸腺苷（ATP），提供细胞能量。
此外，葡萄糖-6-磷酸还参与细胞内的抗氧化反应等。
因此，对葡萄糖-6-磷酸的检测具有非常重要的生物学意义。
二、葡萄糖-6-磷酸的检测方法1.酶联免疫吸附法（ELISA）：ELISA方法是一种高灵敏度和高特异性的检测方法，适用于血清、尿液等生物样品中葡萄糖-6-磷酸的检测。
通过使用特异性抗体和酶反应产物的发色反应来测定样品中的葡萄糖-6-磷酸浓度。
2.高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种常用的生化分析方法，可以对生物样品中的葡萄糖-6-磷酸进行准确的分离和定量分析。
该方法具有灵敏度高、分辨率好、分析时间短等优点。
3.薄层色谱法：薄层色谱法是一种简便、快速的检测方法，适用于对葡萄糖-6-磷酸浓度进行初步的筛查和分析。
4.毛细管电泳法：毛细管电泳是一种高效分离技术，可以对葡萄糖-6-磷酸进行高效的分离和检测，是一种灵敏度高、分辨率好的检测方法。
三、葡萄糖-6-磷酸检测标准的制定原则1.灵敏度和特异性：检测方法需要具有足够的灵敏度和特异性，能够准确地检测出样品中的葡萄糖-6-磷酸，且不受其他物质的干扰。
2.稳定性和重复性：检测方法需要具有良好的稳定性和重复性，能够保证检测结果的准确性和可靠性。
3.操作简便和快速：检测方法需要操作简便、快速，适用于大规模的样品检测。
4.经济性：检测方法需要具有一定的经济性，能够降低检测成本，提高检测效率。
小鼠葡萄糖 6磷酸脱氢酶 (G6PD) 酶联免疫分析试剂盒 使用说明书
小鼠葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号：E0716m10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
11. 覆膜：5张12. 使用说明书：1份自备物品1. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2. 微量加液器及吸头，EP管3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸标本的采集及保存1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液50μl，余孔分别加标准品或待测样品50μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 立即在每个孔中加入检测溶液A工作液50μl（在使用前半小时内配制），轻轻晃动混匀，酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 弃去液体，甩干，洗板3次。
每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)简介：葡糖-6-磷酸脱氢酶( glucose 6-phosphatedehydrogenase ，G-6-PD 或G6PD)是糖酵解途径、柠檬酸循环以外的另一个葡萄糖分解途径的磷酸葡萄糖酸途径(磷酸戊糖途径)中的第一个酶(EC1.1.1.49)。
Leagene 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)其检测原理是红细胞G-6-PD 催化葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-内酯，后者很快氧化成6-磷酸葡萄糖酸(6-PGA)，同时NAPD 被还原成NADPH ，其反应公式如下：G-6-P+NAPD +→6-PGA +L-NADPH 。
在上述偶联反应中，NADPH 生成速率与样本中酶活性呈正比，通过分光光度计或自动分析仪检测吸光度上升速率(ΔA /min)，上升速率(ΔA /min)与G-6-PD 活性呈正比，比色杯光径1.0cm ，直接计算酶的活性单位。
100T 该试剂盒试剂可以检测50次样本，该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、生理盐水2、水浴锅3、比色杯4、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、预备溶血液：取新奇抗凝血，离心取上清及白细胞层，用4℃预冷的生理盐水洗涤，每次取上清时，务必去除剩余的白细胞层，再加预冷的生理盐水配成含红细胞压积为30%的红细胞悬液，4℃保存备用。
临用前，以样本稀释液稀释，即为溶血液。
4℃保存10h ，编号名称TE0085 100TStorage试剂(A): 样本稀释液100ml -20℃ 避光试剂(B): G6PD assay buffer 100ml 4℃ 试剂(C): NADP 18mg -20℃ 试剂(D): G-6-P 1支-20℃ 试剂(E): G-6-P 稀释液10mlRT 使用说明书1份-20℃保存48h。
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介：葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应，通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。
本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。
本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性，并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。
本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品)，相当于50ng/ml 或278µM ；检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品)，相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。
本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度，也可以检测高血糖血样品。
市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ，相当于约20-600mg/dl ，在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难，而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。
本试剂盒所需样品体积小。
本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ，也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。
本试剂盒特异性好。
与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比，由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，且不受其它还原性物质的影响，本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。
葡萄糖(glucose)，也被称为dextrose 或grape sugar ，被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。
葡萄糖-6-磷酸检测标准
葡萄糖-6-磷酸检测标准
1. 试验原理：葡萄糖-6-磷酸酶催化葡萄糖-6-磷酸在存在
NADP+的条件下转化成6-磷酸葡萄糖和NADPH。
在一定温
度下，葡萄糖-6-磷酸浓度与生成的NADPH的光密度成正比。
2. 试剂准备：葡萄糖-6-磷酸酶混合物、缓冲液、NADP+、葡
萄糖-6-磷酸标准品。
3. 方法步骤：
（1）将标准品加入每个反应管中，加入缓冲液至总体积1ml。
（2）加入葡萄糖-6-磷酸酶混合物，混匀。
（3）在37℃恒温水浴中孵育10min，停止反应。
（4）加入1ml NADP+，混匀。
（5）在340nm波长下测定产生的NADPH的吸光度，作为光
密度读数。
（6）使用标准品测出样品中葡萄糖-6-磷酸的含量，并计算出
样品中葡萄糖-6-磷酸浓度。
4. 检测范围和灵敏度：检测范围为0.001-10mg/L，在最佳实验条件下，灵敏度为0.001mg/L。
5. 质量控制：在每次检测前，应首先测定内部标准，如标准品
和阳性对照，以确保试剂和设备的正常运行。
同时，每次检测均应伴有负对照（即不含葡萄糖-6-磷酸的样品）的检测结果以防止假阳性的发生。
6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0265规格:100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存（切忌放-20℃）；试剂二：粉剂×1支，4℃保存；用时每支加250μL双蒸水充分溶解备用；试剂三：粉剂×1支，4℃保存；用时每支加250μL双蒸水充分溶解备用。
产品说明：G6PDH（EC 1.1.1.49）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是磷酸戊糖途径的关键酶，催化6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸内酯，同时将NADP+还原为NADPH，供生物合成及维持细胞内的还原状态用。
因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH催化NADP+还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的处理1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤1、紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于37℃水浴预热30min以上。
3.工作液配制：临用前将试剂一、试剂二、试剂三以15：0.2：0.2比例混合。
4.加样表：试剂名称（μL）测定管（μL）空白管（μL）工作液190190样本10-蒸馏水-10于340nm处测定5min内吸光值变化，第0s吸光值记为A1，第300s吸光值记为A2。
葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶微板法)
葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)简介：葡萄糖(Glucose, Dextrose ，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C 6H 12O 6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。
Leagene 葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)其检测原理是在己糖激酶的催化下，葡萄糖和ATP 发生磷酸化反应生成葡萄糖-6-磷酸，后者与NAPD 在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下发生氧化还原反应，分光光度计340nm 进行比色测定。
本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞、组织等样本中葡萄糖含量定量测定，特异性高，不受尿酸和抗坏血酸的干扰，故可以检测尿液中葡萄糖。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 样本处理：①血清、血浆、脑脊液、尿液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本：a 、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，1000g 离心10min ，弃上清，留取沉淀。
b 、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，1000g 离心10min ，弃上清，留取沉淀。
c 、加入200~300μl 的PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W ，每次3~5s ，间隔30s ，重复3~5次。
亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。
③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=1：9的比例，加入生理盐水或PBS ，冰浴条件下手动或机械匀浆。
离心，取上清待用。
2、 酶标仪Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：编号 名称TC0701 50T Storage试剂(A): 显色试剂 5ml -20℃ 避光 试剂(B): 酶试剂5ml-20℃ 避光临用前，按显色试剂：酶试剂=1：1混匀，即HK 工作液，4℃保存。
试剂(C): Glu 标准(5mmol/L) 1ml-20℃ 使用说明书1份空白管(B) 对照管(C)标准管(S) 待测管(U)生理盐水(ml)0.0050.2Glu标准(5mmol/L)(ml) 0.005待测样本(ml) 0.005 0.005HK工作液(ml) 0.2 0.2 0.2②充分混匀,水浴中孵育。
葡萄糖-6-磷酸酶检测
迪信泰检测平台
葡萄糖-6-磷酸酶检测
葡萄糖-6-磷酸酶（Glucose-6-phosphatase, G6Pase），又称葡糖-6-磷酸酶，是一种水解磷酸化合物的磷酸酶，广泛存在于动物、植物、微生物及细胞中。
在肝组织中通过水解葡糖-6-磷酸释放葡萄糖入血，因此饥饿时肝糖原能够补充血糖，维持血糖平衡。
由此可见葡萄糖-6-磷酸酶是糖异生的关键酶。
G6Pase主要定位于内质网，是内质网的标志酶，最适pH值为6.5。
迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测葡萄糖-6-磷酸酶活性的变化。
此外，我们还提供其他糖异生类的检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定葡萄糖-6-磷酸酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 葡萄糖-6-磷酸酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(葡萄糖-6-磷酸底物法)临床方案模板-G6PD-体外诊断试剂-IVD
方 案 版 本 : V1.0
方案日期: 2017/03/27
拟试验时间: 2018 年 8 月 至 2018 年 12 月
临床研究者姓名（签字）: 临床研究者所在单位（盖章）： *****医院 联系方式（电话）:
临床试验类型：
□新诊断试剂产品的研究 ■已有同品种批准上市产品的临床研究 □关于变更申请中产品临床研究
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒（葡萄糖-6-磷酸底物法）临床试验方案-v1.0-来自017/03/02目录
摘要................................................................................................................................4 试验研究人员................................................................................................................5 1. 基本内容...................................................................................................................6 2. 申办者信息...............................................................................................................7 3. 考核试剂相关信息...................................................................................................7 4. 参比试剂...................................................................................................................8 5. 研究设计.................................................................................................................10 6. 研究步骤.................................................................................................................12 7. 研究试剂管理.........................................................................................................15 8. 文件管理.................................................................................................................16 9. 数据管理.................................................................................................................17 10. 统计考虑...............................................................................................................18 11. 可行性分析...........................................................................................................20 12. 质量控制与质量保证...........................................................................................21 13. 临床研究伦理方面...............................................................................................22 14. 不良事件预测及应当采取的措施.......................................................................24 15. 对临床试验方案的修正规程...............................................................................24 16. 临床试验方案的偏离...........................................................................................24 17. 研究总结与终止...................................................................................................25 18. 保密原则...............................................................................................................25 19. 研究结果发表约定...............................................................................................25 20. 各方承担的职责...................................................................................................26 21. 各方研究方案签署...............................................................................................26
糖原合成酶(GCS)活性检测试剂盒说明书 微量法
糖原合成酶（GCS）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3335规格：100T/96S产品简介：糖原合成酶（Glycogen synthase,GCS）将UDPG的糖基加到原有糖原或是糖原蛋白的非还原端，以α-1,4糖苷键连接。
GCS是动物机体糖原合成过程的限速酶，同时也是胰岛素作用的主要靶酶，在糖代谢及维持血糖相对稳定的过程中有着重要作用。
GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UDP，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH生成NAD+，在340nm下测定NADH的下降速率，即可反映GCS活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体18mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体7.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体14μL×1支，4℃避光保存。
试剂四：粉剂×1支，-20℃保存。
试剂五：粉剂×1支，-20℃保存。
试剂六：液体48μL×1支，4℃避光保存。
试剂七：粉剂×1支，-20℃保存。
试剂八：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
工作液的配制：临用前将试剂三、试剂四和试剂五转移到试剂一中混合溶解后待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，避免反复冻融。
-20℃保存2周。
试剂八的配制：临用前在试剂八中加入5mL试剂二充分溶解，再将试剂六和试剂七转移到试剂八中混合溶解后待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，避免反复冻融。
-20℃保存1周。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。
葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书
葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书货号：G1500规格：3×50ml保存：4℃避光，6个月名称3×50ml Storage试剂(A):G-6-Pase孵育液50ml4℃避光试剂(B):ALP硫化液2×1ml RT避光试剂(C):固定液50ml4℃避光试剂(D):G-6-Pase对照液10ml4℃避光产品说明：葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6–phosphatase，G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶，G-6-Pase和微体紧密结合，定位于内质网，是内质网的主要标志酶，能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。
G-6-Pase对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要的作用，是糖代谢的关键酶。
当血糖降低时，G-6-Pase促进肝糖原转变为血糖。
当缺乏G-6-Pase时，会引起糖原分解障碍，使糖原积累在肝、肾、心脏等部位，导致肝糖原储积病。
G-6-Pase最适pH为6.5，在pH6.0～8.0亦可，pH8.0最稳定，pH5.0易变性。
组织化学反应多用pH6.5～6.7。
葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。
该酶对固定很敏感，组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋，G-6-Pase完全被抑制。
需用新鲜组织低温恒冷切片，经甲醛短时固定酶即失活，但可短时低温丙酮固定，但一般不固定。
操作步骤(仅供参考)：1.冰冻切片入蒸馏水清洗。
2.入G-6-Pase孵育液37℃孵育20min。
3.自来水冲洗后，蒸馏水冲洗。
4.在上述过程中配制ALP硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍,即为ALP硫化工作液，即配即用。
切片入硫化工作液，孵育1min。
5.自来水水洗。
6.(可选)入固定液，固定2min。
7.入蒸馏水水洗2次。
8.甘油明胶封片。
染色结果：G-6-Pase活性处棕色沉淀阴性对照(可选)：将切片置入试剂(D)-G-6-Pase对照液中，其余步骤相同，结果为阴性。
葡萄糖-6-磷酸检测标准
葡萄糖-6-磷酸检测标准葡萄糖-6-磷酸(G6PD)缺乏是遗传性的红细胞缺陷，影响到葡萄糖代谢。
该缺陷可能会在接触到某些药物、疾病或环境压力后导致溶血性贫血。
因此，对G6PD缺乏的筛查尤为重要，而G6PD缺乏筛查的标准就是G6PD检测。
G6PD检测是通过分析红细胞中G6PD酶活性来确定G6PD缺乏。
下面将会介绍G6PD检测的标准方法。
1. G6PD活性检测G6PD活性检测是最常见的G6PD检测方法，它的思路是测量红细胞中G6PD酶的活性。
常用的测量方法有酵母三磷酸脱氢酶(yeast triosephosphate dehydrogenase)法和比色法。
酵母三磷酸脱氢酶法的原理是比较待测血液与正常血液在同一时间内对酵母三磷酸脱氢酶活性的变化，然后计算G6PD酶活性。
比色法是根据G6PD酶的还原剂作用来测量NADP/H的形成。
在进行G6PD活性检测的时候，需要注意以下几点：1)对于新生儿，G6PD酶活性会在出生后数日内升高，因此最好在出生后1个月后再测量。
2)血液抽取应注意避免对红细胞的损伤，通常采用静脉抽血或经表皮血流动力学监测系统(EMLA)麻醉后进行皮下抽血。
3)使用酶活性仪分析，不同仪器标准、笔头、反应体积等有较大影响，不同仪器的测量结果并不一致。
2.基因检测基因检测是另一种诊断G6PD缺乏的方法，其思路是检测G6PD基因的序列或突变。
现代基因检测技术使得这种方法越来越准确和可靠。
基因检测的优点是能够检测到隐性G6PD缺乏，而基于酶活性的检测方法无法检测到隐性缺陷。
此外，基因检测也更能够指导个性化的治疗计划。
3.红细胞形态学检测红细胞形态学检测是另一种筛查G6PD缺乏的方法。
红细胞在G6PD 缺乏的情况下更容易受损或产生微小的有色附着物质。
通过检查血涂片上红细胞的形态和有色附着物质，就可以初步判断是否存在G6PD缺乏的可能性。
在实际检测中，红细胞形态学检测通常与G6PD活性检测或基因检测结合使用，以增强诊断准确性。
葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4189
葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4189规格：50T/24S可见分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体40mL×1瓶4℃保存试剂一液体12mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2瓶4℃保存试剂三粉剂×1瓶4℃保存试剂四粉剂×1瓶4℃保存试剂五液体8mL×1瓶4℃保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前用8mL蒸馏水溶解备用。
2、试剂四：临用前用8mL蒸馏水溶解备用。
3、标准品：10μmol/mL磷标准液。
临用前用蒸馏水稀释16倍至0.625μmol/mL的标准溶液备用。
4、工作液的配制：试剂二中加入5mL试剂一充分溶解备用。
可以将工作液分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
5、定磷试剂的配制：按H2O:试剂三:试剂四:试剂五（V:V:V:V）=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose6phosphatase，G6Pase，EC3.1.3.9）是一种水解磷酸化合物的磷酸酶，广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和无机磷，利用钼蓝法测定无机磷含量的增加，即可反映G6P活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，肝脏组织及相关液体样本中小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)水平。
用纯化的小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)，再与HRP标记的葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
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葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）活性检测试剂盒说明书微量法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC3325
规格:100T/48S
产品内容：
提取液：液体120mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体12mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前用4mL蒸馏水溶解备用。
试剂四：试剂×1瓶，4℃保存；临用前用4mL蒸馏水溶解备用。
试剂五：液体4mL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支。
10μmol/mL磷标准液。
产品说明：
葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose6phosphatase，G6Pase，EC3.1.3.9）是一种水解磷酸化合物的磷酸酶，广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和无机磷，利用钼蓝法测定无机磷含量的增加，即可反映G6P活性。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取
液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。
2、将10μmol/mL标准液用蒸馏水稀释16倍至0.625μmol/mL的标准溶液备用。
3、工作液的配制：试剂二中加入5mL试剂一充分溶解备用。
O:试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若4、定磷试剂的配制：按H
2
无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
5、操作表：
测定管对照管标准管空白管样品（µL）2020
工作液（µL）80
充分混匀，37℃（哺乳动物）或者25℃（其他物种）水
浴反应10min。
反应后迅速放入沸水中沸水浴10min。
取出
冷却至常温
工作液（µL）-80
10000rpm常温离心10min后取上清。
上清液（µL）2525--
标准溶液（µL）--25-
定磷试剂（µL）125125125125
蒸馏水（µL）100100100125
充分混匀，40℃反应10min。
吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中，测量660nm处吸光值，测定管、对照管、空白管、标准管测定的吸光度分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
计算△A=A测定管-A对照管，△A标准=A标准管-A空白管。
三、G6P活性计算：
1、血清（浆）G6P活力计算
单位定义：每毫升血清（浆）每分钟生成1nmol无机磷定义为一个酶活力单位。
G6P（U/mL）=△A÷（△A标准÷C标准）×1000×V酶促÷V样品÷T=312.5×△A÷△A标准。
2、组织、细菌或细胞中G6P活力计算
（1）按样本蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟生成1nmol无机磷定义为一个酶活力单位。
G6P（U/mg prot）=△A÷（△A标准÷C标准）×1000×V酶促÷（Cpr×V样品）÷T
=312.5×△A÷△A标准÷Cpr。
（2）按样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟生成1nmol无机磷定义为一个酶活力单位。
G6P（U/g鲜重）=△A÷（△A标准÷C标准）×1000×V酶促÷（W÷V提取×V样品）÷T
=312.5×△A÷△A标准÷W。
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1nmol无机磷定义为一个酶活力单位。
G6P（U/104cell）=△A÷（△A标准÷C标准）×1000×V酶促÷（500÷V提取×V样品）÷T
=0.625×△A÷△A标准。
C标准：标准溶液浓度，0.625μmol/mL；V酶促：酶促反应总体积，0.1mL；V样：加入样本体积，0.02mL；V提取：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万；1000：单位换算系数，1μmol=1000nmol。
注意事项：
1、建议将样品用提取液稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2、若A大于1.5或者显色完成后有沉淀产生，将上清液或者粗酶液用蒸馏水稀释后再进行测定。
3、标准曲线线性范围为0.04-5μmol/mL。
4、定磷试剂应现配现用，正常颜色为浅黄色，如有变色或变蓝则均为失效。