上课- 微生物的实验室培养
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微生物的实验室培养
生物量的测定
通过测定菌体干重、蛋白质含量或 DNA含量等方法来反映微生物的生 长情况。
代谢产物的测定
通过测定培养基中代谢产物如有机酸、 酒精等的含量变化来了解微生物的代 谢状况。
05
微生物的分类与鉴定
传统分类方法
01
02
03
形态学特征
通过观察微生物的形态、 大小、结构等特征进行分 类。
生理生化特性
合成生物学
利用基因编辑和合成技术，设计和构建具有特定 功能的微生物细胞或生物系统。
3
微生物资源开发与利用
发掘和利用具有特殊功能的微生物资源，如极端 环境微生物、深海微生物等，为生物技术和产业 创新提供新的思路和方法。
THANKS
感谢观看
氧化磷酸化
通过电子传递链将 NADH和FADH2氧化为 NAD+和FAD，同时生
成ATP。
氮代谢
包括氨基酸的合成与分 解、氮的固定与转化等
过程。
微生物的生长曲线与测定
生长曲线
描述微生物在液体培养基中生长繁殖 过程的曲线，包括延滞期、对数期、 稳定期和衰亡期。
生长速率常数
反映微生物生长速度的参数，与培养 基成分、温度、pH等因素有关。
代谢组学和蛋白质组学技术
通过分析微生物的代谢产物和蛋白质组成，揭示微生物的代谢途径 和调控机制。
微生物鉴定流程
样品采集与处理
选择合适的采样点，采集具有代表性的样品， 并进行适当的处理以便后续分析。
微生物分离与纯化
将样品中的微生物进行分离和纯化，获得单一菌 落或菌株。
形态学观察
对分离得到的微生物进行形态学观察，记录其形态、 大小、结构等特征。
生物安全柜使用
微生物的实验室培养(第一课时).ppt
生物实验室常用的0.22微米滤器也无法将其完 全过滤，因此支原体是实验室细胞培养的头号 公敌，经常杀细胞于无形之间。支原体没有经 典的细菌细胞壁结构，所以它是一个不折不扣 的变形高手。同样因为没有细胞壁，大多数作 用于细胞壁合成的抗生素如青霉素等对支原体 都是无效的。虽然大多数支原体不是致病菌， 但部分支原体致病起来不是一般的菌。
2.蓝藻
3.放线菌
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线 菌产生的 ，如链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、 红霉素、庆大霉素 等
4.衣原体
衣原体为革兰氏阴性病原体，是一类能通过细 菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原 核细胞性微生物。过去认为是病毒，现归属细 菌范畴。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳 动物。能引起人类疾病的有沙眼衣原体、肺炎 衣原体、鹦鹉热肺炎衣原体。
微 生 物
1.细菌——形态
细菌
细菌的构造
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的 休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高 温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽 孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风 飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢 又可以萌发，形成一个细菌.
⑴.概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。 ⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。 ⑶.常见的生长因子：
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
思考:
• 微生物有哪些营养方式(代谢类型）?你能各 举一例?
同化作用:异养型; 自养型 异化作用:需氧型;厌氧型
• 是如何获能的? 自养型:光能或氧化无机物获能;
异养型:有机物中获能
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
(优质课件)微生物的实验室培养
2、将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基
等进行
灭菌。
3、为了避免周围环境中微生物污染，实验操作应 在 酒精灯附近进行。
4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。
七、接种技术
无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程称 为接种。
1、接种 工具
2 、常用的接种方法
斜面划线接种的操作过程
种类
用途
例
选择培 养基
培 而从中养 抑分众基制加离多不入所微需某要需生种的的物物微质或生加 到物缺入 酵少生青 母某长种霉菌，营素和促养分霉进物离菌需质得， 要微的生微物生物生长。
鉴别培 鉴别不同种 养基 类的微生物
伊红—美蓝培养基 可以鉴别大肠杆菌， 其菌落呈现金属光 泽深紫色。
几种选择培养基：
始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最 终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
平板划线的几种方法
平板划线的操作过程 P18
A.从试管中取菌
每次划线后要灼烧接种环， 目的是什么？
每次划线的起点有什么 特点？
• 注意事项：
第一步以及每一次划线之前和划线结束后都要 灼烧接种环。灼烧接种环要冷却后再划线。
做什么准备？ 点燃酒精灯；斜面向上
斜面用什么接种？ 接种环如何灭菌？
取棉塞（不放到桌面？） 试管口灭菌
挑取少量菌体
从里到外轻轻划“S”型曲线，注意不要划破培养基。 试管口通过火焰，塞紧试管口。 放在37℃恒温箱中培养24h。
微生物的纯培养
分离提纯微生物常用的方法：
平板划线法、稀释涂布平板法
• 平板划线分离微生物的原理：连续划线。 由于划线后，线条末端的细菌的数目比线条起
人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
微生物的实验室培养学习课件PPT
是指使用强烈的理化因素杀死物 体内外所有的微生物，包括所有细菌 的孢子、芽孢、霉菌及病毒，而达到 完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工 作中最普通也是最重要的技术。
3.常用的消毒与灭菌的方法 (1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法: 100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法: 用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒; 氯气消毒水源
Cncnc-micro
水
• 是细胞中生化反应的良好介质；营 养物质和代谢产物都必须溶解在水里， 才能被吸收或排出体（细胞）外。 • 水的比热高，能有效的吸收代谢过 程中放出的热量，不致使细胞的温度 骤然上升。 • 维持细胞的膨压（控制细胞形态）。
Cncnc-micro
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念
氮源种类
Cncnc-micro
无机盐（mineral salts）
无机盐功能 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压，PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。 Mg、Ca、K是多种酶的激活剂 无机盐种类
构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞 干重的95％以上 Ca、K 、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配 培养基要加磷酸盐、硫酸盐。 Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素，在微生物培养中有 0.1PPM就可以了，自来水原料中已够用，不需另加。
无菌操作泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法。无论是随后 将要学到的倒平板、平板划线操作，还 是平板稀释涂布法，其操作中的每一步 都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。 只有熟练、规范地进行无菌操作，才可 能成功地培养微生物。
3.常用的消毒与灭菌的方法 (1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法: 100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法: 用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒; 氯气消毒水源
Cncnc-micro
水
• 是细胞中生化反应的良好介质；营 养物质和代谢产物都必须溶解在水里， 才能被吸收或排出体（细胞）外。 • 水的比热高，能有效的吸收代谢过 程中放出的热量，不致使细胞的温度 骤然上升。 • 维持细胞的膨压（控制细胞形态）。
Cncnc-micro
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念
氮源种类
Cncnc-micro
无机盐（mineral salts）
无机盐功能 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压，PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。 Mg、Ca、K是多种酶的激活剂 无机盐种类
构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞 干重的95％以上 Ca、K 、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配 培养基要加磷酸盐、硫酸盐。 Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素，在微生物培养中有 0.1PPM就可以了，自来水原料中已够用，不需另加。
无菌操作泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法。无论是随后 将要学到的倒平板、平板划线操作，还 是平板稀释涂布法，其操作中的每一步 都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。 只有熟练、规范地进行无菌操作，才可 能成功地培养微生物。
微生物的实验室培养(纯化)
03 微生物生长曲线与测定
生长曲线类型及特点
A
延迟期
微生物接种到新鲜培养基后，需要一段时间适 应新环境，此期间微生物生长缓慢，代谢活跃， 为接下来的对数生长期做准备。
对数期
经过延迟期后，微生物进入快速生长阶段， 此期间微生物数量呈指数增长，代谢旺盛， 形态和生理特性比较稳定。
B
C
稳定期
随着营养物质的消耗和有害代谢产物的积累， 微生物生长速度逐渐减慢，新增殖的细胞数 与衰亡的细胞数大致相等，微生物总数达到 最高水平并保持相对稳定。
借助人工智能、机器学习等技术手段，实现对培养条件的智能化控制，
提高实验室培养的自动化程度和效率。
谢谢聆听
进行无菌操作时，需穿戴无菌衣、帽、 口罩和手套，确保操作过程无污染。
无菌器材
使用无菌器材，如无菌吸管、无菌培 养皿等，避免污染。
培养基制备与灭菌
培养基选择
根据微生物的生长需求和实验目 的，选择合适的培养基。
培养基制备
按照培养基配方准确称量各成分， 混合均匀后分装至培养皿或试管中。
培养基灭菌
采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法 等方法对培养基进行灭菌处理，确 保无菌状态。
02
扩大培养
增加微生物的数量，为后续实验提供足够的生物材料。
03
微生物鉴定
通过观察微生物在特定培养基上的生长情况和形态特征， 对微生物进行种类鉴定。
培养基类型及选择
基础培养基
提供微生物生长所需的基本营养 物质，如碳源、氮源、无机盐等。
选择性培养基
在基础培养基中加入某种试剂或 药物，以抑制非目标微生物的生
未来发展趋势与展望
01
高通量培养技术
随着生物技术的发展，高通量培养技术将成为未来微生物实验室培养的
微生物的实验室培养公开课ppt课件
微生物的实验室培养公 开课ppt课件
2024/1/30
1
contents
目录
2024/1/30
• 微生物实验室培养概述 • 微生物培养基制备 • 微生物接种与培养技术 • 微生物分离纯化技术 • 微生物鉴定与保藏技术 • 实验安全与防护知识
2
微生物实验室培养
01
概述
20义
法生长的情况。
2024/1/30
17
其他分离纯化方法
单细胞挑取法
利用显微操作技术，从混杂的微生物群体中挑取单个细胞进行培养 ，获得纯培养物。
选择培养基法
利用微生物对营养物质或生长条件的需求差异，配制特定的选择培 养基，使目标微生物能够生长而杂菌受到抑制，达到分离纯化的目 的。
膜过滤法
利用微孔滤膜过滤微生物悬液，将微生物截留在滤膜上，然后将滤膜 转移到培养基表面进行培养，获得纯培养物。
2024/1/30
27
THANKS.
2024/1/30
28
20
生理生化鉴定方法
生长条件测定
测定微生物在不同温度、 pH值、氧气条件下的生长 情况，了解其生理特性。
2024/1/30
代谢产物分析
通过分析微生物的代谢产 物，如酸、碱、气体等， 推断其代谢途径和类型。
酶反应试验
利用特定的酶反应试验， 检测微生物体内酶的活性 和种类，进一步确定其分 类地位。
21
微生物的生长需要一定的营养物质，包括碳源、氮源、无机盐等。需 要根据微生物的需求设置合适的营养条件。
13
生长曲线测定与分析
生长曲线的测定
通过定期测量微生物的数量或生物量 ，可以绘制出生长曲线。常用的测量 方法包括显微镜计数法、比浊法等。
2024/1/30
1
contents
目录
2024/1/30
• 微生物实验室培养概述 • 微生物培养基制备 • 微生物接种与培养技术 • 微生物分离纯化技术 • 微生物鉴定与保藏技术 • 实验安全与防护知识
2
微生物实验室培养
01
概述
20义
法生长的情况。
2024/1/30
17
其他分离纯化方法
单细胞挑取法
利用显微操作技术，从混杂的微生物群体中挑取单个细胞进行培养 ，获得纯培养物。
选择培养基法
利用微生物对营养物质或生长条件的需求差异，配制特定的选择培 养基，使目标微生物能够生长而杂菌受到抑制，达到分离纯化的目 的。
膜过滤法
利用微孔滤膜过滤微生物悬液，将微生物截留在滤膜上，然后将滤膜 转移到培养基表面进行培养，获得纯培养物。
2024/1/30
27
THANKS.
2024/1/30
28
20
生理生化鉴定方法
生长条件测定
测定微生物在不同温度、 pH值、氧气条件下的生长 情况，了解其生理特性。
2024/1/30
代谢产物分析
通过分析微生物的代谢产 物，如酸、碱、气体等， 推断其代谢途径和类型。
酶反应试验
利用特定的酶反应试验， 检测微生物体内酶的活性 和种类，进一步确定其分 类地位。
21
微生物的生长需要一定的营养物质，包括碳源、氮源、无机盐等。需 要根据微生物的需求设置合适的营养条件。
13
生长曲线测定与分析
生长曲线的测定
通过定期测量微生物的数量或生物量 ，可以绘制出生长曲线。常用的测量 方法包括显微镜计数法、比浊法等。
微生物的实验室培养(课件)
详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一 定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生 物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微 生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地 补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒 定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业 生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化 的微生物菌株接种到培 养基中，让其生长繁殖 。根据需要，可以选择 不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观 察微生物的生长情况， 记录生长曲线、菌落形 态等数据，并进行相关 的检测和鉴定，如生化 反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具 有重要影响，不同微生物对pH值 的要求不同，因此需根据实际情况 调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通 过高温或高压灭菌，消除培养基中 的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验 室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施， 如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空 气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁， 确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处 理，避免对环境和人类健康造成危害 。
培养获得的微生物可以 用于后续的研究和应用 ，如生产生物制品、进 行疾病诊断和治疗等。 同时，对于有价值的菌 种可以进行长期保藏，
高中生物课件21微生物的实验室培养
高压蒸汽 灭菌法
紫外线 消毒 化学药物 消毒
主要方法
高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 内 ,100 kPa,121 ℃ 下 持 续 加 热 15~30 min
30 W 紫外线灯照射 30 min
用体积分数为 70%~75%的 乙醇、碘酒涂抹等
应用范围
续表
培养基等
接种室空气等
用于皮肤、伤口、动植物组织表面 消毒,手术器械、玻璃器皿等消毒
专题 2 微生物的培养与应用
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课题 1 微生物的实验室培养
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课前预习导学
目标导航
学习目标
1.了解有关培养基的基础知识。 2.进行无菌技术的操作。 3.进行微生物的培养。
重点难点 重点:
1.进行无菌技术的操作。 2.进行微生物的培养。 难点:正确进行无菌技术的操作。
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预习导引
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3.学习教材第 18 页平板划线操作,思考下列问题。 (1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在 划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗? 提示:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线 结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来 源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的 数目逐渐减少,以便得到单菌落。划线结束后需要灼烧接种环,能及时杀 死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者。
目录 退出
3.培养基灭菌后,需要冷却至 50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用 什么办法来估计培养基的温度?
提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降 到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
紫外线 消毒 化学药物 消毒
主要方法
高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 内 ,100 kPa,121 ℃ 下 持 续 加 热 15~30 min
30 W 紫外线灯照射 30 min
用体积分数为 70%~75%的 乙醇、碘酒涂抹等
应用范围
续表
培养基等
接种室空气等
用于皮肤、伤口、动植物组织表面 消毒,手术器械、玻璃器皿等消毒
专题 2 微生物的培养与应用
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课题 1 微生物的实验室培养
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课前预习导学
目标导航
学习目标
1.了解有关培养基的基础知识。 2.进行无菌技术的操作。 3.进行微生物的培养。
重点难点 重点:
1.进行无菌技术的操作。 2.进行微生物的培养。 难点:正确进行无菌技术的操作。
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预习导引
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3.学习教材第 18 页平板划线操作,思考下列问题。 (1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在 划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗? 提示:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线 结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来 源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的 数目逐渐减少,以便得到单菌落。划线结束后需要灼烧接种环,能及时杀 死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者。
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3.培养基灭菌后,需要冷却至 50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用 什么办法来估计培养基的温度?
提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降 到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
微生物的实验室培养公开课课件
通过实验室培养，可以大量繁殖和生 产有价值的微生物资源，如酶、抗生 素、有机酸等，应用于医药、食品、 农业等领域。
微生物生长和代谢研究
实验室培养可以模拟微生物在自然环 境中的生长条件，研究微生物的生长 规律、代谢途径和产物等，深入了解 微生物的生理生化特性。
培养基类型及选择
01
天然培养基
成分复杂，营养丰富，适用于大多数微生物的培养。如牛肉膏蛋白胨培
分离纯化步骤
制备培养基→倒平板→涂布分离→培养观察→纯种鉴定。
常见问题分析与解决策略
污染问题
可能是由于培养基灭菌不彻底、 接种工具不干净等原因导致。解 决方法包括严格检查培养基和接 种工具的无菌状态，确保无菌操
作。
不生长或生长缓慢
可能是由于培养基营养成分不足 、温度不适宜等原因导致。解决 方法包括调整培养基成分和比例
达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
分离纯化原理及步骤详解
分离纯化原理
利用微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成， 后代在个体、形态及生理特性上与原来的单细胞相同的特点，从混杂的微生物 细胞群中，获得只含有某一种或某一株微生物的过程。
代谢产物在工业生产中的应用实例
抗生素生产
通过微生物发酵生产抗生素，如青霉 素、头孢菌素等，广泛应用于医疗领 域。
氨基酸生产
利用微生物转化作用生产各种氨基酸 ，如谷氨酸、赖氨酸等，用于食品、 饲料和医药行业。
酶制剂生产
通过微生物发酵生产各种酶制剂，如 淀粉酶、蛋白酶等，应用于洗涤剂、 纺织、造纸等行业。
废弃物处理方法和环保要求
废弃物分类收集
对实验过程中产生的废弃物进行分类收集，避免不同性质废弃物 相互污染。
2---1-微生物的实验室培养
化碳、渗透压等的要求。
第6页，共48页。
典例精析 2015·广元期中不同的微生物对营养物质的需要各不相
同。下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
第11页，共48页。
菌落
细菌的菌落特征因 种而异
第12页，共48页。
常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min； 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或
80℃下煮15min；
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔
灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源； 4、紫外线消毒；
第3页，共48页。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
第4页，共48页。
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
第5页，共48页。
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和 氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生 物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细 菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧
内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。
2.灭菌： 用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物（包括
芽孢和孢子），而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也 是最重要的技术。
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有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽 孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例
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典例精析 2015·广元期中不同的微生物对营养物质的需要各不相
同。下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
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菌落
细菌的菌落特征因 种而异
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常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min； 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或
80℃下煮15min；
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔
灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源； 4、紫外线消毒；
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液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
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沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
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2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和 氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生 物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细 菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧
内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。
2.灭菌： 用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物（包括
芽孢和孢子），而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也 是最重要的技术。
第9页，共48页。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽 孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例
优质课微生物的实验室培养
末端
烧红
将平板_____放入培养箱中培养。
倒置
思考：1、为什么在操作的第一步要灼烧接种环？
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；
思考：2、每次划线之前都要灼烧接种环？
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
平板划线法的要点
接种前，每次划线前及接种后都要灼烧接种环
接种环灼烧后等其冷却后再进行划线
第二次及其之后的划线操作，总是从上一次划线的末端开始划线
(5)另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气等的要求。
(4).不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、 无机盐——基本成分
（1）按培养基的物理形态分： 液体培养基 半固体培养基 固体培养基
大肠杆菌的纯化培养分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段；实验分为实验组（接种大肠杆菌的培养基）和对照组（未接种大肠杆菌的培养基）。
整个实验过程一定要严格消毒灭菌（无菌操作），否则就无法得到纯化的大肠杆菌，导致实验失败。下面可能出现的实验结果及相应的原因分析
1.如果对照组未长出菌落，实验组长出颜色形状大小基本一致的菌落
（1）.平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。
烧红
将平板_____放入培养箱中培养。
倒置
思考：1、为什么在操作的第一步要灼烧接种环？
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；
思考：2、每次划线之前都要灼烧接种环？
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
平板划线法的要点
接种前，每次划线前及接种后都要灼烧接种环
接种环灼烧后等其冷却后再进行划线
第二次及其之后的划线操作，总是从上一次划线的末端开始划线
(5)另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气等的要求。
(4).不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、 无机盐——基本成分
（1）按培养基的物理形态分： 液体培养基 半固体培养基 固体培养基
大肠杆菌的纯化培养分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段；实验分为实验组（接种大肠杆菌的培养基）和对照组（未接种大肠杆菌的培养基）。
整个实验过程一定要严格消毒灭菌（无菌操作），否则就无法得到纯化的大肠杆菌，导致实验失败。下面可能出现的实验结果及相应的原因分析
1.如果对照组未长出菌落，实验组长出颜色形状大小基本一致的菌落
（1）.平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。
微生物的实验室培养培训课件
环境保护
微生物培养可以监测和评估环境中的微生物群落和生态系统的健康状况。
总结和要点
通过本课件，你了解了微生物培养的目的、实验室安全和规范、基础知识、 步骤、常见问题和解决方案，以及应用领域。掌握这些知识，你将能够在微 生物实验室中进行安全和高效的培养工作。
3
废物处理
正确处理和处置实验室废物，遵守相关的废物管理规定，保护环境和他人的安全。
微生物培养基础知识
1 培养基组成
培养基包括碳源、氮源、矿物盐和生长因子，提供微生物所需的营养物质。
2 选择适当的培养基
根据微生物的特性和生长需求，选择合适的培养基，促进微生物的生长和繁殖。
3 pH控制
微生物对pH敏感，控制培养基的pH值可以影响微生物的生长速度和代谢过程。
生长问题
如果微生物无法生长，检查培养基、温度、氧气和营养物质是否合适。
3
菌落鉴定
利用不同的实验方法和技术，对菌落进行鉴定和分类。
微生物培养的应用领域
医学领域
微生物培养在临床诊断和治疗、疫苗研发和微生物药物生产等方面具有重要应用。
食品和饮料工业
使用微生物培养技术检测食品和饮料中的细菌、真菌和其他致病微生物。
生物医学应用
培养微生物是研究病原菌、 开发新药物和疫苗的基础， 有助于改善人类健康。
生命科学研究
微生物培养提供了研究基 因、遗传学和和规范
1
个人防护措施
戴手套、口罩和防护眼镜，确保实验室操作时的个人安全。
2
消毒和清洁
严格遵守实验室卫生标准，定期消毒工作区和器材，减少微生物污染的风险。
微生物培养的步骤
接种
使用接种环或接种棒，在培养 基上接种微生物。
孵育
微生物培养可以监测和评估环境中的微生物群落和生态系统的健康状况。
总结和要点
通过本课件，你了解了微生物培养的目的、实验室安全和规范、基础知识、 步骤、常见问题和解决方案，以及应用领域。掌握这些知识，你将能够在微 生物实验室中进行安全和高效的培养工作。
3
废物处理
正确处理和处置实验室废物，遵守相关的废物管理规定，保护环境和他人的安全。
微生物培养基础知识
1 培养基组成
培养基包括碳源、氮源、矿物盐和生长因子，提供微生物所需的营养物质。
2 选择适当的培养基
根据微生物的特性和生长需求，选择合适的培养基，促进微生物的生长和繁殖。
3 pH控制
微生物对pH敏感，控制培养基的pH值可以影响微生物的生长速度和代谢过程。
生长问题
如果微生物无法生长，检查培养基、温度、氧气和营养物质是否合适。
3
菌落鉴定
利用不同的实验方法和技术，对菌落进行鉴定和分类。
微生物培养的应用领域
医学领域
微生物培养在临床诊断和治疗、疫苗研发和微生物药物生产等方面具有重要应用。
食品和饮料工业
使用微生物培养技术检测食品和饮料中的细菌、真菌和其他致病微生物。
生物医学应用
培养微生物是研究病原菌、 开发新药物和疫苗的基础， 有助于改善人类健康。
生命科学研究
微生物培养提供了研究基 因、遗传学和和规范
1
个人防护措施
戴手套、口罩和防护眼镜，确保实验室操作时的个人安全。
2
消毒和清洁
严格遵守实验室卫生标准，定期消毒工作区和器材，减少微生物污染的风险。
微生物培养的步骤
接种
使用接种环或接种棒，在培养 基上接种微生物。
孵育
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微生物的恒温培养
菌种的保存
1、临时保藏：接种到固体斜面培养基， 菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法
菌落：
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。
一.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身 被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭 菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
二、实验操作 (1).制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）
操作步骤 1．计算、称量 2．溶化 3．调pH： pH=7.6 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养 基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而 引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过 三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎
8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中， 塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌 锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌 15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干 热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附 近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平 板，无杂菌污染才可用来接种.
倒平板技术
(2)纯化大肠杆菌
平板划线法:
平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划 线稀释而获得单菌落的方法。一般是将混杂在一起 的不同种微生物，通过在分区的平板表面作多次划 线稀释，形成较多的独立分布的细胞，经培养而繁 殖成相互独立的多个单菌落。 通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。 有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故 必须反复分离多次才可得到纯种。