反相高效液相色谱法同时测定咖啡豆中的6种酚酸类化合物_龙文静
超高效液相色谱法测定不同产地白芷中6种香豆素类成分
超高效液相色谱法测定不同产地白芷中6种香豆素类成分何冰倩;关旸;史冬玲;盛振华【摘要】白芷样品粉末(约2.5 g)用25 mL甲醇浸泡过夜后超声提取30 min,加入适量甲醇补足所失质量,提取液经0.22μm有机膜过滤,采用超高效液相色谱法测定滤液中6种香豆素类成分的含量.以Waters ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱为分离柱,用乙腈和水以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,用紫外检测器测定.6种香豆素类成分的质量浓度在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.034～0.091mg·L-1.方法用于白芷样品的分析,加标回收率为93.2％～107％,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.64％～1.7％.对9个不同产地的白芷样品中6种香豆素类成分的含量进行聚类分析和主成分分析,结果表明:聚类分析和主成分分析的结果一致,样品被分为3类.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2019(055)005【总页数】5页(P602-606)【关键词】超高效液相色谱法;聚类分析;主成分分析;香豆素;白芷【作者】何冰倩;关旸;史冬玲;盛振华【作者单位】浙江中医药大学中医药科学院,杭州 310053;浙江中医药大学中医药科学院,杭州 310053;浙江中医药大学中医药科学院,杭州 310053;浙江中医药大学中医药科学院,杭州 310053【正文语种】中文【中图分类】O652.63白芷为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根。
白芷性温、味辛,归胃、大肠、肺经,可解表散寒、祛风止痛、宣通鼻窍、燥湿止带、消肿排脓[1]。
现代药理作用表明白芷中的香豆素类成分具有解热、镇痛、抗炎、扩血管、抗血小板凝集、降血压作用等[2]。
白芷来源广泛,四川遂宁是白芷之乡,其产的白芷也称川白芷。
另有杭白芷,现主要在安徽、江苏、浙江、湖南等地广泛种植。
白芷主要成分为香豆素类、挥发油以及生物碱等[3-4]。
总酚的测定方法
总酚的测定方法总酚是一种常用的化学指标，用于测定样品中酚类化合物的含量。
酚类化合物广泛存在于自然界和工业生产中，其测定方法的准确性和可靠性对于环境保护、药品研发和工业生产具有重要意义。
总酚的测定方法有多种，下面将介绍其中几种常用的方法。
一、分光光度法分光光度法是一种常用的总酚测定方法。
通过测量样品在特定波长下的吸光度，可以计算出其中酚类化合物的浓度。
该方法简便、快速，并且对于不同种类的酚类化合物具有较好的选择性。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用样品中酚类化合物在固定相上的分离特性，通过检测其在流动相中的峰面积或峰高，可以计算出总酚的含量。
高效液相色谱法具有分离效果好、分析速度快的特点，广泛应用于食品、环境和药品等领域。
三、电化学法电化学法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用电极与样品中的酚类化合物发生氧化还原反应，通过测量电流或电势变化，可以计算出总酚的含量。
电化学法具有灵敏度高、选择性好的特点，广泛应用于环境监测和药品分析等领域。
四、发光法发光法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用特定荧光染料与酚类化合物发生反应产生发光信号，通过测量发光强度，可以计算出总酚的含量。
发光法具有灵敏度高、特异性好的特点，广泛应用于生物医学和环境监测等领域。
总酚的测定方法在实际应用中需要考虑多个因素，如样品的性质、测定的目的和要求等。
在选择合适的测定方法时，需要综合考虑这些因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
总酚的测定方法在环境保护、药品研发和工业生产中具有重要意义。
通过准确测定总酚的含量，可以评估样品的污染程度、药品的质量和工业生产的效果，为相关领域的研究和应用提供科学依据。
总酚的测定方法是化学分析领域的重要内容之一，随着科学技术的不断发展和创新，新的测定方法也在不断涌现。
这些方法的应用将进一步推动总酚分析技术的发展，为环境保护、药品研发和工业生产等领域提供更加精确和可靠的数据支持。
高效液相色谱法测定巧克力中的可可碱和咖啡因
高效液相色谱法测定巧克力中的可可碱和咖啡因刘平年【摘要】使用Zobarx Edipse XDB C18柱,以水-乙腈(体积比为88:12)为流动相,选择测定波长为278 nm,应用高效液相色谱法测定巧克力中的可可碱和咖啡因.可可碱和咖啡因的平均回收率分别为96.7%和97.4%,RSD分别为1.05%和2.16%(n=5),检出限均为0.005g/kg.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2005(014)002【总页数】2页(P30-31)【关键词】高效液相色谱法;可可碱;咖啡因;巧克力;氧化镁;测定【作者】刘平年【作者单位】上海市食品研究所,上海,200235【正文语种】中文【中图分类】O6可可碱和咖啡因均属于嘌呤碱[1]，其含量是评定巧克力品质的重要指标。
由于巧克力中含有大量脂肪、蛋白质等物质，基质非常复杂，要去除杂质，将可可碱和咖啡因从巧克力中提取出来并测定其含量较为困难。
茶叶、可可粉中可可碱和咖啡因的测定已有报道[2～3]，用高效液相色谱法测定巧克力中的可可碱和咖啡因未见报道。
笔者利用氧化镁吸附巧克力中的杂质，释放可可碱和咖啡因，应用高效液相色谱法测定了巧克力中的可可碱和咖啡因，取得较好的结果。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂高效液相色谱仪：Agilent 1100型，附带二极管阵列检测器(DAD)：美国安捷伦公司；咖啡因标准品：纯度为99.5%。
北京试剂厂；可可碱标准品：纯度为99.5%。
美国Chemsiver公司；咖啡因标准储备液：1 000 μg/mL。
准确称取0.100 0 g咖啡因标准品，用甲醇溶解并定容至100 mL；可可碱标准储备液：1 000 μg/mL。
准确称取0.100 0 g可可碱标准品，用少量2 g/L氢氧化钠溶液溶解后，再用甲醇定容至100 mL；甲醇：HPLC级，美国天地公司；乙腈：HPLC级，美国天地公司；氧化镁：分析纯；实验用水为去离子水。
1.2 色谱条件色谱柱：Zorbax Eclipse XDB C18柱(150 mm×4.6 mm i.d.， 5 μm，美国安捷伦公司)；流动相：水-乙腈(体积比为88∶12)，流速为1 mL/min；柱温：30℃；检测波长：278 nm，带宽为30 nm；参比波长：360 nm，带宽为100 nm；进样量：20 μL。
反相高效液相色谱法同时测定脉络宁注射液中6种酚酸类成分的含量
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｉ ｈ ｎ ｉ Ａｃ ｓｉ ｉ ｏ ｉｇＩｊｃｉｎ ｂ Ｐ ＨＰ Ｃ Ｈ Ｎ ｕ ， Ｉ ｉ ｇ ｅｅｍｉａｉ ｆ ｘＰ ｅ ｄｃ ｉ ｎＭａｌ ｎｎ ｎｅｔ ｙＲ — Ｌ Ｚ Ａ ＧＨ ｉ Ｌ ａ ｏ Ｓ ｄ ｕ ｏ Ｘ ｎ，
ＺＨＯＵ ｏ ｇ ｙ ｎ Ｈ ｎ －ａｚ
・
５ ・ ４
Ｃ ｎｅ ｅ ｏ ｒ ａｌ ｆ ｎｆ ｒ ａｔｉ ｎ ｎ Ｃ ｈｉ ｓ Ｊ ｕ ｎ ｏ Ｉ ｏ ｍ ｏ ｏ Ｔ Ｍ
Ｆ ． ０ Ｖｏ１ ６ ｅｂ ２０ ９ ．１ Ｎｏ ２ ．
反相高效液相色谱法 同时测定脉络宁注射液 中 ６种酚 酸类 成 分 的含 量
张 蕙 李 祥 周红燕 徐向阳 ２陈伟奇 ， ， ， ，
，
ｅ ａ ．ａｊ ｇ ｔ ｌ Ｎ ｎｉ ｎ
ｏ Ｃ ， ａ ｉ １０ ￣Ｃ ｉ ￣２ ｅｈｏｏｙＣ ｎ ｒｆＪｎｎ ｈｒ ａｅｔａ ｆＴ Ｍ Ｎ ｎｎ ２０ ４ ｈ ａ ｃｎｌ ｅｔ ｉｉ Ｐ ａｍ ｃｕｃｌ ｊｇ ｎ Ｔ ｇ ｅ ｏ ｌｇ ｉ
Ｃ ｍ ａｙＮ ｎｉ １ ０ ９ Ｃ ｉ ） ｏ ｐ ｎ， ａｊｎ ０ ０ ， ｈｎ ｇ２ ａ Ａｂｔａｔ ｓ ｃ ：０ｂｅｔ ｅ Ｔ ｓａ ｌ ｈ ａ ｍｅｈ ｄ ｆｒ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｔｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ｆｓ ｈ ｎ ｉ ｃｄ ｎ ｒ ｊｃｉ ｏ ｅ ｔ ｂｉ ｔ ｏ ｏ ｅｅ ｍｉａ ｏ ｈ ｏ ｔｎ ｓ ｏ ｉ ｐ ｅ ｄｃ ａ ｉｓ ｉ ｖ ｓ ｉ ｘ
柱温 ：２ ５℃；进样 量：２ Ｌ ０ｇ 。结果 新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、３５二咖啡酰奎宁酸、３４二咖啡酰 ，一 ，一
奎 宁酸 的线 性 范 围分 别为 ００ ９ ～０ ５ ４ （ ． １ ０ ． ４ ０ ８ ，＝０ ９ ９ ） ０ ０４０ ～１２ ３２ｇ （ ． ９ 、 ． ２ ６ ． ０ ｇ ，＝１ 、０ ０ １ ６～０ ５２８ ９ ） ． １ ０ ． ５
高效液相色谱法测定酚类物质的探讨
[1] 周 晓 珍,肖 熳.高 效 液 相 色 谱 法 测 定 水 中 六 种酚 类 化 合 物 [J].南 昌 高 专 学 报,2005,1 (56):103-105.
[2] 刘桂明,邓义敏.水 中 苯 酚、五 氯 酚、2,4,6三氯酚 的 高 效 液 相 色 谱 法 [J].云 南 环 境 科 学 ,2005,4(19):59-61.
方法二:流动相为70% 乙 腈—1% (v/v)乙 酸 水 溶液;流速为1ml/min;柱温 箱 温 度 为 35℃;进 样 量 为 10μL,测 定 波 长 在 254nm。 2.2.2 定性标准溶液的配制
本项目旨 在 确 定 碎 煤 加 压 气 化 酚 氨 回 收 水 中 酚类的检验 方 法,因 此,本 实 验 选 择 了 样 品 中 可 能 存在的 20 中 酚 类 物 质,利 用 标 准 物 质 进 行 定 性 分析。
在反相色谱分 析 体 系 中,待 测 的 酚 类 物 质 在 反 向固定 相 和 流 动 相 之 间 进 行 一 定 比 例 的 分 配,此 时,可以通 过 改 变 流 动 相 的 种 类 以 及 组 成 比 例,或 者是流速,来改变或 者 控 制 待 测 物 质 在 色 谱 柱 上 的 保留时间,以达 到 待 测 物 质 有 效 分 离 的 目 的。 通 过 查询文献 发 [2] 现 多 数 采 用 甲 醇 或 者 乙 腈 作 为 流 动 相,而且在流 动 相 中 加 入 1% 的 冰 乙 酸 能 够 有 效 的 改善目 标 物 峰 形 并 且 降 低 峰 宽,获 得 更 好 的 分 离 度。本文 中 选 用 两 种 流 动 相,一 种 是 70% 甲 醇— 1%(v/v)乙酸水溶液,另 一 种 是 70% 乙 腈—1%(v/ v)乙 酸 水 溶 液 。 2.3.2.3 酚类化合物色谱分析结果
高效液相色谱法测定保健品中的6种水溶性维生素及咖啡因
色
谱
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高效液相色谱法测定保健品中的 # 种水溶性维生素及咖啡因
吴淑君， 0 庄志辉， 0 朱孟丽， 0 徐小艳
（ 广州市农业标准与监测中心，广东 广州 $’"&"+ ） 关键词： 高效液相色谱法 （ :;</ ） ； 保健品 （ =2"&>= ?%%@ ） ； 水溶性维生素 （ 5">2A0B%&6C&2 D4>"*48B ） ； 咖啡因 （ 9"??248 ） 中图分类号： E#$+ 0 0 文献标识码： . 0 0 文章编号： ’""" 0+-’& （ !""# ） "& 0"&’( 0"’ 0 0 栏目类别： 技术与应用
表 ! " 方法的对照实验结果 （ ! ) $） 名称 $ .’ $ .! $ .# 烟酸 烟酰胺 $/ 咖啡因 国家标准方法测得的含量 （ ) *+ ) ,+ ） ’* ’(!, ’& . ’(", !% &"’, -# %’(, &" . !%!, -! !* ’+%, "# . ’(-, &% &"-, ’+ %’’, #" . !$’, -’ &* !"", &# . !"’, !# &’’, #! %!%, &. !$#, %"
反相高效液相色谱法同时测定化妆品中7种萘二酚类物质
酚 ） 于 文莲 等 采 用 超 高 效 液 相 色谱 一 联 质谱 法 ； 串
测 定 了 染 发 剂 中 ７种 酚 类 化 合 物 ， 中 包 括 １ ７萘 其 ，－
１ ４ ２ 粉 类 试 样 准 确 称 取 ０ ５ ｇ 精 确 至 ０ ０ １ ． ． ． （ ．０ ｇ 试 样 ， ｌ ） 于 ０ ｍＬ 具 塞 比 色 管 中 ， 入 ２ ｍＬ９ ％ 加 ５ （／ ） 醇 ， 漩 涡 振 荡 器 上振 荡 混 匀 后 ， 加 入 ２ ｖｖ 乙 于 再 ｍＬ０ １ （ ／ ） 酸 溶 液 ， 声 提 取 １ ｎ 冷 却 至 ． ％ ｖ ｖ 乙 超 ５ｍｉ ，
第 ６期
陈立 坚 ， ： 等 反相 高效 液相 色谱 法 同时测定 化妆 品 中 ７种萘 二酚 类物 质
‘３ ６ １・
萘 二酚类 物 质 有 多 种 异 构体 ， 是合 成媒 染 偶 氮 染料 的 中问体 ， 亦可 用于 制备 偶氮 染料 等 ， 涉及 的下
游 产 品 众 多 ， 常 用 的 中 间 原 料 。 该 类 物 质 具 有 刺 是
１ ４ １ 膏 霜 类 、 液 类 和 水 类 试 样 准 确 称 取 ０ ５ ． ． 乳 ． ｇ 精 确 至 ０ ０ １ｇ 试 样 ， １ （ ． ０ ） 于 ０ ｍＬ具 塞 比 色 管 中 ，
加 入 ４ｍＬ９ ％ （ ／ ） 醇 ， 漩 涡 振 荡 器 上 振 荡 混 ５ ｖｖ 乙 于
购 自 Ｓｇ — ｌｒ ｈ公 司 ； ｉｍａＡ ｄｉ ｃ 甲醇和 冰醋 酸 （ 谱 纯 ） 色 ，
９ ％ 乙 醇 （ 析 纯 ） 去 离 子 水 （ ８ ０Ｍｎ ・ ｍ ） ５ 分 ， １ ． ｃ 。
１ ２ 标 准 溶 液 的 配 制 ．
反相高效液相色谱法同时测定香菊胶囊中绿原酸和咖啡酸含量
反相高效液相色谱法同时测定香菊胶囊中绿原酸和咖啡酸含量孙菲;孙欣;金荣【摘要】目的：建立同时测定香菊胶囊中绿原酸和咖啡酸含量的反相高效液相色谱法。
方法色谱柱采用Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm ×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-甲醇-0.2%磷酸溶液(线性梯度洗脱)，检测波长328 nm，流速1.0 mL/min，进样量20μL，柱温30℃。
结果绿原酸和咖啡酸进样量分别在2.034×10-2~5.085×10-1μg ( r=0.9999，n=7)和2.218×10-2~5.545×10-1μg ( r=0.9999，n=7）时与峰面积线性关系良好，加样回收率分别为98.83%和98.72%( RSD分别为0.86%，0.88%，n=6)。
结论该法操作快速、简便、准确、结果可靠，可用于香菊胶囊的质量控制。
%Objective To establish an RP-HPLC method for simultaneous content determination of chlorogenic acid and caffeic acid in Xiangju Capsules. Methods The Agilent Zobax SB-C18 colume ( 250 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) was used; the mobile phase was acetoni-trile-methanol-0. 2%H3PO4 by gradient elution and the detection wavelength was 328 nm;the flow rate was 1. 0 mL/min, the injec-tion volume was 20 μL, and the column temperature was 30 ℃. Results The linear response of chlorogenic acid ranged from 2. 034 × 10-2-5. 085 × 10-1μg ( r=0. 999 9,n=7 ) , and the linear response of caffeic acid ranged from 2. 218 × 10-2-5. 545 × 10-1μg ( r=0. 999 9,n=7 );the average recovery rate of chlorogenic acid was 98. 83% ( RSD=0. 86%,n=6 ) , and the average recovery of caffeic acid was 98. 72% ( RSD=0. 88%,n=6 ) . Conclusion The method is convenient, quick and accurate, and can be used for the quality control of Xiangju Capsules.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2016(025)009【总页数】3页(P65-67)【关键词】香菊胶囊;含量测定;绿原酸;咖啡酸;高效液相色谱法【作者】孙菲;孙欣;金荣【作者单位】黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西 158100;黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西 158100;黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西 158100【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0香菊胶囊由化香树果序（除去种子）、夏枯草、野菊花、黄芪、辛夷、防风、白芷、甘草、川芎9味中药组方，具有辛散祛风、清热通窍之功效[1]，用于急、慢性鼻窦炎及鼻炎的疗效显著[2]。
反相高效液相色谱法同时测定功能饮料中六种B族维生素
反相高效液相色谱法同时测定功能饮料中六种B族维生素徐烨;顾鑫荣;王瑞菲;曹轶男【摘要】提出了反相高效液相色谱法同时测定功能饮料中6种B族维生素,维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、烟酰胺和泛酸的方法.对色谱分离条件做了试验并予以优化.以Kromasil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,用甲醇(A)和0.3%(体积分数)三乙胺溶液(B)(磷酸调节pH至3.5)以不同比例混合进行梯度淋洗,选择在200 nm波长处测定泛酸,在270 nm波长处测定其他5种B族维生素.6种B族维生素的质量浓度在0.5～100 mg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系.标准加入回收率在97.8%～106.2%之间,相对标准偏差(n=5)在0.5%～2.3%之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)005【总页数】4页(P497-499,502)【关键词】反相高效液相色谱;功能饮料;B族维生素【作者】徐烨;顾鑫荣;王瑞菲;曹轶男【作者单位】东北大学理学院,沈阳,110004;东北大学理学院,沈阳,110004;东北大学理学院,沈阳,110004;东北大学理学院,沈阳,110004【正文语种】中文【中图分类】O657.62功能饮料是近年来出现的新型饮品,由于许多功能饮料中添加了B族维生素,使其越来越受到人们的青睐。
B族维生素是水溶性维生素中重要的一类,与酶类一起参与肌体的新陈代谢,能使肌体的机能得到有效的调节,当人体中缺乏B族维生素时,可导致多种疾病的产生。
由于人体自身无法合成这些化合物,适当饮用功能饮料可给予一定的补充。
功能饮料中维生素的含量是影响其功能的主要因素,因此建立功能饮料中B族维生素的测定方法是非常必要的。
目前B族维生素的测定方法有电化学法[1]、微生物法[2]、荧光法[3]、光度法[4]和高效液相色谱法[59](HPLC)。
由于药物中B族维生素的含量较高,而食品中B族维生素的含量较低,要求测定方法的检出限低。
高效液相色谱法同时测定苹果汁中6种酚类物质
（ 青岛农业大学， 青岛２ ６ １０） ６ 摘 要 建立了同时测定苹果汁中儿茶素、 绿原酸、 咖啡酸、 表儿茶素、 香豆酸和阿魏酸６ 种酚类物质的反相
高 效 液 相 色 谱 方 法， 并 对 酚 类 物 质 的 稳 定 性 进 行了 探 讨 。 选 用Ｅ ｃ ｈ ｓ Ｐ ｅ ｘ Ｄ Ｂ 一 Ｃ ： ： 色 谱 柱（ 巧 ｏ ｍ ｍ 、 ４ ． ６ ｍ ｍｉ ．
表１ ６ 种酚类物质的稳定性实验 Ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ＩＳ ｔ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ ， ｉ ｘ Ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｌ ｉ ｃ ｃ ｏ ｍ ｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｓ ｕ ｎ ｄ ｅ ｒ ｄ ｉ ｅｒ ｆ ｅ ｎ ｔ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ
贮存条件
Ｒｅ ｓ ｅ ｖｅ ｒ ｄ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ
回 到初始状态。 柱温： ０℃； ３ 流速： １ ． ｏ ｍ Ｕｍ ｎ ｉ ； 检测波长： ２ ０ｎ ８ ｍ ； 进样量： ０林 ２ Ｌ 。
２ ． ３ 标准溶液和样品溶液的制备
２ 叨７ 一卜 ７ 收稿； １ ２ 以 力 ４一 ０ － ２ 接受 １ 本文系山东省科技厅（ Ｎ ｏ ． 印２ ０ ）和国家农业科技成果转化资金（ ５ Ｎ ｏ６ ２ ０ ５ ３） ２ 资助项目
关键词 高效液相色谱， 苹果汁， 酚类物质， 稳定性
１ 引 言
除鲜食外， 苹果还可加工成罐头、 果汁及浓缩汁。 但由于苹果酚类物质参与的酶促反应及其自 身的
氧化聚合， 常常造成果汁的 褐变、 浑浊， 影响果汁的营养、 风味和感官［ ’ ， ， 〕 。 另外， 苹果酚类物质也是优
良的食品抗氧化剂和保鲜剂， 同时还具有多种生理活性， 如预防心脑血管疾病， 降低血脂， 降血压， 预防
反相高效液相色谱法同时测定咖啡豆中的6种酚酸类化合物
及 其 制品 的质量 控 制 、 源 合 理 开发 利 用 具 有 重要 资
的指 导意 义 。
再分 别精 确 吸取 咖啡 酸 ０ ０ 、－ Ｑ ． ５ｍＬ ． １ｍＬ ３Ｃ Ａ ０ ０ 、
尼 酸 （ ａቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｅ ｙｑ ｉｉ ａ ｉ ，Ｃ Ａ） 阿 魏 酰 奎 尼 酸 ｃｆ ｏ ｌｕｎｃ ｃｄ Ｑ 、
５Ｃ Ａ、 一 Ｑ 咖啡 酸对照 品 （ 国药 品生 物制 品检 定 中 所 ） ３Ｃ Ａ、 ， 一ｉＱ ４ ５ｄＣ Ａ 对 照 品 （ 都 ， － Ｑ ３ ５ｄＣ Ａ、 ， －ｉＱ 成 普瑞法 科 技 开 发 有 限公 司 ） ４Ｃ Ａ 对 照 品 （ 都 ， －Ｑ 成
４Ｃ 一 ＱＡ ． ５ ０ ０ ｍＩ、 一 ５ ＣＱＡ ． ｍＬ、 ５ ｄ Ｃ ０ １ ３， 一 ｉ ＱＡ ． ５ ０ ０
ｍＬ、 ，－ｉ Ｑ ．４ ｍＬ充 分 混 匀 ， 混 合 对 照 品 ４ ５ｄＣ Ａ ０ ０ 得
Ｈ
贮 备液 ， 组 分 相 应 质 量 浓 度 依 次 为 ： ． ４ ｍｇ Ｌ、 各 ３ ４ ／
（ｅｕｏ ｌｕｎｃａ ｉ ， Ｑ 和二 咖啡 酰 奎尼 酸 （ ｉ ｆｒｌｙｑ ｉｉ ｃｄ Ｆ Ａ） ｄ— ｃ ｆ ｏ ｌｕｎｃａ ｉ ， ｉ Ｑ Ｌ４。现 代药 理学 研究 ａｆ ｙｑ ｉｉ ｃｄ ｄＣ Ａ） ｅ ３Ｊ ，
表 明绿 原酸 类化 合 物 具 有抗 氧化 性 、 病 毒 、 菌 、 抗 抑
（ ａｆｉ ａ ｉ） ３咖 啡 酰 奎 尼 酸 （ 一 —ａ ｅ ｙｑ ｉ— ｃ ｆ ｃ ｃｄ 、 － ｅ ３ Ｏ ｃ ｆ ｏ ｌｕｎ ｉ ｃｄ ３Ｃ Ａ） ４ 咖 啡 酰 奎 尼 酸 （ 一 ｃ ｆ ｃ ｉ， －Ｑ ａ 、 － ４Ｏ—ａ－ ｆｏ ｌｕｎｃ ａ ｉ ，４ Ｃ Ａ） ５咖 啡 酰 奎 尼 酸 （ — 一 ｅ ｙｑ ｉｉ ｃｄ 一 Ｑ 、 － ５０
反相高效液相色谱法测定不同煎煮时间夏枯草中丹参素咖啡酸迷迭香酸含量
反相高效液相色谱法测定不同煎煮时间夏枯草中丹参素咖啡酸迷
迭香酸含量
夏枯草是一种具有丰富药用价值的植物，其中含有丹参素、咖啡酸、迷迭香酸等多种
活性成分。
这些活性成分对人体具有重要的药理作用，如抗氧化、抗炎、抗菌等，因此被
广泛应用于药物和保健品的制备中。
不同煎煮时间对夏枯草中丹参素、咖啡酸和迷迭香酸含量的影响一直是研究者关注的
焦点之一。
为了准确测定不同煎煮时间夏枯草中丹参素、咖啡酸和迷迭香酸的含量，科研
人员采用反相高效液相色谱法进行分析和测定，以期为夏枯草的药用价值和应用提供科学
依据。
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）是一种常用的色谱分析方法，具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，被广泛用于药物、化妆品和食品等领域。
该方法通过溶液在以
亲水性固定相填充的色谱柱中运动的速度不同来分离各种成分，再通过检测器检测各组分，从而实现对目标成分的定量分析测定。
在进行反相高效液相色谱法测定夏枯草中丹参素、咖啡酸和迷迭香酸含量的过程中，
首先需要准备供试样品的提取液，然后通过合适的色谱柱进行分离，最后通过检测器对各
组分进行定量测定。
为了保证测定结果的准确性和可靠性，需要严格控制实验条件，包括
色谱柱类型、流动相条件、检测器波长等参数的选择和控制，以及样品提取方法的优化
等。
通过对夏枯草样品进行反相高效液相色谱法分析测定，可以得到不同煎煮时间条件下
夏枯草中丹参素、咖啡酸和迷迭香酸的含量变化规律，为指导夏枯草的合理应用提供科学
依据。
这也有助于优化夏枯草的加工方法，保留夏枯草中有益成分的同时减少不良成分的
生成，从而提高夏枯草的药用价值和应用效果。
HPLC法测定甜叶菊中6个酚酸类成分含量
HPLC法测定甜叶菊中6个酚酸类成分含量李华丽，袁君，郁荣华，朱红，柴姝雯（上海德诺产品检测有限公司，上海200436）摘要 目的：建立高效液相色谱法同时测定甜叶菊叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C6个酚酸类成分。
方法：采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱，柱温30 ℃，检测波长327 nm。
结果：6个酚酸质量浓度在10~196 μg·mL-1范围内线性关系良好；6个酚酸的加样回收率分别为98.3%、95.2%、100.1%、97.3%、95.6%和96.1%，加样回收率、精密度、重复性、稳定性均符合有关规定；9批样品中6个酚酸类成分的含量分别为新绿原酸0.062%~0.725%，绿原酸0.277%~2.450%，隐绿原酸0.096%~0.694%，异绿原酸B 0.046%~0.867%，异绿原酸A0.157%~0.772%，异绿原酸C 0.135%~1.821%，6个酚酸之和在1.182%~6.668%。
结论：该方法可为甜叶菊进一步开发利用提供质量控制方法。
关键词：甜叶菊；甜菊；糖草；新绿原酸；绿原酸；隐绿原酸；异绿原酸；咖啡酰奎宁酸；酚酸；高相液相色谱中图分类号：R 917 文献标识码：A 文章编号：0254-1793（2017）02-0219-05doi：10.16155/j.0254-1793.2017.02.05Determination of six phenolic acids in the leaves of Stevia rebaudianaBertoni by HPLCLI Hua-li， YUAN Jun， YU Rong-hua， ZHU Hong， CHAI Shu-wen（Shanghai Denuo Product Testing Service Co.， LTD.， Shanghai 200436， China）Abstract Objective：To establish an HPLC method for simultaneous determination of six phenolic acids including 5-caffeoylquinic acid， chlorogenic acid， 4-caffeoylquinic acid， 3，4-dicaffeoylquinic acid， 3，5-dicaffeoylquinic acid and 4，5-dicaffeoylquinic acid in the leaves of Stevia rebaudiana Bertoni．Methods：The analyses were performed on a C18 column （4.6 mm×250 mm， 5μm） with the gradient elution of acetonitrile-0.1% formic acid water at a flow rate of 1.0 mL·min-1．The detection wavelength was set at 327 nm and the column temperature was set at 30 ℃．Results：The six phenolic acids have good linearity in the concentration range of 10-196 μg·mL-1．The average recoveries of the six compounds were 98.3%， 95.2%， 100.1%， 97.3%， 95.6% and 96.1%， respectively．The contents of six phenolic acids in 9 samples were 0.062%-0.725% （5-caffeoylquinic acid）， 0.277%-2.450% （chlorogenic acid），0.096%-0.694% （4-caffeoylquinic acid）， 0.046%-0.867% （3，4-dicaffeoylquinic acid）， 0.157%-0.772% （3，5-dicaffeoylquinic acid） and 0.135%-1.821% （4，5-dicaffeoylquinic acid）， respectively．The sum of the six * 第一作者 Tel：（021）36322100；E-mail：344056815@phenolic acids is 1.182%-6.668%．Conclusion：The HPLC method is helpful for the quality control of the leaves of Stevia rebaudiana Bertoni．Keywords：Stevia rebaudiana Bertoni；Tianju；Tangcao；neochlorogenic acid；chlorogenic acid；cryptochlorogenic acid； isochlorogenic acid； caffeoylquinic acid； phenolic acid； HPLC甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）别名甜菊、糖草，属菊科（Composite）斯台比亚属（Stevia），原产地在南美亚热带地区，1977年我国引进栽培获得成功。
反相高效液相色谱法同时测定脉络宁注射液中6种酚酸类成分的含量
反相高效液相色谱法同时测定脉络宁注射液中6种酚酸类成分的含量张蕙;李祥;周红燕;徐向阳;陈伟奇【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2009(016)002【摘要】目的建立用反相高效液相色谱法同时测定脉络宁注射液中6种酚酸含量的方法 .方法采用Kromasil-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:0.0 mL/min;紫外检测波长:327 nm;柱温:25℃;进样量:20 μL.结果新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸的线性范围分别为0.010 90～0.544 8 μg(r=0.999 9)、0.024 06～1.203 2 μg(r=1)、0.011 06～0.552 8 μg(r=1)、0.015 94～0.796 8 μg(r=1)、0.009 104～0.455 2 μg(r=1)、0.010 37～0.518 4 μg(r=1),回收率分别为101.06%、100.22%、101.54%、99.42%、100.21%、101.65%.结论本法灵敏简便,准确可靠,可作为脉络宁注射液中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸含量同时测定的方法 .【总页数】3页(P54-56)【作者】张蕙;李祥;周红燕;徐向阳;陈伟奇【作者单位】南京中医药大学,江苏,南京,210046;南京中医药大学,江苏,南京,210046;金陵药业股份有限公司技术中心,江苏,南京,210009;金陵药业股份有限公司技术中心,江苏,南京,210009;金陵药业股份有限公司技术中心,江苏,南京,210009【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.RP-HPLC法同时测定枸杞中4种酚酸类成分的含量 [J], 刘少静;刘萌;杨黎彬2.高效液相色谱法测定追风伞提取物中5种酚酸类成分含量 [J], 陈婷;徐加兵3.HPLC法测定大果山楂果实中八种酚酸类成分的含量 [J], 孙博;霍华珍;蔡爱华;谢运昌;李海云;李典鹏4.一测多评法测定壮药三加皮中5个酚酸类成分的含量 [J], 郭勇秀;蒋林;农毅清;李芳婵;随家宁;魏博伟5.反相高效液相色谱法测定脉络宁注射液中肉桂酸的含量 [J], 余明艳;汪水娟;汪勤;夏仲豪;陈颢因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定咖啡因全文编辑修改
精选全文完整版可编辑修改实验 7 高效液相色谱法测定咖啡中的咖啡因含量一、目的要求1．理解反相色谱的原理和应用。
2．掌握标准曲线定量法。
二、原理高效液相色谱的分离原理：见理论课教材高效液相色谱的定性与定量：见理论课教材高效液相色谱的仪器：见理论课教材咖啡因又称咖啡碱，属黄嘌呤衍生物，化学名称为1, 3, 7-三甲基黄嘌呤，可由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱。
它能兴奋大脑皮层，使人精神兴奋。
咖啡中含咖啡因约为1.2%~1.8%，茶叶中约含2.0%~4.7%。
可乐饮料、APC药片等中含咖啡因。
其分子式为C8H10O2N4，结构式为：采用C-18柱反相液相色谱法进行分离，以紫外检测器进行检测，以咖啡因标准系列溶液外标法定量，可测定各类食品、药品中咖啡因的含量。
但实际样品成分往往比较复杂，如果直接进样，虽然操作简单，但会影响色谱柱寿命。
根据咖啡因的极性和酸碱性，采取萃取分离的方法进行前处理，可有效消除共存的干扰物，对提高定量准确度和保护色谱柱都有较大的益处。
三、仪器与试剂仪器试剂1．甲醇（色谱纯）；二次蒸馏水；氯仿(A.R.)；6 mol•L-1盐酸；饱和碳酸钠溶液；咖啡因(A.R.)；咖啡豆（磨成粉状）或速溶咖啡。
2．1000 mg•L-1咖啡因标准贮备溶液；将咖啡因在110℃下烘干1 h。
准确称取0.1000 g咖啡因，用氯仿溶解，定量转移至100 mL容量瓶中，用氯仿稀释至刻度。
四、实验步骤1．按操作说明书使色谱仪正常工作，色谱条件为：柱温：室温；流动相：甲醇/水= 60/40；流动相流量：1.0 mL•min-1；检测波长：275 nm 2．咖啡因标准系列溶液：浓度为10.0~100 mg•L-1。
3．样品处理：准确称取0.25 g咖啡粉试样，用30 mL蒸馏水煮沸10 min，冷却后，将上层清夜转移至100 mL容量瓶中，并按此步骤再重复二次，最后用蒸馏水定容至刻度。
将上述样品溶液分别进行干过滤（即用干漏斗、干滤纸过滤），收集25.0mL滤液。
高效液相色谱法同时测定苹果汁中6种酚类物质
高效液相色谱法同时测定苹果汁中6种酚类物质吕海涛;孙海峰;曲宝涵;戴洪义【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2007(35)10【摘要】建立了同时测定苹果汁中儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸和阿魏酸6种酚类物质的反相高效液相色谱方法,并对酚类物质的稳定性进行了探讨.选用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d,5 μm),以甲醇-1%乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱.柱温30℃,流速1.0 mL/min,在280 nm波长下进行检测.本方法样品处理简单,具有良好的重现性和线性,相关性系数均达到0.9999,儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素和香豆酸和阿魏酸的回收率分别为102%～103%、94.3%～101%、102%～104%、98.4%～101%、96.2%～99.8%和102%～104%;检出限分别为20、30、10、20、7和15μg/L(S/N=3).【总页数】5页(P1425-1429)【作者】吕海涛;孙海峰;曲宝涵;戴洪义【作者单位】青岛农业大学,青岛,266109;青岛农业大学,青岛,266109;青岛农业大学,青岛,266109;青岛农业大学,青岛,266109【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.高效液相色谱法测定浓缩苹果汁中棒曲霉毒素 [J], 李卫华;杜利君;宋欢2.高效液相色谱法测定苹果汁中8种酚类化合物 [J], 吕海涛;邓锐3.反相高效液相色谱法测定浓缩苹果汁中的10种酚类物质 [J], 孔祥虹;何强;郝少莉4.超高效液相色谱法测定浓缩苹果汁及其加工用树脂中苯乙烯和二乙烯苯残留量[J], 付兴隆;乐爱山;张磊;姚秉华;何强5.超高效液相色谱法测定进出口浓缩苹果汁中的吡虫啉残留量 [J], 刘温喜;孔祥虹;郝少莉;仇农学因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
离子对反相高效液相色谱同时测定饮品中V_(pp)、V_(B6)及咖啡因含量
离子对反相高效液相色谱同时测定饮品中V_(pp)、V_(B6)及
咖啡因含量
马永建;冯芳
【期刊名称】《江苏预防医学》
【年(卷),期】2000(11)2
【摘要】建立了离子对反相高效液相色谱（HPLC）同时测定饮品中Vpp、VB6和咖啡因的方法。
以庚烷磺酸钠为离子对试剂，甲醇∶水2∶8（1％冰乙酸）为流动相。
Vpp、VB6及咖啡因的线性范围分别是40～200μg／ml、8～40μg／ml 及50～250μg／ml。
回收率分别为98．50～101．8％、99．60～104．0％及99．30～102．5％。
该法可用于饮品中Vpp、VB6及咖啡因的含量测定，对3批样品的含量及稳定性进行了测定。
结果表明该法简便、快速、准确、选择性好。
【总页数】2页(P7-8)
【关键词】咖啡因;饮料;HPOLC;烟酰胺;维生素B6
【作者】马永建;冯芳
【作者单位】江苏省卫生防疫站;中国药科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R155.59
【相关文献】
1.反相离子对高效液相色谱波长切换法测定复方苦参水杨酸散中4个成分的含量[J], 张申亮;聂黎行
2.反相高效液相色谱和超高效液相色谱法测定饮料中咖啡因含量的比较研究 [J], 曾诚;赵文惠
3.反相高效液相色谱法分离测定复合维生素片剂中V_(B1),V_(B2),V_(B6)和烟酰胺[J], 杜晓光
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十一种酚类化合物的高效液相色谱测定方法研究的开题报告
十一种酚类化合物的高效液相色谱测定方法研究的开题报
告
题目：十一种酚类化合物的高效液相色谱测定方法研究
一、研究背景
酚类化合物是一类重要的化工原材料，广泛应用于化工、医药、食品等领域。
然而，
酚类化合物具有毒性和对环境的潜在危害，因此其检测和监测显得十分必要。
高效液
相色谱（HPLC）是酚类化合物检测的一种重要方法，其具有高灵敏度、高分辨率、操作简便等优点，因此成为了酚类化合物测定的首选方法。
二、研究目的
本研究旨在建立一种高效液相色谱测定方法，能够同时测定常见的十一种酚类化合物，包括间苯二酚、间苯三酚、邻苯二酚、邻苯三酚、水杨酸、对羟基苯甲酸、对苯二酚、对苯二甲酚、对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸、4-羟基苯甲酸。
三、研究内容与方法
1. 研究内容
（1）建立十一种酚类化合物的HPLC测定方法；
（2）对建立的方法进行验证，包括准确度、精密度、线性范围等；
（3）应用建立的方法测定不同样品中十一种酚类化合物的含量。
2. 研究方法
（1）选取适当的色谱柱、流动相，优化HPLC测定条件；
（2）制备标准品溶液，建立十一种酚类化合物的标准曲线；
（3）通过回归方程、相关系数等参数进行方法验证；
（4）应用建立的方法测定不同样品中十一种酚类化合物的含量。
四、研究意义及预期成果
建立一种同时测定十一种酚类化合物的HPLC测定方法，可为相关行业的监管和检验
提供技术支持。
同时，该方法的建立还有利于促进酚类化合物的环境保护和安全生产。
预期成果为建立的高效液相色谱测定方法的优化及其在不同样品中十一种酚类化合物的含量测定应用。
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2011年5月Vol．29No ．5May 2011Chinese Journal of Chromatography439 442研究论文DOI ：10．3724/SP．J．1123．2011．00439*通讯联系人：张盛，博士，副教授，主要研究方向为植物功能成分化学．E-mail ：jason081124@hotmail．com ．刘仲华，博士生导师，教授，主要研究方向为植物功能成分化学．E-mail ：larkin-liu@163．com ．基金项目：教育部创新团队计划（No ．20091101）．收稿日期：2011-01-05反相高效液相色谱法同时测定咖啡豆中的6种酚酸类化合物龙文静1，张盛1，3*，袁玲2，李银花1，2，刘仲华1，2*（1．国家植物功能成分利用工程技术研究中心，湖南长沙410128；2．湖南农业大学茶学教育部重点实验室，湖南长沙410128；3．湖南农业大学园艺园林学院植物资源工程系，湖南长沙410128）摘要：建立了同时测定咖啡豆中6种酚酸类化合物（咖啡酸、3-咖啡酰奎尼酸、4-咖啡酰奎尼酸、5-咖啡酰奎尼酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸、4，5-二咖啡酰奎尼酸）的反相高效液相色谱测定方法。
采用Kromasil C 18柱（200mm ˑ4.6mm ，5μm ），以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，二极管阵列检测器检测，45min 内可对6种目标物进行同时检测，且各化合物都能达到基线分离。
经测定，样品中6种酚酸类化合物的加标回收率为90.76% 104.73%，相对标准偏差为0.7% 3.9%。
该法简便、快速、灵敏度高，适用于咖啡豆中6种酚酸类化合物的同时分析以及咖啡豆原料与制品的质量控制和综合评价。
关键词：反相高效液相色谱法；酚酸类化合物；咖啡豆中图分类号：O658文献标识码：A 文章编号：1000-8713（2011）05-0439-04Simultaneous determination of 6phenolic acids in coffee beansby reversed-phase high performance liquid chromatographyLONG Wenjing 1，ZHANG Sheng 1，3*，YUAN Ling 2，LI Yinhua 1，2，LIU Zhonghua 1，2*（1．National Research Center of Engineering Technology for Utiliz ation of Functional Ingredients from Botanicals ，Changsha 410128，China ；2．Key Laboratory of Tea Science of Ministry of Education ，Hunan Agricultural University ，Changsha 410128，China ；3．Departm ent of Botanical Resources Engineering ，College ofHorticulture ＆Gardening ，Hunan Agricultural University ，Changsha 410128，China ）Abstract ：A method of reversed-phase high performance liquid chromatography coupled w ith di-ode array detection （HPLC-DAD ）w as established for the simultaneous determination of 6phe-nolic acids in green coffee beans．These phenolic acids are caffeic acid ，3-O -caffeoylquinic acid ，4-O -caffeoylquinic acid ，5-O -caffeoylquinic acid ，3，5-O -dicaffeoylquinic acid and 4，5-O -dicaffeoylquinic acid．The separation w as achieved using a Kromasil C 18column （200mm ˑ4.6mm ，5μm ）under the gradient elution w ith the mobile phases of acetonitrile and 0.1%（v /v ）formic acid /w ater．The 6phenolic acids w ere w ell separated w ithin 45min．The recoveries w ere from 90.76%to 104.73%w ith the relative standard deviations betw een 0.7%and 3.9%．The method is simple ，rapid and highly sensitive ，suitable for the simultaneous determination of 6phenolic acids and quality control of coffee beans．Key words ：reversed-phase high performance liquid chromatography （RP-HPLC ）；phenolic acids ；coffee bean咖啡（Coffea arabica ）为茜草科咖啡属多年生灌木或者小乔木，在中国主要种植于云南与海南两省，其中云南小粒种咖啡以其独特口感闻名于世界。
作为世界三大饮品之一，咖啡的保健作用备受人们关注。
咖啡豆含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素及矿物质，其中活性成分绿原酸类化合物约占咖啡豆干重的4% 14.4%［1］。
绿原酸类化合物是由反式肉桂酸（如咖啡酸、阿魏酸、香豆酸、芥子酸等）和奎尼酸及其衍生物（如莽草酸、奎尼酸甲酯或丁酯、4-去氧奎尼酸等）缩合而成的酯类化合色谱第29卷物，根据奎尼酸单元羟基成酯的数目，可大致分为单酯类、二酯类、三酯类及四酯类化合物［2］。
绿咖啡豆中有13类绿原酸类化合物，其中主要是咖啡酰奎尼酸（caffeoylquinic acid ，CQA ）、阿魏酰奎尼酸（feruloylquinic acid ，FQA ）和二咖啡酰奎尼酸（di-caffeoylquinic acid ，diCQA ）［3，4］。
现代药理学研究表明绿原酸类化合物具有抗氧化性、抗病毒、抑菌、降脂、抗癌等多种生理活性，对高血压、动脉硬化也具有一定的抑制作用［2，5］。
早在19世纪，国外就对咖啡豆中的绿原酸类化合物进行过报道［6］，国内近年来对金银花、杜仲等药用植物中的5-咖啡酰奎尼酸（5-O -caffeoylquinic acid ，5-CQA ）也做了非常深入的研究［7－11］，但对我国咖啡豆原料及制品中绿原酸类化合物研究较少。
随着经济全球化的迈进，我国咖啡产业高速发展，但尚欠缺科学系统的质量控制与综合评价体系。
本文构建了高效液相色谱法同时检测咖啡豆中6种主要的酚酸类化合物：咖啡酸（caffeic acid ）、3-咖啡酰奎尼酸（3-O -caffeoylquin-ic acid ，3-CQA ）、4-咖啡酰奎尼酸（4-O -caf-feoylquinic acid ，4-CQA ）、5-咖啡酰奎尼酸（5-O -caffeoylquinic acid ，5-CQA ）、3，5-二咖啡酰奎尼酸（3，5-O -dicaffeoylquinic acid ，3，5-diCQA ）、4，5-二咖啡酰奎尼酸（4，5-O -dicaffeoylquinic acid ，4，5-diCQA ）（各分子结构式见图1），对我国咖啡豆原料及其制品的质量控制、资源合理开发利用具有重要的指导意义。
图16种酚酸类化合物的化学结构式Fig．1Chemical structures of 6phenolic acids1实验部分1．1仪器、试剂与材料高效液相色谱仪（岛津LC-10ATVP ），LC solu-tion 色谱数据工作站；4504MP 电子天平（1/10000）；超声波清洗器（昆明市超声仪器有限公司，KQ3200B 型，功率为150W ）；纯水机（Ther-moFisher 公司，Diamond TII 型）。
5-CQA 、咖啡酸对照品（中国药品生物制品检定所），3-CQA 、3，5-diCQA 、4，5-diCQA 对照品（成都普瑞法科技开发有限公司），4-CQA 对照品（成都普思生物科技有限公司），所有对照品纯度均大于或等于98%；乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）；水为超纯水。
咖啡豆样品于2009年10月收集于云南丽江、德宏、保山、思茅4个产区各种植园（样品粉碎过20目筛，室温避光保存）。
1．2色谱条件色谱柱：Kromasil C 18柱（200mm ˑ4.6mm ，5μm ）；柱温25ħ；进样量：10μL ；流动相：0.1%（v /v ）甲酸水溶液（A ）、乙腈（B ）。
洗脱程序：0 42min ，5%B 25%B ；43 46min ，25%B ；47 50min ，25%B 50%B ；51 52min ，50%B ；53 55min ，50%B 5%B ；56 60min ，5%B 。
流速：1.0mL /min ；检测波长：325nm 。
1．3对照品贮备液的制备精密称取咖啡酸、3-CQA 、4-CQA 、5-CQA 、3，5-diCQA 、4，5-diCQA 对照品适量，分别置于25mL 容量瓶中，加入70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到各对照品贮备液。
其质量浓度依次为：103.20、337.68、208.15、447.90、166.67和206.15mg /L 。
再分别精确吸取咖啡酸0.01mL 、3-CQA 0.05mL 、4-CQA 0.05mL 、5-CQA 0.1mL 、3，5-diCQA 0.05mL 、4，5-diCQA 0.04mL 充分混匀，得混合对照品贮备液，各组分相应质量浓度依次为：3.44mg /L 、56.28mg /L 、34.69mg /L 、149.30mg /L 、27.79mg /L 和27.49mg /L 。
1．4供试品溶液的制备精密称取0.25g 咖啡豆碎末，置于100mL 锥形烧瓶中，加入70%甲醇25mL ，室温下超声提取30min ，过滤冷却定容于50mL 容量瓶中，过0.45μm 微孔滤膜，即为供试品溶液。