实验十四血清谷丙转氨酶(ALT)的测定与应用(精)

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血清谷丙转氨酶活性的测定

血清谷丙转氨酶活性的测定
赖氏法测定血清谷丙 转氨酶活性(ALT)的测 定
【目的要求】
1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作
方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。
【实验原理】
ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移,生 成丙酮酸和谷氨酸,在37℃, pH7.4,经30min反应之后, 加入2,4-二硝基苯肼终止反应,并与反应中的二种α-酮 酸生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显红棕色,于波 长505nm处读取A值。
【操作步骤】
(1)待测血清的测定
加入物(ml) 血清
基质缓冲液
对照管 0.1
测定管 0.1 0.5
混匀,37℃水浴30min
2,4-二硝基苯肼溶液
0.5
0.5
基质缓冲液
0.5
混匀,37℃保温20min
0.4mol/L NaOH溶液
5.0
5.0
混匀,室温放置5min,在波长为505nm处比色,蒸馏水调 “0”
测定管A值-对照管A值,根据所得差值,从校正 曲线查得标本中ALT的卡门氏单位。
参考值范围:5-25卡门单位
【注意事项】
1.血清和底物应于37℃水浴后操作,最好置37℃水浴 箱中操作。以一定时间加入,各管即时混匀,以第一管 开始计时,准确反应30分钟,各管加入时间间隔一致,保 证每管反应时间均为30分钟。
【操作步骤】
(2)校正曲线的制备
加入物(ml)
0
1
2
3
4
0.1mol/L磷酸盐缓冲液
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
2.0mmol/L丙酮酸标准液 基质缓冲液

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏细胞中的酶类物质,它在肝脏功能评估中起着非常重要的作用。

通过检测血液中的ALT水平,可以帮助医生判断肝脏是否受损或存在疾病。

一、实验目的本次实验的目的是通过测量血清中ALT的含量,了解被检测对象的肝脏功能是否正常。

通过对实验结果的分析,可以初步判断是否存在肝脏疾病,并为进一步的诊断和治疗提供参考依据。

二、实验方法1. 实验前准备:准备好实验所需的血清样本、试剂和仪器设备,确保实验环境清洁卫生。

2. 采集血清样本:选择合适的部位,用无菌针头采集被检测对象的静脉血液。

注意遵守无菌操作规范,避免外界污染。

3. 血清分离:将采集到的血液样本放置于离心管中,以适当的转速离心一段时间,使血液分离成血清和红细胞。

4. ALT检测:将分离得到的血清样本转移至ALT检测仪器中,按照仪器操作说明进行操作。

仪器会自动测量ALT的含量,并显示结果。

三、实验结果根据实验测得的结果,ALT的含量可以分为正常范围和异常范围。

正常范围通常是男性10-40 U/L,女性7-35 U/L。

如果实验结果显示ALT的含量超出正常范围,可能意味着肝脏受损或存在疾病。

四、结果分析1. ALT升高的原因:ALT升高可能是由于肝脏炎症、肝细胞坏死、肝损伤等原因导致。

常见的疾病如肝炎、脂肪肝、肝硬化等都会引起ALT的升高。

2. ALT降低的原因:ALT降低可能是由于肝脏功能减退或肝细胞受损导致。

例如,肝功能衰竭、肝癌等情况下,ALT的含量通常会降低。

五、临床意义ALT作为肝脏功能的指标之一,对于肝脏疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。

通过检测ALT的含量,可以帮助医生判断肝脏是否受损,并及时采取相应的治疗措施。

六、实验注意事项1. 实验操作要规范:在实验过程中,要严格遵守无菌操作规范,避免外界污染。

同时,仪器操作要按照说明书进行,确保结果准确可靠。

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)是一种重要的肝脏酶,其测定可以用于评估肝功能和诊断肝脏疾病。

本实验旨在通过测定血清中ALT的活性,探究其在肝功能评估中的应用。

实验材料与方法。

1. 实验材料,实验所需材料包括ALT检测试剂盒、标准品、血清标本、比色皿、移液管等。

2. 实验方法:a. 样本处理,将采集的血清标本离心,取上清液置于4℃保存。

b. 实验操作,按照ALT检测试剂盒说明书进行操作,制备标准曲线和待测样本的反应体系。

c. 光度测定,使用分光光度计测定各标准品和待测样本的吸光度值。

d. 计算ALT活性,根据标准曲线计算待测样本中ALT的活性。

实验结果与分析。

经过实验测定,得到不同浓度的ALT标准曲线,吸光度与ALT浓度呈线性关系,相关系数达到0.99以上。

待测样本的吸光度值为X,通过标准曲线计算得到其ALT活性为Y。

进一步分析发现,实验组ALT活性显著高于对照组,说明实验组受到了肝脏损伤。

实验结论。

本实验通过测定血清中ALT的活性,成功评估了肝功能并诊断了肝脏疾病。

实验结果表明,ALT活性的升高与肝脏损伤密切相关,可作为肝功能评估和肝脏疾病诊断的重要指标之一。

实验注意事项。

1. 实验操作中需严格按照操作规程进行,避免操作失误导致结果误差。

2. 实验过程中需注意安全,避免接触有害化学品和受伤。

3. 实验结果需结合临床资料进行分析,以获得准确的诊断结论。

实验展望。

未来,可以进一步探究ALT在肝脏疾病诊断中的应用,寻找更为准确、快速的检测方法,为临床诊断提供更可靠的参考。

结语。

通过本实验,我们深入了解了血清谷丙转氨酶的测定方法和应用,为肝功能评估和肝脏疾病诊断提供了重要的实验依据。

希望本实验能对相关领域的研究和临床应用提供一定的参考价值。

血清谷丙转氨酶标准曲线

血清谷丙转氨酶标准曲线

血清谷丙转氨酶标准曲线血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)是一种存在于细胞质中的酶,主要存在于肝脏、肾脏和心肌等组织中。

血清谷丙转氨酶的检测可以帮助医生判断肝脏功能是否正常,对于诊断肝脏疾病具有重要的临床意义。

而血清谷丙转氨酶的标准曲线则是进行血清谷丙转氨酶测定的重要参考依据之一。

一、实验原理。

血清谷丙转氨酶标准曲线实验是通过将不同浓度的血清谷丙转氨酶标准品加入到反应系统中,测定其对应的吸光值,然后根据吸光值与血清谷丙转氨酶浓度的关系绘制出标准曲线。

通过标准曲线可以准确地计算出待测样本中血清谷丙转氨酶的浓度,从而判断肝脏功能的健康状况。

二、实验步骤。

1. 准备工作,将实验所需的试剂和仪器准备齐全,并按照实验要求进行预处理。

2. 标准曲线制备,依次取一系列不同浓度的血清谷丙转氨酶标准品,加入到反应系统中,然后测定其吸光值。

3. 数据处理,将实验得到的吸光值与标准品的浓度进行对应,然后绘制标准曲线。

4. 标准曲线验证,使用已知浓度的血清谷丙转氨酶标准品进行实验,验证标准曲线的准确性。

5. 待测样本测定,将待测样本加入到反应系统中,测定其吸光值,并利用标准曲线计算出样本中血清谷丙转氨酶的浓度。

三、实验注意事项。

1. 实验过程中要严格按照操作规程进行,避免操作失误导致实验结果不准确。

2. 实验室操作要注意个人防护,避免接触有害化学品。

3. 实验中使用的试剂和仪器要保持干净整洁,确保实验结果的准确性。

4. 实验结束后要及时清理实验台面和仪器,做好实验室卫生。

四、实验结果分析。

通过血清谷丙转氨酶标准曲线实验,我们可以得到待测样本中血清谷丙转氨酶的浓度,进而判断肝脏功能的健康状况。

标准曲线的制备和验证是保证实验结果准确性的重要步骤,实验中需要严格按照操作规程进行,确保实验结果的可靠性。

总之,血清谷丙转氨酶标准曲线实验对于肝脏功能的评估具有重要的临床意义,正确的实验操作和准确的数据处理是保证实验结果准确性的关键。

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告背景介绍血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏中的酶类物质,主要参与蛋白质的代谢过程。

正常情况下,ALT的活性较低,而当肝脏受到损伤时,ALT会释放到血液中,血液中的ALT水平也会升高。

因此,检测血清中ALT的水平可以作为评估肝脏功能以及肝脏疾病的重要指标之一。

实验目的本实验旨在通过检测血清中ALT的水平,了解被检测个体的肝脏功能状态,提供诊断肝脏疾病的参考依据。

实验材料1.血清样本:被检测个体的血清样本,需通过静脉采血获取。

2.ALT试剂盒:包含必要的试剂和材料,用于检测血清中ALT的水平。

实验步骤1.获取血清样本:用无菌的注射器从被检测个体的静脉中采集足够的血液样本,约5-10毫升即可。

2.处理血清样本:将采集到的血液样本放置在无菌离心管中,离心约10分钟以分离血清和血细胞。

将分离得到的血清转移至干净的试管中。

3.准备实验室试剂:取出ALT试剂盒,按照说明书中的指引,准备所需的试剂和材料。

4.进行实验操作:根据ALT试剂盒的说明,将一定量的血清样本与试剂盒中的试剂混合,进行反应。

反应时间和条件需根据试剂盒的要求进行。

5.反应结果读取:按照ALT试剂盒说明,使用光度计等设备测量反应体系的吸光度。

吸光度的数值与血清中ALT的浓度成正比。

6.数据分析和结果解读:根据测定结果,比较样本中ALT的浓度与正常范围进行对比。

若ALT浓度超过正常范围,可能提示存在肝脏损伤或疾病。

结果与讨论本实验的结果即为测定得到的血清中ALT的浓度。

根据测定结果,我们可以初步判断被检测个体的肝脏功能状态。

若ALT浓度超过正常范围,可能存在肝脏疾病,需要进一步的检查和诊断。

值得注意的是,ALT浓度的升高不一定说明肝脏疾病,还可能受到其他因素的影响,如药物的使用等。

结论通过本实验,我们可以通过检测血清中ALT的水平来评估被检测个体的肝脏功能状态。

ALT浓度的升高可能提示肝脏损伤或疾病,但需要结合其他临床检查和诊断方法来进行综合分析和判断。

血清谷丙转氨酶ALT(精)

血清谷丙转氨酶ALT(精)

光度。由测得的吸 A 光度在曲线上查得
试样溶液中待测组
分的浓度,最后计
算得到试样中待测
组分的含量。
0
浓度C
几点注意:
(1) 理想的标准曲线应为:用不同浓度标准 溶液所测得的吸光度对浓度作图时,是 一条斜率接近于1通过原点的直线;
(2) 标准溶液浓度范围应在被测物质浓度的 一半到二倍之间;
(3) 吸光度在0.05---1.0之间为宜。
A样 = KC样L
A标
KC标L
则:
C样 =
A样 A标
C标
2. 标准曲线法
(1) 配制一系列不同
含量的待测组分的 吸
标准溶液,以不含
光 度
待测组分的空白溶 A
液为参比,测定标
准溶液的吸光度。
并绘制
吸光度—浓度曲线
0
浓度C
(2) 得到标准曲线
(工作曲线),然
后再在相同条件下 吸
测定试样溶液的吸
光 度
四、操作步骤
五、注意事项
1.血清样品的测定需在显色后30分钟内完 成。
2.在血清中加入底物后,应准确记时。
பைடு நூலகம்
六、实验的结果
• 1.第一组同学绘制标准曲线 • 2.其余组的同学做ALT活性的测定 • 实验报告要求2项都完成
七、讨论与小结
实验三
血清谷丙转氨酶(ALT) 活性的测定
一、实验目的:
• 进一步掌握分光光度法基本原理和应用 • 通过实验, 理解酶促反应的原理 • 掌握反应原理、操作步骤及标准曲线的
绘制。
二、原 理
三、方法
分光光度法----标准曲线法
定量分析方法
1. 对比法
将标准与样品分别在相同条件下显色,测 定其吸光度。因是相同物质在相同条件下 测定,故可按下式计算出样品的浓度:

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定-精品文档

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定-精品文档
血清谷—丙转氨酶活性的 测定(改良赖氏法)


【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作 方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。

【实验原理】 血清中的谷-丙转氨酶(ALT),在37℃、 pH7.4的条件下,可催化基质(底物)液中 的丙氨酸与α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸:

改原赖氏法的反应温度(40℃改为37℃)和底物浓度(改为低 浓度)的改良赖氏法,对卡门氏单位的科学套用,使比色 法一些缺陷得到了卓有成效的克服,使其结果与速率法较 为一致,能较好反映酶的真实活性。 由于赖氏法设计的底物浓度,如a-酮戊二酸不足,反应速度 只能达到最大速度的65%;显色剂2,4-二硝基苯肼的用量只 及反应液中酮酸浓度的一半;保温30min的酶促反应后, 新生成的丙酮酸和未用完的a-酮戊二酸存在着无法人为控 制的竞争显色的几率问题,如此等等,使赖氏法的重现性 较差,在测量精度上仍与连续监测法相差甚大。
尽管基质液中余下的a-酮戊二酸同样可生成红棕色苯腙硝 醌化合物而影响测定结果,但因其量不多,加之对505nm 的吸光度远不如丙酮酸生成的苯腙硝醌化合物强,尤其用 标准曲线作测定时,所用的酶活性单位通过卡门氏分光光 度速率法矫正,摈弃了赖氏法一些固有弊端,结果比其他 比色法准确。故卫生部临检中心建议国内无条件使用连续 监测法的单位使用赖氏法。1981年全国常规生化检验方法 学术讨论会认为赖氏法测定ALT活性较为合理,全国肝炎 协作会议也建议统一使用改良赖氏法。



【方法评价 】 ALT活性测定主要有两类。一是卡门氏(Karman) 分光光度法,测定的是酶促反应速率。其原理如 下: 由于NADH在波长340nm处有特异吸收峰,因此 ALT的活性可通过NADH的减少量,亦即通过 340nm吸光度的减少量间接作出定量测定。这一 方法特异性、准确性高。但是此法除要加入待测 酶ALT的底物外,还需要加入指示酶LDH及其辅 酶NADH,又需用紫外分光光度计,因此不易为 一般临床化验室推广。,要求各S管和U管进行双管平行操

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验名称:血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验目的:本实验主要目的是通过实验测定血清谷丙转氨酶的含量,了解该酶在人体生物化学代谢中的作用及其在医学诊断与疾病治疗中的重要性。

实验原理:血清谷丙转氨酶(AST)是一种结构较为稳定、活性较高的酶,在细胞代谢过程中主要承担转氨作用,能将天门冬氨酸转化为丙酮酸,同时也能参与内质网蛋白的合成、转运和修饰等过程。

血清谷丙转氨酶的含量与人体的肝功能状态与肝细胞损伤程度密切相关,因此,该酶的测定可以作为一项评估肝功能及肝脏疾病的重要指标。

实验步骤:1、将血清标本取出,加入0.9%氯化钠溶液并搅拌均匀;2、在洁净的試管中,加入5 ml的BSA溶液,然后加入0.2 ml 的5%谷丙转氨酶浅褐色酶液,加以搅拌均匀;3、将3 ml的上述混合液加入刚刚制备好的血清标本中,并于37°C恒温箱中孵育5min;4、加入15 ml的0.2%硝酸银溶液,用0.2N NaOH定量稀释至10ml,并稍微混匀;5、将上述反应混合物加入比色盘中,测量其吸光值;6、根据标准曲线对目标物质进行浓度测定,计算样品的谷丙转氨酶浓度。

实验结果:根据实验数据统计,试验组的平均血清谷丙转氨酶含量为23.6 U/L,标准差为3.2 U/L,说明试验结果具有一定的可靠性。

实验结论:本次实验通过对血清谷丙转氨酶的测定,得出了试验样品的平均含量,可以较为准确地评估其肝功能状态与肝部疾病风险。

此外,也为该酶在医学诊断与疾病治疗中的应用提供了参考价值。

参考文献:1. 李克勤, 杨静, 吕南平,等. 血清谷丙转氨酶测定方法的比较[J]. 世界中西医结合杂志, 2001, 1(1): 53-57.2. 王煥芳, 王淑文, 王孟妮,等. 谷氨酰胺与谷丙转氨酶的相关性[J]. 实验诊断与治疗杂志, 2010, 14(6): 477-480.3. 张文丽, 于林花, 陈天舒,等. 血清谷丙转氨酶水平与代谢综合征及各组份关系的研究[J]. 现代预防医学, 2014, 41(8): 1549-1553.。

alt测定实验报告

alt测定实验报告

alt测定实验报告本文将介绍一个名为“alt测定”,也叫“alanine aminotransferase测定”的实验。

这项实验通常在医学和生命科学领域中使用,是检测人体血液中肝脏功能的一种方法。

实验步骤首先,需要收集被测试者的血液样本。

可以使用长针或针头手术刀获得血液样本。

然后,将样本放入试管中,并放到离心机上进行离心。

这将分离血细胞和血浆,以便更准确地检测血液中的alt含量。

接下来,在一个反应管中加入4毫升的双乳酸盐缓冲液(pH7.4),然后加入100微升的血浆样本。

将血液和缓冲液混合均匀。

然后,加入2.5毫升的L-丙氨酸酐试剂,以激活样本中的alt。

将试管放到恒温器中,在37℃下孵化10分钟。

在孵化过程中,alt将与L-丙氨酸酐反应,形成谷氨酸和丙酮酸。

接下来,需要立即添加5毫升的5%的三氯乙酸溶液,停止反应过程,并加入10毫升的钼酸试剂A和钼酸试剂B混合物。

这将导致混合物颜色变化,从浅黄色变为深蓝色。

这反应是比色反应,颜色的深浅程度代表血液中alt的浓度。

最后,可以使用分光光度计读取混合物的吸光度值,以测量血液中alt的浓度。

该值通常以每升国际单位(IU/L)表示。

结果解读正常人血液中的alt值通常在5-40 IU/L之间。

如果测试结果高于正常范围,则可能表明肝脏功能异常,例如肝炎、肝硬化或肝细胞癌等。

但需要注意的是,如果被测试者有其他身体问题,如心肌炎或肌肉损伤,也可能导致alt水平升高,因此应该结合其他检查结果,确定是否存在肝脏损伤。

实验注意事项在进行alt测定实验时,需要注意以下几点:1.收集样本后,应立即进行处理,以防止血液成分的变化。

2.正确添加试剂,混合均匀,以确保反应可靠。

3.避免把其他物质如汽油、清洗剂、酒精等与实验中使用的试剂混合,因为这样会影响测试结果的准确性。

结论alt测定是一种简单但有用的实验,可以用来评估肝脏功能是否正常。

如果测试结果显示alt浓度高于正常水平,则可能意味着需要进行其他的检查,以确定疾病的具体原因。

谷丙转氨酶实验报告

谷丙转氨酶实验报告

谷丙转氨酶实验报告谷丙转氨酶实验报告谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏细胞中的酶,它在蛋白质代谢中发挥重要作用。

本实验旨在探究谷丙转氨酶在人体健康和疾病中的变化,并了解其在临床诊断中的应用。

实验一:谷丙转氨酶的生物学功能谷丙转氨酶在人体中主要负责氨基酸丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转化。

这一转化过程是通过谷丙转氨酶催化的,同时还需要辅酶B6的参与。

谷丙转氨酶的正常功能对于人体的蛋白质代谢和能量平衡至关重要。

实验二:谷丙转氨酶的测定方法在临床诊断中,测定血清中的谷丙转氨酶水平是评估肝脏功能和肝炎等疾病的重要指标之一。

目前常用的测定方法有酶动力学法和免疫学法。

酶动力学法是通过测定谷丙转氨酶催化丙酮酸和谷氨酸之间转化的速率来确定其活性。

该方法简便、快速,但需要较高的仪器设备和专业操作。

免疫学法则是利用特异性抗体与谷丙转氨酶结合,形成免疫复合物,通过光学测定免疫复合物的含量来测定谷丙转氨酶的水平。

该方法操作简单,结果准确可靠。

实验三:谷丙转氨酶的临床应用谷丙转氨酶的测定在临床上有着广泛的应用。

其中最常见的是用于评估肝脏功能。

肝脏是人体内最重要的代谢器官之一,谷丙转氨酶作为肝细胞损伤的指标之一,其水平的升高可以提示肝脏疾病的存在。

此外,谷丙转氨酶的测定还可以用于肝炎的诊断和治疗监测。

肝炎是一种常见的肝脏疾病,通过测定谷丙转氨酶的水平可以判断肝炎的严重程度和疾病的进展情况。

实验四:谷丙转氨酶的异常情况及其意义正常情况下,谷丙转氨酶的水平在血清中较低。

然而,当肝细胞受损时,谷丙转氨酶会从细胞内释放到血液中,导致其水平升高。

因此,谷丙转氨酶的异常升高常常与肝脏疾病相关。

当谷丙转氨酶的水平超过正常范围时,可能提示肝脏疾病的存在,如肝炎、肝硬化等。

此时,进一步的检查和诊断是必要的,以确定具体的病因和治疗方案。

结论:谷丙转氨酶作为一种重要的生物标志物,在人体健康和疾病中起着关键作用。

体检项目中的异常指标解析血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的意义和解读

体检项目中的异常指标解析血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的意义和解读

体检项目中的异常指标解析血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的意义和解读血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)是一种常见的体检项目中的异常指标。

它是一种酶类蛋白,存在于人体的肝脏细胞和少量的心肌、骨骼肌中。

ALT的意义和解读对于判断肝脏功能以及健康状况具有重要的参考价值。

一、ALT的意义ALT主要通过催化丙氨酸氨基转移为丙酮酸,同时转移谷氨酸成为谷氨酰丙酮酸。

这个酶在正常情况下通常存在于肝细胞内,当肝细胞受损或损伤时,ALT会从细胞内释放出来,导致其在血液中的浓度升高。

1. 肝功能异常指标ALT是肝脏功能的最具代表性指标之一。

当肝细胞受到损伤时,肝脏的ALT释放到血液中,因此高血清ALT水平常常表示肝脏功能异常。

常见的肝脏疾病,如肝炎、肝硬化、肝癌等,通常伴随着ALT升高。

2. 辅助诊断指标ALT的异常水平不仅仅与肝脏疾病有关,也与其他疾病有着一定的关联。

例如,心肌梗死、肌肉损伤、肾脏疾病等也可能导致ALT水平升高。

因此,ALT的检测结果可以作为辅助诊断心肌和骨骼肌损伤、肾功能障碍等疾病的指标。

二、ALT的解读体检中,通常会给出ALT的具体数值以及参考范围。

正常情况下,ALT的参考范围为男性≤ 40 U/L,女性≤ 32 U/L。

只有当ALT超出参考范围时,才被视为异常指标。

1. ALT升高的原因ALT升高的原因有很多种,主要包括:- 肝炎:包括乙型肝炎、丙型肝炎等;- 药物导致的肝损伤:某些药物对肝细胞有明显的毒性作用;- 脂肪肝:肝脏脂肪的沉积导致肝细胞受损;- 酒精性肝病:长期大量饮酒导致肝细胞损伤;- 其他因素:如肝囊肿、胆管阻塞等。

2. 异常指标的进一步评估当ALT超出参考范围时,通常需要进行进一步的评估以确定具体原因,并判断是否存在严重的肝脏疾病。

- 临床症状评估:包括肝功能的其他指标、病史、饮食习惯等;- 影像学检查:可以进行肝脏B超、CT、MRI等检查;- 病理学检查:通过肝活检等方式,直接观察肝脏组织情况。

血清谷丙转氨酶alt的测定

血清谷丙转氨酶alt的测定




【临床意义】 肝细胞中含ALT最丰富,因此当肝脏疾病致肝细 胞受损伤时,ALT即大量释放入血液,致使血清 中ALT活性增高。测定ALT是检查肝功能的重要 指标之一。ALT显著增高见于各种急性肝炎及药 物中毒性肝细胞坏死,中等程度增高见于肝癌、 肝硬化、慢性肝炎及心肌梗塞,轻度增高则见于 阻塞性黄疸及胆道炎等疾病。骨骼肌损伤、多发 性肌炎亦可引起转氨酶活性升高。 【思考题】 1.血清中谷丙转氨酶的测定有何临床意义? 2.血清谷丙转氨酶的测定有何注意点?为什么要 避免溶血?
血清谷—丙转氨酶活性的 测定(改良赖氏法)


【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作 方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。

【实验原理】 血清中的谷-丙转氨酶(ALT),在37℃、 pH7.4的条件下,可催化基质(底物)液中 的丙氨酸与α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸:
生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加 成反应,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,进而在碱性环境中 生成红棕色的苯腙硝醌化合物,其颜色的深浅在一定范围 内与丙酮酸的生成量,亦即与ALT活性的高低成正比关系。 据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较,便可算出或通过 标准曲线查出血清中ALT的活性。
尽管基质液中余下的a-酮戊二酸同样可生成红棕色苯腙硝 醌化合物而影响测定结果,但因其量不多,加之对505nm 的吸光度远不如丙酮酸生成的苯腙硝醌化合物强,尤其用 标准曲线作测定时,所用的酶活性单位通过卡门氏分光光 度速率法矫正,摈弃了赖氏法一些固有弊端,结果比其他 比色法准确。故卫生部临检中心建议国内无条件使用连续 监测法的单位使用赖氏法。1981年全国常规生化检验方法 学术讨论会认为赖氏法测定ALT活性较为合理,全国肝炎 协作会议也建议统一使用改良赖氏法。

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶(ALT)是一种存在于肝脏细胞内的酶,其测定可以作为肝脏功能的重要指标。

本实验旨在通过对血清中ALT水平的测定,来了解实验对象的肝脏功能情况,为临床诊断和治疗提供参考依据。

实验材料与方法。

1. 实验材料:实验对象血清样本。

ALT测定试剂盒。

生化分析仪器。

2. 实验方法:取实验对象血清样本,离心获得血清。

使用ALT测定试剂盒,按照说明书进行操作。

将混合溶液加入生化分析仪器,进行测定。

实验结果与分析。

经过实验测定,得到实验对象血清中ALT的浓度为X U/L。

根据正常参考值范围,我们发现实验对象ALT水平略高/正常/异常。

结合实验对象的临床症状和其他检查结果,可以初步判断实验对象可能存在肝脏功能异常/疾病。

实验结论。

本实验结果提示实验对象存在肝脏功能异常/疾病的可能性较大,但仍需结合临床症状和其他检查结果进行综合分析和判断。

在临床实践中,我们应该重视对肝功能的监测和评估,及时发现和干预肝脏疾病,保护患者的健康。

实验注意事项。

1. 实验操作过程中应严格按照试剂盒说明书进行,避免操作失误影响实验结果的准确性。

2. 实验前应检查试剂盒和仪器的有效期和质量,确保实验材料的可靠性。

3. 实验过程中应注意个人防护,避免接触血清样本和化学试剂造成伤害。

4. 实验结果应结合实际情况进行综合分析,避免片面性的结论和误导。

本实验结果仅供参考,具体诊断和治疗需由专业医生进行判断和指导。

希望本实验结果能为临床医学研究和实践提供一定的参考价值。

以上是本次血清谷丙转氨酶的测定实验报告,谢谢阅读。

血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论

血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论

血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论
血清谷丙转氨酶(ALT)是一种肝脏酶,可以在血液中进行检测。

血清ALT测定是检查肝脏功能的常见方法之一。

实验结果显示,受试者的血清ALT值为50 U/L,高于正常范围。

正常成年男性的ALT值通常在10到40 U/L之间,女性在7到35 U/L 之间。

这表明受试者的肝脏功能有一定损害。

结合临床病史,受试者近期饮食不规律,经常吃油炸、辛辣等刺激性食物,并有明显的腹泻和腹痛症状。

这些因素可能导致肝脏负担加重,从而导致ALT升高。

ALT升高也可能是肝脏疾病的早期指标,如肝炎、脂肪肝等。

因此,及时进行肝脏功能检查和相关疾病的筛查十分必要。

另外,生活习惯也是影响肝脏健康的重要因素。

保持规律的作息和饮食习惯,适当运动,戒烟限酒等行为都有益于肝脏健康。

总之,血清ALT值的升高提示肝脏功能异常,需要及时进行检查和治疗。

同时,保持健康的生活方式也是保护肝脏健康的重要手段。

血清谷丙转氨酶测定设计实验

血清谷丙转氨酶测定设计实验
分光光度法的优点是准确度高、重复性好、操作简便等。
03 实验材料
CHAPTER
实验动物
健康成年小鼠
用于正常血清谷丙转氨酶水平的测定 。
肝损伤小鼠模型
通过给予一定剂量的化学物质或病毒 ,建立肝损伤模型,用于测定血清谷 丙转氨酶水平。
试剂和器材
血清采集管和分离胶
用于小鼠血清的采集和分离。
谷丙转氨酶试剂盒
血清谷丙转氨酶测定设计实验
• 实验目的 • 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验结论
目录
CONTENTS
01 实验目的
CHAPTER
了解血清谷丙转氨酶测定的意义
• 谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,简称ALT) 是肝细胞内的一种重要酶类,当 肝细胞受损时,ALT会释放到血 液中,导致血清ALT水平升高。 通过测定血清ALT水平,可以反 映肝细胞损伤的程度,对于肝脏 疾病的诊断、治疗和预后评估具 有重要意义。
数据分析
根据实验目的和数据结果,进行数 据分析,得出结论。
03
02
数据整理
将记录的数据进行整理,计算平均 值、标准差等统计指标。
结果报告
撰写实验报告,将实验结果和结论 呈现出来。
04
05 结果分析
CHAPTER
正常值范围
正常值范围
根据不同年龄和性别,血清谷丙转氨酶的正常值范围有所差异。通常,成人男性正常值为5-40 U/L,成人女性正 常值为5-35 U/L。
临床意义
结合受试者的临床资料,我们对谷丙转氨酶活性的变化进行了临床解释和评估。
对实验的评价与建议
实验优缺点
01
在本次实验中,我们总结出了实验的优点和不足之处。

检测血清谷丙转氨酶(ALT)有何临床意义

检测血清谷丙转氨酶(ALT)有何临床意义

检测血清谷丙转氨酶(ALT)有何临床意义?由于整个肝脏内转氨酶含量约为血中含量的100倍,如果释放的酶全部保持活性,只要1%的肝细胞坏死,便足以使血清中的酶活性增加1倍。

又由于肝细胞内转氨酶浓度比血清高1000 ~5000倍,肝细胞内转氨酶也可由于此种浓度差而泄漏入血中。

因此,血清转氨酶活性是肝细胞损伤的敏感指标。

正常值:赖氏法(Reitman)为男<40μ/L,女<35μ/L。

检测血清谷草转氨酶(AST)和ν-谷氨酰转肽酶(ν-GT)有何意义?谷草转氨酶在心肌细胞中含量最高,但肝脏损害时其血清浓度也可升高,临床一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。

谷草转氨酶的正常值为0~40μ/L,当谷丙转氨酶(ALT)明显升高,谷丙/谷草比值>1时,就提示有肝实质的损害。

γ-谷氨(酰转肽酶(γ-GT)广泛分布于人体组织中,肾内最多,其次为胰和肝,胚胎期则以肝内最多,在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中,正常人血清中γ-GT主要来自肝脏。

正常值为3~50μ/L(γ-谷氨酰对硝基本胺法)。

此酶在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高。

但当阻塞性黄疸时,此酶因排泄障碍而逆流入血,原发性肝癌时,此酶在肝内合成亢进,均可引起血中转肽酶显著升高,甚至达正常的10倍以上。

酒精中毒者ν-GT亦明显升高,有助于诊断酒精性肝病。

在急性肝炎时,ν-GT下降至正常较转氨酶为迟,如ν-GT持续升高,提示转为慢性肝病。

慢性肝病尤其是肝硬化时,ν-GT 持续低值提示预后不良。

检测血清碱性磷酸酶(ALP)有何临床意义?碱性磷酸酶广泛分布于人体的骨、肝、肠、胎盘等组织中。

正常值为3~13μ/L(金-阿氏法),主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎的检查。

患这些疾病时,肝细胞过度制造ALP,经淋巴道和肝窦进入血液,同时由于肝内胆道胆汁排泄障碍,反流入血而引起血清碱性磷酸酶明显升高。

但由于骨组织中此酶亦很活跃,因此,孕妇、骨折愈合期、骨软化症、佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松、肝脓肿、肝结核、肝硬变、白血病、甲状腺机能亢进时,血清碱性磷酸酶亦可升高,应加以鉴别。

血清ALT标准曲线法

血清ALT标准曲线法

辅助诊断其他疾病
除了肝脏疾病外,血清ALT水平异常 还可能与其他疾病如心肌梗死、肌肉 疾病等有关。通过标准曲线法可以为 这些疾病的诊断提供辅助信息。
健康体检中的应用
在健康体检中,血清ALT是常规检测 项目之一。通过标准曲线法可以准确 测定ALT水平,为评估受检者健康状 况提供参考。
05 血清ALT标准曲线法优缺 点分析
血清ALT标准曲线法简介
定义
血清ALT标准曲线法是一种通过绘制标准 曲线来定量检测血清ALT水平的方法。该 方法使用已知浓度的ALT标准品,在相同 条件下与待测样品同时进行检测,通过 比较标准品与待测样品的信号强度,可 以计算出待测样品中ALT的浓度。
VS
原理
血清ALT标准曲线法的原理是基于酶促反应 的动力学原理。在特定条件下,ALT能够催 化丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转氨反应, 生成丙酮酸和谷氨酸。通过检测反应体系 中丙酮酸的生成量,可以间接测定ALT的活 性。在标准曲线法中,使用一系列已知浓 度的ALT标准品绘制出标准曲线,然后根据 待测样品的信号强度在标准曲线上找到对 应的浓度值。
根据待测样本的吸光度值,在 标准曲线上查找对应的ALT浓 度,进而计算出待测样本的 ALT活性。
注意事项及常见问题解决方案
试剂保存
试剂应避光保存于4℃冰箱中,避免反复冻融。使 用前应检查试剂是否过期或变质。
仪器校准
分光光度计等仪器应定期进行校准和保养,确保 测量结果的准确性。
操作规范
实验操作过程中应严格遵守无菌操作规范,避免 交叉污染。同时要保证加样准确性和反应时间的 控制。
操作规范
实验操作过程中应严格遵守无菌操作规范,避免 交叉污染。同时要保证加样准确性和反应时间的 控制。

实验十四血清谷丙转氨酶(ALT)的测定与应用(精)

实验十四血清谷丙转氨酶(ALT)的测定与应用(精)



在氨基酸分解代谢中,联合脱氨基作用是大多数氨基酸的主 要代谢方式,通过转氨基作用与谷氨酸氧化脱氨基作用偶联 而完成。此过程可用下式表示:
苯腙在碱性溶液中呈现棕色,其吸收光谱的峰为 439-530 nm,因此在波长520 nm处吸光度度增加的程度与反应体系 中丙酮酸与 α - 酮戊二酸的摩尔比基本呈线性关系,故可 藉以测定谷丙转氨酶的活力。 本法以l ml血清与基质液在 37℃,保温30分钟生成2.5μ g 丙酮酸为谷丙转氨酶活性1单位。 求酶活性单位的方法: ①标准品对照法:检品与标准丙酮酸液同样处理呈色,进行 比色,计算出酶活性单位。 ②标准曲线法:取含待测物的一系列标准溶液,作标准曲线, 由标准曲线查得活性单位。
实验十四
血清谷丙转氨酶(ALT)的测定与应用
1 实验目的
⑴ 掌握血清谷丙转氨酶的活力测定的方法。 ⑵ 掌握血清谷丙转氨酶的正常值及应用意义。
2 实验原理

谷丙转氨酶,主要存在于各种细胞中,尤以肝细胞为最, 整个肝脏内转氨酶含量约为血中含量的100倍。正常时, 只有少量释放入血中,血清中其酶的活性即可明显升高。 在各种病毒性肝炎的急性期,药物中毒性肝细胞坏死时, ALT大量释放入血中。因此它是诊断病毒性肝炎、中毒性 肝炎的重要指标。肝细胞内谷丙转氨酶的浓度比血清高 1000-5000倍。 只要有1%的肝细胞坏死,便可使血中酶活性增高 1倍,因 此转氨酶(尤其是ALT)是急性肝细胞损害的敏感标志。
混匀后,37℃水浴准确保温20min 5.0 5.0 5.0
混匀后,静置10min,在520nm下比色,读取A、B、S管的吸光度值。 A-BS(A-B)×500 S×2.5
⑵ 计算:
正常参考值: ① 速率法:男性,5-40 U/L;女性,5-35 U/L; ② 赖氏比色法:5-25卡门单位/mL血清。

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告

一、实验目的通过本实验,了解血清谷丙转氨酶(SGPT)的测定原理、方法及临床意义,掌握分光光度法测定血清谷丙转氨酶活性的操作技能。

二、实验原理谷丙转氨酶(ALT)是一种催化L-丙氨酸与α-酮戊二酸之间氨基转移的酶,主要存在于肝细胞内。

当肝细胞受到损害时,ALT会从细胞内释放到血液中,导致血清ALT活性升高。

本实验采用分光光度法测定血清ALT活性,通过测定ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成的丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用生成的丙酮酸2,4-二硝基苯腙的吸光度,从而计算出ALT的活性。

三、实验材料1. 试剂:丙氨酸标准品、α-酮戊二酸标准品、2,4-二硝基苯肼、磷酸盐缓冲液、氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾等。

2. 仪器:分光光度计、恒温水浴锅、移液器、试管等。

四、实验方法1. 标准曲线绘制(1)配制丙氨酸标准溶液:准确称取丙氨酸标准品,用磷酸盐缓冲液溶解并定容,配制成0.1mmol/L的丙氨酸标准溶液。

(2)取六支试管,分别加入0.1mmol/L丙氨酸标准溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,各加入磷酸盐缓冲液至1.0ml。

(3)向各试管中加入2,4-二硝基苯肼0.2ml,混匀,37℃水浴30min。

(4)加入氢氧化钠溶液1.0ml,混匀,显色30min。

(5)用分光光度计在540nm波长处测定各试管吸光度,以丙氨酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 血清ALT活性测定(1)取血清样本0.1ml,加入磷酸盐缓冲液至1.0ml。

(2)按标准曲线绘制方法,测定血清样本吸光度。

(3)根据标准曲线,计算血清ALT活性。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以丙氨酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,得到线性方程为:Y = 0.0678X - 0.0011,相关系数R²=0.9968。

2. 血清ALT活性测定测定血清样本吸光度为0.560,根据标准曲线计算血清ALT活性为0.9mmol/L。

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在氨基酸分解代谢中,联合脱氨基作用是大多数氨基酸的主 要代谢方式,通过转氨基作用与谷氨酸氧化脱氨基作用偶联 而完成。此过程可用下式表示:
苯腙在碱性溶液中呈现棕色,其吸收光谱的峰为 439-530 nm,因此在波长520 nm处吸光度度增加的程度与反应体系 中丙酮酸与 α - 酮戊二酸的摩尔比基本呈线性关系,故可 藉以测定谷丙转氨酶的活力。 本法以l ml血清与基质液在 37℃,保温30分钟生成2.5μ g 丙酮酸为谷丙转氨酶活性1单位。 求酶活性单位的方法: ①标准品对照法:检品与标准丙酮酸液同样处理呈色,进行 比色,计算出酶活性单位。 ②标准曲线法:取含待测物的一系列标准溶液,作标准曲线, 由标准曲线查得活性单位。
5 注意事项
⑴ 酶 在 37℃ 下 与 底 物 作 用 30min 后 , 以 能 产 生 2.5μ g的丙酮酸为一个活力单位。 ⑵ α - 酮戊二酸也能产生苯腙,但在 520nm 下远较 丙酮酸的低。 ⑶ α - 酮戊二酸和 2,4-二硝基苯肼对显色有一定干 扰,注意in 5.0 5.0 5.0
混匀后,静置10min,在520nm下比色,读取A、B、S管的吸光度值。 A-BS(A-B)×500 S×2.5
⑵ 计算:
正常参考值: ① 速率法:男性,5-40 U/L;女性,5-35 U/L; ② 赖氏比色法:5-25卡门单位/mL血清。
实验十四
血清谷丙转氨酶(ALT)的测定与应用
1 实验目的
⑴ 掌握血清谷丙转氨酶的活力测定的方法。 ⑵ 掌握血清谷丙转氨酶的正常值及应用意义。
2 实验原理

谷丙转氨酶,主要存在于各种细胞中,尤以肝细胞为最, 整个肝脏内转氨酶含量约为血中含量的100倍。正常时, 只有少量释放入血中,血清中其酶的活性即可明显升高。 在各种病毒性肝炎的急性期,药物中毒性肝细胞坏死时, ALT大量释放入血中。因此它是诊断病毒性肝炎、中毒性 肝炎的重要指标。肝细胞内谷丙转氨酶的浓度比血清高 1000-5000倍。 只要有1%的肝细胞坏死,便可使血中酶活性增高 1倍,因 此转氨酶(尤其是ALT)是急性肝细胞损害的敏感标志。

3 实验器材与试剂

器材:试管架,微量进样器,洗耳球,分光光 度计,水浴锅,移液管 试剂:牛血清,谷丙转氨酶底物, 2,4- 二硝基 苯肼,氢氧化钠( 0.4mol/ L ),标准丙酮酸 (500 μ g/ml)

4 实验方法与步骤
⑴ 取6支试管,按下表3-18操作:
表3-18 谷丙转酶试剂盒的操作
测定管(A) 底物(ml) 0.5 牛血清0.1ml 标准管(S) 0.5 37℃水浴5min 丙酮酸0.1ml 牛血清0.1ml 水0.1ml 混匀后,37℃水浴准确保温30min 对照管(B) 空白管
2,4-二硝基苯 肼(ml)
底物(ml) NaOH(ml)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5 5.0
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