抗氧化能力的检测
抗氧化能力指数测定原理及应用
抗氧化能力指数测定原理及应用随着人们健康意识的提高，抗氧化能力成为的焦点。
抗氧化能力是指机体在面对氧化应激时，消除和降低氧化压力的能力。
为了更好地了解机体的抗氧化能力，抗氧化能力指数的测定变得越来越重要。
本文将详细介绍抗氧化能力指数测定的原理、方法及应用。
抗氧化能力指数测定主要基于氧化还原反应的原理，通过测定样品对自由基的清除能力来评价其抗氧化能力。
一般情况下，测定的指标包括总抗氧化能力、还原力、氧自由基清除能力等。
总抗氧化能力：总抗氧化能力是指机体对氧化应激的综合防御能力，包括酶类和非酶类抗氧化物质。
测定总抗氧化能力的方法主要是基于比色或荧光法，通过检测样品对自由基的清除率来计算总抗氧化能力。
还原力：还原力是指样品对氧化剂的还原能力，通过测定样品在特定条件下的还原能力，可以评估其抗氧化能力。
常用的测定方法包括邻苯三酚自氧化法和铁离子还原法。
氧自由基清除能力：氧自由基是导致氧化应激的主要因素之一，通过测定样品对氧自由基的清除能力，可以了解其抗氧化能力。
常用的测定方法包括电子自旋共振法和化学发光法。
抗氧化能力指数测定在多个领域均有应用，如生物学、医学、营养学等。
以下是几个具体应用的例子。
生物学：在生物学领域，抗氧化能力指数测定被广泛应用于研究物种演化、生物衰老、药物筛选等方面。
通过测定不同物种或不同组织的抗氧化能力，有助于深入了解生物体的抗氧化机制和衰老过程。
医学：在医学领域，抗氧化能力指数测定可以帮助医生评估患者的抗氧化状态，预测其对疾病的易感性。
例如，某些疾病如癌症、糖尿病等与机体的抗氧化能力密切相关，通过测定患者的抗氧化能力，可以为疾病的预防和治疗提供参考。
营养学：在营养学领域，抗氧化能力指数测定可以评价食品的营养价值。
机体的抗氧化系统需要多种营养素的支持，如维生素C、维生素E、硒等。
通过测定食品中的抗氧化物质含量，可以为膳食营养推荐提供依据。
抗氧化能力指数测定对于评价机体的抗氧化状态具有重要意义，它不仅有助于了解个体的健康状况，还可为疾病的预防和治疗提供指导。
抗氧化活性实验方法
抗氧化活性实验方法（体外实验）之迟辟智美创作1、清除DPPH 自由基能力的测定称取一定量的DPPH ，用无水乙醇配制成0.04mg/mL 的DPPH 溶液.分别取2mL 分歧浓度（2，4，6，8mg/mL ）的溶液，加入2mL DPPH 溶液，混合均匀，室温放置30min 后，5000r/min 离心10min.取上清液于517nm 处测吸光值.用Vc 作为阳性对比.样品对DPPH 自由基的清除率用以下公式计算：DPPH ()1201100%A A A -=-⨯清除率 A 0—2mL 无水乙醇+ 2mL DPPH 溶液的吸光值；A 1—2mL 样品溶液+ 2mL DPPH 溶液的吸光值；A 2—2mL 样品溶液+ 2mL 无水乙醇的吸光值.2、总还原能力的测定在10mL 离心管中分别加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲液 2.5mL 和分歧浓度（2，4，6，8mg/mL ）的溶液1mL ，加入2.5 mL 1%铁氰化钾，混合均匀后于50℃ FeCl 3，混匀后静置10min ，在700nm 处检测吸光值.Vc 作为阳性对比.3、对Fe 2+离子螯合能力的测定分别取1mL 分歧浓度（2，4，6，8mg/mL ）的溶液和3.7mL 蒸馏水，加入2mmol/L 的FeCl 2溶液0.1mL 和5mmol/L 的菲洛嗪溶液0.2mL ，25℃水浴10min ，于562nm 处测吸光值.EDTA 为阳性对比.样品对Fe 2+的螯合率计算公式如下：Fe 2+()1201100%A A A -=-⨯螯合率 A 0—1mL 蒸馏水取代反应体系中样品溶液后的吸光值；A 1—样品溶液反应后的吸光值；A 2FeCl 2溶液后的吸光值.4、超氧自由基（O 2-）清除率的测定采纳邻苯三酚自氧化法测定.取50mmol/L Tris-HCl 缓冲液（pH8.2）4.5mL ，置25℃水浴中保温20min ，分别加入1mL 样品溶液和0.4mL 25mmol/L 邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min ，加入1mL 8mmol/L HCl 终止反应，于299nm 处测定吸光度（A x ），空白对比组以相同体积蒸馏水取代样品.按下式计算O 2-清除率：O 2-00100%x A A A -=⨯清除率 A 0—空白对比液吸光度；A x —样品溶液吸光度.5、羟自由基（•OH ）清除率的测定利用H 2O 2与Fe 2+2O 2 1mL 、9mmol/L FeSO 4 1mL 、9mmol/L 水杨酸-乙醇溶液1mL ，分歧浓度的样品溶液1mL.最后加H 2O 2启动反应，37℃反应30min ，以蒸馏水为参比，在510nm 下测定各浓度的吸光度.考虑到样品自己的吸光值，以9mmol/L FeSO 4 1mL 、9mmol/L 水杨酸-乙醇溶液1mL ，分歧浓度的样品溶液1mL 和1mL 蒸馏水作为样品的本底吸收值.按下式计算•OH 清除率： •OH 001100%x x A A A ⎛⎫-=-⨯ ⎪⎝⎭清除率A 0—空白对比液的吸光度；A x —加入样品溶液后的吸光度；A x0—不加显色剂H 2O 2样品溶液本底的吸光度.。
抗氧化功能评价方法
抗氧化功能评价方法
一、化学方法
1.自由基清除能力测定法：常见的方法有DPPH自由基清除法、ABTS 自由基清除法和超氧阴离子清除法。
这些方法通过测定样品对自由基的清除能力，间接反映了其抗氧化能力。
2.过氧化氢清除能力测定法：该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力，评价其抗氧化能力。
3.金属螯合能力测定法：该方法测定样品与金属离子的结合能力，反映了样品的抗氧化能力。
4.过氧化物酶活性测定法：该方法测定样品中过氧化物酶的活性，评价其抗氧化能力。
二、生物学方法
1.细胞实验法：该方法通过将样品加入细胞培养基中，观察其对细胞的保护作用，评价其抗氧化能力。
2.动物模型实验法：将样品通过灌胃、注射等方式给予动物，观察其对动物体内氧化损伤的保护作用，评价其抗氧化能力。
3.人体试验法：将样品通过口服、注射等方式给予人体，观察其对人体内氧化损伤的保护作用，评价其抗氧化能力。
三、综合方法
1.多指标评价法：综合考虑样品在化学方法和生物学方法中的多个指标，给予综合评分，评价其抗氧化能力。
2.生物传感器法：利用生物传感器对样品进行检测，通过测定信号的变化来评价其抗氧化能力。
3.分子生物学方法：通过测定样品中相关基因的表达水平和蛋白质的表达水平，评价其抗氧化能力。
以上仅为抗氧化功能评价方法的一部分，不同方法的选择应根据具体的研究目的和样品类型来确定。
在实际应用中，常常需要结合多个方法进行综合评价，以获得更准确的结果。
abts实验原理
abts实验原理宝子！今天咱来唠唠ABTS实验原理，可有趣啦。
ABTS是啥呢？它呀，就是2,2 - 联氮 - 二(3 - 乙基 - 苯并噻唑 - 6 - 磺酸)二铵盐的简称，这名字老长了，就像那种超级复杂的魔法咒语一样。
ABTS在这个实验里可是个超级明星哦。
这个实验呢，主要是用来测抗氧化能力的。
你想啊，咱们生活里有好多东西都有抗氧化的能力呢，像那些超级健康的水果啦，还有一些养生的茶之类的。
那怎么知道它们抗氧化能力有多强呢？这就轮到ABTS实验上场啦。
ABTS一开始呢，要被氧化成ABTS·+阳离子自由基。
这个过程就像是把一个乖巧的小孩变成一个充满活力的小怪兽一样。
怎么让它变成这个自由基呢？通常会用一些强氧化剂，像过硫酸钾之类的。
就像给ABTS注入了一股超强的能量，让它变身啦。
当ABTS变成ABTS·+之后呢，它就有了特殊的能力。
这个时候，如果我们把想要测试抗氧化能力的样品加进去，就像是一场大战要开始了。
如果这个样品有抗氧化能力，那它就会和ABTS·+发生反应。
就好比抗氧化的样品是一群小英雄，ABTS·+是小怪兽，小英雄们会努力去消灭小怪兽呢。
这个反应是怎么发生的呢？抗氧化的样品会把自己的电子给ABTS·+，这样ABTS·+就会慢慢变回原来的ABTS。
就像小怪兽被小英雄打败了，又变回了原来乖乖的模样。
那我们怎么知道这个反应进行得怎么样了呢？这就需要看颜色的变化啦。
ABTS·+是有颜色的，一般是那种蓝绿色，可显眼了。
当它和抗氧化样品反应之后，颜色会慢慢变淡。
就像小怪兽的力量被削弱了，它身上那种特别的光芒也慢慢消失了。
我们可以用分光光度计来测量这个颜色变化。
分光光度计就像是一个超级厉害的眼睛，能精确地看到颜色变化的程度呢。
如果样品的抗氧化能力很强，那颜色就会变得很淡很淡，就像小怪兽被打得落花流水，几乎消失不见啦。
如果抗氧化能力比较弱呢，颜色就不会有太大的变化，就像小英雄们还不够强大，小怪兽还是很嚣张。
总抗氧化能力测定(FRAP法)
精品文档小麦叶片总抗氧化能力测定（FRAP法）一、实验原理FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tri-pyridyl-tria-zine（Fe 3+-TPTZ）产生蓝色的 Fe2+-TPTZ,随后在 593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。
并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10側，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。
由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
AntioxidantFe3+-TPTZ （橘黄色）---------- >Fe2+-TPTZ （蓝色）二、实验步骤1. FRAPT作液配制：0.3 M pH 3.6醋酸缓冲液：0.364g无水醋酸钠+3.2mL冰乙酸定容至200mL 用1M HCl调节pH至3.6 ;10mmol/L TPTZ溶液25mL 0.078g TPTZ 用40mM盐酸溶液定容至25mL 20mmol/L FeCl3溶液 50mL 2.78g 用 RO水定容至 50mL上述溶液以 10:1:1 的比例混合（现配现用）。
2. 取叶片0.1g，加入2.5mL蒸馏水研磨稍沉淀后取 1.5mL 12000g离心10min（4°C）,取上清液。
3. 在反应管中加入100uL上清液，再加入2.4mL工作液，37°C条件下水浴10min, 于593nm处测定吸光度，4. 标准曲线绘制：以0.1-1.6mmol/L的FeSQ的标准液替代样品绘制标准曲线。
三、结果计算以1.0mmol/L的FeSQ为标准，样品抗氧化活性以达到同样吸光度值为一个FRAP fi，计算结果。
精品文档2.8.2. Ferric Reducing/Antioxidant Power (FRAP) assayBriefly, the FRAP reagent contained 2.5 mL 10 mM L_1TPTZ solution in 40 mM L1HCI plus 2.5 mL 20 mM L1 FeCI^ and 25 mL 0+3 M L1acetate buffer, pH 3*6 was prepared freshly and warmed at 37°C・After addition of root ethanol extracts (prepared as in section 2.7) and incubation at 37°Cfor 5 min, absorbance of the reaction mixture was measured at 593 nm. The final result was expressed as the concentration of antioxidants having a ferric reducing ability equivalent to that of 1 mM L_1 FeSO4based on the standard curve for FeSO4 x 7H.0 at a concentration range between 100 and 1000 pM L_1 [3 口[1] Benzie I F F, Strain J J. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as aMeasure of “ntioxidant Power”： The FRAP Assay[J]. Analytical Biochemistry, 1996, 239(1):70-6.[2] Katarz yna Szafra nska, Rafa? Szewczyk, Kryst yna Maria Jan as. In volveme nt ofmelat onin applied to Vig na radiata, L. seeds in pla nt resp onse to chilli ng stress[J].Central European Journal of Biology, 2014, 9(11):1117-1126.精品文档欢迎您的下载，资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习资料等打造全网一站式需求。
抗氧化能力指数_ORAC_测定原理及应用_续洁琨
AU C= 015 @ ( f0 + f1 ) @ $ t+ 015 @ ( f1 + f2 ) @ $ t+ , + 015 @ ( fx + fx+ 1 ) @ $ t+ , + 015 @ ( fn- 1 + fn ) @ $ t= 015 @ [ 2 @ ( f0 + f1 + , + fn- 1 + fn ) - f0 - fn ] @ $ t
抗氧化活性测定方法
一、抗氧化测定1．DPPH:a)样品溶液浓度初测定，（0~4℃）储藏。
b)称4mg，加无水甲醇溶解于烧杯，转移至100mL容量瓶定容。
浓度为0.04mg/mL。
避光（0~4℃）储藏。
i.5ml离心管（2mlDPPH·溶液+2ml无水甲醇）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
平行测定2次。
A1ii.5ml离心管（2ml待测样+2mL无水甲醇）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
A2iii.5ml离心管（2mlDPPH·溶液+2ml待测样）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
A3清除率（Y）=[1-（A3-A2）/A1]∙100%。
平行测定3次，取平均值。
分别以试样质量浓度和清除率做显形回归方程并计算清除率为50%时，代测样品的浓度值，即半抑制浓度IC50。
自由基清除能力，AE=1/IC50。
根据AE大小判断待测样品清除自由基能力的大小，AE越大清除能力越强。
2．·OHa)PBS制配：磷酸二氢钠31.2g 1000ml蒸馏水定容，磷酸氢二钠71.6g1000ml蒸馏水定容。
移液管移液磷酸二氢钠190ml、磷酸氢二钠810ml 于1000ml 烧杯，pH 计调7.4。
b) 邻二氮菲：148mg 蒸馏水定容100ml 。
c) 硫酸亚铁：208.5mg 蒸馏水定容100ml 。
d) 100ml30%双蒸馏水定容300ml 。
封口。
i. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+0.5ml 22O H +双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm 。
A1ii. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A2 iii. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 待测样+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+0.5ml 22O H +双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A3iv. 10ml 离心管（1mlPBS+双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A 空。
测定抗氧化的六种方法是
测定抗氧化的六种方法是
1.自由基清除能力测定法：通过测定样品对自由基的清除能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括DPPH（2,2-二苯基-1-苦基肼）自由基清除法和ABTS（2,2'-联氨基二-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)）自由基清除法。
2.氧化还原能力测定法：通过测定样品在氧化还原反应中的电子接受能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括还原能力测定法和Ferric reducing antioxidant power（FRAP）法。
3.金属离子螯合能力测定法：通过测定样品对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括铁离子螯合能力测定法和铜离子螯合能力测定法。
4.脂质过氧化抑制能力测定法：通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括脂质过氧化抑制能力测定法和TBARS（硫代巴比妥酸反应物）测定法。
5.蛋白质氧化抑制能力测定法：通过测定样品对蛋白质氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括蛋白质碳氧化酶活性测定法和蛋白质过氧化物酶活性测定法。
6.细胞抗氧化能力测定法：通过测定样品对细胞内氧化应激的保护作用来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括细胞活力测定法和细胞内氧化应激指标测定法。
abts检测原理
abts检测原理宝子们！今天咱们来唠唠ABTS检测原理这个超有趣的事儿。
ABTS呀，它是一种可用于检测抗氧化活性的试剂呢。
想象一下，在一个小小的化学世界里，ABTS就像一个特别的小侦探。
它原本是一种蓝绿色的溶液哦。
这个溶液里的ABTS分子就像是一群整装待发的小士兵，每个分子都有着自己独特的结构和性质。
当我们要检测某个东西的抗氧化能力的时候呢，就把这个待检测的样品，比如说可能是一种植物提取物，或者是某种营养补充剂，放进ABTS溶液里。
如果这个样品具有抗氧化性，那就像是这个样品里有一群超级英雄。
这些超级英雄呢，会和ABTS小士兵发生反应。
抗氧化物质会把ABTS小士兵从原本的蓝绿色状态变成另一种颜色，一般是变成绿色或者无色。
这就好比超级英雄把小士兵的蓝绿色制服给换了，或者直接让小士兵隐身了一样，超级神奇呢！那为啥会这样呢？这是因为抗氧化物质具有提供电子或者氢原子的能力。
ABTS分子呢，在溶液里是一种阳离子自由基的状态，它特别渴望得到电子或者氢原子来让自己变得更稳定。
当抗氧化物质出现的时候，就慷慨地把电子或者氢原子给了ABTS阳离子自由基。
这个过程就像是一场慷慨的赠予仪式。
ABTS得到了这些电子或者氢原子之后，它的化学结构就发生了变化，从而导致颜色也跟着改变啦。
而且呀，这个颜色变化的程度和抗氧化物质的抗氧化能力是成正比的哦。
如果我们放进ABTS溶液里的样品抗氧化能力特别强，那ABTS溶液的颜色就会变得特别淡，甚至完全无色。
就像超级英雄的力量特别强大，一下子就把所有的ABTS小士兵都改变了状态。
相反，如果样品的抗氧化能力比较弱，那ABTS溶液的颜色可能只是稍微变浅一点，从蓝绿色变成浅绿色这样。
我们还可以通过一些仪器，像分光光度计来精确地测量ABTS溶液颜色变化前后在特定波长下的吸光度。
根据吸光度的变化值，就能准确地算出这个样品的抗氧化活性啦。
这就像是给超级英雄们的能力打分一样，吸光度变化大的，抗氧化能力得分就高，变化小的，得分就低。
怎么测量抗氧化能力的方法
怎么测量抗氧化能力的方法
测量抗氧化能力涉及许多不同的方法，以下是一些常用的方法：
1. 自由基清除能力测量：通过测量样品对自由基的清除能力来评估其抗氧化能力。
常用的自由基包括DPPH (2,2-二苯基-1-苦味肼)、ABTS (2,2'-联氮二（3-乙基苯并噻唑啉酸琥珀酸盐）二阳离子)和超氧阴离子自由基。
2. 过氧化氢清除能力测量：过氧化氢清除能力（或称过氧化氢酶样本）测量了样品对过氧化氢的清除能力，过氧化氢是由超氧阴离子自由基生成的。
3. 铁还原能力测量：铁还原能力指样品还原Fe3+离子为Fe2+离子的能力。
常用的铁还原能力测量方法包括FRAP (铁还原能力)和CUPRAC (铜还原能力)。
4. 水解抗氧化能力测量：通过测量样品对脂质氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括TBARS (酸性的硫代巴比妥酸反应物)、比色法和荧光法。
5. 抗氧化酶活性测量：通过测量样品中抗氧化酶（如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽-S-转移酶）的活性来评估其抗氧化能力。
需要注意的是，测量抗氧化能力的方法多种多样，选择适合的方法应根据研究目的和样品特性进行。
建议在进行实验之前进行充分的文献调研和试验验证，并在
专业人士的指导下进行实验操作。
抗氧化能力的测定（精选4篇）
抗氧化能力的测定（精选4篇）以下是网友分享的关于抗氧化能力的测定的资料4篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。
DPPH抗氧化能力测定篇一DPPH.法测定绿原酸清除自由基能力2.1 待测液的制备将绿原酸(纯度56%)、维生素C和没食子酸分别配制成体积分数为0.1mg/mL的无水乙醇溶液。
2.1.1 绿原酸母液的配制称取9.0 mg绿原酸，定容到50ml，即可得到绿原酸的母液0.1mg/mL。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml;mg/ml。
2.1.2 Vc母液的配制称取mg VC，定容到100ml，即可得到VC的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.3 没食子酸母液的配制称取mg 没食子酸，定容到100ml，即可得到没食子酸的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.4 DPPH母液的配制称取mg DPPH，用无水乙醇定容到100ml，即可得到DPPH的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成至一定浓度的溶液。
CDPPH= mg/ml。
（建议用0.025mg/mL）2.2 DPPH.溶液的可见光谱以无水乙醇为对照，在分光光度计上对DPPH.溶液进行在440～600nm下扫描。
Amax= nm2.3 抗氧化活性测定DPPH.是一种稳定的自由基，它的乙醇溶液呈紫色，在可见光区最大吸收峰为nm。
当DPPH.溶液中加入自由基清除剂时，溶液颜色变浅，517nm处的吸光度变小，而吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系。
因此，可用来检测自由基的清除情况，从而评价某物质的抗氧化能力，其能力用清除率(Scavenging Rate,SR)来表示，清除率越大，抗氧化能力越强具体实验步骤及方法：精确吸取的DPPH.溶液2mL与2ml无水乙醇混合均匀后，以相对应的溶剂(4mL无水乙醇)为对照，用分光光度计测定上述溶液在nm处的吸光度值(A0)。
常见体外抗氧化实验方法-抗氧化试验-抗氧化活性实验方法-抗氧化测定法-李熙灿Xican Li
常见体外抗氧化实验方法(含原理、试剂配制、操作流程、实例分析、英文表述)- 2023-3①DPPH·自由基清除法 2 Array②ABTS·+自由基清除法 5③ FRAP法(铁还原法) 811④过氧自由基(超氧自由基，·O2-)清除法(连苯三酚自氧化法)⑤羟基自由基(·OH)清除法(脱氧核糖法) 14⑥PTIO·自由基清除法(水溶液中) 16⑦ CUPRAC法(铜还原法) 18⑧铁络合能力(Ferrozin法) 20⑨脂质过氧化清除法(亚油酸为底物) 23⑩抗氧化产物的预测26①DPPH·自由基清除法/DPPH法原理：DPPH·（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical）即α, α-二苯基-β-苦基肼基游离基，由于p-π共轭，所以，氮自由基能稳定存在[1]。
当DPPH自由基被某物质清除，其最大吸收波长519nm处的吸光度A值随之减小；相应地，某物质自由基清除活性增加，其体外抗氧化活性也增加。
实验操作[1]:1.1 DPPH测试液的配置（适用于酶标仪测量，总体积为100μL）取DPPH 2毫克溶于约40mL溶剂（乙醇、95乙醇或甲醇）中，超声5min，充分振摇，务使上下各部分均匀。
取DPPH溶液80μL加入到96孔板中，加95乙醇（或无水乙醇）20μL，稀释混合，测A值，使A＝0.20±0.01。
该DPPH溶液避光保存，4h内用完。
（注意：如果是用分光光度计．．．．．，则A＝0.6±0.02比较合适）1.2 样品液的配置样品用合适的溶剂溶解，为便于计算，可配成1mg/mL浓度。
溶剂根据样品的极性进行选择，首选95乙醇或无水乙醇，如不溶可用DMSO。
1.3 预试取DPPH溶液80μL，往其中加少量样品液，加样时，先少后多渐加，边加边混合，并观察溶液的褪色情况，当溶液颜色基本褪去时，记下样品的加样量。
抗o试验原理
抗o试验原理
抗O试验是一种常用的实验方法，用于检测物质的抗氧化能力。
该实验基于物质对氧气（O）的化学反应，通过测量物质在氧化环境中的表现来评估其抗氧化效果。
实验过程如下：首先，准备一个含有氧气的实验体系。
可以将待测试物质与一定量的氧气暴露在一定温度的环境中，或者将待测试物质溶解在含氧气的溶液中。
接下来，根据实验需要，可添加一定浓度的过氧化氢（H2O2），用作氧化剂。
然后，将含有待测试物质的实验体系与一个空白对照体系进行对比。
在一定时间内（通常为几分钟到几小时），观察和比较实验体系与对照体系的变化情况。
可以通过物质的颜色变化、浊度变化、沉淀形成等指标来评估其抗氧化效果。
若待测试物质具有较强的抗氧化能力，则其在实验过程中会呈现较轻微的变化，而对照体系则可能发生明显的氧化反应。
值得注意的是，在进行抗O试验时，需控制实验条件，如温度、光照、反应时间等，以确保实验结果的准确性和可比性。
此外，还需注意选择合适的指标来评价物质的抗氧化能力，以及对实验结果进行统计分析，以得出可靠的结论。
总之，抗O试验是一种常用的实验方法，通过模拟物质在氧化环境中的表现，评估其抗氧化效果。
通过合理设计实验条件和选择适当的评价指标，可以得出准确可靠的结果。
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较1.DPPH自由基清除法：DPPH是一种紫色自由基，具有很强的吸收特性。
该方法通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
这种方法简单、快速，广泛用于抗氧化活性的初步筛选。
但是该方法只能反映样品对一种自由基的清除能力，不能全面评估其抗氧化性能。
2.ABTS自由基清除法：ABTS是一种蓝色自由基，其吸收波长与DPPH不同，具有更广的吸收范围。
该方法通过测定样品对ABTS自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
与DPPH法相比，ABTS法可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
但是该方法需要较长时间才能得到准确结果。
3.过氧化氢清除法：该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力来评估其抗氧化活性。
过氧化氢是一种常见的氧化剂，可以导致细胞损伤。
该方法简单、快速，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是过氧化氢法只能评估样品对过氧化氢的清除能力，不能反映其对其他自由基的清除能力。
4.铁离子还原能力法：该方法通过测定样品对Fe3+的还原能力来评估其抗氧化活性。
Fe3+是一种常见的氧化剂，可以与还原剂发生反应，形成Fe2+。
该方法简单、快速，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是铁离子还原能力法只能评估样品对Fe3+的还原能力，不能全面评估其抗氧化性能。
5.脂质过氧化抑制能力法：该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化活性。
脂质过氧化是一种常见的氧化反应，可以导致脂质的氧化损伤。
该方法能够全面评估样品的抗氧化性能，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是该方法操作繁琐，需要较长时间才能得到准确结果。
总体来说，不同的抗氧化活性测定方法各有优劣。
在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法进行测定。
此外，多种方法的综合比较可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
抗氧化能力检测方法如何选择
抗氧化能力检测方法如何选择1.避免氧自由基法避免氧自由基法是一种常用的营养物质抗氧化能力检测方法，通过测定物质对人工合成的活性氧自由基的清除能力来反映其抗氧化能力。
常用的活性氧自由基包括DPPH自由基和ABTS自由基。
该方法简单易行，适用于大批量样品处理。
2.过氧化氢降解法过氧化氢降解法是一种定量测定物质抗氧化能力的方法，通过测定物质对过氧化氢的消耗程度来评估其抗氧化能力。
该方法操作简便，适用于多种样品类型。
3.金属离子螯合能力法金属离子螯合能力法是一种常用的抗氧化能力检测方法，通过测定物质对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化性能。
常用的金属离子包括铁离子、铜离子等。
该方法适用于多种样品类型，尤其适用于检测多酚类化合物的抗氧化能力。
4.体外细胞模型法体外细胞模型法是一种模拟人体细胞环境，通过测定物质对细胞的氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的细胞模型包括人类肝细胞HepG2、人类白血病细胞HL-60等。
该方法较为贴近真实的生理环境，但操作较为繁琐。
5.动物模型法动物模型法是一种模拟人体内环境，通过测定物质对动物体内氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠等。
该方法能够更好地反映物质的抗氧化能力，在药物研发领域较为常见，但需注意动物伦理和实验条件等问题。
在选择抗氧化能力检测方法时，需要综合考虑实验目的、被测物的特性、实验条件、预算等因素。
有时需要结合多种方法来评估物质的抗氧化能力，增加研究可靠性。
同时，还需注意选择已经被广泛验证和接受的方法，以确保实验结果的准确性和可重复性。
抗氧化能力的体外测定方法研究进展
抗氧化能力的体外测定方法研究进展一、本文概述随着现代生活节奏的加快和环境污染的日益严重，人体面临的氧化应激压力不断增大，抗氧化能力的重要性日益凸显。
因此，抗氧化能力的体外测定方法研究进展成为了生物医学、营养学、食品科学等领域的研究热点。
本文旨在综述近年来抗氧化能力体外测定方法的研究进展，以期为相关领域的研究人员提供全面的信息参考和技术指导。
本文将首先对抗氧化能力的概念进行界定，明确其生理意义和重要性。
随后，将重点介绍几种常用的抗氧化能力体外测定方法，包括总抗氧化能力（TAC）测定、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定、过氧化氢酶（CAT）活性测定、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定等。
还将探讨这些方法的优缺点、适用范围以及在实际研究中的应用情况。
通过本文的综述，我们希望能够为相关领域的研究人员提供全面的抗氧化能力体外测定方法的知识体系和技术指导，为推动抗氧化能力研究的发展和应用提供有益的参考。
二、抗氧化能力的概念和机制抗氧化能力是指生物体系在面临氧化压力时，通过一系列复杂的生化反应来消除或抵抗活性氧（ROS）和活性氮（RNS）的能力。
这些活性物质是由正常细胞代谢或环境应激产生的，它们具有高度反应性，能够破坏细胞内的关键分子，如DNA、蛋白质和脂质，从而引发各种疾病，如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等。
抗氧化机制主要包括酶促和非酶促两大类。
酶促抗氧化系统包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等，它们能够催化ROS和RNS的分解，从而防止其对细胞的损害。
非酶促抗氧化系统则主要包括各种抗氧化剂，如维生素C、维生素E、谷胱甘肽、尿酸、胆红素等，它们可以直接与ROS和RNS反应，从而消除其活性。
近年来，对抗氧化能力的研究已经从简单的抗氧化剂筛选发展到了对抗氧化机制的深入研究。
研究者们开始关注抗氧化剂之间的协同作用，以及抗氧化剂与细胞信号通路之间的关系。
对抗氧化能力的评估方法也从单一的化学测定发展到了细胞模型和动物模型的评估，使得对抗氧化能力的理解更加全面和深入。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1]FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中，Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。
反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。
该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。
而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。
法(trolox equivalent antioxidant capacity)ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自基。
在抗氧化剂存在时，这种自基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。
TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。
但是，ABTS·+并非生理自基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。
法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity) DPPH·(二苯代苦味肼基自基)法是较常用的方法之一。
DPPH·是一种稳定的以氮为中心的自基，其醇溶液呈深紫色,在517nm 处有一吸收峰。
总抗氧化能力测定FRAP法
小麦叶片总抗氧化能力测定F R A P法一、实验原理FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tri-pyridyl-tria-zineFe3+-TPTZ产生蓝色的Fe2+-TPTZ,随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力;由于反应在酸性条件下进行,可以抑制内源性的一些干扰因素;并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM,因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显着干扰FRAP法的检测反应;由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的,样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显着影响检测反应;AntioxidantFe3+-TPTZ橘黄色——————> Fe2+-TPTZ 蓝色二、实验步骤1.FRAP工作液配制：M pH 醋酸缓冲液：无水醋酸钠+冰乙酸定容至200mL,用1M HCl调节pH至；10mmol/L TPTZ溶液25mL： TPTZ用40mM 盐酸溶液定容至25mL；20mmol/L FeCl溶液50mL：用RO水定容至50mL；3上述溶液以10:1:1的比例混合现配现用;2.取叶片,加入蒸馏水研磨稍沉淀后取 12000g离心10min4o C,取上清液;3.在反应管中加入100uL上清液,再加入工作液,37 o C条件下水浴10min,于593nm处测定吸光度,4.标准曲线绘制：以的FeSO的标准液替代样品绘制标准曲线;4三、结果计算以L的FeSO为标准,样品抗氧化活性以达到同样吸光度值为一个FRAP值,计算结果;41Benzie I F F, Strain J J. The Ferric Reducing Ability of Plasma FRAP as a Measure of “Antioxidant Power”: The FRAP AssayJ. Analytical Biochemistry, 1996, 2391:70-6.2Katarzyna Szafrańska, Rafa Szewczyk, Krystyna Maria Janas. Involvement of melatonin applied to Vigna radiata, L. seeds in plant response to chilling stressJ. Central European Journal of Biology, 2014, 911:1117-1126.。
简述抗o试验的原理和应用
简述抗o试验的原理和应用1. 原理抗o试验是一种用于检测物质的抗氧化能力的实验方法。
它基于氧气与物质发生氧化反应的原理，通过观察物质处理前后的氧化状态的变化，来评估其抗氧化能力。
1.1 氧化反应氧化是一种指物质与氧气发生化学反应的过程。
当物质与氧气接触时，由于氧气的高氧化能力，会导致物质分子内部的化学键被氧气分子断裂，形成新的化学物质。
这个过程会导致物质的性质发生改变，并可能产生有害的副产品。
1.2 抗氧化能力抗氧化能力是指物质对氧化反应的抵抗能力。
一般来说，物质的抗氧化能力越强，其分子内部的化学键越稳定，被氧气氧化的速度就越慢。
因此，抗氧化能力强的物质可以保护其他物质不被氧化，从而延长物质的使用寿命。
2. 应用抗o试验广泛应用于食品、化妆品、药品等领域。
下面列举了一些常见的应用场景： - 食品行业：抗o试验可以用于评估食品中的抗氧化物质含量和抗氧化能力，从而评价食品的品质和安全性。
例如，抗o试验可以用于检测食用油的抗氧化性能，评估其炸制食品时的稳定性。
- 化妆品行业：抗o试验可以用于评估化妆品中的抗氧化成分的稳定性和抗氧化能力。
这对于防止化妆品因氧化而变质、减少色斑和皮肤老化等问题非常重要。
- 药品行业：抗o试验可以用于评价药物中的抗氧化剂的功效和稳定性，从而提高药物的疗效和安全性。
例如，抗o试验可以用于评估抗癌药物的抗氧化能力，以及预测其对肿瘤细胞的治疗效果。
3. 抗o试验方法抗o试验有很多不同的方法，下面介绍了其中几种常见的方法： - DPPH法：这是一种常用的抗o试验方法，它基于2,2-二苯基-1-苦吗啉-5,6-烷二酮（DPPH）的性质。
DPPH是一种紫色的有机自由基，它的颜色会随着被抗氧化物质的引入而褪色。
因此，通过测量溶液的颜色变化，可以评估物质的抗氧化能力。
- ORAC法：这是一种用于测量物质的抗氧化能力的方法，在食品和化妆品行业得到了广泛应用。
它基于抗氧化物质与自由基之间的反应。