Ki67、Survivin在早期宫颈癌中的表达与预后相关性分析

Ki67、Survivin在早期宫颈癌中的表达与预后相关性分析
目的探讨Ki67、Survivin在早期宫颈癌组织中的表达，且与术后生存期及淋巴结转移的关系；分析Ki67和Survivin的相关性。

方法收集110例手术切除或活检标本，包括正常宫颈组织，宫颈癌组织（按5年存活率及有无淋巴结转移分组），进行免疫组织化学法检测Ki67、Survivin蛋白的表达。

结果宫颈癌组织中Ki67的表达率为85%，明显高于正常宫颈组织，Ki67阳性表达与术后生存时间呈负相关（x2=5.7624，P＜0.05），与淋巴结转移呈正相关（x2=11.4820，P＜0.01）；宫颈癌组织中Survivin表达率为80%，高于正常宫颈组织，Survivin 阳性表达与术后生存時间呈负相关（x2=5.2410，P＜0.05），与淋巴结转移呈正相关（x2=10.0624，P＜0.01）。

结论Ki67、Survivin可作为反映宫颈癌预后生存期及淋巴结转移程度的指标。

标签：宫颈癌；Ki67；Survivin；生存时间；淋巴结转移；免疫组织化学
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，目前全球发病的年轻化趋势越来越明显，严重威胁女性健康。

随着分子生物学的发展，人们还发现了越来越多的与预后相关的生物学指标[1]，如凋亡途径相关基因，细胞增殖相关基因，肿瘤转移相关的基因以及与生存相关的基因等。

反映肿瘤细胞增殖活性的指标很多，目前以Ki67最具代表性；近年来该因子用于各种恶性肿瘤生物学行为的研究Survivin 是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新成员，是迄今为止发现最强的凋亡抑制因子，有研究表明Survivin的表达与肿瘤的恶性程度、预后不良呈正向关系，是一个有潜在价值的肿瘤标志，与肿瘤预后密切相关。

本实验通过收集标本，通过免疫组织化学法检测Ki67、Survivin蛋白在宫颈癌组织中的表达，分析两者在宫颈癌组织中的表达情况，进一步探讨其与宫颈癌预后的关系及两者之间的相关性，为临床防治宫颈癌提供理论依据。

1 资料与方法
1.1 一般资料
宫颈标本取自2000年1月～2010年12月就诊于山西省长治市人民医院妇产科且行手术切除的宫颈癌患者，选取80例为实验组，其标本均经病理检查确诊为早期宫颈癌的宫颈新鲜备用标本，其中存活率>5年有淋巴结转移组10例、无淋巴结转移组30例，存活率75%为4分。

显色强度黄色为1分，呈棕黄色为2分，呈棕褐色为3分。

细胞染色强度（等于阳性细胞积分、显色强度积分）：0分为阴性（-），1～4分为弱阳性（+），5～8分为中度阳性（++），9～12分为强阳性（+++）。

1.5 统计学处理
应用SPSS17.0软件进行统计学分析，组间比较采用x2检验及Fisher’s精确概率法，两指标间比较采用二元变量的等级相关检验，P＜0.05为差异有统计学
意义。

2 结果
2.1 不同宫颈组织Ki67的表达
Ki67在宫颈癌组的阳性表达率明显高于正常宫颈组，在正常宫颈组的阳性表达率为6.7%，宫颈癌组为85%，两组Ki67的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。

见表1。

2.2 不同宫颈组织Survivin的表达
Survivin在宫颈癌组的阳性表达率高于正常宫颈组，两组Survivin的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。

见表1。

2.3 宫颈癌组织中Ki67与Survivin的表达与预后生存时间及淋巴结转移的关系
在80例早期宫颈癌组织中存活率>5年的40例标本中Ki67的阳性表达率为75%，Survivin的阳性表达率为70%；而存活率<5年的40例标本中Ki67的阳性表达率为95%，Survivin的阳性表达率为90%。

其中有淋巴结转移的标本20例，Ki67阳性表达率为95%，Survivin阳性表达率为90%；无淋巴结转移的标本60例，Ki67阳性表达率为82%，Survivin阳性表达率为77%。

研究结果显示，Ki67、Survivin的表达均与宫颈癌预后生存时间及淋巴结转移呈负相关，差异有统计学意义（P＜0.05）。

见表2。

2.4 宫颈癌组织中Ki67和Survivin表达之间的相关性
在68例Ki67阳性的宫颈组织标本中，有20例Survivin表达阳性，阳性率为29.41%，在12例Ki67阴性的宫颈癌组织标本中，有5例Survivin表达阴性，7例Survivin表达阳性，阳性率为58.33%。

两者的表达是不相关的（r=0.182，P=0.258）。

见表3。

3 讨论
宫颈癌是全球发病率居第2位的妇女恶性肿瘤，仅次于乳腺癌，在我国居女性恶性肿瘤之首，且有逐年递增的趋势。

山西省襄垣县、阳城县是国内外罕见的宫颈癌高发区，且发病人群有年轻化的趋势，是严重威胁妇女健康的疾病之一。

研究[2]发现早期宫颈癌5年存活率为85.3%，有淋巴结转移的患者5年存活率为70.07%；导师前期研究[3-5]发现早期宫颈癌无淋巴结转移的5年存活率为87.4%，有淋巴结转移的患者5年存活率为49.7%，有淋巴结转移的5年存活率显著低于无淋巴结转移者。

随着分子生物学的发展，人们发现了越来越多的与预后相关的生物学指标，宫颈癌的发生、发展与抑癌基因的表达、调控，细胞凋亡以及细胞增殖有关。

3.1 宫颈癌与Ki67
反映肿瘤细胞增殖活性的指标很多，目前以核增殖抗原Ki67最具代表性；国内外文献报道[6]多种恶性肿瘤中均存在Ki67的过度表达。

因此推测Ki67可能是一种癌基因[7]，过度表达可以导致肿瘤的发生；Ki67与恶性肿瘤的发生，转移和预后密切相关，已广泛用于研究肿瘤的生物学行为及预后分析。

Ki67抗原[8]属于非组蛋白，是一种与细胞增殖相关的核抗原，因产生抗体的克隆生长在培养板67而得名。

Ki67仅分布于细胞核内[9]，高度增殖的细胞多与癌前病变组织及其恶性组织相关，增生、增殖常被认为是生长紊乱的早期指标。

已有国内外文献报道[10]，Ki67可作为许多肿瘤的预后指标，另有研究表明Ki67在早期宫颈癌进展中有较强的预测作用。

本研究通过收集早期宫颈癌蜡块标本，以正常宫颈组织切片为对照，采用免疫组织化学法对Ki67进行测定，探讨Ki67与宫颈癌预后生存时间及淋巴结转移的关系，进一步证实Ki67表达与宫颈癌预后的相关性。

3.2 宫颈癌与Survivin
Survivin是目前发现的最强的凋亡抑制因子，可以通过3种途径[11]抑制细胞调亡：（1）通过内源性和外源性途径抑制细胞调亡；（2）参与细胞有丝分裂的调节和胞质分裂；（3）促进血管的形成。

Survivin在癌组织中过度表达克服凋亡检测点，通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖；在大多数人类常见肿瘤如肺癌，结肠癌，胰腺癌，前列腺癌，乳腺癌，胃癌等中表达异常升高；其表达往往与肿瘤的恶性程度、预后不良呈正向关系，是一个有潜在价值的肿瘤标志，与肿瘤预后密切相关。

Kim等[12]对不同宫颈组织中Survivin的表达的研究发现，其在Ⅰ级CIN中的表达率为66.7%，在Ⅱ～Ⅲ级CIN中表达率为87.5%，在宫颈鳞状上皮癌组织中表达率为100%。

研究认为，Survivin的表达与宫颈癌的发展密切相关。

Yoshida 等[13]研究显示Survivin表达上调预示生存期短和预后不良。

而Lee等[14]研究却显示Survivin的表达和生存率之间无关联性。

Survivin是否可以成為宫颈癌的一个新的预测指标尚有争议[15-16]。

本试验通过收集标本，利用SP法对早期宫颈癌组织标本及正常宫颈组织标本Survivin的测定，分析其与预后生存期及淋巴结转移的关系，进一步探讨及证实Survivin高表达与早期宫颈癌预后的相关性，并得出结论。

本课题立足山西省这一宫颈癌高发区，首先对2000年1月～2010年12月就诊于长治市医院的早期宫颈癌患者进行流行病学调查，分析其生存时间。

在此基础上联合检测Ki67与Survivin基因，其分别在早期宫颈癌组织中高表达，验证了Ki67、Survivin基因在早期宫颈癌中的表达情况，以及均与宫颈癌患者术后生存时间呈负相关、与淋巴结转移呈正相关。

同时分析Ki67、Survivin两种蛋白表达在早期宫颈癌中的相关性差异无统计学意义，两者无明显相关性，通过联合检测Ki67和Survivin表达与宫颈癌发生的相关性，进一步发现两种基因联合与宫颈癌临床病理特征、术后生存的关系，有望为术后有效评估患者预后，指导术后辅助干预提供理论依据，也为下一步进行二者表达与宫颈癌发病机制的研究及寻求新的治疗宫颈癌靶点提供理论依据[17-18]。

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