紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量

紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量
紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量
1 序言
1.1 研究的目的和意义
维生素是必须得从食物中获取并且在物质代谢过程中起到了极其重要的作用的一种物质[1]。

这类物质在生物体内不能合成或者合成量特别少，不足以维持生物体的正常的生理功能，虽然生物体对维生素的需要量很少，但所需量必须经常从食物中获得，所以我们研究维生素具有重要的意义[2]。

维生素C是维生素的一种，维生素C在医学上被称作抗坏血酸，具有防治坏血病的功效，它是显示抗坏血酸生物活性的一类有机化合物的总称[3]。

维生素C广泛的存在于我们常见的水果和蔬菜中，所以我们能够准确地测定出水果中地维生素C的含量，对我们的日常饮食和健康的生活具有重要的指导意义。

1.2维生素C含量的研究史
中国是人口众多的国家，人口密度相对较大，病毒发病率较高，我国在对抗病毒的战争中起到一个关键作用。

SARS病毒首先出现在我们中国，死于SARS 病毒的90%是我们中国人。

国内对于维生素C的生产水平已经处于领先地位,可以彻底解决病毒的问题，只是生产的维生素C大部分都外销，我们中国人服用维生素C的平均剂量，远远低于一些欧美国家和日本。

目前，围绕着维生素C 含量的测定产生了一系列的研究课题和任务，因为它对人们日常饮食具有重要指导意义，成为了现今国内外研究的热点，现在主要有2,4-二硝基苯肼比色法、碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等来测定维生素C的含量。

1.2.1碘量法
武文等[4]利用I?的氧化性,用淀粉作指示剂,采用I?作标准溶液进行直接滴定,这叫做直接碘量法。

直接碘量法的滴定原理:维生素C分子中的二烯醇基可被I?氧化成二酮基,当维生素C分子中的二烯醇基被I?完全氧化后,过量的I?与淀粉指示剂发生显色作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液中有蓝色出现时，即为滴定终点。

直接碘量法测定水果和蔬菜
中维生素C的含量时，要求所测的果蔬溶液为无色和浅色的是样溶液或者提取液,该方法测维生素C不需要特殊的测定仪器,操作非常简便、准确。

陈诚等[5]利用维生素C在10-5mol/L以下乙酸介质中,与I2反应的性质，这
种方法叫做间接碘量法。

反应过程中剩余的I2与I-生成显色物质I3离子:I2+I-=I3,然后通过I3吸光度,再算出维生素C的吸光度,从而测定出水果和蔬菜中的维生素C含量。

由于许多果品中都含有叶绿素、胡萝卜素、叶黄素、花青素等色素物质，其维生素C提取液都有颜色，致使碘量法测定维生素C的含量时，滴定终点不易辨别，所以，这类方法不适用于含花青素高的物质[6]。

1.2.2 2,4-二硝基苯肼比色法
张颖等[7]所采用2,4-二硝基苯肼比色法对不同产地的不同生长环境下的枸杞子中维生素C的含量进行了测定张颖与比较，用活性炭吸附样品中的维生素C,再将还愿型的维生素C氧化为脱氢的维生素C，它是一种沽糖衍生物，再与2,4-二硝基苯肼发生反应生成红色脎，在波长为540nm的波长下进行测定。

采用2,4-二硝基苯肼比色法来测定维生素C的含量,具有方便测量、测量准确的特点。

但是2,4-二硝基苯肼比色法，也会受到色素的影响，当待测的果蔬提取液或试样溶液有颜色时，吸光值会受到颜色的影响，导致测定结果的不准确性。

1.2.3高效液相色谱法
王艳颖[8]等人利用高效液相色谱法来测定水果和蔬菜中维生素C 的含量，这是一种新方法。

他们都是利用HYPERSIL-C18色谱柱，而王艳颖、刘长建、姜波是采用0.05mol/L磷酸二氢钾为缓冲液，以甲醇作为流动相。

王艳颖等测定草莓中维生素C含量的结果表示，在果蔬提取液的浓度较小的范围内有良好的线性关系，回收效果比较好，回收率高达0.98%以上，相对标准误差在5%以下。

高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法，具有分析时间短、灵敏度高、测定迅速、样品处理简单、选择性好和测定结果重复性好等优点[12]。

1.2.4紫外分光光度法
马宏飞[9]等人用紫外分光光度法确定维生素C的含量，使用TU-1901双光束紫外可见分光光度计测得各种常见水果试样溶液的吸光度，通过各种常见水果试样溶液的吸光度来算出各种常见水果中维生素C 的含量。

维生素C在溶液中极容易被破坏，容易被空气中氧化，稳定剂也会对光线产生一些吸收，所以测定维生素C时，要想使滴定结果准确，稳定剂和破坏剂的选择是关键[10]。

首先利用紫外分光光度法来确定维生素C的溶液的最大吸收波长,在最大吸收波长下绘制工作曲线，测出水果试样溶液或提取液的吸光度，再通过工作曲线，快速且定。