最新定量项目的性能验证.
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✓ 实验材料：① 选用与检测仪器相配套的试剂、校准 品及其它辅助试剂。② 两个水平的质控品：质控水 平1、质控水平2。
精密度
➢ 统计分析：应用Excel软件计算出X，SD值及CV值。 结果判断：批内测定质控1、质控2的CV值均小于1/4 TEa ，可判定该项目批内精密度结果为“通过”。 以ALT为例（链接）
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
值。 ➢ 比较稀释后的样本检测值的均值和其预期值，计算R值
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
参考依据
正确度性能评价（NCCLS EP15A2 ）
比对及偏差（ NCCLS EP9）
精密度评价（ NCCLS EP5A2 EP15A2 ）
批间不精密度： 批内不精密度：
线性范围（可报告范围）评价（ NCCLS EP6） 生物参考区间评价 （NCCLS C-28A)
术语和定义
➢ 正确度：一系列测量平均值与接受参照值之间一致程度。 ➢ 精密度：精密度是指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次
参考区间验证
➢ 参考区间来源 ➢ 检测系统一致性 ➢ 参考人群适用性 ➢ 临床医生参与 ➢ 需要时，根据性别、年龄等划分
参考区间验证
➢ 参考区间来源： ➢ NCCLS C28-A2推荐可以引用权威刊物、厂家试剂
说明书或转移其他医院实验室的生物参考区间 ，采 用适用性评估的方法建立参考区间 ➢ 《全国临床检验操作规程》（第3版） ➢ 试剂供应商提供的对应的参考区间
检测值与预期值比较相对偏差，应小于TEa,若大于TEa ，则去 除某点，缩小分析范围作为真实的可报告范围。
例ALT(链接)
临床可报告范围
➢ 高值标本一份：浓度在AMR上限的80%－120%范围内 ➢ 用厂商推荐的稀释液按最高稀释倍数稀释标本 ➢ 原始样本和稀释后的样本重复检测两次，分别计算其均
精密度
➢ 批间精密度评价 实验方法： 由同一个或同一组操作者在同一台仪器上进行操作，使用相同 的校准品、相同种类和批号的试剂。每天用两个浓度，共做20 天。评估结束时共有40个测试结果。从所有40个数据计算出批 批间精密度。
➢ 实验材料： ① 选用与检测仪器相配套的试剂、 校准品及其它辅助试剂。 ② 自配两个水平的质控品：质控水平1、质控水平2。
➢ 线性范围指对没有进行任何预处理（稀释，浓缩等）的 标本，分析方法能够直接测定出的待测物范围，也就是 系统最终的输出值（活性或浓度）与被分析物的活性或 浓度成线性比例的范围。
➢ 临床可报告范围是指对临床诊断、治疗有意义的待测物 浓度范围。此范围如果超出了线性范围，可将标本通过 稀释、浓缩等预处理使待测物浓度处于分析测量范围内， 最后结果乘以稀释倍数。
实验方法均值
700 600 500 400 300 200 100
0 0
两种方法均值散点图
y = 1.013R82x =+ 00..90979088
200
400
比较方法均值600 Nhomakorabea800精密度（EP5-A2）
批内精密度评价
✓ 实验方法：选择具有医学决定水平的高低值标本按 规定的操作方法，在较短的时间内及稳定的条件下 各做20次重复测定。计算其X、SD与CV。变异系 数即代表批内精密度。
实验室内部比对
以上实验至少重复5天，每天实验必须进行校准和室内 质控。只有在室内质控合格的情况下，当天的实验室数 据才有效。
➢ 回归计算：利用所有样本双份测定的有效数据，计算两 个方法间的线性回归方程：Y=a+bX。r≥0.975（或 r2≥0.95） ，b接近1，a足够小。
实验室内部比对
偏差估计：在医学决定水平，利用回归方程计算预期偏差，预期偏 差Bx=a+(b-1)X，相对偏差=Bx/X 。结论：预期偏差小于1/2TEa偏 差，其性能得到验证。以ALT为例（链接）
正确度验证
➢ 正确度评价（应用3次参加卫生部临检中心能力验证 的结果）
➢ 以ALT为例（链接）
实验室内部比对
➢ 实验室使用两套及以上检测系统检测同一项目时，应有比对数 据表明其检测结果的一致性，每年至少1次，依据NCCLS EP9A2（或样本数量不少于20，3天内完成，浓度水平覆盖测量范围， 包括医学决定水平）
精密度
➢ 统计分析：应用Excel软件计算出X，SD值及 CV值。 结果判断：批内测定质控1、质控2的CV值均小 于1/3TEa ，可判定该项目批内精密度结果为 “通过”。 以ALT为例（链接）
线性评价：EP6-P2
➢ 可报告范围：包含两种类型的范围，线性范围（分析测 量范围）和临床可报告范围。
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
规定比对实验室选择原则 样品数量：至少5份，包括正常和异常 频率：至少每年2次 判断标准：应有≥80%结果符合要求
临床化学检验分析性能要求（附录A）
➢ A.3实验室内分析系统间不定期比对（如设备故障修复后）要求： 样本数≥5，浓度覆盖测量范围，包括医学决定水平，至少4份样 本检测结果的偏差＜ 1/2TEa
➢ A.4实验室内分析系统间定期比对要求，样本数≥20，浓度应覆 盖测量范围，包括医学决定水平，计算回归方程，在医学决定 水平下系统误差（偏倚）＜ 1/2TEa
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
EP6-P2
实验方法：选取高值血清作为高值标本，选取生理盐水作为低 值标本，浓度范围的确定应以分析项目的线性要求为准。在同 一天内用同一批号试剂和样本进行线性实验，对所有样本进行 双份测定，取其均值进行结果计算和判断。
统计分析：用直线回归对数据进行统计，得直线回归方程 Y=bX+a，b应在0.97～1.03范围内， r2＞0.95 。
➢ 计算回归方程，计算在医学决定水平下系统误差（偏倚%），应 ＜1/2TEa
实验室内部比对
➢ 参加室间质评仪器作为基准仪器和比对方法，另一作为实验仪器和 实验方法
➢ 40个不同的临床病人标本，至少50%样本的测定结果处于实验室的 参考区间之外，浓度范围覆盖线性范围
➢ 每天选择8个临床病人样本，按1到8的顺序编号。用两种方法同时 进行检测，按照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2， 1的样本顺序进行测定。每天的样本应在2小时内测定完毕，以确保 分析物的稳定
总允许误差，重复性精密度＜1/4TEa，中间（室内）精密度＜ 1/3TEa
临床化学检验分析性能要求
➢ A.5留样再测判断标准：依据检测项目样本稳定性要求选取长期 限样本，n＞5，覆盖测量范围，考虑医学决定水平，至少4份样 本测量结果的偏差＜1/3TEa
➢ A.6没有标准和室间质评要求时，实验市间结果比对合格标准可 依据制造商声明的性能标准而制定
生物参考区间
➢ 引用生物参考区间并验证：收集 1组 (20例)健康参考个体样本 ,在已 经过性能评价、 验证可靠的检测系统上检测样本 ，检测结果 90% ( 18例)落在现用或假设参考区间以内，不超过 10% (2例)结果落在 现用或假设参考区间以外 ，说明该参考区间有效
➢ 假如 3例或以上检测结果落在参考区间以外；则应重新取和之前相 似的没有离群点值的20个健康参考个体，对其参考范围再进行确认 或建立自己实验室的生物参考区间。
应有80结果符合要求正确度评价应用3次参加卫生部临检中心能力验证的结果实验室使用两套及以上检测系统检测同一项目时应有比对数据表明其检测结果的一致性每年至少1次依据ncclsep9a2或样本数量不少于203天内完成浓度水平覆盖测量范围包括医学决定水平计算回归方程计算在医学决定水平下系统误差偏倚应12tea参加室间质评仪器作为基准仪器和比对方法另一作为实验仪器和实验方法40个不同的临床病人标本至少50样本的测定结果处于实验室的参考区间之外浓度范围覆盖线性范围每天选择8个临床病人样本按1到8的顺序编号
生物参考区间
健康个体纳入标准 没有影响检测结果的生理指征 无服用药物或进行饮食治疗 发育正常，无器质性疾病 3个月内无输血、手术史 妇女不在妊娠期及哺乳期
临床化学检验分析性能要求
➢ 附录A： ➢ A.1适用时，性能指标应不低于国家标准、行业标准、或地方法
规要求 ➢ A.2检测系统不精密度要求：以能力验证/室间质评评价界限作为
报告范围、生物参考区间。实验室应只用确认过的程序证实所用检验程序 适合其预期用途，证实应尽量充分以满足给定用途或满足某领域应用的需 求，实验室应记录证实所得的结果及使用的程序 ➢ 应评估所选用方法和程序，在用于医学检验之前应证实其可给出满意结果 ➢ 实验室负责人或指定人员应在开始即对程序评审并定期评审，每年一次 ➢ 实验室对性能数据形成文件并保存 。
精密度
➢ 统计分析：应用Excel软件计算出X，SD值及CV值。 结果判断：批内测定质控1、质控2的CV值均小于1/4 TEa ，可判定该项目批内精密度结果为“通过”。 以ALT为例（链接）
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
值。 ➢ 比较稀释后的样本检测值的均值和其预期值，计算R值
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
参考依据
正确度性能评价（NCCLS EP15A2 ）
比对及偏差（ NCCLS EP9）
精密度评价（ NCCLS EP5A2 EP15A2 ）
批间不精密度： 批内不精密度：
线性范围（可报告范围）评价（ NCCLS EP6） 生物参考区间评价 （NCCLS C-28A)
术语和定义
➢ 正确度：一系列测量平均值与接受参照值之间一致程度。 ➢ 精密度：精密度是指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次
参考区间验证
➢ 参考区间来源 ➢ 检测系统一致性 ➢ 参考人群适用性 ➢ 临床医生参与 ➢ 需要时，根据性别、年龄等划分
参考区间验证
➢ 参考区间来源： ➢ NCCLS C28-A2推荐可以引用权威刊物、厂家试剂
说明书或转移其他医院实验室的生物参考区间 ，采 用适用性评估的方法建立参考区间 ➢ 《全国临床检验操作规程》（第3版） ➢ 试剂供应商提供的对应的参考区间
检测值与预期值比较相对偏差，应小于TEa,若大于TEa ，则去 除某点，缩小分析范围作为真实的可报告范围。
例ALT(链接)
临床可报告范围
➢ 高值标本一份：浓度在AMR上限的80%－120%范围内 ➢ 用厂商推荐的稀释液按最高稀释倍数稀释标本 ➢ 原始样本和稀释后的样本重复检测两次，分别计算其均
精密度
➢ 批间精密度评价 实验方法： 由同一个或同一组操作者在同一台仪器上进行操作，使用相同 的校准品、相同种类和批号的试剂。每天用两个浓度，共做20 天。评估结束时共有40个测试结果。从所有40个数据计算出批 批间精密度。
➢ 实验材料： ① 选用与检测仪器相配套的试剂、 校准品及其它辅助试剂。 ② 自配两个水平的质控品：质控水平1、质控水平2。
➢ 线性范围指对没有进行任何预处理（稀释，浓缩等）的 标本，分析方法能够直接测定出的待测物范围，也就是 系统最终的输出值（活性或浓度）与被分析物的活性或 浓度成线性比例的范围。
➢ 临床可报告范围是指对临床诊断、治疗有意义的待测物 浓度范围。此范围如果超出了线性范围，可将标本通过 稀释、浓缩等预处理使待测物浓度处于分析测量范围内， 最后结果乘以稀释倍数。
实验方法均值
700 600 500 400 300 200 100
0 0
两种方法均值散点图
y = 1.013R82x =+ 00..90979088
200
400
比较方法均值600 Nhomakorabea800精密度（EP5-A2）
批内精密度评价
✓ 实验方法：选择具有医学决定水平的高低值标本按 规定的操作方法，在较短的时间内及稳定的条件下 各做20次重复测定。计算其X、SD与CV。变异系 数即代表批内精密度。
实验室内部比对
以上实验至少重复5天，每天实验必须进行校准和室内 质控。只有在室内质控合格的情况下，当天的实验室数 据才有效。
➢ 回归计算：利用所有样本双份测定的有效数据，计算两 个方法间的线性回归方程：Y=a+bX。r≥0.975（或 r2≥0.95） ，b接近1，a足够小。
实验室内部比对
偏差估计：在医学决定水平，利用回归方程计算预期偏差，预期偏 差Bx=a+(b-1)X，相对偏差=Bx/X 。结论：预期偏差小于1/2TEa偏 差，其性能得到验证。以ALT为例（链接）
正确度验证
➢ 正确度评价（应用3次参加卫生部临检中心能力验证 的结果）
➢ 以ALT为例（链接）
实验室内部比对
➢ 实验室使用两套及以上检测系统检测同一项目时，应有比对数 据表明其检测结果的一致性，每年至少1次，依据NCCLS EP9A2（或样本数量不少于20，3天内完成，浓度水平覆盖测量范围， 包括医学决定水平）
精密度
➢ 统计分析：应用Excel软件计算出X，SD值及 CV值。 结果判断：批内测定质控1、质控2的CV值均小 于1/3TEa ，可判定该项目批内精密度结果为 “通过”。 以ALT为例（链接）
线性评价：EP6-P2
➢ 可报告范围：包含两种类型的范围，线性范围（分析测 量范围）和临床可报告范围。
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
规定比对实验室选择原则 样品数量：至少5份，包括正常和异常 频率：至少每年2次 判断标准：应有≥80%结果符合要求
临床化学检验分析性能要求（附录A）
➢ A.3实验室内分析系统间不定期比对（如设备故障修复后）要求： 样本数≥5，浓度覆盖测量范围，包括医学决定水平，至少4份样 本检测结果的偏差＜ 1/2TEa
➢ A.4实验室内分析系统间定期比对要求，样本数≥20，浓度应覆 盖测量范围，包括医学决定水平，计算回归方程，在医学决定 水平下系统误差（偏倚）＜ 1/2TEa
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
EP6-P2
实验方法：选取高值血清作为高值标本，选取生理盐水作为低 值标本，浓度范围的确定应以分析项目的线性要求为准。在同 一天内用同一批号试剂和样本进行线性实验，对所有样本进行 双份测定，取其均值进行结果计算和判断。
统计分析：用直线回归对数据进行统计，得直线回归方程 Y=bX+a，b应在0.97～1.03范围内， r2＞0.95 。
➢ 计算回归方程，计算在医学决定水平下系统误差（偏倚%），应 ＜1/2TEa
实验室内部比对
➢ 参加室间质评仪器作为基准仪器和比对方法，另一作为实验仪器和 实验方法
➢ 40个不同的临床病人标本，至少50%样本的测定结果处于实验室的 参考区间之外，浓度范围覆盖线性范围
➢ 每天选择8个临床病人样本，按1到8的顺序编号。用两种方法同时 进行检测，按照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2， 1的样本顺序进行测定。每天的样本应在2小时内测定完毕，以确保 分析物的稳定
总允许误差，重复性精密度＜1/4TEa，中间（室内）精密度＜ 1/3TEa
临床化学检验分析性能要求
➢ A.5留样再测判断标准：依据检测项目样本稳定性要求选取长期 限样本，n＞5，覆盖测量范围，考虑医学决定水平，至少4份样 本测量结果的偏差＜1/3TEa
➢ A.6没有标准和室间质评要求时，实验市间结果比对合格标准可 依据制造商声明的性能标准而制定
生物参考区间
➢ 引用生物参考区间并验证：收集 1组 (20例)健康参考个体样本 ,在已 经过性能评价、 验证可靠的检测系统上检测样本 ，检测结果 90% ( 18例)落在现用或假设参考区间以内，不超过 10% (2例)结果落在 现用或假设参考区间以外 ，说明该参考区间有效
➢ 假如 3例或以上检测结果落在参考区间以外；则应重新取和之前相 似的没有离群点值的20个健康参考个体，对其参考范围再进行确认 或建立自己实验室的生物参考区间。
应有80结果符合要求正确度评价应用3次参加卫生部临检中心能力验证的结果实验室使用两套及以上检测系统检测同一项目时应有比对数据表明其检测结果的一致性每年至少1次依据ncclsep9a2或样本数量不少于203天内完成浓度水平覆盖测量范围包括医学决定水平计算回归方程计算在医学决定水平下系统误差偏倚应12tea参加室间质评仪器作为基准仪器和比对方法另一作为实验仪器和实验方法40个不同的临床病人标本至少50样本的测定结果处于实验室的参考区间之外浓度范围覆盖线性范围每天选择8个临床病人样本按1到8的顺序编号
生物参考区间
健康个体纳入标准 没有影响检测结果的生理指征 无服用药物或进行饮食治疗 发育正常，无器质性疾病 3个月内无输血、手术史 妇女不在妊娠期及哺乳期
临床化学检验分析性能要求
➢ 附录A： ➢ A.1适用时，性能指标应不低于国家标准、行业标准、或地方法
规要求 ➢ A.2检测系统不精密度要求：以能力验证/室间质评评价界限作为
报告范围、生物参考区间。实验室应只用确认过的程序证实所用检验程序 适合其预期用途，证实应尽量充分以满足给定用途或满足某领域应用的需 求，实验室应记录证实所得的结果及使用的程序 ➢ 应评估所选用方法和程序，在用于医学检验之前应证实其可给出满意结果 ➢ 实验室负责人或指定人员应在开始即对程序评审并定期评审，每年一次 ➢ 实验室对性能数据形成文件并保存 。