反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中6种活性成分的含量
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效液相色谱 中图分类号：Ｒ９１７ 文献标识码：Ａ
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｉｘａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎＦａｎｇｊｉＨｕａｎｇｑｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎｂｙＲＰ ＨＰＬＣ
ＧＵＡＮＪｉａｏ，ＺＨＡＮＧＹｉｎｇ，ＦＥＩＸｕｅ，ＳＵＮＹｕｈｕｉ，ＷＡＮＧＬｉｍｉｎｇ，ＨＡＯＣｈｅｎｇｙｉ，ＦＥＮＧＢｏ，ＺＨＵＨｅｙｕｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＪｉｌｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＪｉｌｉｎＣｉｔｙ，ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，１３２０１３，Ｃｈｉｎａ）
基金项目：国家自然科学基金项目（８１７０３６８３）；吉林省中医药管理局项目（２０１７０９８，２０１７２５０）；吉林省卫生计生委课题（２０１７Ｑ０４８）；吉林市科技 局杰出青年基金项目（２０１６６０２９，２０１６６０３１）；吉林医药学院大学生创新创业项目（２０１６）．
作者简介：关 皎（１９８３—），女（汉族），讲师，博士． 通讯作者：朱鹤云（１９８２—），男（汉族），副教授，博士．
第２３０９１８卷年 １第０月５期 Ｊｏ吉ｕｒｎ ａｌ林 ｏｆ 医Ｊ ｉｌｉ药ｎ Ｍ学ｅｄ ｉｃａ院ｌ Ｕ学ｎｉ ｖｅｒ报ｓｉｔｙ ＶｏＯｌ．ｃ３ｔ９． ２０Ｎ １８ｏ．５
— ３２பைடு நூலகம்—
文章编号：１６７３２９９５（２０１８）０５０３２１０５
·论 著·
反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中 ６种活性成分的含量
关 皎，张 颖，费 雪，孙宇慧，王黎明，郝乘仪，冯 波，朱鹤云 （吉林医药学院药学院，吉林 吉林 １３２０１３）
摘 要：目的 建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘 草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量。方法 采用 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（２）色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相为 ０．２ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵 ０．１％甲酸溶液（Ａ）乙腈（Ｂ）；流速为 １．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温为 ３０℃；进样量为 ２０μＬ。测定粉 防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸时采用梯度洗脱（０～５ｍｉｎ，１５％ ～２０％Ｂ；５～ １０ｍｉｎ，２０％ ～３０％Ｂ；１０～１５ｍｉｎ，３０％ ～３５％Ｂ；１５～２０ｍｉｎ，３５％ ～４５％Ｂ，Ｖ／Ｖ），平衡时间为 １０ｍｉｎ，检测波 长为 ２５４ｎｍ；测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱（０～８ｍｉｎ，８０％８０％Ｂ，Ｖ／Ｖ），检测波长为 ２２０ｎｍ。结果 粉防 己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在 ５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）、１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝ ０．９９９９）、１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）、５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）、５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）浓度范围内与峰 面积呈良好的线性关系，平均回收率（ｎ＝９）分别为 ９９．３％、９８．７％、９７．５％、９９．１％和 ９９．２％。白术内酯Ⅰ在 ０．０５～２．５ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率（ｎ＝９）为 ９７．６％。结论 方法结果准确，操作简便，具有良好的重现性和稳定性，可用于防己黄芪汤的质量控制。 关 键 词：防己黄芪汤；粉防己碱；防己诺林碱；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；甘草苷；甘草酸；白术内酯Ⅰ；反相高
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＲＰＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｉｘａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ， ｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ，ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄａｎｄａｔｒａｃｔｙｌｅｎｏｌｉｄｅⅠ ） ｉｎＦａｎｇｊｉＨｕａｎｇｑｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（２）（２５０ｍｍ ×４．６ｍｍ，５μｍ）．Ｔｈｅｍｏ ｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆ０．２ｍｏｌ／Ｌａｍｍｏｎｉｕｍａｃｅｔａｔｅ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０．１％ ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄ）（Ａ）ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（Ｂ）．Ｔｈｅｆｌｏｗ ｒａｔｅｗａｓ１．０ｍＬ／ｍｉｎａｎｄｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｔ３０℃．Ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ２０μＬ．Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ， ｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎａｎｄｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｔ２５４ｎｍ ｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ （０～５ｍｉｎ，１５％ ～２０％Ｂ；５～１０ｍｉｎ，２０％ ～３０％Ｂ；１０～１５ｍｉｎ，３０％ ～３５％Ｂ；１５～２０ｍｉｎ，３５％ ～４５％Ｂ，Ｖ／Ｖ） ａｎｄｔｈｅｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ１０ｍｉｎ；ＡｔｒａｃｔｙｌｅｎｏｌｉｄｅⅠ ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｔ２２０ｎｍｗｉｔｈｉｓｏｃｒａｔｉｃｅｌｕｔｉｏｎ（０～８ｍｉｎ， ８０％ ～８０％Ｂ，Ｖ／Ｖ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｗｅｒｅ５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）ｆｏｒｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，１～５０ｍｇ／Ｌ （Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒ ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ，５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）ｆｏｒｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄ；Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝９）ｏｆｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ｆａｎｇｃｈｉｎｏ ｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎａｎｄｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗｅｒｅ９９．３％，９８．７％，９７．５％，９９．１％ ａｎｄ９９．２％，ｒｅｓｐｅｃ
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ＧＵＡＮＪｉａｏ，ＺＨＡＮＧＹｉｎｇ，ＦＥＩＸｕｅ，ＳＵＮＹｕｈｕｉ，ＷＡＮＧＬｉｍｉｎｇ，ＨＡＯＣｈｅｎｇｙｉ，ＦＥＮＧＢｏ，ＺＨＵＨｅｙｕｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＪｉｌｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＪｉｌｉｎＣｉｔｙ，ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，１３２０１３，Ｃｈｉｎａ）
基金项目：国家自然科学基金项目（８１７０３６８３）；吉林省中医药管理局项目（２０１７０９８，２０１７２５０）；吉林省卫生计生委课题（２０１７Ｑ０４８）；吉林市科技 局杰出青年基金项目（２０１６６０２９，２０１６６０３１）；吉林医药学院大学生创新创业项目（２０１６）．
作者简介：关 皎（１９８３—），女（汉族），讲师，博士． 通讯作者：朱鹤云（１９８２—），男（汉族），副教授，博士．
第２３０９１８卷年 １第０月５期 Ｊｏ吉ｕｒｎ ａｌ林 ｏｆ 医Ｊ ｉｌｉ药ｎ Ｍ学ｅｄ ｉｃａ院ｌ Ｕ学ｎｉ ｖｅｒ报ｓｉｔｙ ＶｏＯｌ．ｃ３ｔ９． ２０Ｎ １８ｏ．５
— ３２பைடு நூலகம்—
文章编号：１６７３２９９５（２０１８）０５０３２１０５
·论 著·
反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中 ６种活性成分的含量
关 皎，张 颖，费 雪，孙宇慧，王黎明，郝乘仪，冯 波，朱鹤云 （吉林医药学院药学院，吉林 吉林 １３２０１３）
摘 要：目的 建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘 草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量。方法 采用 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（２）色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相为 ０．２ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵 ０．１％甲酸溶液（Ａ）乙腈（Ｂ）；流速为 １．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温为 ３０℃；进样量为 ２０μＬ。测定粉 防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸时采用梯度洗脱（０～５ｍｉｎ，１５％ ～２０％Ｂ；５～ １０ｍｉｎ，２０％ ～３０％Ｂ；１０～１５ｍｉｎ，３０％ ～３５％Ｂ；１５～２０ｍｉｎ，３５％ ～４５％Ｂ，Ｖ／Ｖ），平衡时间为 １０ｍｉｎ，检测波 长为 ２５４ｎｍ；测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱（０～８ｍｉｎ，８０％８０％Ｂ，Ｖ／Ｖ），检测波长为 ２２０ｎｍ。结果 粉防 己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在 ５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）、１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝ ０．９９９９）、１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）、５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）、５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）浓度范围内与峰 面积呈良好的线性关系，平均回收率（ｎ＝９）分别为 ９９．３％、９８．７％、９７．５％、９９．１％和 ９９．２％。白术内酯Ⅰ在 ０．０５～２．５ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率（ｎ＝９）为 ９７．６％。结论 方法结果准确，操作简便，具有良好的重现性和稳定性，可用于防己黄芪汤的质量控制。 关 键 词：防己黄芪汤；粉防己碱；防己诺林碱；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；甘草苷；甘草酸；白术内酯Ⅰ；反相高
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＲＰＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｉｘａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ， ｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ，ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄａｎｄａｔｒａｃｔｙｌｅｎｏｌｉｄｅⅠ ） ｉｎＦａｎｇｊｉＨｕａｎｇｑｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（２）（２５０ｍｍ ×４．６ｍｍ，５μｍ）．Ｔｈｅｍｏ ｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆ０．２ｍｏｌ／Ｌａｍｍｏｎｉｕｍａｃｅｔａｔｅ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０．１％ ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄ）（Ａ）ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（Ｂ）．Ｔｈｅｆｌｏｗ ｒａｔｅｗａｓ１．０ｍＬ／ｍｉｎａｎｄｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｔ３０℃．Ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ２０μＬ．Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ， ｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎａｎｄｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｔ２５４ｎｍ ｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ （０～５ｍｉｎ，１５％ ～２０％Ｂ；５～１０ｍｉｎ，２０％ ～３０％Ｂ；１０～１５ｍｉｎ，３０％ ～３５％Ｂ；１５～２０ｍｉｎ，３５％ ～４５％Ｂ，Ｖ／Ｖ） ａｎｄｔｈｅｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ１０ｍｉｎ；ＡｔｒａｃｔｙｌｅｎｏｌｉｄｅⅠ ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｔ２２０ｎｍｗｉｔｈｉｓｏｃｒａｔｉｃｅｌｕｔｉｏｎ（０～８ｍｉｎ， ８０％ ～８０％Ｂ，Ｖ／Ｖ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｗｅｒｅ５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）ｆｏｒｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，１～５０ｍｇ／Ｌ （Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，１～５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９６）ｆｏｒ ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ，５～２５０ｍｇ／Ｌ（Ｒ＝０．９９９９）ｆｏｒｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄ；Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝９）ｏｆｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ｆａｎｇｃｈｉｎｏ ｌｉｎｅ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎａｎｄｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗｅｒｅ９９．３％，９８．７％，９７．５％，９９．１％ ａｎｄ９９．２％，ｒｅｓｐｅｃ