凝胶过滤层析实验报告

凝胶过滤层析实验报告
实验名称：凝胶过滤层析实验报告
实验目的：通过凝胶过滤层析实验，了解分离纯化分子的基本
原理和方法，掌握凝胶层析和胶体过滤的工艺方法，以及在实验
中遇到问题的解决方案。

实验原理：
凝胶层析方法按照其色谱柱填充物的性质可以分为分子筛层析、凝胶层析和亲和层析三种。

本实验采用凝胶层析方法。

凝胶层析法的原理是利用凝胶层来过滤分子，使不同分子在凝
胶层中停留时间不同从而实现分离。

凝胶层由一种或多种表现不
同的纯化材料组成。

根据静电吸附，分子量、构象和亲水亲疏等
不同特征，分子在凝胶层中的停留时间不同，从而实现了分子的
分离与纯化。

常用的凝胶材料有葡聚糖、玻璃珠、纸板和硅胶等。

在凝胶层析的过程中，分子穿过凝胶孔隙，与孔壁作用，质量小、构象简单的分子在孔隙中的停留时间比质量大、构象复杂的分子短，从而实现了分离纯化。

胶体过滤法原理是基于分子在胶体的质量和形状上的差异，经
过胶体过滤后可以实现分离纯化目标分子。

实验步骤：
1. 准备实验材料：样品中含有数种分子，需要先进行固体颗粒
的分离预处理。

准备不同孔径的凝胶和胶体。

2. 准备凝胶层析硅胶柱：溅涂硅胶等于客胶的大环胶纸采用纸
筒套紫外线透明人字形凝胶板制成硅胶或其他纯化材料的色谱柱。

3. 经过样品的预处理，将样品加入硅胶柱中静置24小时。

4. 收集经过凝胶层析分离的目标分子。

5. 准备胶体过滤柱：通过不同孔隙大小的胶体过滤材料，将目
标分子实现精准纯化。

实验结果：
经过凝胶层析和胶体过滤，样品中的分子被成功分离和纯化。

分离后的分子经过比对，其纯度高达90%以上，符合实验预期。

实验结论：
通过凝胶层析和胶体过滤实验，掌握了分子的分离纯化原理和方法。

本实验有助于提升实验者的实际操作能力，为后续实验打下坚实基础。