银冬颗粒中总黄酮含量的测定

中药与临床Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2012;3(3)
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山银花性寒，味辛，有散风热，解热毒的功效
[1]。

银冬颗粒是在中医药理论的指导下精心研制的
中药复方保健品，具有自主知识产权。

主要用于春夏之交瘟疫流行、热毒所伤，阴虚口渴；或夏季伤暑，烦热口渴；或嗜食香燥，火毒内生等。

它是课题组科技扶贫项目“秀山金银花产业开发”的产业链深加工产品，是从秀山灰毡毛忍冬（山银花）、天冬等物质中提取的有效成分，制成的一种药食两用保健品，已经申报国家技术发明专利。

为了控制银冬颗粒的质量，保证其疗效，本文采用紫外分光光度法对制剂中的总黄酮进行了含量测定。

1仪器与试药
JA2003N 电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；超声清洗器KQ5200E 型（江苏省昆山市淀山湖镇）；U3100紫外分光光度计(日立)。

银冬颗粒（西南大学中药研究所研制，批号：09112601、09112603、09112704），芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，批号:100080-200707)；三氯化铝、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇等试剂均为分析纯。

2方法与结果
2.1对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品12.9mg ，置于100mL 容量瓶中，加60%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得芦丁的对照品溶液。

2.2供试品溶液的制备
精密称取样品1.5000g ，置25mL 容量瓶中，加入60%乙醇适量超声溶解30min ，60%乙醇定容，取1.5mL 样品溶液置10mL 容量瓶中，60%乙醇定容。

3标准曲线的绘制
分别精密吸取芦丁对照液（μ）5、
李金玲，张聪聪，薛强，张辉，徐晓玉
[摘要]目的：建立紫外分光光度法测定银冬颗粒中总黄酮含量的方法。

方法：紫外分光光度法测定总黄酮的含量，检测波长为510nm 。

结果：总黄酮的检测浓度在6.45~51.6μg .mL -1范围内与吸光度呈良好线性关系（r=0.9997）；平均回收率为99.85%，RSD=2.35%（n=5）。

结论：该方法的精密度，重复性，稳定性，加样回收率良好，能用于银冬颗粒的质量控制。

[关键词]银冬颗粒；总黄酮；紫外分光光度法[中图分类号]R 282.5
[文献标识码]A
[文章编号]1674-926X(2012)03-006-02
Determination of total avonoids content in YIN DONG granules /LI Jin-ling ,ZHA NG Cong-cong,X UE Qiang,ZHANG Hui,X U Xiao-yu//(Pharmacy College,Southwest University,Center of Ef cacy Evaluation Engineering T echnology Research-Chongqing,Chongqing 400716,China)
[Abstract]Objective:To establish ultraviolet spectrophotometry method for the determination of total avonoids content in YIN DONG granules.Method:The detection wave length was set at 510nm for the determination.Result:The good linear was obtained in the range of 6.45μg .mL -1~51.6μg .mL -1(r=0.9997).The average recovery rate was 99.85％，and RSD was 2.35％(n=5).Conclusion:The precision,repeatability,stability ,recovery of the method can satisfy the quality control requirement of YIN DONG granules.
[Key words]YIN DONG granules ；total avonoids ；ultraviolet spectrophotometry
银冬颗粒中总黄酮含量的测定
炮制制剂
[基金项目]国家科技支撑计划课题（2006BAC01A16）专
项；重庆市“十一五”规划项目，秀山县政府资助
[作者单位]西南大学药学院，重庆市药效评价工程技术研究
中心，重庆400716
[作者简介]李金玲（1986-），女，硕士研究生，研究方向：
药用资源综合开发与利用
Email:lijinling1986@
[通讯作者]徐晓玉（1958-），女，教授，博士生导师，研究
方向：新药研发与中药药理学xxy 6@[收稿日期]3 2.129g/ml 0.0Email:
2012-0-19
中药与临床Pharmacy and Clinics of Chinese Materia M edica2012;3(3) 16
1.00、
2.00、4.00、5.00mL于10.00ml容量瓶中，分别加入5％亚硝酸钠溶液0.30mL，摇匀，静置6min；再加10％氯化铝溶液0.30mL，摇匀，静置6min，摇匀；再加4％氢氧化钠溶液4.00mL，用水稀释至刻度，摇匀，静置15min，以试剂作空白参比液，于510nm波长处测吸光度。

确立所得标准曲线回归方程为：Y=80.325X–0.0919（r=0.9997，n=5）。

2.4精密度试验
取对照品溶液，连续测定5次，记录吸光度值。

吸光度平均值为9.82，RSD%=0.51，表明仪器精密度良好。

2.5稳定性试验
取供试品溶液分别于0、0.5、1、2、4h时，测定其吸光度并记录。

总黄酮含量的RSD%=3.55，表明供试液在4h内显色稳定。

2.6重复性试验　
取同一批供试品6份按照供试品溶液的配制方法配置，以试剂（未加对照品的溶液）为空白参比液在510nm波长扫描其最大吸收波长。

总黄酮的平均含量为48.08mg/g，RSD%=2.08，表明方法重现性良好。

2.7加样回收率试验
取09112601批样品0.2000g，共五份，芦丁标准品0.011g五份于25mL容量瓶中，按照2.2项下供试品溶液的配制方法配置，以试剂（未加对照品的溶液）为空白参比液在510nm波长扫描其最大吸收波长，记录吸光度值。

结果见表1，计算得平均回收率为：99.85%，RSD=2.35%。

表1回收率实验
Tab.1Rate of recovery experiment
样品取样品中加标量回收量回收率平均回RSD 样量(g)量(mg)(mg)(mg)(%)收率(%)(%) 10.28.9011.009.18103.11
20.28.9011.008.8899.72
30.28.9011.008.7698.3999.85 2.35 40.28.9011.008.99101.02
50.28.9011.008.6497.022.8样品总黄酮含量的测定
取供试品溶液以试剂（未加对照品的溶液）为空白参比液在510nm波长扫描其最大吸收波长，记录吸光度值，计算09112601批样品中总黄酮的含量为：44.54mg/g、43.03mg/g、45.06mg/g。

3讨论
以芦丁为对照品，采用硝酸铝-亚硝酸钠为显色剂，根据黄酮化合物母核中含有碱性氧原子能与游离的铝离子生成络合物，在亚硝酸钠的碱性溶液中呈红橙色进行比色测定，方法简便、准确、灵敏度高。

金银花的花、茎、叶中所含的主要药用成分是绿原酸和总黄酮，《中国药典》也将绿原酸作为金银花生药的质量控制指标，因此银冬颗粒以绿原酸和总黄酮为银冬颗粒剂的质量控制指标，实验室前期以绿原酸含量测定作为制剂质量控制的主要部分，为了更好的对其进行质量控制，本文以芦丁为对照品，采用分光光度法对制剂中的总黄酮进行了含量测定方法的研究，结果表明银冬颗粒中总黄酮的含量均符合《中国药典》对颗粒剂的要求[2~3]。

参考文献
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（责任编辑：胡慧玲）
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（责任编辑胡慧玲）
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