杜氏利什曼原虫及黑热病防控的研究进展ppt课件

脉搏大都增速，血压降低。患者血浆蛋白总量的下 降以及贫血，因此可发生水肿，以下肢和脸部最常 见。偶亦出现全身性浮肿 。发热期间伴有鼻出血。
患者淋巴结常有轻微或中度肿大 ；夜间咳 嗽；绝大多数妇女在患黑热病后月经闭止， 发育也受影响。
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黑热病病人--肝脾肿大

示脾肿大 黑热病俗称 “大肚子病”
一般在初次发热半个月后可触及，半年 后可能超过脐部，最大的可达耻骨上方
有半数左右的病人肝脏呈肿大，肝肿大出现常较脾肿大为迟， 肿大程度不如脾肿大明显， 很少有超过右肋缘下6cm者
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3 黑热病的临床表现
•消化系统症状 •循环系统症状 •其他症状
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患者常有口腔炎，患者食欲减退常有消化不良 及食后胃部饱胀的感觉。甚至可引发恶心呕吐 及腹痛等症状。



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12岁男孩 脾肿大 贫血 严重消瘦
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4 黑热病的诊断治疗即防治措施
•诊断
病原检查
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用组织穿刺法自脾、骨髓、肝或淋巴结取材，穿 刺液涂片后，用瑞氏或姬氏染色，油镜下检查无 鞭毛体。上述穿刺液还可接种在培养基中，培养 后检查有无前鞭毛体生长。
酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接荧光抗体 试验（IFA）、间接血凝试验（IHA）等的阳性 率较高，但与其它疾病常有交叉反应，亦不宜 用于疗效考核。
免疫诊断
分子生物学 诊断 2019
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运用分子生物学的方法诊断杜氏利什曼原 虫感染研究得较早，效果满意，有很高的 敏感性和特异性。
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•补充

我国黑热病特殊临床表现

1. 皮肤型黑热病：多数为结节型。结节呈大小不 等的肉芽肿，或呈暗色丘疹状，常见于面部及颈 部，在结节内可查到无鞭毛体。 2. 淋巴结型黑热病：无黑热病病史，局部淋巴结 肿大，大小不一，较表浅，无压痛，无红肿，嗜 酸性粒细胞增多。活检可查到无鞭毛体。

鞭毛体寄生于白蛉消化 道，二分裂法繁殖
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1.2 生活史(life cycle)
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转变为前鞭毛体 （白蛉体内）
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无鞭毛体 （人或哺乳动物体内）
二分裂繁殖﹑发育
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感染性的前鞭毛体 （白蛉体内）
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2 治病机理
脾肿大 脾功亢进 单核巨噬细 胞破裂 全血
WBC 血小板
抵抗力 出血
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利什曼病
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内脏利什曼病（黑热病） 粘膜皮肤利什曼病 皮肤利什曼病
杜氏利什曼原虫
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黑热病
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1.1形态
1.无鞭毛体又称利杜体 ） （Leishman-Donovan body）

椭圆形或圆形 无游离的鞭毛 虫体很小 均值4.4µm×2.8µm 高倍镜下可见基体和根丝体 ﹙鞭毛根﹚
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研究进展
•青蒿素有望用于治疗黑热病
学家评估了青蒿素治疗杜氏利什曼原虫的效果。发现该药能在利什曼 原虫生长的各个阶段杀死它，特别是在致病的“无鞭毛体”阶段。青 蒿素对杜氏利什曼原虫无鞭毛体更有效，这一事实表明该药是通过巨 噬细胞起作用的。巨噬细胞是一种能吞噬和杀死入侵人体的有害生物 的免疫细胞。很可能青蒿素不会直接杀死利什曼原虫，而是进一步激 活巨噬细胞，从而让它清除利什曼原虫。青蒿素比目前的抗利什曼病 药物戊烷脒和米替福新更加安全。前者可能导致糖尿病，后者有可能 导致下一代出生缺陷。青蒿素的优点在于它是已经获得批准的药物， 因此毒理试验已经完成。由于利什曼病是印度的流行病，而且目前的 抗利什曼病药物存在副作用，使用青蒿素治疗利什曼病的前景非常令 人鼓舞。
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பைடு நூலகம்
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防治措施
•治疗方法
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防制黑热病流行的重要环节。 采用五价锑剂葡萄糖酸锑钠，国产制剂为斯锑黑 克较好。对于少数经锑剂反复治疗无效的病人或 不适宜使用锑剂的病人，可用戊脘脒或二脒替等 芳香双脒剂治疗。皮肤性黑热病患者的治疗以戊 脘脒为佳 。
•预防措施
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消灭病犬 保护健康犬 杀灭白蛉
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2.（前）鞭毛体 Promastigote



虫体呈梭形 大小为10～20µm×1.5～4µm 核位于虫体中部 基体发出一鞭毛，长与虫体相近，弯曲 前鞭毛体运动 活泼，鞭毛不 停地摆动
虫体前端菊花状
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白蛉 （Phlebotomus sand fly ）

体小，3㎜，约为蚊子1/3， 驼背状，全身密生细毛，灰 黄色
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研究进展
•利什曼原虫核酸疫苗
用含编码利什曼原虫GP63基因核酸疫苗pcDNA1-GP63直 接免疫BALB/c鼠，检测到质粒在小鼠至少存在40天，抗体 免疫组化染色显示高水平表达的GP63。硕大利什曼原虫 攻击感染，发现鼠已产生高度抵抗力。利什曼原虫抗原能 诱导免疫小鼠产生高水平细胞因子，通过Th1型细胞免疫 抵抗攻击。BALB/c小鼠一般对利什曼原虫感染敏感，因为 它不能激活Th1反应，除非加入外源性的IL-12。核酸疫苗 的发生、发展时间虽不长，却已取得了许多可喜的成就。 它具备的许多优点如操作方法简便，能同时诱导机体产生 高水平保护性的体液和细胞免疫力，且安全、持效，有抗 各种病原体感染及抗肿瘤的广阔应用前景，正引起各有关 研究领域学者的强烈兴趣。 20
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研究进展
•反义核酸技术在防治黑热病中的应用进展
利什曼原虫所有mRNA的5´端均含有一共同的由35 个核苷酸组成的小外显子(5'-ACCGCUAUAUAAGUAUCAGUUUCUGUACUUUAU UG-3')，这为AON … 提供了极好的作用靶位。研究表 明，以小外显子为靶的16 nt PS AON(5'-CTGATGCTTATATAGC-3') 杀死培养鼠巨噬细胞中无鞭毛体， 而对宿主巨噬细胞无损害。当16nt pS AON浓度为 10μmol/L时，约30％感染巨噬细胞在培养后24小时 好转。为进一步提高细胞对AON的摄入，将16nt pS AON与软脂酸连接，并与人的低密度脂蛋白(LDL)混 合，用于体外感染巨噬细胞测试……
RBC
Ⅱ型变态反应
贫血
利 杜 体 大 量 繁 殖
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增生
淋巴结肿大
肝肿大 肝功受损 白蛋白 白 /球
浆细胞
免疫复合 物沉积 Ⅲ型变 态反应
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球蛋白
肾功 受损 白蛋白 排出
蛋白
倒置
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治愈后，病人获得稳定免疫力
3黑热病的临床表现 • 发热 •脾肿大 •肝肿大
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95﹪的黑热病人有发热症状，且一般在 下午发热，夜间伴有盗汗
21世纪是生物学的世纪
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杜氏利什曼原虫
(Leishmannia dunovani)
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人体寄生利什曼原虫（ Leishmannia ） 杜氏利什曼原虫(L. dunovani) 热带利什曼原虫(L. tropica) 墨西哥利什曼原虫(L. mexicana) 巴西利什曼原虫(L. braziliensis)