火腿肠中脂肪测定之项目方案设计
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火腿肠中脂肪测定之项目方案设计
一、作者姓名:赵从凯
二、所属单位:潍坊职业学院园林工程学院
三、授课班级:2011级生物技术及应用班
四、设计内容:
1、样品的选取
原则:有代表性和脂肪含量高。
2、实验方法的选择
主要选取索氏提取法和酸水解法。
3、实验设计
思路:锻炼同学们的设计能力,能同时学习索氏提取法和酸水解法两种提取测定方法。
步骤:1、索氏提取法
第一、样品处理。
要点:
(1)样品充分磨碎,然后称量初始重量。
(2)将样品放入烘箱进行烘干,98℃,烘至恒重。
(3)称重,记录称量值。
称重要迅速,避免在空气中暴露时间过长。
(4)将滤纸等使用的物品进行充分烘干。
(5)所有使用的物品均脱脂。
(6)称重总质量。
第二、仪器组装与装液
要点:
(1)仪器要安装正确。
(2)将样品放入提取室。
(3)注意正己烷的量,安全起见,不要超过烧瓶的1/3。
(4)注意循环冷凝水要接入。
(5)不要离人,注意观察。
(6)注意提取的时间。
(7)注意随时调节加热的温度(正己烷的沸点为68℃-69℃)。
第三、后处理
要点:
(1)提取完成后,注意试剂的回收。
(2)将样品包拿出,进行充分烘干。
(3)烧瓶充分挥发,不要直接烘干。
(4)烘干后,进行称重,记录称重的质量。
2、酸水解法
第一、样品来源
将索氏提取完成后的样品作为该方法的初始样品。
第二、水解
将称重后的样品放于100ml的三角瓶中,加入一定的水(根据具体情况,一般样:水为1:4),充分混合,加入10-20ml盐酸,混匀后于70-80℃的水浴中,每隔5-10min用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止,约须40-50min,取出静置,冷却。
第三、提取
取出三角瓶加入10-20ml乙醇,混合。
冷却后将混合物移入新的100mL三角瓶中,用25mL石油醚分次冲洗,洗液一并倒入具塞量筒内。
加塞振摇1min,将塞子慢慢转动放出气体,再塞好,静置15min,小心开塞,用石油醚冲洗塞及筒口附着的脂肪。
静置10-20min,待上部液体清晰,吸出上层清液于已恒量的三角瓶内,再加入5ml石油醚于具塞量筒内振摇,静置后仍将上层石油醚吸出,放入原锥形瓶内。
将三角形瓶于水浴上蒸干,置95-105℃烘箱中干燥2h,取出放干燥器中冷却30min后称量。
3、计算
用差量法分别计算索氏提取法的脂肪含量和酸解法的脂肪含量,最终计算整
个样品中总的脂肪含量。
4、注意事项
(1)操作过程一定注意安全问题。
(2)注意各个步骤的操作要点
(3)尽量不要引入外源脂肪,防止增大误差。