实验六十四 鸡胚胎接种技术

微生物學實驗
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實驗六十四 雞胚胎接種技術
增殖病毒以供病毒學研究用。

很多病毒皆能在雞胚胎之某些部位增殖，例如各種痘病毒在絨毛尿囊膜上增殖良好，而禽流感病毒、新城病病毒都很容易在尿囊腔內增殖，藉由收取尿囊液可獲得大量增殖之病毒，可做為疫苗製造、診斷試劑以及其他病毒學研究之用。

(一) 材料
1. 5-6日齡與9-11日齡之雞胚胎蛋
2. 病毒接種液
3. 1 ml 針筒附26號5/8吋針或23號1又1/3吋針
4. 碘酒
5. 打洞用鐵釘
6. 融化之液態蠟
(二) 設備
1. 照蛋器
2.
37℃培養箱
第十一章 病毒與血清學的相關技術
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(一) 尿囊腔接種（allantoic cavity inoculation ）：
1. 取9-11日齡之雞胚胎蛋。

2. 以照蛋器透視雞胚胎蛋，調整蛋之位置使氣室在上端，於氣室邊緣上方約 5 mm 以及雞胚之對角處作記號。

3. 以碘酒徹底擦拭消毒後於記號處打洞。

4. 用26號5/8吋針垂直插入洞內約1.2-1.3公分，注入0.1-0.2 ml 之接種液。

5. 以融化之蠟封住洞口。

(二) 卵黃囊接種法（yolk-sac inoculation ）
1. 取5-6日齡之雞胚胎蛋。

2. 調整蛋之位置使氣室在上端。

3. 以碘酒徹底消毒後於氣室端做記號並打洞。

4. 以23號1又1/3吋針垂直插入洞內，注入0.5-1.0 ml 之接種液。

5. 以融化之蠟封住洞口。

(三) 絨毛尿囊膜接種法（chorio-allantoic membrane inoculation ；CAM ）
1. 取9-11日齡之雞胚胎蛋。

2. 水平調整蛋之位置使氣室在右側。

3. 藉由照蛋器之透視，選擇胚胎之相對位置處，以碘酒徹底消毒後做記號並 打洞。

4. 另外在氣室端也以碘酒徹底消毒後做記號並打洞。

5. 以矽膠吸球吸附於氣室端洞口，原先胚胎相對位置處之絨毛尿。

微生物學實驗
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6. 囊膜集陷落而形成一人工氣室。

7. 以23號針將0.5-1.0 ml 之接種液注入人工氣室上之洞內。

8. 以融化之蠟封住洞口。

圖64-1 尿囊腔接種（allantoic cavity inoculation ）
第十一章 病毒與血清學的相關技術
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圖64-2
圖64-3 卵黃囊接種法（yolk-sac inoculation ）
微生物學實驗
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實驗六十四 雞胚胎接種技術
班級： 組別：
姓名： 學號：
1. 每隔24小時觀察並紀錄胚胎之發育情形一次。

2. 收集尿囊液、絨毛尿囊膜，觀察並紀錄之。

1. 尿囊腔接種法為何需選用9-11日齡之雞胚胎蛋？
2. 尿囊腔接種病毒後，若隔日即見到胚胎死亡，為何其尿囊液須棄置不用？
3. 三種雞胚胎接種工作完成後該如何收集增殖之後的病毒？。