龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠M1M2巨噬细胞极化平衡的调控作用

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引文格式：殷学伟，郭励稢，周梦贤，邱岩，毕宏生，郭大东．龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Ｍ１／Ｍ２巨
噬细胞极化平衡的调控作用［Ｊ］．眼科新进展，２０２１，４１（５）：４０８ ４１２．ｄｏｉ：１０．１３３８９／ｊ．ｃｎｋｉ．ｒａｏ．２０２１．００８５
【实验研究】
龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的调控作用△
殷学伟　郭励稢　周梦贤　邱岩　毕宏生　郭大东
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作者简介：殷学伟（ＯＲＣＩＤ：００００ ０００２ ７４８０ １０２５），
女，
１９９５年８月出生，山东东营人，在读博士研究生。

研究方向：眼科疾病的发病机制及中西医结合治疗。

Ｅ ｍａｉｌ：８５４１３２９８１＠ｑｑ．ｃｏｍ通信作者：郭大东（ＯＲＣＩＤ：００００ ０００２ １７１２ ００５５），男，
１９６８年１２月出生，山东淄博人，博士，教授，山东中医药大学眼科研究所实验中心主任。

研究方向：眼科疾病的发病机制及中西医结合治疗。

Ｅ ｍａｉｌ：ｄａｄｏｎｇｇｅｎｅ＠１６３．ｃｏｍ
收稿日期：２０２１ ０１ １０
修回日期：２０２１ ０２ ２２
本文编辑：方红玲
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基金项目：国家自然科学基金项目（编号：８１８７３１６３）；山东省自然科学基金重点项目（编号：ＺＲ２０２０ＫＣ０２４）；山东中医药科技发展计划项目（编号：２０１５ １４５）作者单位：２５００１４　山东省济南市，山东中医药大学［殷学伟（
２０２０级博士研究生），周梦贤（２０２０级硕士研究生）］；
１０００６９　北京市，首都医科大学（郭励稢）；２５０００２　山东省济南市，山东中医药大学第二
附属医院（邱岩）；
２５０００２　山东省济南市，山东中医药大学附属眼科医院（毕宏生）；２５０００２　山东省济南市，山东省中西医结合眼病防治重点实验室，山东省高校中西医结合眼病防治技术（强化）重点实验室，山东中医药大学眼科研究所（毕宏生，郭大东）【
摘要】　目的　探讨龙胆泻肝汤（ＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎ，ＬＸＤ）对实验性自身免疫性葡萄膜炎（ＥＡＵ）大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的调控作用。

方法　将４８只雌性Ｌｅｗｉｓ大鼠随机分为正常对照组、ＥＡＵ模型组和ＬＸＤ干预组，其中ＥＡＵ模型组和ＬＸＤ干预组大鼠首先诱导并建立ＥＡＵ模型，ＬＸＤ干预组大鼠每天给予ＬＸＤ灌胃处理１２ｄ，ＥＡＵ组大鼠给予相同体积的ＰＢＳ缓冲液灌胃处理１２ｄ。

实时荧光定量ＰＣＲ（Ｑ ＰＣＲ）和酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）检测免疫后１２ｄ三组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１
ｍＲＮＡ及蛋白的表达；
此外，采用流式细胞仪检测以上各组织中Ｍ１型、Ｍ２型巨噬细胞极化水平，分析ＬＸＤ对ＥＡＵ大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的
影响。

结果　免疫后１
２ｄ，与正常对照组相比，ＥＡＵ模型组大鼠各组织中ｉＮＯＳｍＲＮＡ和蛋白表达均升高，而Ａｒｇ１ｍＲＮＡ和蛋白表达均降低（均为
Ｐ＜０．０５）；与ＥＡＵ模型组相比，ＬＸＤ干预组大鼠脾脏、淋巴结以及眼组织中ｉ
ＮＯＳ表达均降低，而Ａｒｇ１表达均升高（均为Ｐ＜０ ０５）。

流式细胞仪检测结果显示，免疫后１２ｄ，ＥＡＵ模型组大鼠各组织中Ｍ１型巨噬细胞极化水平升高，
而Ｍ２型巨噬细胞极化水平降低（均为Ｐ＜０．０５），呈现不均衡表达；与ＥＡＵ模型组相比，ＬＸＤ干预组大鼠各组织中Ｍ１型巨噬细胞极化水平下降，而Ｍ
２型巨噬细胞极化水平升高，两者比例逐渐恢复均衡。

结论　在ＥＡＵ大鼠中，Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化比例紊乱，ＬＸＤ可明显降低Ｍ１型巨噬
细胞极化水平以及相关因子ｉＮＯＳ表达，提高Ｍ２型巨噬细胞极化水平以及相
关因子Ａｒｇ１表达，从而发挥对ＥＡＵ大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的调控作用。

【
关键词】　龙胆泻肝汤；实验性自身免疫性葡萄膜炎；ｉＮＯＳ；Ａｒｇ１；Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化【中图分类号】　Ｒ７７３
葡萄膜炎是一类临床常见、不可逆、具有致盲性的复发性自身免疫性眼病，病因复杂，且其发病
率呈逐年上升趋势［１］。

目前，葡萄膜炎多采用激素和免疫抑制剂药物治疗，副作用较大。

因此，深入探讨葡萄膜炎的发病机制以及发现新的治疗靶点对葡萄膜炎的临床治疗具有重要意义。

龙胆泻肝汤（ＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎ，ＬＸＤ）是由龙胆草、山栀子、泽泻、黄芩、木通、车前子、生地黄、柴胡、当归和生甘草共十味中药组成，具有较强的免疫调节作用［２］
；
临床研究发现，ＬＸＤ对前葡萄膜炎有较好的治疗作用［３］。

此外，ＬＸＤ可通过多种途径改善机体的免疫反应，从而有效减少实验性自身免疫性葡萄膜炎（ＥＡＵ）大鼠前房炎症细胞浸润，保护眼部组织
结构，促进机体免疫功能恢复［４］
，
但是ＬＸＤ对葡萄膜炎免疫平衡的调控机制仍不十分清楚。

巨噬细胞是先天固有免疫的重要组成部分，在炎症和宿主防御中发挥核心作用。

在不同的病理生理条件下，巨噬细胞可转化为不同的功能表型，即经典活化性
巨噬细胞（
ｃｌａｓｓｉｃａｌｌｙａｃｔｉｖａｔｅｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｍ１）和选择活化性巨噬细胞（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙａｃｔｉｖａｔｅｄｍａｃｒｏ
ｐｈａｇｅｓ，Ｍ２）［５］。

研究发现，Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化的不平衡通常与各种炎症性疾病密切相关。

抗炎症的Ｍ２型巨噬细胞的减少和促炎症的Ｍ１型巨噬细胞的增加与炎症性疾病及自身免疫性疾病的发生有关。

Ｍ１型巨噬细胞主要参与启动和维持炎症
反应，而Ｍ
２型巨噬细胞主要参与炎症消退［６］。

失衡（增加）的Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞比例是推动自身免
疫性疾病发生发展的重要病理因素［
７］。

考虑到Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞平衡在炎症性疾病中的重要作用，本研究拟通过检测ＬＸＤ干预１２ｄ前后ＥＡＵ大
鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Ｍ
１型巨噬细胞、Ｍ２型巨噬细胞和ｉＮＯＳ、Ａｒｇ １的ｍＲＮＡ及蛋白表达的变化，分析ＬＸＤ对ＥＡＵ大鼠Ｍ１型、Ｍ２型巨噬细胞极化的影响，探讨ＬＸＤ对ＥＡＵ大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的调控作用，为ＥＡＵ的临床治疗提供新的思路和理论依据。

·８０４·　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ眼科新进展　２０２１年５月　第４１卷　第５期
ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．５Ｍａｙ２０２１
１　材料与方法　
１．１　材料　
１．１．１　主要试剂及仪器　光感受器间维生素Ａ类结合蛋白（ＩＲＢＰ）（生工生物工程股份有限公司，上海）；结核分枝杆菌（ＴＢ）（Ｄｉｆｃｏ公司，美国）；完全弗氏佐剂（ＣＦＡ）（Ｓｉｇｍａ公司，美国）；ＬＸＤ配方颗粒（华润三九医药股份有限公司）；Ｇｅｎｅｓｉｓ Ｄ动物眼部照相机（Ｋｏｗａ公司，日本）；ＲＮＡ提取试剂盒（Ａｉｄｌａｂ公司，北京）；大鼠脾脏单核细胞分离液试剂盒（Ｓｏ ｌａｒｂｉｏ公司，北京）；逆转录试剂盒、Ｑ ＰＣＲ试剂盒（ＱＩＡＧＥＮ公司，德国）；ＦＩＴＣ Ｆ４／８０（博奥森生物技术有限公司，北京）；ＡＰＣ ＣＤ１１ｂ（钰博生物科技有限公司，上海）；ＰＥ ＣＤ８６（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ公司，美国）；ＰＥ ＣＤ２０６（圣克鲁斯生物技术有限公司，上海）；固定破膜试剂盒（ＢＤ公司，美国）；大鼠ＥＬＩＳＡ（ｉＮＯＳ、Ａｒｇ１）试剂盒（Ｊｉａｎｇｌａｉｂｉｏ公司，上海）。

１．１．２　实验动物分组及处理　随机将４８只健康Ｌｅｗｉｓ雌性大鼠（鼠龄６～８周，体质量１６０～１８０ｇ，ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅ维通利华公司，北京）分为正常对照（ＮＣ）组、ＥＡＵ模型组和ＬＸＤ干预组，每组１６只。

ＥＡＵ模型组和ＬＸＤ干预组大鼠的足底、腹壁两侧和后背处分别注射２００μＬ含ＩＲＢＰ、ＣＦＡ和ＴＢ的混合液以建立ＥＡＵ大鼠模型，在ＮＣ组大鼠的相同部位分别注射相同含量的ＣＦＡ及ＴＢ混合乳糜液（不含ＩＲＢＰ）。

免疫后，ＬＸＤ组大鼠每天按１０００ｍｇ·ｋｇ－１进行ＬＸＤ灌胃干预，ＥＡＵ模型组和ＮＣ组大鼠给予相同体积的ＰＢＳ缓冲液灌胃，每天１次，直至大鼠处死。

１．２　Ｑ ＰＣＲ检测各组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ １ｍＲＮＡ表达　免疫后１２ｄ，收集各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织，进行组织ＲＮＡ的提取和ＲＮＡ反转录，引物序列：ＧＡＰＤＨ上游引物为５’ ＣＡＣＧＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＧＧＣＡＣＡＧＴ ３’，ＧＡＰＤＨ下游引物为５’ ＡＧＣＧＧＡＡＧＧＧＧＣＧＧＡＧＡＴＧＡＴ ３’，大小为２２２ｂｐ；ｉＮＯＳ上游引物为５’ ＣＴＴＣＣＧＧＧＣＡＧＣ ＣＴＧＴＧＡＧＡＣＧ ３’，ｉＮＯＳ下游引物为５’ ＡＴＣ ＣＣＣＡＧＧＴＧＴＴＣＣＣＣＡＧＧＴＡＧＧ ３’，大小为２９７ｂｐ；Ａｒｇ１上游引物为５’ ＣＧＧＣＴＴＧＣＧＡＧＡＴＧＴＧＧ ３’，Ａｒｇ１下游引物为５’ ＴＡＧＣＣＧＧＧＧＴＧＡＡＴＡＣＴＧＧ ３’，大小为２００ｂｐ。

反应体系为每孔２０μＬ，反应条件为：９５℃５ｍｉｎ，反应循环１次；９５℃２０ｓ，５７℃２５ｓ，６０℃２５ｓ，循环４５次。

Ｑ ＰＣＲ程序完成后，按２－ΔΔＣｔ计算ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１的ｍＲＮＡ相对表达水平。

１．３　ＥＬＩＳＡ法检测各组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１蛋白表达　免疫后１２ｄ，收集各组大鼠的脾脏、淋巴结以及眼组织，液氮研磨后加入ＲＩＰＡ裂解液３５０μＬ溶解，匀浆３０ｓ，移至超声波组织细胞粉碎机中进行冰上超声２０ｍｉｎ，然后置于４℃的离心机中８０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ。

ＢＣＡ法检测并计算各组样品的蛋白浓度，采用商业用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测各组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１的蛋白表达。

１．４　各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化水平检测　免疫后１２ｄ，分别取三组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织，收集单核细胞，加入细胞刺激液６μＬ和蛋白酶转运抑制剂４μＬ轻轻混匀，置于３７℃、含体积分数５％ＣＯ
２
培养箱中，避光孵育５ｈ，首先进行细胞表面染色，然后将细胞固定破膜，进行细胞内染色，最后加入３５０μＬＰＢＳ将细胞重悬，滤网过滤，流式细胞仪检测各组样本中Ｍ１型、Ｍ２型巨噬细胞的表达水平，分析ＬＸＤ对ＥＡＵ大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的影响。

１．５　统计学分析　采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行数据统计分析，所有实验均重复３次，组内统计学差异比较均采用单因素方差分析，组间采用ＬＳＤ检验进行两两比较。

检验水准：α＝０．０５。

２　结果　
２．１　各组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１的ｍＲＮＡ表达　Ｑ ＰＣＲ检测发现，免疫后１２ｄ，与ＮＣ组相比，ＥＡＵ模型组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳｍＲＮＡ相对表达水平均升高，Ａｒｇ１ｍＲＮＡ相对表达水平均降低（均为Ｐ＜０．０５）；与ＥＡＵ模型组相比，ＬＸＤ干预组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳｍＲＮＡ相对表达水平均显著降低，Ａｒｇ１ｍＲＮＡ相对表达水平均明显升高（均为Ｐ＜０ ０５）（见表１）。

表１　免疫后１２ｄ各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１ｍＲＮＡ的表达
组别脾脏（倍数）淋巴结（倍数）眼组织（倍数）　
ＮＣ组
　ｉＮＯＳｍＲＮＡ１．００±０．００１．００±０．００　１．００±０．００　
　Ａｒｇ１ｍＲＮＡ１．００±０．００１．００±０．００　１．００±０．００　
ＥＡＵ模型组
　ｉＮＯＳｍＲＮＡ２．４７±０．８１ ３．３１±０．１８ ４．８４±１．３０
　Ａｒｇ１ｍＲＮＡ０．５４±０．０９ ０．５２±０．０９ ０．８０±０．１２
ＬＸＤ干预组
　ｉＮＯＳｍＲＮＡ０．５４±０．１９ ＃＃０．７５±０．２２＃＃＃　１．２１±０．５２＃　
　Ａｒｇ１ｍＲＮＡ１０．４８±２．８１ ＃＃＃８．４１±２．４２ ＃＃＃ ７．７６±１．８５ ＃＃ 注：与ＮＣ组比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１， Ｐ＜０．００１；与ＥＡＵ模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１。

２．２　各组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１的蛋白表达　ＥＬＩＳＡ法检测发现，ＥＡＵ组和ＬＸＤ组大鼠各组织中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１蛋白相对表达水平变化趋势与ｍＲＮＡ相对表达水平基本一致。

免疫后１２ｄ，与ＮＣ组相比，ＥＡＵ模型组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ蛋白相对表达水平均明显升高，Ａｒｇ１蛋白相对表达水平均明显降低（均为Ｐ＜０ ０５）；与ＥＡＵ模型组相比，ＬＸＤ干预组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ蛋白表达水平均显著降低，Ａｒｇ１蛋白表达水平均明显升高（均为Ｐ＜０．０５）（见表２）。

２．３　ＬＸＤ对ＥＡＵ大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的影响　流式细胞仪检
·
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４
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眼科新进展　２０２１年５月　第４１卷　第５期
ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．５Ｍａｙ２０２１ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ
测结果显示，免疫后１２ｄ，ＥＡＵ模型组大鼠各组织中Ｍ１型巨噬细胞水平升高，而Ｍ２型巨噬细胞水平降
低，
Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化比例均高于ＮＣ组，呈现不均衡状态；
ＬＸＤ干预组大鼠各组织Ｍ１型巨噬细胞水平下降，Ｍ２型巨噬细胞水平升高，两者比例逐渐
恢复均衡（见图１、图２、表３）。

表２　免疫后１２ｄ各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织
中ｉＮＯＳ和Ａｒｇ１蛋白表达
组别脾脏淋巴结眼组织　ＮＣ组
　ｉＮＯＳ蛋白／ｎｇ·Ｌ－１６．４１±０．３０　９．７５±０．６３３．４７±０．１８ Ａｒｇ１蛋白／ｎｇ·Ｌ－１７．９２±０．６７
１０．２４±１．６８
１．４３±０．２４
ＥＡＵ模型组
　ｉＮＯＳ蛋白／ｎｇ·Ｌ－１４８．８３±０．３２
２２．７０±１．７５
２１．０５±１．７０
　Ａｒｇ１蛋白／ｎｇ·Ｌ－１１．９４±０．２６
２．４９±２．１４
０．１６±０．０２
ＬＸＤ干预组
　ｉＮＯＳ蛋白／ｎｇ·Ｌ－１１６．８３±１．７４ ＃＃＃１６．６６±２．３９
＃１５．６０±１．１１
＃＃　Ａｒｇ１蛋白／ｎｇ·Ｌ－１２５．７５±２．９１ ＃＃＃１５．３１±１．７３ ＃＃＃１４．７４±１．０８ ＃＃＃ 注：与ＮＣ组比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１， Ｐ＜０．００１；与ＥＡＵ模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１。

图１　流式细胞仪检测各组大鼠脾脏、淋巴结和
眼组织中Ｍ１型巨噬细胞水平变化　Ａ：圈门的Ｐ１
为Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋细胞；Ｂ：右上象限为Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ
＋ＣＤ８６＋
巨噬细胞（Ｍ１型巨噬细胞）。

图２　流式细胞仪检测各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Ｍ２型巨噬细胞水平变化　Ａ：圈门的Ｐ１
为Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋细胞；Ｂ：右上象限为Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ
＋ＣＤ２０６＋
巨噬细胞（Ｍ２型巨噬细胞）。

表３　各组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Ｍ１型、Ｍ２
型巨噬细胞水平以及Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞比例变化
组别Ｍ１型巨噬细胞水平／％Ｍ２型巨噬细胞水平／％Ｍ１／Ｍ２细胞比例变化ＮＣ组　脾脏０．９９±０．１２１．６１±０．２２０．６３±０．１６　淋巴结０．９２±０．１２１．３７±０．２９０．６８±０．０６　眼组织１．０３±０．１１
１．２６±０．２８
０．７３±０．１８
ＥＡＵ模型组　脾脏１．７２±０．２７
０．９２±０．２５
２．００±０．８４
　淋巴结１．９１±０．２６ ０．６８±０．２４ ２．９４±０．７２ 眼组织１．６４±０．２２
０．４１±０．３４
２．９２±０．２５
ＬＸＤ干预组　脾脏１．１６±０．１７＃
２．７４±０．４１ ＃
＃０．４４±０．１３＃
　淋巴结１．１５±０．１８＃１．８７±０．３３＃＃０．６４±０．２０＃＃　眼组织
１．２５±０．０９
＃２．３４±０．３９
＃＃０．６３±０．０６
＃＃＃ 注：与ＮＣ组比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１，
Ｐ＜０．００１；与ＥＡＵ
模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃
Ｐ＜０．００１。

３　讨论
祖国医学认为，葡萄膜炎属“瞳神紧小”“瞳神干
缺”等范畴，急性期以肝胆火炽型为主。

ＬＸＤ具有泻肝经实火、利肝胆湿热之功效，对急性期葡萄膜炎有显著疗效。

本课题组前期研究显示，中西医综合治
疗葡萄膜炎效果优于单纯西药治疗［８
９］
，提出“火热为标，肝胆为枢，五脏为本”的葡萄膜炎病机理论，其中“肝性失柔，火热上炎”为其关键病机，以“清火柔肝明目，标本经枢兼调”治法取得较好的临床疗效［１０］。

因此，我们认为中医药治疗葡萄膜炎与调肝有关。

肝主疏泄、主藏血，在维持机体正常功能和调节免疫平衡方面发挥重要作用，具有现代免疫学的基础。

ＬＸＤ可通过清肝火、调肝经促进机体恢复免
疫平衡，达到治疗葡萄膜炎的目的。

Ｌ
ＸＤ对葡萄膜炎等免疫性眼病具有良好的治疗作用。

有研究显示，龙胆泻肝胶囊能显著降低葡萄膜炎患者外周血中ＩＦＮ γ、ＴＮＦ α
、ＩＬ ２３的水平，改善机体的免疫状态，表明ＬＸＤ对葡萄膜炎有良好的治疗作用［３］。

本课题组前期临床研究显示，ＬＸＤ对葡萄膜炎的治疗在治愈率、随访１年复发率、住院时间、不良反应、患者耐受性及依从性、症候积分改变率等多方面均优
于单纯西药组［１０］
；前期实验研究发现，ＬＸＤ可有效
减少Ｅ
ＡＵ大鼠前房的炎症细胞浸润，保护眼部组织结构，正向调节机体免疫功能［１１］。

因此，探讨ＬＸＤ治疗葡萄膜炎的生物学本质，具有临床和实验研究的坚实基础。

巨噬细胞是一种重要的抗原提呈细胞，巨噬细胞参与的免疫机制可能与Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡相关。

在ＬＰＳ、ＩＦＮ γ等炎症因子刺激作用下，巨噬细胞可极化为Ｍ１型巨噬细胞，而巨噬细胞在Ｔｈ２型细胞因子作用下可极化为促进损伤组织修复的
Ｍ２型巨噬细胞［１２ １４］。

巨噬细胞可通过在Ｍ１和Ｍ２
·０１４·　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ
眼科新进展　２０２１年５月　第４１卷　第５期
ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．５Ｍａｙ２０２１
功能表型中的改变作出环境信号反应［１５］。

Ａｒｇ１为Ｍ２型巨噬细胞的标志物，而ｉＮＯＳ为Ｍ１型巨噬细胞的标志物［１６］。

Ａｒｇ１与ｉＮＯＳ作为巨噬细胞极化过程中的一对竞争性酶，二者可通过调控它们的表达和活性的动态平衡调节巨噬细胞的功能，Ｍ１型巨噬细胞可释放ＩＬ ６和ＩＦＮ γ等，进而间接激活ＳＴＡＴ３，诱导巨噬细胞ｉＮＯＳ等炎症因子的表达，引起致炎因子的分泌增多，进而发生脓毒性休克和组织坏死［１７ １８］。

Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化的不平衡可影响炎症性疾病，包括自身免疫性疾病的发展进程。

Ｍ１型巨噬细胞表达或分泌ＣＤ８６、ＴＮＦ α以及ｉＮＯＳ等多种促炎因子，Ｍ２型巨噬细胞表达或分泌抗炎因子，如Ａｒｇ１及ＩＬ １０等［１９］。

在自身免疫性疾病中，ＳＴＡＴ６可刺激巨噬细胞发生Ｍ２型极化，进而调节Ａｒｇ１抗炎因子的表达［２０ ２１］。

研究显示，ＩＬ ３３可使肠系膜中的Ｍ２型巨噬细胞比例增高，进而诱导巨噬细胞向Ｍ２型巨噬细胞极化，参与皮肤黏膜上皮组织损伤的修复以及重建黏膜免疫平衡过程［２２］。

Ａｒｇ１可有效减少ｉＮＯＳ所生成的ＮＯ造成的机体损伤，对组织修复具有促进作用［２３］。

研究显示，Ｍ２型巨噬细胞表面标志物可参与抗炎、抗肿瘤以及抗氧化过程，发挥免疫调节作用［２４］。

Ｋｕｎｇ等［２５］研究发现，在类风湿性关节炎（ＲＡ）小鼠动物模型中，噻二唑 ６，１１ 二酮可通过特异性抑制Ｔ细胞死亡相关基因８的功能和表达，调节Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡，减少关节炎症的疼痛和破坏，进而抑制ＲＡ的发生发展；花青素 ３ Ｏ β 葡萄糖苷（Ｃｙ ３ ｇ）可通过过氧化物酶体增殖物激活受体 γ（ＰＰＡＲγ）介导的ＮＦ κＢ以及转录６信号通路的信号转导子和激活子调节Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡，降低促炎因子表达水平，提高抗炎因子表达水平，从而发挥抗炎作用［２６］。

本研究发现，与ＮＣ组相比，免疫后１２ｄ的ＥＡＵ模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中ｉＮＯＳｍＲＮＡ及蛋白表达水平明显升高，而Ａｒｇ１的ｍＲＮＡ及蛋白表达水平降低（均为Ｐ＜０．０５），Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化比例均高于ＮＣ组，呈现不均衡表达；经ＬＸＤ治疗后，ＬＸＤ干预组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中ｉＮＯＳ表达均显著降低，而Ａｒｇ１表达均明显升高（均为Ｐ＜０．０５），Ｍ１型巨噬细胞极化水平下降，而Ｍ２型巨噬细胞极化水平升高，Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞比例逐渐恢复均衡。

提示ＬＸＤ可通过调节Ｍ１型、Ｍ２型巨噬细胞的极化水平恢复ＥＡＵ大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞的极化平衡，从而发挥治疗ＥＡＵ的作用。

总之，ＥＡＵ大鼠的脾脏、淋巴结以及眼组织中ｉＮＯＳ水平显著升高，而Ａｒｇ １表达水平降低，Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡发生紊乱。

ＬＸＤ可明显降低Ｍ１型巨噬细胞极化水平以及相关因子ｉＮＯＳ表达水平，提高Ｍ２型巨噬细胞极化水平以及相关因子Ａｒｇ １表达水平，从而发挥对ＥＡＵ大鼠Ｍ１／Ｍ２巨噬细胞极化平衡的调控作用，达到治疗葡萄膜炎的效果。

本研究为临床应用ＬＸＤ治疗ＥＡＵ提供了新的理论基础和依据。

参考文献
［１］　段俊国．中西医结合眼科学［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，２０１３．
ＤＵＡＮＪＧ．ＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙｏｆｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉ ｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＣｈｉｎａＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＰｒｅｓｓ，２０１３．
［２］　ＬＥＥＴＹ，ＣＨＡＮＧＨＨ．ＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＴａｎｇｈａｓｉｍｍｕｎｏ ｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｎＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＴｃｅｌｌｓａｎｄａｔｔｅｎｕａｔｅｓｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｓｉｇｎｓｉｎＭＲＬ／ｌｐｒｍｉｃｅ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ，２０１０，２５（５）：６７７ ６８５．
［３］　向圣锦，王毓琴，李艳，郑美琴．龙胆泻肝胶囊对ＨＬＡ Ｂ２７相关性急性前葡萄膜炎患者血清相关细胞因子水平的影响［Ｊ］．医
学研究杂志，２０１３，４２（１）：５８ ６１．
ＸＩＡＮＧＳＪ，ＷＡＮＧＹＱ，ＬＩＹ，ＺＨＥＮＧＭＱ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＣａｐｓｕｌｅｏｎＨＬＡ Ｂ２７ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｓｅｒｕｍｒｅｌａｔｅｄｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅａｎｔｅｒｉｏｒｕｖｅｉｔｉｓ［Ｊ］．ＪＭｅｄＲｅｓ，２０１３，４２（１）：５８ ６１．
［４］　杨东．龙胆泻肝汤加减治疗前葡萄膜炎的疗效观察［Ｊ］．药物与人，２０１４，２７（５）：３９．
ＹＡＮＧＤ．ＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｃｕｒａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆＬｏｎｇｄａｎＸｉｅ ｇａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｎｔｅｒｉｏｒｕｖｅｉｔｉｓ［Ｊ］．ＤｒｕｇＨｕｍａｎ，２０１４，２７（５）：３９．
［５］　ＭＵＲＲＡＹＰＪ．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｎｎｕＲｅｖＰｈｙｓｉ ｏｌ，２０１７，７９（１０）：５４１ ５６６．
［６］　ＫＯＮＧＸ，ＧＡＯＪ．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ：ａｋｅｙｅｖｅｎｔｉｎｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｐｈａｓｅｏｆａｃｕｔｅｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＭｏｌＭｅｄ，２０１７，２１（５）：９４１ ９５４．
［７］　ＦＵＮＥＳＳＣ，ＲＩＯＳＭ，ＥＳＣＯＢＡＲ ＶＥＲＡＪ，ＫＡＬＥＲＧＩＳＡＭ．Ｉｍ ｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｉｎａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１８，１５４（２）：１８６ １９５．
［８］　崔丽君，宋小莉，郭大东．中医药综合治疗葡萄膜炎随机对照试验的系统评价［Ｊ］．中华中医药学刊，２０１４，３２（１１）：２７４７ ２７５０．
ＣＵＩＬＪ，ＳＯＮＧＸＬ，ＧＵＯＤＤ．Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗｏｆｒａｎｄｏｍ ｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌｓｏｆｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｕｖｅｉｔｉｓｗｉｔｈｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＴｒａｄｉｔＣｈｉｎ
Ｍｅｄ，２０１４，３２（１１）：２７４７ ２７５０．
［９］　荣立洋，郭大东，李佳，毕宏生．葡萄膜炎中医病因病机分析与中西医结合治疗研究［Ｊ］．中医药导报，２０１７，２３（４）：７５ ７７．
ＲＯＮＧＬＹ，ＧＵＯＤＤ，ＬＩＪ，ＢＩＨＳ．ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｔｉｏｌｏｇｙａｎｄｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｕｖｅｉｔｉｓｉｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉ ｃｉｎｅ［Ｊ］．ＣｈｉｎＭｅｄＧｕｉｄｅ，２０１７，２３（４）：７５ ７７．
［１０］　解孝锋，崔浩，王兴荣，卢弘，宋继科，郭大东，等．中西医结合治疗葡萄膜炎临床研究［Ｊ］．山东中医药大学学报，２０１５，３９
（１）：３７ ４１．
ＸＩＥＸＦ，ＣＵＩＨ，ＷＡＮＧＸＲ，ＬＵＨ，ＳＯＮＧＪＫ，ＧＵＯＤＤ，
ｅｔａｌ．ＣｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｙｏｎＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅａｎｄ
Ｗｅｓｔｅｒｎｍｅｄｉｃｉｎｅｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｕｖｅｉｔｉｓ［Ｊ］．ＪＳｈａｎ
ｄｏｎｇＵｎｉｖＴｒａｄｉｔＣｈｉｎＭｅｄ，２０１５，３９（１）：３７ ４１．
［１１］　唐凯，郭大东，张莲，司俊康，杜宇翔，毕宏生．龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用［Ｊ］．眼科新进展，
２０１５，３５（４）：３０５ ３０９．
ＴＡＮＧＫ，ＧＵＯＤＤ，ＺＨＡＮＧＬ，ＳＩＪＫ，ＤＵＹＸ，ＢＩＨＳ．Ｔｒｅａｔ
ｍｅｎｔｅｆｆｉｃａｃｙｏｆＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＴａｎｇｏｎｒａｔｓｗｉｔｈｅｘｐｅｒｉ
ｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ［Ｊ］．ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ，２０１５，
３５（４）：３０５ ３０９．
［１２］　ＭＵＲＲＡＹＰＪ，ＡＬＬＥＮＪＥ，ＢＩＳＷＡＳＳＫ，ＦＩＳＨＥＲＥＡ，ＧＩＬ ＲＯＹＤＷ，ＧＯＥＲＤＴＳ，ｅｔａｌ．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｐｏ
ｌａｒｉｚａｔｉｏｎ：ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ［Ｊ］．
Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２０１４，４１（１）：１４ ２０．
［１３］　ＥｌＫＡＳＭＩＫＣ，ＰＵＧＬＩＥＳＥＳＣ，ＲＩＤＤＬＥＳＲ，ＰＯＴＨＪＭ，ＡＮ ＤＥＲＳＯＮＡＬ，ＦＲＩＤＭＧ，ｅｔａｌ．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｉｎｄｕｃｅ
ａｄｉｓｔｉｎｃｔｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ／ｐｒｏｆｉｂｒｏｔｉｃｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｈｅｎｏ
ｔｙｐｅｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１４，１９３
（２）：５９７ ６０９．
［１４］　ＳＣＨＩＥＲＩＮＧＣ，ＫＲＡＵＳＧＲＵＢＥＲＴ，ＣＨＯＭＫＡＡ，ＦＲ?ＨＬＩＣＨＡ，ＡＤＥＬＭＡＮＮＫ，ＷＯＨＬＦＥＲＴＥＡ，ｅｔａｌ．ＴｈｅａｌａｒｍｉｎＩＬ ３３
ｐｒｏｍｏｔｅｓｒｅｇｕｌａｔｏｒｙＴ ｃｅｌｌｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎｅ［Ｊ］．Ｎａ
ｔｕｒｅ，２０１４，５１３（７５１９）：５６４５６ ５６４５８．
·
１
１
４
·
眼科新进展　２０２１年５月　第４１卷　第５期
ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．５Ｍａｙ２０２１ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ
［１５］　ＭＡＮＴＯＶＡＮＩＡ，ＳＩＣＡＡ，ＬＯＣＡＴＩＭ．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａ
ｔｉｏｎｃｏｍｅｓｏｆａｇｅ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００５，２３（４）：３４４ ３４６．
［１６］　ＭＩＬＬＳＣＤ．Ａｎａｔｏｍｙｏｆａｄｉｓｃｏｖｅｒｙ：ｍ１ａｎｄｍ２ｍａｃｒｏｐｈａ
ｇｅｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２０１５，６（５）：２１２．
［１７］　ＨＥＬＤＴＫ，ＷＥＩＨＵＡＸ，ＹＵＡＮＬ，ＫＡＬＶＡＫＯＬＡＮＵＤＶ，ＣＲＯＳＳＡ
Ｓ．Ｇａｍｍａｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｕｇｍｅｎｔｓｍａｃｒｏｐｈａｇｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｂｙｌｉ
ｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｂｙｔｗｏｄｉｓｔｉｎｃｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
，ａｔｔｈｅｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｌｅｖｅｌａｎｄｖｉａａｎａｕｔｏｃｒｉｎｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｎｖｏｌｖｉｎｇｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒａｌｐｈａａｎｄｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １［Ｊ］．ＩｎｆｅｃｔＩｍ ｍｕｎ，１９９９，６７（１）：２０６ ２１２．
［１８］　ＳＯＤＨＩＮＡ，ＫＥＳＨＥＲＷＡＮＩＶ．Ｓｉｇｎａｌｉｎｇｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄ
ｉｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＩＬ １βｂｙｍｕｒｉｎｅｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｖｉｔｒｏｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ［Ｊ］．ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００７，７（１１）：１４０３ １４１３．
［１９］　ＭＵＲＲＡＹＰＪ．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｎｎｕＲｅｖＰｈｙｓ
ｉｏｌ
，２０１７，７９：５４１ ５６６．［２０］　ＬＡＵＭ，ＴＡＳＮＴＩＫＯＳＥ，ＭＡＸＷＥＬＬＭＪ，ＴＡＲＬＩＮＴＯＮＤＭ，
ＡＮＤＥＲＳＯＮＧＰ，ＨＩＢＢＳＭＬ．ＬｏｓｓｏｆＳＴＡＴ６ｐｒｏｍｏｔｅｓａｕｔｏ ｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅａｎｄａｔｏｐｙｏｎａｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｇｅｎｅｔｉｃｂａｃｋ ｇｒｏｕｎｄ［Ｊ］．ＪＡｕｔｏｉｍｍｕｎ，２０１２，３９（４）：３８８ ３９７．
［２１］　ＬＡＷＲＥＮＣＥＴ，ＮＡＴＯＬＩＧ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｍａｃｒｏ
ｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ：ｅｎａｂｌｉｎｇｄｉｖｅｒｓｉｔｙｗｉｔｈｉｄｅｎｔｉｔｙ［Ｊ］．Ｎａｔ
ＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ
，２０１１，１１（１１）：７５０ ７６１．［２２］　ＹＩＮＨ，ＬＩＸ，ＨＵＳ，ＬＩＵＴ，ＹＵＡＮＢ，ＧＵＨ，ｅｔａｌ．ＩＬ ３３ａｃｃｅｌ
ｅｒａｔｅｓｃｕｔａｎｅｏｕｓｗｏｕｎｄｈｅａｌｉｎｇｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙａｃｔｉｖａｔｅｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］．ＭｏｌＩｍｍｕｎｏｌ，２０１３，５６（４）：３４７ ３５３．
［２３］　ＡＮＤＯＹ，ＯＫＵＴ，ＴＳＵＪＩＴ．Ｐｌａｔｅｌｅｔｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ
ＬＰＳｉｎｄｕｃｅｄｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓａｃ
ｃｏｍｐａｎｉｅｄｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＮＦ κ
ＢｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄＡｒｇｉｎａｓｅ １ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１６，１１（９）：ｅ０１６２２０８．
［２４］　ＷＡＮＧＮ，ＬＩＡＮＧＨ，ＺＥＮＫ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｔｈａｔｉｎ
ｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅＭ
１ Ｍ２ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｂａｌａｎｃｅ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２０１４，２８（５）：６１４．
［２５］　ＫＵＮＧＣＣ，ＤＡＩＳＰ，ＣＨＩＡＮＧＨ，ＨＵＡＮＧＨＳ，ＳＵＮＷＨ．
ＴｅｍｐｏｒａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆｄｉｓｔｉｎｃｔｃｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄＭ１／Ｍ
２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｒｅｇｕｌａｔｅｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ
［Ｊ］．ＭｏｌＢｉｏｌＲｅｐ，２０２０，４７（８）：３４２３ ３４３７．［２６］　ＬＩＵＹ，ＤＥＮＧＧＦ，ＷＡＮＧＸ，ＬＵＯＪ，ＱＩＡＮＸＹ，ＬＩＮＧＷＨ．
Ｃｙａｎｉｄｉｎ ３ Ｏ β ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｐｏｌａｒｉｚｅｓＬＰＳ ｉｎｄｕｃｅｄＭ１ｉｎｔｏＭ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｉｎＪ７７４ｃｅｌｌｓｖｉａＰＰＡＲγ ｍｅｄｉａｔｅｄＮＦ κＢａｎｄＳＴＡＴ６ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＪＦｕｎｃｔＦｏｏｄｓ，２０２１，７７（１）：１０４３１４．
ＲｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｏｆＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎｉｎｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｂａｌａｎｃｅｏｆＭ１／
Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ
ＹＩＮＸｕｅｗｅｉ１，ＧＵＯＬｉｊｉｅ２，ＺＨＯＵＭｅｎｇｘｉａｎ１，ＱＩＵＹａｎ３，ＢＩＨｏｎｇｓｈｅｎｇ４，５，ＧＵＯＤａｄｏｎｇ
５１．ＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５００１４，ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ２．ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００６９，Ｃｈｉｎａ３．ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５０００２，ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ４．ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＥｙｅＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５０００２，ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ５．ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅｆｏｒＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄＴｈｅｒａｐｙｏｆＯｃｕｌａｒＤｉｓ
ｅａｓｅｓ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅＥｙｅＤｉｓｅａｓｅＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄＴｒｅａｔｍｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｅｎ ｈａｎｃｅｄ）ｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＥｙｅＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５０００２，ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＧＵＯＤａｄｏｎｇ，Ｅ ｍａｉｌ：ｄａｄｏｎｇｇｅｎｅ＠１６３．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｏｆＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎ（ＬＸＤ）ｉｎｔｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｂａｌ
ａｎｃｅｏｆＭ
１／Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ（ＥＡＵ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＴｈｅｆｅｍａｌｅＬｅｗｉｓｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌ（ＮＣ）ｇｒｏｕｐ，ＥＡＵｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄＬＸＤｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｇｒｏｕｐ．Ｆｉｒｓｔ，ｔｈｅＥＡＵｍｏｄｅｌｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｉｎｒａｔｓｉｎＥＡＵｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄＬＸＤｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ，ｒａｔｓｉｎｔｈｅＬＸＤｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ
ｇｒｏｕｐｗｅｒｅｇｉｖｅｎＬＸＤｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｌｌｙｅｖｅｒｙｄａｙｆｏｒ
１２ｄａｙｓ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｒａｔｓｉｎＥＡＵｇｒｏｕｐｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｖｏｌ ｕｍｅｏｆｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｌｌｙｅｖｅｒｙｄａｙｆｏｒ１２ｄａｙｓ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉＮＯＳａｎｄＡｒｇ１ｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｌｅｖｅｌｓｉｎｓｐｌｅｅｎ，ｌｙｍｐｈｎｏｄｅａｎｄｅｙｅｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｑ ＰＣＲ）ａｎｄｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｔｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ
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ｅｌｓｏｆｉＮＯＳｉｎｓｐｌｅｅｎ
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ｌｅｖｅｌｓｏｆｉＮＯＳｉｎＬＸＤｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ
，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｒｇ１ｉｎｓｐｌｅｅｎ，ｌｙｍｐｈｎｏｄｅａｎｄｅｙｅｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅｌｅｖａｔｅｄ（ａｌｌＰ＞０．０５）．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ１２ｄａｙｓａｆｔｅｒｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ，ｔｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＭ１ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｔｈｅｔｉｓｓｕｅｓｏｆｔｈｅＥＡＵｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＭ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ（ａｌｌＰ＜０．０５），ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｗａｓｉｎｄｉｓｏｒｄｅｒ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＥＡＵｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＭ１ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎＬＸＤｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｅｒｅａｓｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＭ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ（ａｌｌＰ＞０．０５），ａｎｄｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆＭ１／Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｇｒａｄｕａｌｌｙｒｅｔｕｒｎｅｄｔｏｂａｌａｎｃｅ．Ｃｏｎ ｃｌｕｓｉｏｎ　ＴｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆＭ１／Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｓｉｎｄｉｓｏｒｄｅｒｉｎＥＡＵｒａｔｓ．ＬＸＤｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｆｒｅ
ｑｕｅｎｃｙｏｆＭ
１ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＭ１ｍａｃｒｏｐｈａｇｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅｉＮＯＳ，ｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆＭ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＭ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅＡｒｇ１，ｔｈｅｒｅｂｙｐｌａｙｉｎｇａｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｉｎ
ｔｈｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｂａｌａｎｃｅｏｆＭ
１／Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎＥＡＵｒａｔｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】　ＬｏｎｇｄａｎＸｉｅｇａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎ；ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ；ｉＮＯＳ；Ａｒｇ１；Ｍ１／Ｍ２ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｐｏｌａｒｉｚａ ｔｉｏｎ
·２１４·　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ
眼科新进展　２０２１年５月　第４１卷　第５期
ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．５Ｍａｙ２０２１。