关于GBT13662-2018《黄酒》中总糖的测定(亚铁氰化钾滴定法)不确定度评价报告

黄酒是以稻米、黍米、玉米、小米或小麦等为主要原料，经蒸煮、加曲、糖化、发酵、压榨、澄清、过滤、煎酒、贮存和勾兑而成的酿造酒。

当前，随着我国经济的快速发展、人民生活质量的提高和健康意识的增强，健康、营养、安全和保健的新的饮酒观念开始盛行，对黄酒的类型、品质也就有了更高的要求与追求。

其中，黄酒的总糖含量是区别不同类型黄酒的主要指标，根据其中的总糖含量，可将黄酒分为干黄酒、半干黄酒、半甜黄酒、甜黄酒。

总糖的测定方法较多，目前，亚铁氰化钾法测定黄酒中总糖是判断黄酒类型的一种快速、精密度良好、成本低的测定方法，为确保检测结果的准确可靠，对其检测过程中影响
结果的因素进行分析，评价影响因素对检测结果的综合影响程度，进而对此方法进行不确定度评定。

1材料与方法1.1仪器设备
1.1.1分析天平：感量0.0001g 1.1.2恒温水浴锅1.1.3可调式电炉
1.1.4聚四氟乙烯滴定管50mL 1.1.5容量瓶若干100mL 、1000mL 1.1.6移液管2mL 、5mL 1.1.7量筒50mL
1.1.8广口三角瓶若干100mL
关于GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定（亚铁氰化
钾滴定法）不确定度评价报告
张利1，汤有宏1,2
（1.安徽古井贡酒股份有限公司，安徽
亳州
236820；2.安徽省固态发酵工程技术研究中心，
安徽亳州
236820）
摘要:依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》和GB/T 27411-2012《检测实验室中常用不确定度
评定方法与表示》两个不确定度相关标准，对GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定（亚铁氰化钾滴定法）的测量不确定度进行评定，根据《黄酒》亚铁氰化钾滴定法测定黄酒总糖含量的分析方法，建立数学模型，找出检测过程中影响结果的不确定度分量来源并进行评定分析，最终得出不确定度评定结果。

关键词：黄酒；总糖；亚铁氰化钾滴定法；不确定度中图分类号：TS262.4；TS207.3
文献标识码：B
Uncertainty Evaluation Report on Determination of Total Sugar (Potassium
Ferrocyanide Titration)in Yellow Rice Wine (GB/T13662-2018)
ZHANG Li 1,TANG Youhong 1,2
(1.Anhui Ancient Well Gong Co.,Ltd.,Bozhou 236820,Anhui,China;
2.Anhui Province solid-state fermentation engineering technology research Center,Bozhou 236820,Anhui,China)
Abstract:According to JJF 1059.1-2012evaluation and expression of measurement uncertainty and GB /T 27411-2012evaluation and expression of uncertainty commonly used in testing laboratories,the measurement uncertainty of total sugar in yellow wine (potassium ferrocyanide titration)of GB /t13662-2018is evaluated,and the total sugar in yellow wine is determined according to potassium ferrocyanide titration of yellow wine Content analysis method,establish mathematical model,find out the sources of uncertainty components that affect the results in the detection process and carry out evaluation analysis,and finally get the uncertainty evaluation results.Key words:Yellow rice wine;total sugar;potassium ferrocyanide titration;uncertainty
收稿日期：2019-12-20
作者简介：张利（1989-），女，工程师，安徽古井贡酒股份有限公司白酒理化分析员。

第47卷第3期2020年5月
酿酒LIQUOR
MAKING
Vol.47.№.3May ，2020
文章编号:1002-8110（2020）03-0044-06
44
张利，等：关于GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定（亚铁氰化钾滴定法）
不确定度评价报告
第三期2020
1.2试剂和溶液
1.2.1费林甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）15.0g及次甲基蓝0.05g，加水溶解并定容至1000mL，摇匀备用。

1.2.2费林乙液：称取酒石酸钾钠（C4H4KNaO6·4H2O）50g、氢氧化钠54g、亚铁氰化钾4g，加水溶解并定容至1000mL，摇匀备用。

1.2.3葡萄糖标准溶液（1g/L）：称取经103℃~105℃烘干至恒重的无水葡萄糖1g（精确至0.0001g），加水溶解，并加浓盐酸5mL再用水定容至1000mL。

1.2.4次甲基蓝指示液（10g/L）：称取1.0g次甲基蓝，用水溶解并定容至100mL。

1.2.5盐酸溶液（6mol/L）：量取浓盐酸50mL,加水稀释至100mL。

1.2.6甲基红指示剂（1g/L）：称取甲基红0.10g，溶于乙醇并稀释至100mL
1.2.7氢氧化钠溶液（200g/L）：称取氢氧化钠20g，用水溶解并稀释至100mL
1.3不确定度评定依据
1.3.1JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》。

1.3.2GB/T27411-2012《检测实验室中常用不确定度评定方法与表示》。

1.4检测方法
1.4.1检测方法
国家标准GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定，亚铁氰化钾滴定法。

1.4.2方法原理
费林溶液与还原糖共沸,在碱性溶液中将铜离子还原成亚铜离子，并与溶液中的亚铁氰化钾络合而呈黄色。

以次甲基蓝为指示剂，达到终点时，稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原为无色为终点。

依据试样水解液的消耗体积，计算总糖含量。

1.4.3方法简述
1.4.3.1空白试验
准确吸取费林甲、乙液各5mL于100mL锥形瓶中，加入葡萄糖标准溶液9mL，混匀后置于电炉上加热，在2min内沸腾，然后以4s~5s一滴的速度继续滴入葡萄糖标准溶液，直至蓝色消失立即呈现黄色为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总量（V）。

1.4.3.2试样测定
试样的测定如下步骤操作：
1.4.3.
2.1吸取试样2mL~10mL（控制水解液含糖量在1g/L~2g/L）于100mL容量瓶中，加水30mL和盐酸溶液（6mol/L）5mL，在68℃~70℃水浴中加热15min。

冷却后，加入甲基红指示剂两滴，用氢氧化钠中和至红色消失（近似于中性）。

加水定容至100mL，摇匀，用滤纸过滤后，作为试样水解液备用。

1.4.3.
2.2预滴定：准确吸取费林甲、乙液各5mL及试样水解液5mL于100mL锥形瓶中，摇匀后置于电炉上加热至沸腾，用葡萄糖标准溶液滴定至终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的体积。

1.4.3.
2.3滴定：准确吸取费林甲、乙液各5mL及试样水解液5mL于100mL锥形瓶中，加入比预滴定少1.00mL的葡萄糖标准溶液，摇匀后置于电炉上加热至沸腾，继续用葡萄糖标准溶液滴定至终点。

记录消耗葡萄糖标准溶液的体积。

接近终点时，滴入葡萄糖标准溶液的用量应控制在0.5mL~1.0mL。

1.5数学模型
试样中总糖含量按下式计算：
=1000
式中：
——
—试样中总糖的含量，单位为克每升（g/L）；
——
—空白试验时，消耗葡萄糖标准溶液的体积，单位为毫升（mL）；
1
——
—试样测定时，消耗葡萄糖标准溶液的体积，单位为毫升（mL）；
——
—葡萄糖标准溶液的浓度，单位为克每毫升（g/mL）；
——
—试样的稀释倍数。

所得结果表示至一位小数。

1.6不确定来源分析
根据数学模型分析，可知黄酒总糖含量的测定不确定度来源于以下几个分量：
1.6.1试样测定重复性引入的不确定度r（）
1.6.2空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r（0）
1.6.3试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r（1）
1.6.4葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r（）1.6.5试样制备引入的不确定度r（）
45
1.6.6移取5mL 试样时引入的不确定度r （5
）则黄酒中总糖含量测量的相对标准不确定度为：
r
2（）=r 2（）+r 2（0）+r 2（1
）+r 2（）+r 2（）+r 2
（5）2不确定度评定
总糖含量测量的重复性带来不确定度按A 类评
以外，其他各分量引入的不确定度按B 类评定。

2.1试样测定重复性引入的不确定度r （）
按照GB/T13662-2018《黄酒》6.2总糖6.2.2亚铁氰化钾滴定法重复进行试验10次（n=10），分析同一黄酒样品绍兴花雕酒（属半干黄酒）中总糖含量，测定结果见表1绍兴花雕酒中总糖含量测定结果。

则试样重复性检测引入的相对标准不确定度r （）
为：r （）=RSD ÷n √=0.007713÷10√=0.0024392.2
空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r （0
）按照GB/T13662-2018《黄酒》6.2总糖6.2.2亚铁氰化钾滴定法重复进行试验10次（n=10），分析空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积，
测定结果见表2空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积测定结果。

表1绍兴花雕酒中总糖含量测定结果
样品名称绍兴花雕酒
试样稀释倍数
50
葡萄糖标准
溶液浓度（g/L ）1.0130
空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积(mL)10.3010.2010.2710.3010.3010.3010.2510.2210.2010.28
试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积（mL ）
7.387.357.35
7.387.387.357.407.427.397.39
检测结果（g/L ）29.1729.4829.4829.1729.1729.4828.9728.7729.0729.07
平均值（g/L ）29.2
标准偏差0.2251
相对标准偏差RSD 0.007713
由实验方法可知，空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的相对标准不确定度r （0）即为50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度r （01）、空白消耗葡萄糖标准溶液的体积重复性产生的不确定度r （02），其来50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度r （01）自于两个分量：50mL A 级滴定管容量引入的不确定度（
011
）和50mL A 级滴定管温度
变化引入的不确定度（012
）。

2.2.150mL A 级滴定管容量引入的标准不确定度：
（
011
）
查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A 级50mL 滴定管允差为±0.05mL ，服从矩形分布，取包含因子k=3√，则有：
（
011
）=0.05÷3√=0.029
2.2.250mL A 级滴定管温度变化引入的标准不确定
度（012
）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4℃，按均匀分布，则有：（
112
）=αV △t ÷3
√=2.1×10-4×50×5÷3√=0.003031
则50mL A 级滴定管引入的标准不确定度：（01）为：
（01）=[2
（
11
）+2
（
012
）]1
2
=[(0.029)2+(0.003031)2]1
2=0.04195
则50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度：r （01
）为：r （01
）=（01）÷0=0.04195÷10.26=0.004089
10.30
10.20
10.27
10.30
10.30
10.30
10.25
10.22
10.2010.2810.26
0.003869
第三期
2020
酿酒46
2.2.3空白消耗葡萄糖标准溶液的体积重复性产生的不确定度r （02
）为：r （02）=RSD ÷n √÷10√则空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r （0
）为：r （0
）=[2
（01）+2
（02）]1
2
=[(0.004089)2+(0.001223)2]1
2=0.004268
2.3
试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r （1
）按照GB/T13662-2018《黄酒》6.2总糖6.2.2亚
铁氰化钾滴定法重复进行试验10次（n=10），分析试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积，测定结果见表3试样测消耗葡萄糖标准溶液的体积测定结果。

7.38
7.39
7.35
7.35
7.38
7.38
7.35
7.40
7.427.397.38
0.02211
由实验方法可知，试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的相对标准不确定度r （1）即为50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度r （11）、试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积重复性产生的不确定度r （12），其来50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度r （11）自于两个分量：50mL A 级滴定管容量引入的不确定度（
111
）和50mL A 级滴定管
温度变化引入的不确定度（112
）。

2.3.150mL A 级滴定管容量引入的标准不确定度：
（
111
）
查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A 级50mL 滴定管允差为±0.05mL ，服从矩形分布，取包含因子k=3√，则有：
（011
）=0.05÷3√=0.029
2.3.250mL A 级滴定管温度变化引入的标准不确定
度（
112
）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4
℃，按均匀分布，则有：（
112
）=αV △t ÷3
√=2.1×10-4×50×5÷3
√=0.003031
则50mL A 级滴定管引入的标准不确定度:（11）为：
（11）=[2
（
111
）+2
（
112
）]
1
2=[(0.029)2+(0.003031)2]12
=0.04195
则50mL A 级滴定管引入的相对标准不确定度r （01
）为:r （11
）=（11）÷0=0.04195÷7.38=0.0056842.3.3试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积重复性
产生的不确定度r （02）：该项不确定度已通过实验合成重复性考虑，在此不再重复考虑。

则试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度r （1
）为：r （1）=r （11
）=0.0056842.4葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r
（）葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度即为标准物质葡萄糖称量引入的不确定度r （）和葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r （），其来葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r （）自于两个分量：1000mL A 级容量瓶容量引入的不确定度（1）和1000mL A 级容量瓶温度变化引入的不确定度（2）。

2.4.1标准物质葡萄糖称量引入的不确定度r
（）分析天平检定证书标明其示值误差为±0.0005g ，服从矩形分布，取包含因子k=3√，标准物质质量为1.0130g 。

则标准物质称量引入的相对标准不确定度为：r
（）=0.00051.0130×3
√=2.845×10-4g
2.4.2葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r
（）葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r
（）自于两个分量：1000mL A 级容量瓶容量引入的不确定度（1）和1000mL A 级容量瓶温度变化引入的不确定度（2）。

2.4.2.11000mL 容量瓶的容量引起的不确定度：（1）
葡萄糖标准溶液配制时使用了A 级1000mL 容量瓶，查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A 级1000mL 容量瓶允差为±0.40mL ，服从矩形分布，取包含因子k=3√，则：
张利，等：关于GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定
（亚铁氰化钾滴定法）不确定度评价报告
第三期
2020
47
（1）=0.40÷3
√=0.231
2.4.2.21000mL A级容量瓶温度变化引入的不确定度（2）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4℃，按均匀分布，则有：
（2）=αV△t÷3
√
=2.1×10-4×1000×5÷3
√
=0.6062
则：（）=[2（1）+2（2）]12
=[(0.231)2+(0.6062)2]12
=0.6487
则葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r（）为：
r
（）=（）÷1000=0.0006487
则葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度r（）为：
r
（）=[r2（）+r2（）]12
=[(0.0002845)2+(0.0006487)2]12
=0.0007083
2.5试样制备引入的不确定度r（）
试样制备引入的不确定度即为使用A级2mL 移液管引入的不确定度r（1）和使用A级100mL容量瓶引入的不确定度r（2）。

使用A级100mL容量瓶引入的不确定度r（2）来自于两个分量：A级100mL 容量瓶容量引入的不确定度（21）和A级100mL容量瓶温度变化引入的不确定度（22）。

2.5.1A级2mL移液管引入的不确定度r（1）
A级2mL移液管引入的不确定度r（1）来自于两个分量：A级2mL移液管引入的标准不确定度（11）和A级2mL移液管温度变化引入的不确定度（22）。

2.5.1.1A级2mL移液管体积引入的不确定度（11）
查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A级2mL移液管允差为±0.008mL，则A级2mL移液管体积引入的不确定度（11）为：
（11）=0.008÷3
√=0.004619
2.5.1.2A级2mL移液管温度变化引入的不确定度（12）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4℃，按均匀分布，取包含因子k=3
√，则A级2mL移液管温度变化引入的不确定度（12）为：
（22）=αV△t÷3
√
=2.1×10-4×2×5÷3
√
=0.001212
则A级2mL移液管引入的不确定度（1）为：（1）=[2（11）+2（12）]12
=[(0.004619)2+(0.001212)2]12
=0.004775
则A级2mL移液管引入的相对不确定度r1）为：r
（1）=（1）÷=0.004775÷2=0.002388
2.5.2A级100mL容量瓶引入的相对不确定度r
（2）
A级100mL容量瓶引入的不确定度r（2）来自于两个分量：A级100mL容量瓶容量引入的不确定度（21）和A级100mL容量瓶温度变化引入的不确定度（22）。

2.5.2.1A级100mL容量瓶容量引入的不确定度（21）
查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A级100mL容量瓶允差为±0.10mL服从均匀分布，取包含因子k=3
√，则：
（11）=0.10÷3
√=0.05774
2.5.2.2A级100mL容量瓶温度变化引入的不确定度（22）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4℃，按均匀分布，取包含因子k=3
√，则A级100mL容量瓶温度变化引入的不确定度（22）为：
（22）=αV△t÷3
√
=2.1×10-4×100×5÷3
√
=0.06062
则A级100mL容量瓶引入的不确定度（2）为：（2）=[2（21）+2（22）]12
=[(0.05774)2+(0.06062)2]12
=0.08372
则A级100mL容量瓶引入的相对不确定度r（2）
第三期2020
酿酒
48
为：
r （2
）=（2）÷=0.08372÷100=0.0008372则试样制备引入的不确定度r
（）为：r （）=[r 2（1）+r 2（2
）]1
2=[(0.002388)2+(0.0008372)2]1
2=0.002531
2.6移取5mL 试样时引入的不确定度r （5
）移取5mL 试样时引入的不确定度r （5）来自于两个分量：A 级5mL 移液管引入的标准不确定度（51）和A 级5mL 移液管温度变化引入的不确定度（52）。

2.6.1A 级5mL 移液管引入的标准不确定度（51）
查阅JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》得，A 级5mL 移液管允差为±0.025mL ，则A 级5mL 移液管引入的标准不确定度（51）为：
（51）=0.025÷3√=0.01443
2.6.2A 级5mL 移液管温度变化引入的不确定度
（52）
设温度变化为±5℃,20℃时水的膨胀系数α=2.1×10-4℃，按均匀分布，
取包含因子k=3√，则A 级5mL 移液管温度变化引入的不确定度（52）为：
（52）=αV △t ÷3
√=2.1×10-4×5×5÷3
√=0.003031
则A 级5mL 移液管引入的不确定度（5）为：
（5）=[2（51）+2
（52）]1
2
=[(0.01443)2+(0.003031)2]1
2=0.01474
则移取5mL 试样时引入的不确定度r （5
）为：u r （5）=（5）÷=0.01474÷5=0.0029482.7
合成不确定度
则黄酒中总糖含量测量的相对不确定度为：
r （）=[r 2（）+r 2（0）+r 2（1
）+r 2（）+r 2（）+r 2
（5）]1
2
=0.008489
合成标准不确定度：（）=r
（）
2.8扩展不确定度
取包含因子k=2,则扩展不确定度：=（）×2=0.5g/L 2.9测量结果不确定度报告
由上面分析计算，最终得出黄酒样品中总糖含量测定结果为29.2g/L ±0.5g/L ［k=2］。

3结论
本次不确定度评定依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》和GB/T 27411-2012《检测实验室中常用不确定度评定方法与表示》两个不确定度相关标准中的有关规定，对GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定（亚铁氰化钾滴定法）
的测量不确定度进行评定，其检测过程中的不确定度来源主要有试样测定重复性引入的不确定度、空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度、试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度、葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度、试样制备引入的不确定度、移取5mL 试样时引入的不确定度六个分量，对此六个分量进行不确定度评定，最终得出扩展不确定度为包含因子k=2时扩展不确定度U=0.5μg/L ，黄酒样品中总糖含量为29.2g/L ±0.5g/L ［k=2］。

[参考文献]
[1]GB/T13662-2018《黄酒》[S].
[2]JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》[S].
[3]GB/T 27411-2012《检测实验室中常用不确定度评定方法与表示》[S].[4]魏茹霞.黄酒中总糖与还原糖含量测定方法比较[J].科技与创新.2016.22:118-119
表4各相对标准不确定度分量汇总表
不确定度分量
r （）r （0）r （1）r （）r （）r （5）
不确定度来源
试样测定重复性引入的不确定度
空白试样消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度试样测定消耗葡萄糖标准溶液的体积引入的不确定度葡萄糖标准溶液配制引入的不确定度试样制备引入的不确定度移取5mL 试样时引入的不确定度
相对标准不确定度
0.0024390.0042680.0056840.00070830.0025310.002948
序号123456
张利，等：关于GB/T13662-2018《黄酒》中总糖的测定
（亚铁氰化钾滴定法）不确定度评价报告
第三期2020
49。