ICH生物技术生物药品的质量要求

由于用的模型病毒不会与实际污染病毒相同，因此要根据 生产品种和知识加以判断。
研究的模型病毒要有针对性
病毒污染可来自起始材料，亦可能来自工艺过程。
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去除或灭活病毒安全性指南 (Q5A)
评价灭活或去除病毒的能力，应考虑
滴度降低
灭活的速度，灭活曲线形状
方法耐用性，即条件改变后的适用性
对不同种类病毒的可选择性
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ICH对生物技术/生物制品质量要求的文件
病毒安全性评价 (Q5A） 细胞的表达构建体分析（Q5B） 生物制品稳定性试验（Q5C） 细胞基质的来源和鉴定（Q5D） 生产工艺改变产品的可比性（Q5E） 标准规格 (Q6B)
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病毒安全性评价 (Q5A)
要对细胞基质原材料进行全面定性和筛查，以明确存在哪些病毒 污染物。
后生动物细胞
应 用 MCB 和 WCB 单 个 容 器 （ 容 器 总 数 的 1 ％ ， 但 不 少 于 2 个 ） 检 测 细菌和真菌；支原体；可能污染的病毒。
微生物细胞
设计特异性试验方法检测微生物细胞库中外源性微生物因子和外源
性细胞污染物。
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生产工艺改变产品的可比性 (Q5E)
ICH制订了生物技术产品的质量评估和生产工艺有关
后，生产过程再污染。
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细胞的表达构建体分析（Q5B）
1. 表达构建体为含有重组蛋白编码序列的表达载体。 表达构建体分析的
目的是确保产品的正确编码序列被导入到宿主细胞，并从培养到生产结束
保持不变，以保证终产品的质量和一致性。
2. 在活细胞中产生的重组蛋白，其基因序列可能发生突变而改变蛋白质的
鉴定方法，分别在ICH文件(Q5A、Q5B、Q5C、Q5D 、Q6B和CTD-Q)中，在应用中证明是行之有效的。 Q5E是工艺改变后产品质量可比性的指导文件 工艺改变将对原料药及产品的质量产生影响，由此影 响到生产部门的资源及效益。
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)
两类改变的可比性(q5E)
产品 仿制
批准以后 的可比性
通过确定污染物的人向性，对危险程度做出评价。
制定测试外源病毒的计划。
为获得最佳病毒清除效果，对病毒清除或灭活研究应进行仔细设 计，在同一生产过程中使用不同的病毒灭活或消除方法.
认证和评价病毒灭活和消除的方法。
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去除或灭活病毒安全性指南 (Q5A)
病毒去除或灭活的验证研究主要是用于评价在生产过程中 去除或灭活病毒的能力（种类及滴度）
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生物技术/生物制品稳定性试验（Q5C）
6. 生物技术产品及生物制品的货架寿命一般在半年到5年之间。
如预定货架寿命在1年或1年以内，真实时间稳定性研究应为前3个月 每月进行一次，以后每3个月一次。
如预定货架寿命在1年以上，稳定性试验应在贮藏期的第一年每3个 月进行一次；第二年每6个月进行一次，以后每年进行一次。
对于目的基因：弄清来源，克隆经过 对于表达载体：提供表达载体名称、结构和遗 传特性，说明载体组成各部分的来源和功能，如 复制子和启动子来源，抗生素抗性标志物，构建 中所用位点的酶切图谱 对于宿主细胞：要提供细胞株名称、来源、传 代历史、检定结果及基本生物学特性等。
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细胞的表达构建体分析（Q5B）
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预期产品与其变异物的定义（Q5E）
预期活性成分：
A 蛋白质具有预期的结构。
B 蛋白质来自预期的DNA序列。
C 蛋白质来自预期DNA序列并产生预期翻译后修饰。
D 蛋白质来自在预期下游提纯后的修饰产生的生物活性分子。
产品有关物质：
在生产和贮存过程中产生的预期变异体，其性能(化学、物理和
生物)与预期产品是可比的，称产品有关物质。列为活性成份。
以上所规定的测试次数适用于产品在批准前的稳定性试验，如在该产
品批准后，提供的数据说明产品仍是相当稳定的，则可减少稳定性试验
次数。
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细胞基质的来源和鉴定（Q5D）
“细胞基质”是指微生物细胞或来自于人或动物的细胞系。 动物来源的细胞系是指所有后生动物，包括体外无限生长的传代
细胞系以及体外有限代次的二倍体细胞。 微生物的来源包括细菌、真菌、酵母和其他单细胞生物。
质量标准具安全性/有效性的关键。
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生物可比性--改变的类型（Q5E）
原料药A
细胞库 提纯
发酵 生产地点
原料药A’
产品A
处方 剂型 容器 灌封
产品A’
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生物可比性--数据的比较（Q5E）
原料药A
效价测定方法 原料药标准规格
原料药A’
产品A
产品标准规格 药代动力学
产品A’
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X○
X
△
X
△
XX
XX
X
△
△
△
XX
△
○
II III
○
○
○
○
△▲
▲
○
△
△
X△
△
△
△
△
△
▲
○
○
X
△
△
△
XXXX
△
△
○
○
○
○
○
○
血液制品I II IFra bibliotekI○○
○
○
○
○
△
△
△
△
▲
○
X
△
△
X X△
XXX
○
○
○
X
▲
○
○
○
○
XXX
XXX
△
○
○
△
○
○
单克隆抗体
疫苗
I* II* III*
○
○
○
○
○
○
○
X
△
△
▲
X
△
▲
○
△
△
已生产 产品
已批准 正开发
不同阶段 的可比性
产品
改变生产 工艺
工 艺 步 骤 Y-B 工 艺 步 骤 Y-C 工 艺 步 骤 Y-C
药厂B 药厂C 药厂D
工艺步骤X
药厂A 发明者
工艺步骤Y
药厂A 发明者
………
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生物可比性（Q5E）
．
研究的主要课题
改变的阶段，改变的程度。
对产品的影响。 鉴定方法的能力。
2. 原材料和制剂的贮藏期应根据长期、真实时间、真实条件的稳定 性研究的初步数据制定, 至少应提供3批的稳定性数据，这3批应能代 表生产规模的生产和贮藏条件。在贮藏期要求大于6个月时，至少需 申报6个月的稳定性试验资料。
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生物技术/生物制品稳定性试验（Q5C）
3.进行稳定性试验的原料药的质量应能代表用于临床前研究、临床究， 以及规模化生产制品的质量。
性质，从而对病人产生潜在的副作用。蛋白质分析方法有时不能检测到所
有重组蛋白编码序列突变造成的蛋白质结构变化， 核酸分析可用于验证
表达构建体的编码序列和物理状态。因次，用核酸分析和蛋白质分析才能
保证最终产品的氨基酸序列。
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细胞的表达构建体分析（Q5B）
3.用以制备主细胞库（MCB）的表达构建体和细胞克隆
Source: Sundwall et al.19精90品课件
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不同类别产品药理毒理测试项目
类别
亚类 项目
急性毒理 亚急性毒理 慢性毒理 生殖毒理 致突变 致癌变 依赖性 局部刺激 抗原性 致热原性 其他:
免疫毒性 交叉反应 一般药理 ADM E
激 素 ,细 胞 因 子 ,调 节 因 子
I
ab
△
○
I* 人 型。
II* 非人型。
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III* 与药结合型。
基因工程药物的评价
要从以下三方面: （1）起始材料的评价，包括宿主细胞及用于生产的基因的来
源、性质和序列的基础资料。 （2）制造过程的评价。 （3）最终产品的评价。
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ICH对生物技术/生物制品质量要求的文件
ICH对生物技术/生物制品的质量要求，除了应符合 ICH有关文件外，在质量部分，重点提出了６个文件： ICH Q5A、Q5B、Q5C、Q5D、Q5E 和 Q6B。
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预期产品 B （Q5E）
评估可认为合格产品
相同的蛋白质分析结构（氨基酸序列） 相同的物理化学性质 相同的生物学特性，特别是空间结构物质
，反映了临床有效性 具有可比性的杂蛋白质
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预期产品（例：糖基化形式）（Q5E）
评估认为合格产品
相同的原始细胞株（或MCB）。
相同的蛋白质结构（氨基酸序列）。
(1)化学物理鉴定的一致性 (2)污染物限度控制的重要性（热原、病毒、宿主细胞DNA） (3)全过程控制质量的必要性 (4)效价测定的重要性 (5)标准化的趋势
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3
动物的种族特异性
╳╳
IFN
IL-4, IL-9
IL-3, IL-5, GM-CSF
>
IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 FGF-B, TNF, G-CSF, EPO, t-PA
产品有关杂质：当预期产品的分子变异体，其性能与预期产品
没有可比性时，称为产品有关杂质。
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预期产品 A（例：单克隆抗体） （Q5E）
评估可认为是合格产品 相同的原始细胞株（或MCB） 分子结构和杂质属性有可比性，包括 结构特征; 物理化学 性 质; 免疫性质; 杂质的图形 由于培养条件的改变导致糖基异质性的变异需各例分析
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去除或灭活病毒安全性指南(Q5A)
病毒去除与病毒灭活不同
如用层析去除(remove)病毒，则流速和柱孔径是重 要可变因素。
如用缓冲液灭活(inactivation)病毒，则温度和PH是 重要因素。
从统计角度看，病毒污染试验有一定的局限性，主要取决于样
品数量，应用统计算出最大应用测试样品数。 生产工艺全过程要严格执行GMP，以免去除病毒或灭活病毒
后生动物细胞
对于人或动物细胞，可采用形态学分析与其他试验 相结合的方法。在大多数情况下，同工酶分析足以确证 人或动物细胞库的种属来源；
微生物细胞
对于大多数微生物细胞，分析细胞在选择性培养基 上生长情况就可确证宿主细胞库的宿主细胞种族特性。
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细胞库的纯度试验（Q5D）
评估MCB和WCB的生物学纯度，即无外源性微生物因子和外源性细胞污染 是细胞研制和建库的关键。
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细胞基质的来源和鉴定（Q5D）
鉴定目的： 由于细胞源性的生物制品存在外来的污染 物,对产品的质量具有重大影响。细胞基质的特性影响产 品的质量和安全性，为有效地控制产品质量,需对操作细 胞基质的各方面进行严格的控制。
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细胞基质的鉴定（Q5D）
鉴别试验可利用细胞的表型或遗传型的特征，但不必 做所有的试验。通常对MCB做鉴别试验，而对每个WCB 仅做有限的鉴别试验。
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4. 对于稳定性的指标，申报者应设计一系列稳定性试验指标，以便能 保证检 测出制品成分、纯度及效价的变化。效价测定是稳定性试验 的重要部分。
5. 当在长期稳定性试验、加速试验和/或强力破坏试验中检出降解产物
有明显的定性或定量变化时，应考虑其潜在的危害性，并需在长期
稳定性试验中对降解产物进行精品定课性件 和定量的分析。
△
○
X
X
X
△
X
X
X
△
X
△
△
△
○
X△
○
*
○
○
○
○
△
△
△
X
○
○
○
X
△
○
○
△
○
○
○
△
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5
不同类别产品药理毒理测试项目
m 原则上必须做。
做。
可能必要的。如产品与人体蛋白结构不同，则必须
可能必要的。如有合理理由，可省略。
X 可能不必要的。
I a 蛋白相同，生理剂量。
I b 蛋白相同，高剂量。
II 蛋白与人体接近。 III 蛋白与人体相差较多。
或表达构建体的存在。 采用限制性内切酶图谱或其它适宜的技术分析表达构建体的拷贝
数、插入或缺失情况以及整合位点的数目。
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生物技术/生物制品稳定性试验（Q5C）
1. ICH制定的“新药原料及制剂稳定性试验”的指导原则总体上适 用于生物技术产品及生物制品。但由于这类制品的活性成份一般是 蛋白质和/或多肽，因此，维持其分子构型，从而保持其生物活性取 决于共价键和非共价键的作用力。这些制剂对诸如温度变化、氧化、 光照、离子含量及切割力等环境因素较为敏感，为保持其生物活性， 避免降解，必须严格规定其贮藏条件。
4.细胞库系统 细胞库是装有均一细胞成分并在规定条件下储存的安瓿集合，每个
安瓿含有等份的单批细胞。 主细胞库(MCB)通常来自选定的含有表达构建体的细胞克隆。 工作细胞库（WCB）是通过扩增一个或多个MCB的安瓿制得。 重组蛋白的生产应建立在良好的主细胞库和工作细胞库基础上。
应详尽表述： 细胞库的生产过程以及其储存条件。 对细胞库的表型和基因型的标记进行鉴定，证明重组蛋白的表达
具有可比性物理化学性质。
具有可比性的糖基类型：唾液酸形式和含量，
触角图形（用IEF,CE，FACE等方法）。
具有可比性的生物学活性，特别对于高级结构蛋白
质，体内活性代表了临床有效性。
具有可比性的杂质谱。
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预期产品
（Q5E）
对其评估，需参考A、B、C，根据 其修饰类型和工艺改变的步骤各例分 拆加以评定。
ICH生物技术/生物 药品的质量要求
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基因工程药物的质量控制
基因工程产品的质量控制与传统生产方法所 得产品有本质的差别。可能会含有用传统生产 方法不可能存在的有害杂质。例如在细菌中表 达的产品可能有内毒素、致敏原，在动物细胞 中表达的产品可能有ＤＮＡ杂质和病毒。
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基因工程产品审评的要点