简述基因工程菌制备流程
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
简述基因工程菌制备流程
基因工程菌制备流程可有趣啦,让我来给你好好唠唠吧。
一、目的基因的获取。
咱得先把想要的基因搞到手。
这就像去超市挑东西一样,你得知道自己想要啥基因。
有时候这个基因是从现有的生物里取出来的,就好比从一个大仓库里找出特定的小物件。
比如说从某种很特别的细菌或者植物里,用一些特殊的方法把基因提取出来。
还有些时候呢,是人工合成这个基因,就像自己动手做一个独一无二的小零件。
这一步可关键啦,要是基因选错了或者没取好,后面可就麻烦喽。
二、载体的选择。
有了基因之后,咱得给它找个“小推车”,这个“小推车”就是载体啦。
载体就像是基因的交通工具,得把基因稳稳地运到目的地。
常见的载体有质粒,这质粒就像是一个小小的环形跑道,基因可以“坐在”上面。
选载体的时候也得特别小心,得看这个载体适不适合咱们要做的事儿。
就像挑鞋子一样,大小不合适可不行呢。
三、基因与载体的连接。
把基因和载体连接起来就像是把小物件粘到小推车上。
这时候就用到一些特殊的“胶水”,也就是一些酶啦,像DNA连接酶之类的。
这个过程得小心翼翼的,要是没粘好,基因在运输过程中就可能掉下来,那前面的功夫可就白费了。
这个连接过程就像是在做手工,要特别精细。
四、重组载体导入宿主菌。
连接好的载体和基因就像带着货物的小推车,得把它推进宿主菌这个“大房间”里。
导入的方法有好几种呢。
有热激法,就像是给宿主菌来个突然的“热刺激”,让它“晕乎乎”的时候把重组载体给带进去。
还有电转化法,就像是给宿主菌来点小电流,把重组载体给“电”进去。
这一步要注意哦,宿主菌要是不接受这个重组载体,那可就麻烦啦,所以得想办法让宿主菌开开心心地接纳它。
五、筛选阳性克隆。
当重组载体进入宿主菌之后,并不是所有的宿主菌都成功接纳了。
这时候就得像挑挑拣拣一样,把那些接纳了重组载体的菌找出来。
这个过程就像是在一群小朋友里找出戴了特定帽子的小朋友。
通常会用一些特殊的标记,比如抗生素抗性标记。
如果宿主菌接纳了重组载体,那它就会有对抗生素的抗性,这样就能把它从那些没有接纳的菌里区分出来啦。
六、工程菌的鉴定与检测。
找到可能的阳性克隆之后,还不能掉以轻心。
得好好鉴定一下这个工程菌到底是不是咱们想要的。
这就像检查一件刚做好的工艺品一样,得看看有没有瑕疵。
要检测基因是不是正确地插入到载体里了,基因有没有正确地表达了等等。
可以用一些分子生物学的方法,像PCR啊,测序啊之类的。
只有经过这些严格的检测,才能确定这个工程菌是真正合格的呢。
基因工程菌的制备流程就是这样一个充满趣味又需要特别细心的过程,每一步都像在搭建一个小积木,要是一块搭不好,整个小房子可就不稳喽。