胶体金快速诊断轮状病毒的临床应用

胶体金快速诊断轮状病毒的临床应用
【摘要】目的:简述腹泻患儿轮状病毒的检测意义。

方法:用轮状病毒的快速诊断试剂盒对234例1岁～3岁患儿的大便标本,做免疫层析双抗体夹心法试验,检验轮状病毒感染情况。

结果125例小儿腹泻患者中,轮状病毒的检出率为51.2%,109例小儿胃肠炎患者中轮状病毒检出率为46.8%,总阳性率为49.1%(115/234),皆于10min内出结果。

结果:阳性结果中未发现交叉反应,与酶法检测无显著性差异,符合临床诊断。

结论:该快速诊断法具有操作简便、快速、准确、特异性强、阳性率高等特点,可以向医疗单位门诊推广应用,它为治疗轮状病毒致腹泻、胃肠炎的患儿提供了及时准确的客观依据。

【关键词】轮状病毒;胶体金;胃肠炎;腹泻
流行病学资料显示轮状病毒急性感染是造成婴儿与儿童腹泻性疾病的主要病因,每年因急性胃肠炎和腹泻而入院的婴儿与儿童病例中,轮状病毒感染率为
50%～60% [1,2] 。

因此,轮状病毒的检测在婴幼儿急性胃肠道疾病的诊疗中
具有重要意义,轮状病毒的快速检测为婴幼儿胃肠道感染性疾病的诊断及时提供了准确的客观依据,使婴幼儿轮状病毒感染的早期治疗成为现实,大大缩短了诊断时间,提高了临床诊治效率。

笔者应用了北京万泰的A群轮状病毒诊断试剂,采用免疫层析双抗体夹心法,对笔者所在医院就医的有腹泻或胃肠炎症状的患儿进行轮状病毒的快速诊断,现将结果报告如下:
1.资料与方法
1.1资料:
1.1.1一般资料:本组234例患儿均为2009年1月~2010年1月期间因腹泻症状来笔者所在医院就诊者,其中男126例,女108例,年龄1～3岁。

1.1.2轮状病毒的快速诊断试剂盒:含10份测试卡,铝箔袋,干燥剂,说明书,滴管。

测试卡主要成分有塑料卡,塑料底板,吸水滤纸,硝酸纤维素膜(包括包被有A 群轮状病毒抗体的检测线和包被有抗鼠抗体的对照线),金垫(附着有胶体金标记A群轮状病毒单克隆抗体)。

滴管内有样品稀释液。

1.1.3检查标本:患儿的大便标本,收集患儿标本时是用一次性的带盖大便样品杯盛装,试验中所需标本量约1g左右。

1.2方法:按北京万泰公司的轮状病毒诊断试剂说明书的方法进行。

由于试剂
盒是放2℃～30℃常温保存,所以试剂盒取出即可用。

旋开滴管取出采便勺,从粪便中收取一勺样本(约100mg),取样后抹平勺面,放入装有样品稀释液的滴管中,旋紧滴管。

振荡混匀,折断滴管上的盖帽。

将测试卡平放干燥平面上,垂直而缓慢地滴加2-3滴混匀后的样本(约80ug)至测试卡加样端中心。

5-10分钟内判断结果,结果判断不可超过10分钟。

1.3结果判定方法:测试卡出现两条红线为阳性,测试卡只出现一条对照线为阴性,测试卡不出现红线,即无对照线出现,实验无效,应重复检测。

2.结果
234例患儿,总阳性率为49.1%,其中轮状病毒致小儿腹泻的阳性检出率为51.2%,致小儿胃肠炎的阳性率为46.8%,均于10min内得出结果,阳性结果中无一例出现交叉凝集现象,(见表1)。

表1234例1岁～3岁患儿轮状病毒快速检测结果
3.讨论
可引起婴幼儿急性胃肠炎和腹泻的原因很多,其中轮状病毒感染是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一。

轮状病毒主要感染患儿的小肠上皮细胞,从而造成细
胞损伤,引起腹泻 [3] 。

流行病学资料显示:轮状病毒每年在夏秋冬季流行,
感染途径为粪-口途径,临床表现为急性胃肠炎,呈渗透性腹泻病,病程一般为7d,发热持续3d,呕吐2～3d,腹泻5d,严重出现脱水症状。

WHO已将轮状病毒感染纳入全球腹泻病控制和免疫规划。

轮状病毒在自然界中分布很广,会感染多种动物,感染入的轮状病毒具有共同的族抗原。

病毒在肠道绒毛细胞质中增殖、破坏细胞,在脱落坏死的细胞中含有大量病毒随粪便排出,因为绒毛细胞被破坏引起腹泻,造成电解质与水分的损失,而导致脱水、酸中毒和休克。

由于婴幼儿免疫力普遍较低,身体代偿能力不足,轮状病毒感染导致的腹泻可致严重的电解质代谢紊乱,救治不及时可危及患儿生命安全。

因此轮状病毒的及
时、准确快速检测,对临床的治疗具有重要意义 [4] 。

临床可用于轮状病毒
检测的方法很多:电镜、核酸电泳、免疫荧光、ELISA等,但是上述检测方法或因诊断周期长,或因操作繁琐、检测成本高,很难满足临床诊断要求,临床应用价值不高。

胶体金快速诊断试验检测轮状病毒是一种操作简便、快速的诊断方法,粪便
中轮状病毒抗原阳性,可诊断为轮状病毒性腹泻或胃肠炎 [5] 。

根据以上临
床应用的结果来看,可知道:该法检测结果准确,从阳性结果完全符合临床诊断和无一例交叉反应可说明。

该法检测快速、操作简便、不需设备,而且易学易掌握。

因而,它可以作为轮状病毒的常规检测方法在我国基层医疗单位推广应用;值得注意:该法存在细菌交叉反应,患儿粪便中的肠道的病原细菌或白色念珠菌,偶然也会被试剂盒检测出,以致结果出现假阳性,这个时候要结合临床症状,做细菌培养和用ELISA方法检测轮状病毒抗体。

参考文献
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[2]詹前朕,杨宏通.微生物学(下册)[M].台湾:华杏出版有限公司,2003,7:884.
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[4]陈振阳,杨定一.最新微生物学[M].台湾:汇华图书出版有限公司,2005,10:410.
[5]陶义训,冯仁丰.实用医学检验学[M].上海科学技术出版社,1996,12:872-873.。