上皮性卵巢癌患者血和组织miR-200b表达水平及其与肿瘤侵袭程度的相

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王景胜 张立 刘正君 陈楠 高会广 (解放军第九七医院检验科 江苏 徐州 264200)
【摘要】 目的 分析上皮性卵巢癌患者血浆和卵巢组织中微小 RNA-200b(miR-200b)的表达水平及其与肿瘤 侵袭程度的相关性。方法 回顾性选取解放军第九七医院 44例经手术病理确诊的上皮性卵巢癌患者为上皮性卵巢癌 组,另同期选取 32例因子宫腺肌病、子宫肌瘤和其它非卵巢病变行手术切除者为对照组。通过实时荧光定量 PCR法对 两组患者血浆和卵巢组织中 miR-200bmRNA的表达水平进行检测;将人卵巢癌细胞系 SK-OV-3细胞分为空白对照 组(未转染任何质粒)、阴性对照组(转染非特异序列 siRNA)及实验组(转染 miR-200b抑制物)。采用 transwell细胞侵 袭实验以观察肿瘤细胞的侵袭能力,并采用 Westernblot法测定基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)蛋白表达水平,并用实时 荧光定量 PCR法对 MMP-9mRNA相对表达量进行检测。结果 上皮性卵巢癌组血浆中 miR-200bmRNA的表达水 平较对照组明显升高,且卵巢组织中 miR-200bmRNA的表达水平较对照组亦明显升高(P <0.01)。miR-200b抑制 物经人卵巢癌细胞系 SK-OV-3细胞转染后,实验组 miR-200bmRNA表达水平较空白对照组、阴性对照组明显下降 (P <0.01)。Transwell细胞侵袭实验结果发现,miR-200b抑制物经人卵巢癌细胞系 SK-OV-3细胞转染后,实验组 transwell小室下层细胞数量较空白对照组、阴性对照组明显减少(P <0.01)。相比空白对照组、阴性对照组,干扰 miR -200b基因表达后实验组 SK-OV-3细胞中 MMP-9蛋白和 mRNA的表达水平均显著下降(P <0.01)。结论 MiR -200b高表达于上皮性卵巢癌患者血浆和卵巢组织中,其可能通过调节 MMP-9蛋白和 mRNA的表达水平以诱导上皮 性卵巢癌细胞的迁移和侵袭。
【关键词】 上皮性卵巢癌 微小 RNA-200b 基质金属蛋白酶 -9 细胞侵袭
ExpressionofmiR-200binbloodandtissuesofepithelialovariancanceranditscorrelationwiththedegreeofinvasionofovariancanc er.WANGJing-sheng,ZHANGLi,LIUZheng-jun,etal.InstituteofClinicalMedicine,TheNinthSeventhHospitalofthePeople'sLiberation Army,XuzhouJiangsu264200,China.
【Abstract】 Objective ToanalyzetheexpressionofmicroRNA-200b(miR-200b)inplasmaandovariantissuesofpatientswithepi thelialovariancanceranditscorrelationwiththedegreeofinvasionofovariancancer.Methods 44patientswithepithelialovariancancercon firmedbysurgeryandpathologywereselectedastheepithelialovariancancergroup,and32patientswithfactoradenomyosis,hysteromyomaand othernon-ovarianlesionswereselectedasthecontrolgroup.Real-timefluorescencequantitativePCRwasusedtodetecttheexpressionofmiR -200binplasmaandovariantissueoftwogroups.HumanovariancancercelllineSK-OV-3wasdividedintoblankcontrolgroup(withoutany plasmidtransfection),negativecontrolgroup(transfectedwithnon-specificsequencesiRNA)andexperimentalgroup(transfectedwithmiR- 200binhibitor).Transwellcellinvasionexperimentwasusedtoobservethetumorcells.Theinvasivenessofmatrixmetalloproteinase-9(MMP- 9)wasdetectedbyWesternblot,andtherelativeexpressionofMMP-9wasdetectedbyreal-timefluorescencequantitativePCR.Results The expressionlevelofmiR-200binplasmaofepithelialovariancancergroupwassignificantlyhigherthanthatofcontrolgroup,andtheexpression levelofmiR-200binovariantissuewasalsosignificantlyhigherthanthatofcontrolgroup(P <0.01).TheexpressionlevelofmiR-200bin theexperimentalgroupwassignificantlylowerthanthatintheblankcontrolgroupandthenegativecontrolgroup(P <0.01)afterthemiR-200b inhibitorwastransfectedintohumanovariancancercelllineSK-OV-3.TheresultsofTranswellcellinvasionexperimentshowedthatthenum berofTranswellsubventricularcellsintheexperimentalgroupwassignificantlylowerthanthatintheblankcontrolgroupandthenegativecontrol group(P <0.01)aftertheTranswellinhibitorwastransfectedintohumanovariancancercelllineSK-OV-3.Comparedwithblankcontrol groupandnegativecontrolgroup,theexpressionlevelsofMMP-9proteinandMMP-9mRNAinSK-OV-3cellsofexperimentalgroupde creasedsignificantlyafterinterferencewiththeexpressionofmiR-200bgene(P <0.01).Conclusion MiR-200bishighlyexpressedinplas maandovariantissuesofpatientswithepithelialovariancancer.Itmayinducethemigrationandinvasionofepithel
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Байду номын сангаас
JournalofClinicalandExperimentalMedicineVol.18,No.15 Aug.2019
DOI:10.3969/j.issn.1671-4695.2019.15.009 文章编号:1671-4695(2019)15-1598-04
上皮性卵巢癌患者血和组织 miR-200b表达水平 及其与肿瘤侵袭程度的相关性分析
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