上皮性卵巢癌患者血和组织miR-200b表达水平及其与肿瘤侵袭程度的相

王景胜 张立 刘正君 陈楠 高会广 （解放军第九七医院检验科 江苏 徐州 ２６４２００）
【摘要】 目的 分析上皮性卵巢癌患者血浆和卵巢组织中微小 ＲＮＡ－２００ｂ（ｍｉＲ－２００ｂ）的表达水平及其与肿瘤 侵袭程度的相关性。方法 回顾性选取解放军第九七医院 ４４例经手术病理确诊的上皮性卵巢癌患者为上皮性卵巢癌 组，另同期选取 ３２例因子宫腺肌病、子宫肌瘤和其它非卵巢病变行手术切除者为对照组。通过实时荧光定量 ＰＣＲ法对 两组患者血浆和卵巢组织中 ｍｉＲ－２００ｂｍＲＮＡ的表达水平进行检测；将人卵巢癌细胞系 ＳＫ－ＯＶ－３细胞分为空白对照 组（未转染任何质粒）、阴性对照组（转染非特异序列 ｓｉＲＮＡ）及实验组（转染 ｍｉＲ－２００ｂ抑制物）。采用 ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞侵 袭实验以观察肿瘤细胞的侵袭能力，并采用 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法测定基质金属蛋白酶 －９（ＭＭＰ－９）蛋白表达水平，并用实时 荧光定量 ＰＣＲ法对 ＭＭＰ－９ｍＲＮＡ相对表达量进行检测。结果 上皮性卵巢癌组血浆中 ｍｉＲ－２００ｂｍＲＮＡ的表达水 平较对照组明显升高，且卵巢组织中 ｍｉＲ－２００ｂｍＲＮＡ的表达水平较对照组亦明显升高（Ｐ ＜０．０１）。ｍｉＲ－２００ｂ抑制 物经人卵巢癌细胞系 ＳＫ－ＯＶ－３细胞转染后，实验组 ｍｉＲ－２００ｂｍＲＮＡ表达水平较空白对照组、阴性对照组明显下降 （Ｐ ＜０．０１）。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞侵袭实验结果发现，ｍｉＲ－２００ｂ抑制物经人卵巢癌细胞系 ＳＫ－ＯＶ－３细胞转染后，实验组 ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室下层细胞数量较空白对照组、阴性对照组明显减少（Ｐ ＜０．０１）。相比空白对照组、阴性对照组，干扰 ｍｉＲ －２００ｂ基因表达后实验组 ＳＫ－ＯＶ－３细胞中 ＭＭＰ－９蛋白和 ｍＲＮＡ的表达水平均显著下降（Ｐ ＜０．０１）。结论 ＭｉＲ －２００ｂ高表达于上皮性卵巢癌患者血浆和卵巢组织中，其可能通过调节 ＭＭＰ－９蛋白和 ｍＲＮＡ的表达水平以诱导上皮 性卵巢癌细胞的迁移和侵袭。
【关键词】 上皮性卵巢癌 微小 ＲＮＡ－２００ｂ 基质金属蛋白酶 －９ 细胞侵袭
ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ－２００ｂｉｎｂｌｏｏｄａｎｄｔｉｓｓｕｅｓｏｆｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｉｎｖａｓｉｏｎｏｆｏｖａｒｉａｎｃａｎｃ ｅｒ．ＷＡＮＧＪｉｎｇ－ｓｈｅｎｇ，ＺＨＡＮＧＬｉ，ＬＩＵＺｈｅｎｇ－ｊｕｎ，ｅｔａｌ．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｈｅＮｉｎｔｈＳｅｖｅｎｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｏｆｔｈｅＰｅｏｐｌｅ＇ｓＬｉｂｅｒａｔｉｏｎ Ａｒｍｙ，ＸｕｚｈｏｕＪｉａｎｇｓｕ２６４２００，Ｃｈｉｎａ．
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－２００ｂ（ｍｉＲ－２００ｂ）ｉｎｐｌａｓｍａａｎｄｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｐｉ ｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｉｎｖａｓｉｏｎｏｆｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ４４ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｃｏｎ ｆｉｒｍｅｄｂｙｓｕｒｇｅｒｙａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｙｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｇｒｏｕｐ，ａｎｄ３２ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｆａｃｔｏｒａｄｅｎｏｍｙｏｓｉｓ，ｈｙｓｔｅｒｏｍｙｏｍａａｎｄ ｏｔｈｅｒｎｏｎ－ｏｖａｒｉａｎｌｅｓｉｏｎｓｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ －２００ｂｉｎｐｌａｓｍａａｎｄｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅｏｆｔｗｏｇｒｏｕｐｓ．ＨｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＫ－ＯＶ－３ｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｗｉｔｈｏｕｔａｎｙ ｐｌａｓｍｉｄｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ），ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈｎｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉＲＮＡ）ａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈｍｉＲ－ ２００ｂｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）．Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｃｅｌｌｉｎｖａｓｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－９（ＭＭＰ－ ９）ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭＭＰ－９ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌ－ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｍｉＲ－２００ｂｉｎｐｌａｓｍａｏｆｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｏｆｍｉＲ－２００ｂｉｎｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅｗａｓａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ ＜０．０１）．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｍｉＲ－２００ｂｉｎ ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ ＜０．０１）ａｆｔｅｒｔｈｅｍｉＲ－２００ｂ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｗａｓｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＫ－ＯＶ－３．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＴｒａｎｓｗｅｌｌｃｅｌｌｉｎｖａｓｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｎｕｍ ｂｅｒｏｆＴｒａｎｓｗｅｌｌｓｕｂｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ ＜０．０１）ａｆｔｅｒｔｈｅＴｒａｎｓｗｅｌｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｗａｓｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＫ－ＯＶ－３．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＭＭＰ－９ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄＭＭＰ－９ｍＲＮＡｉｎＳＫ－ＯＶ－３ｃｅｌｌｓｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｄｅ ｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ－２００ｂｇｅｎｅ（Ｐ ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＭｉＲ－２００ｂｉｓｈｉｇｈｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｐｌａｓ ｍａａｎｄｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒ．Ｉｔｍａｙｉｎｄｕｃｅｔｈｅｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎｏｆｅｐｉｔｈｅｌ
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Байду номын сангаас
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏｌ．１８，Ｎｏ．１５ Ａｕｇ．２０１９
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０１９．１５．００９ 文章编号：１６７１－４６９５（２０１９）１５－１５９８－０４
上皮性卵巢癌患者血和组织 ｍｉＲ－２００ｂ表达水平 及其与肿瘤侵袭程度的相关性分析