核医学 核素示踪技术.ppt

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据混合前后放射性不变原理得 S1m1=S2(m1+mx) Mx=m1(s1/s2—1)
举例:134(参考实验核医学与核药学,胡亚儿、 刘长征 等主编)
4、反稀释法:用已知非标记物测
标记物含量。
原理:同3(135) 设:
已知非标记物的量为m2 已知标记物的比活度为S1 混合后测得的比活度为S2 求标记物的化学量mx 据原理得:S1mx=S2(m2+mx)
1、同位素效应:不同的同位素之间原 子质量差异较大,因而它们参予同一化学 反应的速度不同称之。
如:1H( p)e(周期表中的H) 2H(n、p)e 3H (2n、p)e 表示方法:以同位素间参与化学反应
的 速 率 常 数 的 比 值 来 表 示 , 如 KH/KT KH/KD
氢的同位素表示法
2、同位素效应的分类:
1、选择实验类型的几个原则
a.吸收、分布、转运、排泄等用整体示踪实 验;
b.研究物质在精细结构中运动规律,可选离 体实验,但结果须有整体实验验证;
c.物质转化的研究,离体、整体都得做; d.单用离体实验有时可能得出错误的结论。
2、示踪物选择应考虑的问题 1)射线类型:γ、β(中能、低能……) 2)T1/2: 3)放化纯:>95%
核素示踪技术
第一节 示踪原理及特点
一、定义:示踪剂→吸收、分布、排泄、研究转 移规律及研究疾病、诊断的一门科学。
示踪技术解决实际问题,不能取代的特点: 引入物不能太多的……太小…… 示踪技术发展过程:
二、基本原理:Tracer与未标记时的化学、生物 学性质相同,利用放射性可测量进行示踪物跟综 研究(位置、数量、转变)。
DNA子代细胞
(子代细胞含有 放射性)
DNA子代细胞
用3H-TdR参入淋巴细胞的量(即Lim中放射性强 弱)反应出淋巴细胞转化能力。
应用:
反映细胞免疫状态 反映细胞增殖速度
实验结果表达形式:参入百分率
百万细胞DNA计数=cห้องสมุดไป่ตู้m/106cell
刺激指数=
实验组DNA放射性
-------------------------------对照组DNA放射性
3、正稀释法测物质含量
原理:将已知比活度的标记物与非标记物 混合,测出混合物的比活度,可求出非标记物的 含量。(混合前后放射性不变的原理)
设 : 已 知 标 记 物 的 量 为 m1 , 比 活 度 为 S1 (dpm/mg)混合物测得比活度为S2(dpm/mg), 求混合物中非标记物的化学量mx
S1— S2
第三节 物质转化示踪
一、参入实验:目的是弄清楚体内某些物质如 前身物、反应产物、中间代谢步骤及转化条件。
1、参入实验类型:整体+离体 整体参入实验:如3H-TdR证明TdR是DNA合 成的前体物
离体参入实验:具有生理活性的生物材料,如 组织切片、组织匀浆、游离细胞、亚细胞颗粒等, 将标记物加入,以证实实验的可能性,但做结论 要有整体实验验证才可靠。
1)初级同位素效应:与放素连接的化学健对速 度的影响(主键)
2)次级同位素效应:与放素相邻的化学健对速 度的影响(次健)
3)溶剂同位素效应:溶剂中的某原子被同位素 取代而影响溶质的反应速度,如一般化学反应在 水中,若改为氘水,对反应速度的影响。
4)物质体系同位素效应:进入体内后对生化反 应速度的影响,如H2O改为2H2O喂养动物对生化 反应的影响。
2、主要参数
产物总放 参入百分率= ---------------×100%
前身物总放
产物比活度 相对比活度= -----------------(参入率) 前身物比活度
3、参入实验举例
①淋巴细胞转化实验 实验设计原理(细胞培养): 植物血凝素 淋巴母细胞
淋巴细胞 PHA (能分裂繁殖)
应 用
3H-TdR 培养72hr
C1V1=C2(V1+VX)
2、测Rbc寿命或其它细胞寿命
取Rbc与Na51CrO4混合,淋洗后Rbc即被 标上,引入体内不同时间测放,研究其寿命。
另一种方法:15N—甘氨酸引入血液,Rbc 合成时摄取15N—AA,因此新生成Rbc具有 放射性,30天左右15NRbc达高峰,并且保持 一定时间恒定,最后15NRbc逐渐死亡而放射 性下降,可算得Rbc寿命。同理,该法可研 究Wbc、肿瘤细胞等。
三、示踪研究特点:
1、灵敏度高,可达10-14-----10-18g 2、测定方法简单、不用分离,提纯…… 3、合乎生理条件 4、可定位研究和定量研究 5、可动态研究,对数据做动态分析 6、标记分子易分辨(新旧分子的鉴别) 7、非创伤性 四、常用实验类型 :
离体示踪 整体示踪 单标或多标示踪
五、示踪实验应注意的问题(八个)
4、示踪引入途径:口服、灌胃 v 、m、 皮下、腹腔。
5、样品制备要有利于定量、定位测量、 测量方法确定后,要考虑样品容量,测量 时间等问题。 6、数据处理:根据不同实验目的,选择 适当参数。 7、动物实验:合适的动物,包括大小、 动物特征、防护、尸体处理。 8、短半衰期核素要考虑衰变校正
六、示踪实验中的同位素效应
核素稀释法
核素稀释法测物质含量
原理:稀释前后放素的量不变。(忽略衰变、 排泄等因素)
1 、 测 血 容 量 或 体 液 含 量 : Cl 和 Br 的 放 射 性 同位素主要在细胞外液分布,进入细胞极少。 如用82Br引入体液中,引入的总活度为A(β-), 待一定时间混匀后,抽取少量体液测得比放为 q/ml,则体液量等于A/q(ml),即
m2 S2 mx=--------------
S1—S2
5、核素双稀释法(参考)
设 取两份待测放射性样品,这两份放射性相 等。分别加入非标记已知的m1 和m2 混合,取出少量提纯,测得比活度为S1;S2
得:S1(m1 +mX)=S2(m2 +mX)
S2m2— S1m1 mX =-------------------
4)比活度:要合适
5)标记位置的选择要根据实验来定
6)标记物的稳定性、价格
7)载体的量大小:载体指与放素化学状 态相同的稳定同位素、如51Cr中混有Cr、 稳定性的Cr就是戴体。
3、示踪量的估算:
预实验或前人经验,应注意 人体内的稀释、组织内的浓聚及 对动物健康的影响
措施:查文献+预实验+确定仪 器效率
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