乙肝相关抗原与抗体课件
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抗原和抗体ppt课件
抗原和抗体
抗体
抗体（antibody）
• 定义：机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记 忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生 特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于 组织液及外分泌液中。
抗体和免疫球蛋白
最初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ 球蛋白部分，故曾把抗 体统称为丙种（γ ）球蛋白。 后来发现，抗体并不都在γ 区；并且位于γ 区的球蛋白，也不一 定都具有抗体活性。 WHO将具有抗体活性以及与抗体相关的球蛋白统称为免疫球 蛋白（Ig），如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清
中存在的异常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亚单位等。
免疫球蛋白是结构化学的概念，而抗体是生物学功能的概念。 所有抗体都是免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都是抗体。
生物活性
特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，常需要
补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。但抗体可通过与病 毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用 激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体， 凝聚的IgA、IgG4和IgE 可通过替代途径激活补体。
Y型抗体 结构示意图
一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的：
位于两臂末端称抗原结合片段（Fab）。 "Y"的柄部称结晶片段（FC），糖结合在FC 上。
抗体的功能
抗体的主要功能是与抗原（包括外来的和自身的）相结合，从
而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，抗体是一种应 答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。
结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 可通过胎盘和粘膜：
抗体
抗体（antibody）
• 定义：机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记 忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生 特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于 组织液及外分泌液中。
抗体和免疫球蛋白
最初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ 球蛋白部分，故曾把抗 体统称为丙种（γ ）球蛋白。 后来发现，抗体并不都在γ 区；并且位于γ 区的球蛋白，也不一 定都具有抗体活性。 WHO将具有抗体活性以及与抗体相关的球蛋白统称为免疫球 蛋白（Ig），如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清
中存在的异常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亚单位等。
免疫球蛋白是结构化学的概念，而抗体是生物学功能的概念。 所有抗体都是免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都是抗体。
生物活性
特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，常需要
补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。但抗体可通过与病 毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用 激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体， 凝聚的IgA、IgG4和IgE 可通过替代途径激活补体。
Y型抗体 结构示意图
一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的：
位于两臂末端称抗原结合片段（Fab）。 "Y"的柄部称结晶片段（FC），糖结合在FC 上。
抗体的功能
抗体的主要功能是与抗原（包括外来的和自身的）相结合，从
而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，抗体是一种应 答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。
结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 可通过胎盘和粘膜：
乙肝两对半PPT课件
前S蛋白/抗前S蛋白：前S：出现在急性HBV感染的最早期,在
HBsAg消失之前消失,是病毒清除的最早迹象。抗前S是最早出现的抗 体，前S抗体参与病毒清除机制。最早出现抗前S，可能是病毒将清 除最早标志物。在暴发性肝炎，出现抗前S可能预示垂危中的生机。
HBV的抗原抗体系统HBcAg和抗HBc1
HBcAg：是病毒核壳的结构蛋白，包裹在病毒的核心中，不
Dane’s 颗粒 小球形颗粒 管形颗粒
乙肝病毒（HBV）是一种DNA病毒，乙肝病毒对人的肝脏“情有独 衷”，在生物学上它是嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）家族中 的一员。这个家族中的病毒成员在哺乳动物和鸟类的身上也都有 发现，它们的结构、基因序列和复制策略都非常相似，但是它们 之间却不会互相交叉。
核心颗粒的表面才是病毒真正的衣壳，由乙肝病毒的核心抗原 （HBcAg）组成。HBeAg为HBcAg的可溶性成份，两者约有75%的 氨基酸序列相同，但二级结构不同，各有特异的抗原决定族。临 床上在血液中只检测其可溶性成份。而HBcAg在肝细胞内更容易 被检测到。Dane颗粒中的中心部位就是环状并且有缺口的DNA双 链和依附在上面的DNA聚合酶。
园形颗粒和管形颗粒是HBsAg的空壳，而Dane颗粒中存在乙肝病 毒核酸（即DNA）。 Dane颗粒是具有感染性的完整的HBV颗粒，呈球形，Dane颗粒直 径只有42纳米，乙肝病毒有包膜和核心两个部分，外壳厚7—8纳 米，就是HBsAg（乙肝表面抗原）。核心颗粒直径28纳米，呈二 十面体立体对称。
HBV的抗原抗体系统HBsAg和抗HBs2
抗HBs：是一种保护性抗体，出现在急性感染的后期（约半数在
HBsAg（－）后数月才可检出。6－12个月后逐步达到高峰，持续多 年后逐步下降。部分人终身不产生抗HBs。
乙肝五项解读ppt课件
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7
HBcAg与抗HBc
❖ 抗HBc IgM是HBV感染后较早出现的抗体， 在发病第一周即可出现，持续时间差异较大， 多数在6个月之内消失。高滴度的抗HBc IgM 对诊断急性乙肝或慢性乙肝急性发作有帮助。 抗HBc IgG表示过去感染，高滴度表示现症 感染，常与HBsAg并存；低滴度表示过去感 染，常与抗HBs并存。单一抗HBc阳性者可 以是过去感染，亦可以是低水平感染。
5、剖宫产分娩不能降低HBV的母婴传播率。
6、早产儿一般待体重≥2000g后行相关免疫接 种。
7、如果新生儿与HBsAg阳性成员密切接触， 就必须注射HBIG；不密切接触，不必注射。 （精液不能引起胎儿感染HBV）
8、HBsAg阳性孕妇的新生儿定期随访。
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26
乙型肝炎母婴阻断
❖ 单用乙型肝炎疫苗阻断母婴传播的阻断率为 87.8%(Ⅱ-3)。对HBsAg阳性母亲的新生儿， 应在出生后24 h内尽早（最好在出生后12 h） 注射乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIG)，剂量应 ≥100 IU，同时在不同部位接种10 μg重组酵 母或20μg中国仓鼠卵母细胞 (CHO) 乙型肝炎 疫苗，在1个月和6个月时分别接种第2和第3 针乙型肝炎疫苗，可显著提高阻断母婴传播 的效果 (Ⅱ-3)。
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5
HBeAg与抗HBe
❖ 急性HBV感染时HBeAg的出现时间略晚于
HBsAg。HBeAg与HBV DNA有良好的相关性，
因此，HBeAg的存在表示病毒复制活跃且有较
强的传染性。HBeAg消失而抗HBe产生称为血
清转换。抗HBe阳转后，病毒复制多处于静止状
态，传染性降低。长期抗HBe阳性者并不代表病
乙肝相关抗原和抗体
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------乙肝相关抗原和抗体乙肝相关抗原与抗体乙肝表面抗原(HBsAg) 乙肝表面抗体(HBsAb) 乙肝 e 抗原(HBeAg) 乙肝 e 抗体(HBeAb) 乙肝核心杭体(HBcAb) 乙肝病毒的生命周期：乙肝病毒(HBV)---肝细胞表面---脱掉外衣，进入肝细胞---脱掉内衣，将 HBV DNA 注入肝细胞核---肝细胞核内形成 DNA（每个肝细胞核内含有 10-20 个 DNA 分子，也有报告每个肝细胞核内含有30-50 个 DNA 模板）以肝细胞核内 DNA 为模板，生产出各种乙肝病毒蛋白合成所需要的核糖核酸（RNA），然后在肝细胞浆内生产出乙肝病毒的各种蛋白质（抗原），包括：HBsAg(表面抗原) HBcAg(核心抗原) HBeAg(e 抗原) 这些病毒蛋白质合成后，即发挥病毒复制的各种功能：HBsAg(表面抗原)--- 给病毒 DNA 穿上外衣，包装病毒，或释放入血，形成空的表面抗原 HBcAg(核心抗原)--- 给病毒 DNA 穿上内衣，包装病毒 DNA，等待包装外衣 HBeAg(乙肝 e 抗原)---经过肝细胞浆的内质网，直接分泌到肝细胞外，进入血液及全身一、乙肝表面抗原HbsAg 来源：HbsAg 是 1963 年由 Blumberg 在澳大利亚土著人的血清中首先发现的，故开始被称为澳大利亚抗原，即很长一段时间内人们一直说的奥抗，后又被称为肝炎相关抗原（HAA），1974 年被正式定名为乙型肝炎表面抗原。
1 / 7结构：HbsAg 实际上就是一项肝炎病毒的外壳部分。
在血清中查到它的时候，由于在大多数情况下它并不含有病毒颗粒，因此并不能反映病毒有无复制、复制程度以及传染性强弱、预后等问题。
第二章 抗原与抗体课件
3
完全抗原:同时具有免疫原性和反应原性的物质。如
大多数蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素、动物免 疫血清等。
半抗原:只有反应原性而没有免疫原性的物质，与蛋
白质载体结合时，能刺激机体产生抗体。 简单半抗原：与抗体结合后不出现沉淀反应，但可 用沉淀抑制反应显现。如酒石酸、甲苯酸等低分子 化合物。 复合半抗原：与抗体结合即可出现可见沉淀物。
37
第二：免疫球蛋白产生的顺序。当抗原刺激机体 后可以产生多种Ig。其出现的顺序一般是IgM最早， 但消失也快，在血液中只维持数周至数月。IgG的出 现稍迟于IgM，当IgM接近消失时，IgG方达高峰阶 段，并维持较长时间，甚至达到数年之久。IgA出现 最晚，常在IgM和IgG出现后2周至1～2月才能在血 液中查出，但维持时间较长。这一现象在免疫学上 叫IgM－IgG－IgA顺序律。在检验工作中，可通过对 IgM的检出，达到早期诊断的目的。
36
1. 抗体产生的一般规律
主要有两条规律： 第一：对同一种抗原初次免疫应答与再次免疫应
答产生免疫球蛋白的速度、数量和持续时间不同。 即初次产生缓慢，滴度较低，持续时间较短；再次 产生的速度快，滴度高，持续时间长。这是在体内 存留免疫记忆细胞，当再次受到抗原刺激时，免疫 细胞迅速反应，加快分化增殖，迅速产生抗体。
45
2.母源抗体在幼畜（禽）体内存留时 间及对免疫程序的影响
母源抗体在初生畜（禽）体内的保持时 间及依靠母源抗体所获得的免疫保护的持 续时间，是制定免疫程序的重要依据。
46
根据试验：仔猪接种猪丹毒菌苗应以12周龄 最合适，过1个月再接种1次，免疫效果最好。
总之，一个地区、一个单位对某种动物制定 免疫程序时，都应按照实际情况来做：如疫病 在本地区的流行情况；疫苗的免疫效能以及母 源抗体的滴度加以考虑。如果母畜接种过疫苗， 仔猪吮乳后接受了母源抗体，初次免疫应当予 以后延；若母畜群没有免疫，则应提早进行预 防接种。
完全抗原:同时具有免疫原性和反应原性的物质。如
大多数蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素、动物免 疫血清等。
半抗原:只有反应原性而没有免疫原性的物质，与蛋
白质载体结合时，能刺激机体产生抗体。 简单半抗原：与抗体结合后不出现沉淀反应，但可 用沉淀抑制反应显现。如酒石酸、甲苯酸等低分子 化合物。 复合半抗原：与抗体结合即可出现可见沉淀物。
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第二：免疫球蛋白产生的顺序。当抗原刺激机体 后可以产生多种Ig。其出现的顺序一般是IgM最早， 但消失也快，在血液中只维持数周至数月。IgG的出 现稍迟于IgM，当IgM接近消失时，IgG方达高峰阶 段，并维持较长时间，甚至达到数年之久。IgA出现 最晚，常在IgM和IgG出现后2周至1～2月才能在血 液中查出，但维持时间较长。这一现象在免疫学上 叫IgM－IgG－IgA顺序律。在检验工作中，可通过对 IgM的检出，达到早期诊断的目的。
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1. 抗体产生的一般规律
主要有两条规律： 第一：对同一种抗原初次免疫应答与再次免疫应
答产生免疫球蛋白的速度、数量和持续时间不同。 即初次产生缓慢，滴度较低，持续时间较短；再次 产生的速度快，滴度高，持续时间长。这是在体内 存留免疫记忆细胞，当再次受到抗原刺激时，免疫 细胞迅速反应，加快分化增殖，迅速产生抗体。
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2.母源抗体在幼畜（禽）体内存留时 间及对免疫程序的影响
母源抗体在初生畜（禽）体内的保持时 间及依靠母源抗体所获得的免疫保护的持 续时间，是制定免疫程序的重要依据。
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根据试验：仔猪接种猪丹毒菌苗应以12周龄 最合适，过1个月再接种1次，免疫效果最好。
总之，一个地区、一个单位对某种动物制定 免疫程序时，都应按照实际情况来做：如疫病 在本地区的流行情况；疫苗的免疫效能以及母 源抗体的滴度加以考虑。如果母畜接种过疫苗， 仔猪吮乳后接受了母源抗体，初次免疫应当予 以后延；若母畜群没有免疫，则应提早进行预 防接种。
病毒抗原和抗体检测技术PPT讲稿
抗体复合物，酸性增强
液下，Eu3+解离， 340nm激发光下发 射613nm荧光。
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四、时间分辩免疫荧光技术
（二）方法类型
•固相抗体竞争法
待检抗原和Eu3+标记抗原与固相抗体竞争结合,温育洗涤后在固相中 加入荧光增强液,测定荧光强度，荧光强度与待检抗原含量成反比。
+
+
B/B+F
6/8=0.75
+
+
4/8=0.5
+
+
2/8=0.25
Ag
+
+
1/8=0.125
Ab
Bound
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Free
第三节 放射免疫技术
• 放射免疫
以未结合的Ag*为F， Ag*Ab复合物为B， 则B/F或B/(B＋F)
与Ag的量变存在着 函数关系－剂量反应
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间接法
检测抗体
+ 固相抗原 标本
+ 酶标抗体
+ 底物 显色
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双抗体夹心法
检测抗原
+
固相抗体 标本
+
+
酶标抗体
底物
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显色
竞争法
可检测抗原、抗体
病毒抗原和抗体检测技术课件
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一、抗原—抗体反应
特异性高
液下，Eu3+解离， 340nm激发光下发 射613nm荧光。
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四、时间分辩免疫荧光技术
（二）方法类型
•固相抗体竞争法
待检抗原和Eu3+标记抗原与固相抗体竞争结合,温育洗涤后在固相中 加入荧光增强液,测定荧光强度，荧光强度与待检抗原含量成反比。
+
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B/B+F
6/8=0.75
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Ag
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Ab
Bound
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Free
第三节 放射免疫技术
• 放射免疫
以未结合的Ag*为F， Ag*Ab复合物为B， 则B/F或B/(B＋F)
与Ag的量变存在着 函数关系－剂量反应
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间接法
检测抗体
+ 固相抗原 标本
+ 酶标抗体
+ 底物 显色
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双抗体夹心法
检测抗原
+
固相抗体 标本
+
+
酶标抗体
底物
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显色
竞争法
可检测抗原、抗体
病毒抗原和抗体检测技术课件
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一、抗原—抗体反应
特异性高
乙肝相关抗原与抗体ppt课件
❖ 人自然感染HBV或注射了HbsAg疫苗后，机 体可产生抗HBs。但假设病毒的有关基因发 生了变异，机体所产生的机体对变异株便没 有作用，感染者血清中可同时出现HbsAg和 抗HBs。乙肝疫苗接种也不能有效地预防这 类变异病毒的感染。
乙肝e抗原—HBeAg
H：Hepatitis 肝炎 B：乙型 Ag：Antigen 抗原
乙肝相关抗原与抗体
❖ 乙肝外表抗原—HBsAg ❖ 乙肝e抗原—HBeAg ❖ 乙肝外表抗体—HBsAb ❖ 乙肝e抗体—HBeAb ❖ 乙肝中心杭体—HBcAb
乙肝病毒的生命周期
❖ 乙肝病毒(HBV)--->肝细胞外表--->脱掉外衣， 进入肝细胞--->脱掉内衣，将HBV DNA注入 肝细胞核--->肝细胞核内构成DNA〔每个肝细 胞核内含有10-20个DNA分子，也有报告每个 肝细胞核内含有30-50个DNA模板〕
4 、HBsAb 〔+〕 HBcAb〔+〕 既往感染过乙肝，如今仍有免疫力，属于不典型恢复期， 也能够为急性乙肝感染期。
5、 HBeAb〔+〕 HBcAb〔+〕 既往有乙肝感染，属于急性感染恢复期，也少数 人仍有传染性。
6、 HBcAb〔+〕 过去有乙肝感染或如今正处于急性感染。
7、HBபைடு நூலகம்Ab〔+〕 以前打过乙肝疫苗或以前感染过乙肝。
❖ 1、急性感染 乙肝e抗体在急性自限性感染的恢复期 出现，最终能够呈现乙肝外表抗体、乙肝中心抗体 和抗乙肝e抗体 同时阳性，“三抗体〞阳性标志着 体内的乙肝病毒〔HBV〕已被去除，并且具有免疫 力。
❖ 2、与乙肝外表抗原、乙肝中心抗体同时出现的慢 性继续性感染 这就是所谓“小三阳〞，见于无病症 乙肝外表抗原携带者，也见于慢性乙肝患者，阐明 体内病毒复制遭到不同程度的抑制，传染性降低， 病情能够趋于稳定。发生病毒变异者病情并不减轻 或稳定。
乙肝ppt课件
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20
基层医务工作者 如何做？
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21
♥ 正确定位自己。 ♥ 做好教育宣传。 ♥ 正确指导患者，负责任地就医引导。 ♥ 在现有条件下适当治疗。 做好预防。
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22
如何预防？
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23
乙型肝炎的预防
疫苗预防 阻断母婴传播 避免医源性传播
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感染恢复期，有免疫力，无传染 性 ①窗口期，抗-HBs即将出现； ②HBV感染已过 ①注射疫苗后；②遥远的过去有 过HBV感染
4
乙肝的常规检查
病毒学检查
❖ 表面抗原(HBsAg )及抗体(抗-HBs) ❖ e抗原(HBeAg)及抗体(抗-HBe) ❖ 核心抗原(HBcAg)及抗体(抗-HBc) ❖ 乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA＜103copy/ml)
● 若乙肝表面抗体（HbsAb）（+）定量＜ 10 ∕iu ∕ml → 24 小时内接种免疫高价球蛋白200u
● 若乙肝表面抗体（完整H版bppst课A件b）（+）定量＞ 10 ∕iu ∕ml 或 28 HbsAg(+) →不需要特殊处理
职业暴漏的预防
• （1）在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操 作时必须戴手套，操作完毕，脱去手套后立即洗手，必要 时进行手消毒。
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19
慢性乙型肝炎的管理指南
❖ 当应用口服抗病毒药物进行治疗时，HBeAg阳性患者出现HBeAg血清学 转换后，分别检测HBV DNA 2次均为阴性，每次至少间隔 6个月，则可 终止治疗。HBeAg阴性患者的疗程尚不明确，但如果检测3次且每次间 隔6个月，均提示HBV DNA阴性，则可以考虑不继续治疗。
肝炎病毒抗原抗体检测的ppt课件
6
双抗原夹心法测抗体
1.反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行 包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。 2. 此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因 此其敏感度相对高于间接法。 3.乙肝标志物中抗 HBs的检测常采用本法。 4.本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的 不同，寻找合适的标记方法。
2.在122例ELISA阳性样本中,其中国产试剂检出88例，检出率为72.1%，进 口试剂全部检出，两者差异有显著性（X 2 =17.1，P<0.05）。在进口试剂 单阳性结果40例中，经确认34例为阳性，国产试剂未检出，国产试剂存在 一定的漏检率。主要由于0.5～0.1ng/ml的HBV不能检出的原因。在33例 ELISA阳性确证实验阴性样本中，进口试剂占6例，为18.2%，国产试剂27 例，占71.8%，进口试剂假阳性率明显比国产试剂低。
1）为试剂检出被检物质的最低量的能力； 2）为试剂对人群或大量样品中阳性检出的能力（假阴性
越少越好） ，取决于包被物的全面性。 3) 每一批新试剂应作实验对照
2019/12/24
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血液检测HBsAg ELISA阳性结果确证分析 中华医学实践杂志 > 2004年第3卷第5期 >
1.以卫生部临床检验中心的1ng/ml HBsAg质控血清，用正常血清稀释随标 本检测，国产试剂检测灵敏度为0.5ng/ml，进口试剂为0.10ng/ml。
3
两对半与美国Abbott试剂的比较
河北医学杂志（新） >> 2005年 第10期 总第10期(月刊) >> 论著
乙型肝炎病毒（HBV）标志物是国内实验室经常检测的项 目。两对半试剂生产厂家较多，试剂质量良莠不齐。五家 试剂公司分别为英科新创（厦门）科技有限公司、上海荣 盛生物技术有限公司、北京万泰生物药业有限公司、珠海 丽珠试剂有限公司、深圳月亮湾生物工程有限公司。各厂 家质量有较大差异,为了提高乙肝两对半的检验质量，避免 误诊、漏诊，以美国Abbott试剂作为参比试剂，对五家公司 的两对半试剂的质量进行了对比、评价［4］。
乙肝病毒五项检测 ppt课件
乙型肝炎病毒表面抗原
乙型肝炎病毒表面抗原
注意事项
本样品仅用于体外诊断，操作应按说明说严格进行。封板膜不能重复使用，不同 批号、酶标试剂和阴性对照不可混用，不能与其它厂家试剂混用。
避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒液（如84消毒液）的环境下操作。 使用前请将试剂平稳至室温（平衡30分钟以上），实验前将试剂轻轻振荡混匀， 使用后立即回放2~8℃。未用完的微孔板条与干燥剂一起用自封袋密封2~8℃保存。 过期试剂请勿使用。 加液时必须用加样器，并经常校对加样器的准确性。加入不同样品或不同试剂组 份时，应更换加样器的吸头和加样槽，以防止出现交叉污染。 洗涤时各孔均匀需加满洗液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机应设定 30~60秒浸泡时间。在洗版结束后，必须立即进行下一步，不可使用酶标板干燥。 避免长时间的中断实验步骤，以确保每孔实验条件的均一。 结果判定必须以酶标仪读数为准。读取结果时，应擦干酶标板底部，且孔内不能 有气泡。不要触碰孔底部的外壁，指引或划痕可能影响板孔的读值。 所有样品、废液和废弃物都应按照传染物处理。终止液为硫酸，使用时必须注意
乙型肝炎病毒e抗体
检验方法：
配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性 对照2孔和空白对照1孔（用双波长检测，可不设空白对照孔）。
加样：分别在相应孔中加入待测样品及阴、阳性对照各50µl。
加酶：每孔加人酶标试剂50ul，空白孔除外，轻轻振荡混匀。 温育：用封板膜封板后置37℃温育30min。 洗涤：小心撕掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。 显色：每孔加人显色剂A、B液各50µl，轻轻振荡混匀，37℃避光 显色15min。 测定：每孔加终止液 50µl ，轻轻振荡混匀， 10min 内测定结果。
乙肝五项 ppt课件
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7种罕见模式
1 + + + + + ①一种亚型的HBsAg及异型的抗 HBs（常见）； ②血清从HBsAg转化为抗HBs的过 程（少见）。
2-+++-
3-++++
4--++-
5+-++-
6+++--
7++++-
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16
乙肝检查再添新指标
以前是“两对半”，后来增加了一个HBcAb-Igm(核 心抗体Igm)，成了三对，现在又出现了一个PreS1(乙型肝炎病毒前S1抗原，简称S1抗原)，“两对 半”变成了“三对半”。
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2
乙肝两对半中
1（HBsAg-乙肝病毒表面抗原）为已经感染 病毒的标志， 并不反映病毒有无复制、复制 程度、传染性强弱；
2（HBsAb-乙肝病毒表面抗体）为中和性抗 体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标 志。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视 14121111后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的 人体内也会产生乙肝表面抗体，这是一种好 现象；
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5
：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢 复期常随
HBsAg的消失而消失，如果 急性乙肝发病后3-4个月 ， HBeAg由阳转阴，抗-HBe 出现，表示预后良好.起病 3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是 急性肝炎转为慢性的最早证据。
乙肝病毒DNA复制过程
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3（HBeAg-乙肝病毒e抗原）为病毒复制标志。持 续阳性3个月以上则有慢性化倾向；
乙型肝炎病毒ppt课件
二、基因组结构和编码蛋白
HBV基因组结构，1979年
• 根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异≥4%，目 前HBV分为A-H八个基因型。各基因型又可分为不同亚型。 我国主要是B和C。
• IFN治疗HBV应答率：A＞D，B＞C，A、D＞B、C基因型是 否影响核苷类似物的疗效尚未确定。
• 65℃10h、煮沸10min或高压蒸气均可灭活HBV。
如何治疗？
能治愈吗？
★ 目前极少能治愈！ ★ 是可以治疗的！ ★ 病毒DNA整合于宿主肝细
胞染色体
谁需要治疗？
不论是大三阳还是小三阳，有以下情况者均需治疗： ★ 肝功能异常。
★ 有明显的肝炎症状：乏力、厌食、黄疸、肝区隐痛不适 等。
★ HBV DNA＞103copy/ml)
抗病毒：目前尚无一种能迅速、直接杀死清除乙肝病毒的 药物，最好的抗病毒药物疗效也仅能达到50％左右。目前 国际医学界公认的治疗慢性乙肝有确切疗效的抗病毒药物 主要有两大类： 干扰素：重组人α-1b干扰素、α- 2a、 α-2b干扰素等。 核苷类似物：拉米夫定、阿德福韦。
PCR反应过程
3’
5’
5’
3’
Primers
d.NTPs
Taq 酶
反应组分
变
性
3’ 5’
3’
Taq
5’
3’
退
火
5’
Taq
延
伸
3’
重
复
3’ 3’ 3’ 3’
3’ 3’ 3’ 3’ 3’ 3’ 3’ 3’
5’ 3’
5’ 3’
5’ 3’
3’
循环2 4个拷贝
5’ 3’ 5’ 3’
5’ 3’ 5’ 3’
乙肝基础知识讲座PPT课件
●HBcAb-乙肝病毒核心抗体{5}
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什么是大三阳
●HBsAg-乙肝病毒表面抗原{1}+ ●HBsAb-乙肝病毒表面抗体{2}-
●HBeAg-乙肝病毒e抗原{3}+ ●HBeAb-乙肝病毒e抗体{4}-
●HBcAb-乙肝病毒核心抗体{5}+
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什么是小三阳
●HBsAg-乙肝病毒表面抗原{1}+ ●HBsAb-乙肝病毒表面抗体{2}-
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45
二.乙肝病毒标志物的意义?
1.HBsAg(+)提示感染了乙肝病毒，但不能提 示乙肝病毒复制及传染性;
2.抗HBs(+)表示有保护性抗体，对乙肝有免 疫力，注射乙肝疫苗及自然感染痊愈后都 可产生抗HBs;
3.HBeAg(+)是乙肝病毒复制的指标，提示有 传染性;
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13
五、吞噬或免疫作用
你的身体经常潜伏着很多病菌，肝脏 可以助你抗御细菌的侵入。肝脏能减 弱甚至消灭伤风菌，感冒菌和其他病 菌。 肝脏通过网状内皮系统的Kupffer 细胞的吞噬作用，将细菌、色素和其 它碎屑从血液中除去。
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14
免疫学基础
●抗原的概念 抗原是指能够刺激机体产生（特异性）
２．医源性传播 针灸针、口腔器材、内镜等被乙肝病毒污染的医用器材和血源 以及血制品，在使用时都有可能传播乙型肝炎病毒。
３．性传播 性传播是乙肝传播的一个主要途径，对于易感人群，应该使用避孕 套。
４．垂直传播 垂直传播包括母婴传播，父婴传播以及家族性的感染。垂直传播 占乙肝传播的７０％以上。
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什么是大三阳
●HBsAg-乙肝病毒表面抗原{1}+ ●HBsAb-乙肝病毒表面抗体{2}-
●HBeAg-乙肝病毒e抗原{3}+ ●HBeAb-乙肝病毒e抗体{4}-
●HBcAb-乙肝病毒核心抗体{5}+
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二.乙肝病毒标志物的意义?
1.HBsAg(+)提示感染了乙肝病毒，但不能提 示乙肝病毒复制及传染性;
2.抗HBs(+)表示有保护性抗体，对乙肝有免 疫力，注射乙肝疫苗及自然感染痊愈后都 可产生抗HBs;
3.HBeAg(+)是乙肝病毒复制的指标，提示有 传染性;
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五、吞噬或免疫作用
你的身体经常潜伏着很多病菌，肝脏 可以助你抗御细菌的侵入。肝脏能减 弱甚至消灭伤风菌，感冒菌和其他病 菌。 肝脏通过网状内皮系统的Kupffer 细胞的吞噬作用，将细菌、色素和其 它碎屑从血液中除去。
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免疫学基础
●抗原的概念 抗原是指能够刺激机体产生（特异性）
２．医源性传播 针灸针、口腔器材、内镜等被乙肝病毒污染的医用器材和血源 以及血制品，在使用时都有可能传播乙型肝炎病毒。
３．性传播 性传播是乙肝传播的一个主要途径，对于易感人群，应该使用避孕 套。
４．垂直传播 垂直传播包括母婴传播，父婴传播以及家族性的感染。垂直传播 占乙肝传播的７０％以上。
《抗原与抗体》幻灯片
〔二〕理化性状 1、分子大小 2、化学组成、分子构造和立体构象的复杂性 3、物理状态
三、抗原决定簇
〔一〕根本概念 1、抗原决定簇(antigen determinant)：抗原分子外表 具有特殊立体构型和免疫活性的化学基团称为抗原 决定簇或抗原决定基，也称表位(epitopes) 2、构象决定簇和顺序决定簇 3、功能性决定簇和隐蔽的决定簇
IgM是抗原刺激后出现最早的抗体，故 检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。
IgM是B细胞抗原受体的主要成分
也可参与II、III型超敏反响
3、IgA
分为血清型和分泌型两种，血清型IgA主要由 肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生。而分泌型 IgA〔SIgA〕是由呼吸道、消化道、泌尿生殖 道等处的固有层中浆细胞产生。 主要存在于初乳、唾液、泪液，以及呼吸道消 化道和泌尿生殖道黏膜外表的分泌液中。 分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜
(二)三个功能区 1.可变区〔 variable region, V区〕 〔1〕组成：N端轻链的1/2和重链的1/4组成，含有
110个氨基酸〔2〕功能：与抗原结合，存在与抗 原决定簇结合的特异性结合点。一个Ig分子在功能 上是双价。 2.稳定区〔 constant region, C区〕 〔1〕组成：轻链的1/2和重链的3/4组成，在CH又 有三个亚单位即CH1，CH2和CH3组成 〔2〕功能：由并表现各自的功能。 结合补体(CH2)，粘附巨噬C(CH3)，通过胎盘， ADCC作用 遗传标志的反映区 3.绞链区〔hinge region〕 连接可变区与稳定区，起轴承关节作用
2、载体效应：半抗原与载体结合后首次免疫动物， 可测得半抗原的抗体，出现初次反响,但当第 二次免疫时，半抗原连接的载体只有和首次 免疫所用的载体一样时，才会有再次反响， 这种现象称为载体效应。
三、抗原决定簇
〔一〕根本概念 1、抗原决定簇(antigen determinant)：抗原分子外表 具有特殊立体构型和免疫活性的化学基团称为抗原 决定簇或抗原决定基，也称表位(epitopes) 2、构象决定簇和顺序决定簇 3、功能性决定簇和隐蔽的决定簇
IgM是抗原刺激后出现最早的抗体，故 检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。
IgM是B细胞抗原受体的主要成分
也可参与II、III型超敏反响
3、IgA
分为血清型和分泌型两种，血清型IgA主要由 肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生。而分泌型 IgA〔SIgA〕是由呼吸道、消化道、泌尿生殖 道等处的固有层中浆细胞产生。 主要存在于初乳、唾液、泪液，以及呼吸道消 化道和泌尿生殖道黏膜外表的分泌液中。 分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜
(二)三个功能区 1.可变区〔 variable region, V区〕 〔1〕组成：N端轻链的1/2和重链的1/4组成，含有
110个氨基酸〔2〕功能：与抗原结合，存在与抗 原决定簇结合的特异性结合点。一个Ig分子在功能 上是双价。 2.稳定区〔 constant region, C区〕 〔1〕组成：轻链的1/2和重链的3/4组成，在CH又 有三个亚单位即CH1，CH2和CH3组成 〔2〕功能：由并表现各自的功能。 结合补体(CH2)，粘附巨噬C(CH3)，通过胎盘， ADCC作用 遗传标志的反映区 3.绞链区〔hinge region〕 连接可变区与稳定区，起轴承关节作用
2、载体效应：半抗原与载体结合后首次免疫动物， 可测得半抗原的抗体，出现初次反响,但当第 二次免疫时，半抗原连接的载体只有和首次 免疫所用的载体一样时，才会有再次反响， 这种现象称为载体效应。
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一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
乙肝表面抗体—HBsAb
❖ 抗体是机体免疫应答的产物 。
❖ 乙肝表面抗体（抗-HBs)是一种保护性抗体。
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❖ HbsAg 阳性—感染恢复后期出现。 此时表面抗原（HBsAg）转阴至少已1个月以 上。抗-HBs于6-12月达高峰，以后逐渐下降， 10年内转阴（有时转阴很快）。
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❖ HBeAg是一个绝好的监测病毒的指标 。 如果HBeAg阳性，就表示病毒复制活跃， 血中HBV DNA水平高，传染性强。
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乙肝病毒的生命周期
❖ 乙肝病毒(HBV)--->肝细胞表面--->脱掉外衣， 进入肝细胞--->脱掉内衣，将HBV DNA注入 肝细胞核--->肝细胞核内形成DNA（每个肝细 胞核内含有10-20个DNA分子，也有报告每个 肝细胞核内含有30-50个DNA模板）
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乙肝e抗原—HBeAg
H：Hepatitis 肝炎 B：乙型 Ag：Antigen 抗原
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❖HBeAg，是乙肝病毒在肝细胞内 复制期间，从肝细胞内释放到血 液内的一种病毒蛋白质。
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乙肝表面抗原—HbsAg
❖ HbsAg是1963年由Blumberg在澳大利亚 土著人的血清中首先发现的，故开始被 称为澳大利亚抗原，即很长一段时间内 人们一直说的“奥抗”，后又被称为肝 炎相关抗原（HAA），1974年被正式定 名为乙型肝炎表面抗原。
❖ 人自然感染HBV或注射了HbsAg疫苗后，机 体可产生抗HBs。但如果病毒的有关基因发 生了变异，机体所产生的机体对变异株便没 有作用，感染者血清中可同时出现HbsAg和 抗HBs。乙肝疫苗接种也不能有效地预防这 类变异病毒的感染。
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❖ HbsAg实际上就是一项肝炎病毒的外壳 部分。在血清中查到它的时候，由于在 大多数情况下它并不含有病毒颗粒，因 此并不能反映病毒有无复制、复制程度 以及传染性强弱、预后等问题。
❖ 以肝细胞核内DNA为模板，生产出各种乙肝 病毒蛋白合成所需要的核糖核酸（RNA）， 然后在肝细胞浆内生产出乙肝病毒的各种蛋 白质（抗原），包括： HBsAg(表面抗原) HBcAg(核心抗原) HBeAg(e抗原)
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❖ 这些病毒蛋白质合成后，即发挥病毒复制的各种 功能： HBsAg(表面抗原)---> 给病毒DNA穿上外衣，包 装病毒，或释放入血，形成空的表面抗原 HBcAg(核心抗原)---> 给病毒DNA穿上内衣，包 装病毒DNA，等待包装外衣 HBeAg(乙肝e抗原)--->经过肝细胞浆的内质网， 直接分泌到肝细胞外，进入血液及全身
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
乙肝相关抗原与抗体
❖ 乙肝表面抗原—HBsAg ❖ 乙肝e抗原—HBeAg ❖ 乙肝表面抗体—HBsAb ❖ 乙肝e抗体—HBeAb ❖ 乙肝核心杭体—HBcAb
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❖HBeAg阳性，表示病毒复制活跃， 血清内HBV DNA量大，传染性 强。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工什么功能呢？
❖ 据推测HBeAg是乙肝病毒逃避人体免疫攻击的一种 手段。在乙肝病毒感染的早期，或胎儿在出生期或 在子宫内接触到有病毒的血液时，乙肝病毒在肝细 胞内合成e抗原（HBeAg）并释放到血液内，释放 出的HBeAg先“麻痹”婴儿的免疫系统，由于 HBeAg与HBcAg非常相似，这样，当免疫系统碰到 HBcAg时，由于已经被麻痹，于是不再对病毒产生 免疫反应，使人体处于免疫耐受状态，无法有效地 消灭或清除病毒。乙肝病毒通过释放HBeAg达到逃 避人体免疫攻击的目的。这就是为什么，乙肝病毒 制造出HBeAg这么一个蛋白，只释放到血液内，而 对病毒的复制没有作用。